猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及流行病学调查

应用RT-PCR技术,对广西南宁、玉林、来宾、贵港、柳州、钦州、防城港、崇左、贺州、桂林、广东、海南部分地区等十几个地区发生疑似PRRSV感染的28个猪场送检的264份病死猪的肺脏、脾脏、淋巴结等病料进行猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的检测;共检测出94份阳性病料,阳性率为35.6%;同时利用PRRSV间接ELISA检测试剂盒检测了2005～2007年期间48个猪场875份血清样品,检测结果显示：有39个猪场感染了PRRSV,感染率为81.3%,有338份血清存在PRRSV阳性抗体,阳性率为38.6%。对阳性病料处理后接种Marc-145细胞,出现明显细胞病变（CPE）,继续扩大培养,收获并分离病毒,-70 ℃保存备用。流行病学调查结果表明,广西及周边地区普遍存在PRRSV的感染,且感染率较高,猪繁殖与呼吸综合征已经成为危害本地区养猪业的重要疫病。     

2015—2016年广西梧州市主要病毒性猪病的检测与分析

采用RT-PCR及PCR技术,对广西梧州市7个县（市、区）屠宰场2015—2016年送检的1 304份猪组织样品（肺脏、淋巴结、脾脏）进行高致病性蓝耳病病毒（HPRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）核酸检测,对7个规模场送检的70份病死猪组织病料样品（肺脏、淋巴结、脾脏）进行HPRRSV、CSFV、伪狂犬病病毒（PRV）、圆环病毒（PCV）核酸检测。采用ELISA技术,对梧州市7个县（市、区）送检的8 572份血清检测猪瘟免疫抗体,对2 066份血清检测猪蓝耳病免疫抗体。结果显示：HPRRSV、CSFV核酸检测均为阴性;规模场病死猪组织病料的PRV核酸阳性率为14.3%,PCV为57.1%;猪瘟免疫抗体合格率为90.41%,蓝耳病免疫抗体合格率为73.48%。监测结果表明：梧州市流行的生猪高热病主要涉及猪伪狂犬病和猪圆环病毒病2种病毒病;猪蓝耳病和猪瘟的强制免疫,有效控制了该地主要猪病毒性疫病的发生与流行。     

泰州猪场繁殖障碍性疫病的流行病学调查与防治

为了了解泰州地区猪场繁殖障碍性疫病的发病情况,采用RT-PCR和PCR技术对2012年1—12月间泰州地区36个发生疫病的规模猪场采集的肝脏、脾脏、淋巴结、脑等84份组织病料进行猪蓝耳病（PRRS）、猪瘟（CSF）、猪伪狂犬病（PR）、猪圆环病毒2型（PCV-2）检测。结果检出PRRS阳性病料37份,阳性率44.0%,阳性场17个,场阳性率7.2%;CSF阳性病料16份,阳性率19.0%,阳性场8个,场阳性率22.2%;PR阳性病料27份,阳性率32.1%,阳性场12个,场阳性率33.3%;PCV-2阳性病料44份,阳性率52.4%,阳性场21个,场阳性率58.3%。同时还发现组织病料和发病猪场中存在猪蓝耳病、猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型不同程度的混合感染现象,其中PRRS、PCV-2混合感染最为严重,样品阳性率33.3%,场阳性率25.0%。表明泰州地区规模猪场繁殖障碍性疫病十分复杂,混合感染现象比较普遍,给泰州养猪业带来巨大威胁,应加强疫病的防控工作。     

广西猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

结合流行病学、临床症状、病理变化，采用PCR技术，对2004年1月至2005年5月采自广西14个市97个疑似猪圆环病毒2型（PCV2）感染发病猪场的197份组织病料（脾、肺、淋巴结）进行了PCV2检测；同时，对鉴定为PCV2阳性的组织病料和猪场进行了猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪流感病毒（SIV）和猪伪狂犬病病毒（PRV）的检测，另外，对6个地（市）11个生猪屠宰场采集的外观健康屠宰猪的295份组织样品（脾、肺、淋巴结）进行了PCV2检测。结果显示，在197份组织样品中检出PCV2阳性病料108份，平均阳性率为54．82％（108／197），阳性猪场62个，平均阳性率为63．92％（62／97）。PCV2与PRRSV、CSFV、SIV、PRV混合感染的组织病料总阳性率为42．13％（83／197），混合感染的猪场总阳性率为57．73%（56／97）。从21头外观健康屠宰猪的组织样品中检测到PCV2，阳性率为7．10％。由此可见，PCV2感染在广西猪群中已普遍存在，混合感染和健康带毒现象使病情更加复杂。     

