HPLC测定龟参口服液中人参皂苷Rg_1的含量

龟参口服液具有益气养血,滋阴助阳的功效。本实验建立反相高效液相色谱法测定龟参口服液中人参皂苷Rg_1的含量。方法:采用SMTC18色谱柱(220mm×4.6mm,5μm),水-甲醇-乙腈-磷酸(50:20::30:0.01)为流动相,检测波长为203nm,流速为1.0ml/min,柱温为30℃。结论:本法简便、准确,可用于龟参口服液中人参皂苷Rg_1的含量测定。     

三七总皂苷渗透泵控释片的质量标准研究

本试验建立三七总皂苷渗透泵控释片质量标准,采用薄层色谱法鉴别人参皂苷Rb.和人参皂苷Rg,,采用高效液相色谱法测定对三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1进行含量测定.试验结果:在薄层色谱中检出了人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1;在高效液相色谱中,三七皂苷R1平均回收率为99.9%(n=9),RSD为1.00%,人参皂苷Rg1平均回收率为99.9%(n=9),RSD为0.8 3%,人参皂苷Rb1平均回收率为99.4%(n=9),RSD为0.76%.试验表明该鉴别方法专属性强,含量测定方法简便、准确,可有效控制三七总皂苷渗透泵控释片的质量.     

高效液相色谱法测定人参皂苷复乳中人参皂苷含量

将人参皂苷与复乳佐剂结合,制成W/O/W型人参皂苷乳免疫增强剂。利用HPLC对人参皂苷复乳中3种单体成分检测条件进行筛选,确定最佳条件。液相色谱法检测结果表明,人参皂苷浓度为0.5 mg/m L复乳中每毫升含人参皂苷Rg1 17.82~23.68μg、人参皂苷Re 27.82~33.68μg、人参皂苷Rd 16.82~23.08μg,均符合药典对人参皂苷Rg1、Re和Rd的含量要求。说明建立的检测方法稳定可行,可有效控制人参皂苷复乳佐剂注射液的质量。     

饲料中安定的残留分析

本实验建立了饲料中安定的液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测方法。液相色谱条件为分析柱WatersSunfireTMC18150mm×2.1mm,3.5μm,流动相为乙腈-0.2%甲酸(体积比55∶45),流速:0.2mL/min。质谱条件为电喷雾离子源(ESI ),选择离子监测(SIR)质荷比(m/z)为285,228,154带正电荷的准分子离子和碎片离子。在此条件下安定的线性范围为1～1000μg/L,方法最低定量检测限为1.0μg/kg,安定的回收率为75%±10%。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中的己烯雌酚

本文建立了饲料中己烯雌酚的高效液相色谱—串联质谱检测方法(UPLC-MS/MS)。色谱条件:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱2.1mm×50mm1.7μm;流动相为乙腈—水(50:50,v/v),流速0.2mL/min;进样体积10μL;柱温35℃。采用负电喷雾离子源,在多反应监测(MRM)模式下进行分析,外标法定量,3对定性离子对分别为:m/z320.90151.85、320.90256.92和320.90193.90,定量离子对为320.90151.85。在0.1～500μg/L浓度范围内呈良好的线性,相关系数r0.999。在1、5、20mg/kg3个添加水平,平均回收率75.2%～97.6%,日内变异系数在2.1%～6.3%之间,日间变异系数在3.2%～9.7%,检测限为10μg/kg。     

人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖抑制作用及其机理初探

以不同浓度的人参总皂苷与马立克氏病肿瘤细胞系MSB-1细胞共同作用,利用改良MTT法测定了人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖抑制作用,并通过琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、荧光检测和电镜形态学观察等方法探讨其抑制机理。实验结果表明:人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖存在抑制作用,并呈剂量-时间依赖性,人参总皂苷与MSB-1细胞培养72 h后的半数抑制浓度为:340.41μg/mL,其95%可信限为:(340.41±33.7)μg/mL。流式细胞术测定表明,人参总皂苷抑制了MSB-1细胞DNA的合成。琼脂糖凝胶电泳分析、荧光检测和透射电镜观察表明,人参总皂苷可以诱导部分MSB-1细胞发生凋亡。     

田七须根总皂苷的提取工艺研究

为了建立田七须根中皂苷含量的检测方法,并优化其提取工艺,试验以皂苷含量为检测指标,采用香草醛-高氯酸方法测定三七须根中皂苷的含量,并用回流提取法进行提取。结果表明:人参皂苷Rg1在0.008 3~0.049 8 mg/m L范围内呈良好线性关系(R=0.999 4),平均回收率为101.2%(n=4),变异系数RSD为2.6%;最佳提取工艺条件:以80%的乙醇为提取溶剂,采用回流提取方法提取3次,第1次提取2 h,第2,3次各1.5 h。该测定方法简便,精密度、准确度高,重复性好,提取工艺经济、合理,可加以推广和应用。     