安徽省仔猪腹泻5种病毒感染情况的调查研究

为了解安徽地区仔猪病毒性腹泻流行病学特点,对从安徽省37个规模化猪场采集腹泻仔猪的粪便或病死猪肠段共计186份,用RT-PCR和PCR技术进行了猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(RV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)等5种病毒的检测.结果表明,PEDV阳性病料数占59.1％,阳性猪场占75.7％;TGEV阳性病料数占5.4％,阳性猪场占8.1％;RV阳性病料数占2.7％,阳性猪场占2.7％;PRV阳性病料数占8.1％,阳性猪场占21.6％;PCV-2阳性病料数占25.8％,阳性猪场占54.1％.PEDV与TGEV混合感染占4.3％,PEDV与PCV-2混合感染占18.8％,PEDV与PRV混合感染占10.8％,PRV和PCV-2混合感染占4.8％;其他病因50例,占26.9％.结果表明,PEDV、PCV-2 、PRV的单纯或混合性感染是近年安徽省仔猪腹泻的最为重要的3种病毒性病因,说明在今后的仔猪腹泻病防控过程中,应该着重加强对该3种疾病的综合防控.     

乳牛布鲁氏菌病PCR诊断试剂盒的实验室评估

对前期研制的布鲁氏菌omp25基因-PCR试剂盒的保存期、特异性和可重复性进行了测定，并应用该试剂盒对采自宁夏、甘肃、内蒙古、山西、黑龙江、新疆省（区）的98头血清凝集试验（SAT）阳性乳牛的6批98份乳样和350头SAT阴性乳牛的2批350份乳样进行了检测。检测结果显示，PCR试剂盒与SAT的阳性符合率为100％（98／98），阴性符合率为97．71％（342／350）；从SAT阴性乳牛的乳样中。用PCR试剂盒检出8份阳性，表明其敏感性高于SAT；对2株田间野毒Brgs和Br-nmg株进行了克隆与测序，二者与标准菌株序列的同源性分别为99．8％和100％。试验结果证实，本试剂盒的可重复性良好，特异性较高，-20℃下的有效保存期为5个月。     

四川省PPV与PCV2的病原流行病学调查

从四川省21个规模化猪场采集样品273份,利用PCR方法检测并分析了猪细小病毒和猪圆环病毒的感染及混合感染情况,结果共检出PPV病原阳性样品47份（占17．22％）;PPV阳性猪场8个（占38．1％）;种猪的感染率较高,仔猪感染率相对较低;检出PCV2病原阳性样品143份（占52．38％）,PCV2阳性猪场18个（占85．7％）;PCV2感染随猪年龄的增长而升高;检出PPV和PCV2混合感染样品29份（占10．62％）;同时存在PPV和PCV2的猪场6个（占28．7％）,混合感染主要集中在母猪和保育仔猪阶段。仅有3个猪场未检出PPV和PCV2病原,占14．3％。该结果说明PPV与PCV2及其混合感染在四川省流行广泛,对养殖业构成了较严重的危害。     

一例集约化猪场伪狂犬的诊断及防控

笔者团队开展了一个猪场暴发伪狂犬病(Pseudorabies,PR)后的确诊和防控实践。通过发病情况调查、观察临床症状和剖解组织病变,初步判断某集约化猪场暴发了伪狂犬病。采集2头典型病猪的病料经PCR鉴定为伪狂犬病毒(PRV)阳性,采集10头病猪的血清经PRVgE-ELISA检测为阳性(9/10),确诊该猪场流行和暴发的为猪伪狂犬病。确诊后对该场猪群采取了隔离、消毒和紧急接种等综合防控措施,快速制止了该猪场PR的流行,取得显著的防控效果。     

广西猪繁殖与呼吸综合征病毒感染状况调查

采用RT-PCR技术,对2004年1月至2005年4月期间,广西13个市104个疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场,无菌采取231头病、死猪的组织病料(肺脏、淋巴结、脾脏)进行了病毒检测。同时,对鉴定为PRRSV阳性的组织病料和猪场进行了猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,以确定猪群中PRRSV与PCV2、CSFV和PRV混合感染情况。结果从12个市的115份组织病料中检出PRRSV,病料的平均阳性率为49.78%(115/231),猪场的平均阳性率为61.54%(64/104),不同地市有一定的差异。PRRSV与PCV2、CSFV和/或PRV二重或多重混和感染的组织病料总数为53份,猪场总数为39个,混合感染的组织病料和猪场的总阳性率分别为22.94%(53/231)和37.50%(39/104)。混合感染的组织病料占PRRSV阳性组织病料的46.09%(53/115),混合感染的猪场占PRRSV阳性猪场的60.94%(39/64)。其中以PCV2和PRRSV混合感染的组织病料和猪场数最多。由此可见,PRRSV感染在广西猪场已普遍存在,与其他病毒混合感染现象逐渐趋向复杂化。     

江苏省规模化猪场猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

结合流行病学、临床症状、病理变化,采用PCR技术,对2006年1月至2007年6月采自江苏省9市15个规模化猪场疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染发病的186份组织病料(脾、肺、淋巴结)进行了PCV2检测。结果显示:在186份组织样品中检出PCV2阳性病料118份,平均阳性率为63.44%;阳性猪场15个,猪场阳性率为100%。由此可见,PCV2感染在江苏省规模化猪场中已普遍存在。     

华南地区猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析

为了解华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的最新流行情况,采集了华南地区11个规模猪场各饲养阶段猪血清807份,用套式PCR(nPCR)检测猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2);采集了若干猪场2010年1月至2011年8月期间有咳嗽、喘气、消瘦及疑似PDNS等临床症状的猪血清312份,以及无临床症状猪血清104份,以nPCR检测PCV-2,以一步法反转录PCR(RT-PCR)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。结果发现,所调查的11个规模猪场中只有5个检出PCV-1,所有猪场均检出PCV-2。PCV-2阳性率为30.61%,而PCV-1阳性率仅为4.21%;经产母猪和7周龄以上保育猪PCV阳性率最高;有临床症状的猪血清PCV-2阳性率为58.65%,PRRSV阳性率为37.82%,PCV-2阳性猪群中有39.89%的猪同时感染PRRSV;有症状猪群7月～9月的PCV-2感染率最高,而1月～3月最低;无临床症状猪血清PCV-2阳性率为27.9%,PRRSV阳性率为0.96%,PCV-2与PRRSV无混合感染。证明PCV尤其是PCV-2在华南地区仍广泛传播并流行,而且PCV-2与PRRSV混合感染致病情况较多。PCV-2的感染率与季节有一定的相关性,种猪带毒情况严重。     

山东种公猪精液携带主要病原的检测

采用PCR技术,对2007年-2009年山东部分地区的38个猪场和人工授精站的生产公猪精液样品727份进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪细小病毒(PPV)5种主要病原的检测。结果检出CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2和PPV的阳性数和阳性率分别为18份(2.48%)、27份(3.71%)、7份(0.96%)、33份(4.54%)、9份(1.24%),有7份样品为2种以上病原混合感染,其中以PRRSV+PCV-2混合感染最多。结果表明精液传播病毒仍是当前母猪繁殖障碍的重要原因之一,应重点加强对种公猪的疫病净化和公猪精液管理,从源头控制传染源。     

鄂西北地区猪圆环病毒2型抗体水平监测

应用ELISA方法对鄂西北地区35家标准化猪场282份血清进行猪圆环病毒2型抗体水平检测,间接监测猪圆环病毒2型感染情况。试验结果表明：送检血清中阳性者为207份,总体阳性率73.4％,阳性ELISA值正态分布于0.15~0.6,其中0.3~0.4分布最多,占阳性数的25.1％;送检猪场中未感染猪圆环病毒2型者占17.1％,感染猪圆环病毒2型的猪场占82.9％;通过对发病猪进行临床症状观察和病理剖检发现具有典型猪圆环病毒2型特征。      

广东省猪PCV-2感染的病原学调查

2004年-2006年从广东省4个不同地区458个规模化猪场采集2128份病料,进行了PCV-2的抗原检测,结果表明,被检地区的猪群中普遍存在PCV-2感染,检测的458个规模化猪场中有372个猪场有PCV-2阳性猪,平均阳性率达到81．22%;2128份被检病料样品中有863份为阳性,平均阳性率达40．55％（863／2128）;不同地区不同时段猪场阳性率为63．64％～92．86％,病料样品的阳性率为24．00%～48．00％。     

采用PCR方法对猪场猪瘟病毒、猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒、猪圆环病毒2型混合感染的诊断研究

采用猪瘟-猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(CSFV-PRRSV)多重PCR诊断试剂盒和猪圆环病毒2 型(PCV 2)PCR诊断试剂盒对来自河南省不同地区的6个规模猪场送检的60份临床疑似病料进行了病原学PCR检测。结果表明：60份样品中CSFV、PRRSV、PCV-2感染的阳性率分别为38.3%、30%和43.3%；3种病毒共感染样品数目占所有样品的13.3%，CSFV PCV-2双感染的比例最高，达到31.7%，PRRSV-PCV-2双感染比例为18.3%，而CSFV-PRRSV双感染比例只有15%。自感染猪内脏器官和血清中均能成功检测出病毒。本研究结果表明PCR诊断可作为临床上这3种病的病原学快速、灵敏的诊断方法，并为猪场猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸道综合征、猪圆环病毒2型3种病的流行病学和检测方法的研究奠定了一定的基础。     

广东省猪圆环病毒2型感染的血清学调查

为了解广东省猪群中猪圆环病毒2型(PCV-2)的感染情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对广东部分地区的764份不同年龄段的猪血清进行PCV-2抗体检测,对PCV-2与猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)混合感染情况做了进一步调查.结果表明,PCV-2抗体检测平均阳性率为61.91％(47...     

Seroprevalence of economically important viral pathogens in swine populations of Trinidad and Tobago,West Indies

The objective of this study was to evaluate the seroprevalence and identify the strains of swine influenza virus (SwIV), as well as the seroprevalence of porcine parvovirus (PPV), transmissible gastroenteritis virus (TGEV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), porcine respiratory coronavirus (PRCV), porcine circovirus type 2 (PCV-2), and classical swine fever virus (CSFV) in pigs in Trinidad and Tobago (T&T). Blood samples (309) were randomly collected from pigs at farms throughout T&T. Serum samples were tested for the presence of antibodies to the aforementioned viruses using commercial ELISA kits, and the circulating strains of SwIV were identified by the hemagglutination inhibition test (HIT). Antibodies against SwIV were detected in 114 out of the 309 samples (37%). Out of a total of 26 farms, 14 tested positive for SwIV antibodies. HI testing revealed high titers against the A/sw/Minnesota/593/99 H3N2 strain and the pH1N1 2009 pandemic strain. Antibodies against PPV were detected in 87 out of the 309 samples (28%), with 11 out of 26 farms testing positive for PPV antibodies. Antibodies against PCV-2 were detected in 205 out of the 309 samples tested (66%), with 25 out of the 26 farms testing positive for PCV-2 antibodies. No antibodies were detected in any of the tested pigs to PRRSV, TGEV, PRCV, or CSFV.     

上海市规模化猪场猪圆环病毒2型血清学调查

为了解和掌握上海市PCV-2的感染情况,2003年-2005年对上海市猪群PCV-2的感染情况进行了血清学调查。用间接酶联免疫吸附试验,对上海市9个规模化猪场的768份血样进行了PCV-2抗体检测。被检猪场均有PCV-2抗体阳性,而且在2005年有明显增加的趋势。     

我国部分地区猪圆环病毒2型和猪细环病毒混合感染的调查

为了解猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪细环病毒(TTV)混合感染情况,用PCR方法对来自湖南、江西、广东、福建和广西五省区的193份猪组织样品进行PCV-2、TTV-1和TTV-2进行检测。结果显示,PCV-2感染率为61.1%(118/193),PCV-2和TTV-1混合感染率为32.1%(62/193),PCV-2和TTV-2混合感染率为16.9%(32/193),3种病原混合感染率为9.8%(19/193),2006年PCV-2和TTV的混合感染率最高。由此可见,目前猪群中存在PCV-2和猪TTV的混合感染,PCV-2和TTV-1型混合感染率高于和TTV-2型的混合感染率,且存在一定比例的三重感染情况。     

内蒙古地区猪圆环病毒Ⅱ型感染的血清学调查

本实验应用酶联免疫吸附实验（ELIsA）方法对内蒙古地区部分未经PCV-2免疫的猪场猪只780份血样进行抗体阳性检测,结果显示,不同猪场均有PCV-2感染,PCV-2抗体平均阳性率为38．6％（301／780）,经产母猪阳性率为38．3％（51／133）,后备母猪阳性率为38．7％（46／119）,种公猪阳性感染率为23．5％（8／34）,哺乳仔猪阳性率为42．8％（80／187）,断奶仔猪阳性率为40．9％（70／171）,育肥猪阳性率为33．8％（46／136）。结果表明,内蒙古地区养猪场普遍存在猪圆环病毒II型（pcv-2）感染？