不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响

为了探讨不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响,采用HPLC法测定人参液中单体皂苷Rg1、Re、Rb1(三者合为总皂苷)和稀有皂苷Rg3的含量;MTT法检测不同人参提取液对人肝癌细胞HepG2的抑制率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明,在人参炮制过程中,人参总皂苷含量由0.56%下降到0.13%,稀有皂苷Rg3含量由0.17%增加到0.30%;抑制率检测结果表明,浓度为28.8 g/L时3种提取液对细胞的抑制作用最强,黑参组对肝癌细胞的抑制作用高于人参组和红参组;凋亡实验发现,黑参提取液对细胞的促进凋亡作用明显,人参提取液的促凋亡作用不明显。表明红参和黑参提取液可以抑制人肝癌细胞HepG2增殖并促进其凋亡,可能与参液中的稀有皂苷Rg3含量有关。     

液相色谱-质谱联用分析饲料中新型的β2-肾上腺素能激动剂——齐帕特罗

建立了饲料中齐帕特罗的液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测方法.液相色谱条件为Waters AntantisTM C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3μm);柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%甲酸(892,V/V);流速0.2 mL/min;进样量20μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI+),选择离子监测质荷比(m/z)为262、244、202、185带正电荷的准分子离子和碎片离子.齐帕特罗的线性范围为0.01～4μg/mL,最低定量检测限0.01μg/g,回收率为(90±10)%.     

三七不同皂苷的分析条件研究

三七总皂苷含有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re及三七皂苷R1、R2、R3、R4、R6等20多种皂苷成分,其中人参皂苷Re、Rb1、Rg1及三七皂苷R．含量最高。阎萍等对三七总皂苷的研究中,将Rb1、Rg1及R1三种单体皂苷进行了分离。通过实验发现,人参皂苷Re、Rb1、Rg1及三七皂苷R14种单体皂苷相互之间分离条件要求较高。笔者在此基础上对其分离条件进行了研究,利用薄层色谱与高效液相考察了4种皂苷的分离条件,为中药三七提取物制剂质量控制提供依据。     

人参皂苷Rb1和黄芪多糖对微血管内皮细胞分泌细胞因子的影响

血管内皮细胞(vascular endothelial ce11s,VECs)很长一段时间被认为是机体和外界之间物质交换屏障,随着显微镜、细胞培养和分子生物学的发展发现内皮细胞在机体的免疫应答和炎性反应过程中起到非常重要的作用。人参皂苷Rb1和黄芪多糖都具有提高机体免疫的功能,本试验通过研究人参皂苷Rb1和黄芪多糖对微血管内皮细胞分泌NOI、L-6和TNF-α的影响,为阐述人参皂苷Rb1和黄芪多糖免疫作用机制提供一些试验数据。1材料与方法1.1药品及材料黄芪(产于山西)购自北京同仁堂;人参皂苷购自中国药品生物制品检定所;NO检测试剂盒I、L-6试剂盒和TNF…     

三七不同无皂苷的分析条件研究

三七总皂苷含有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re及三七皂苷R1、R2、R3、R4、R6等20多种皂苷成分,其中人参皂苷Re、Rb1、Rg1及三七皂苷R.含量最高.     

红参川贝咳喘丸的质量控制方法研究

目的:建立红参川贝咳喘丸的质量控制方法。方法:对红参川贝咳喘丸中红参、川贝母采用薄层色谱方法(TLC)进行定性鉴别;红参川贝咳喘丸君药红参中人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1的含量采用高效液相色谱方法进行(HPLC)检测。结果:建立的TLC定性鉴别方法斑点清晰,具有极好的分离度,阴性无干扰;HPLC测定人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1分别在12.08～193.2μg/mL、12.63～202.1μg/mL、12.6～201.6μg/mL范围内呈良好的线性关系,R~2值分别为0.999 6、0.999 6、0.998 4,平均加样回收率分别为97.01%、96.98%、98.31%,RSD分别为0.64%、1.15%、1.24%。结论:该研究方法简便易操作,专属性强,结果准确,能够对红参川贝咳喘丸的质量进行控制。     

三七花总皂苷的回流提取工艺研究

为了建立三七花总皂苷含量的测定方法,优化其回流提取工艺,试验采用香草醛-高氯酸法测定总皂苷的含量,以皂苷含量为指标优化其提取工艺.结果表明:人参皂苷Rg1在0.008 3～0.049 6 mg/mL范围内呈良好线性关系(r =0.999 4),平均回收率为99.3％(n=4),变异系数为3.4％;最佳提取工艺条件为将三...     

硫酸化人参总皂苷的制备及其对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响

用氯磺酸-吡啶试剂制备了硫酸化人参总皂苷衍生物，采用红外光谱仪检测到制备的硫酸化人参总皂苷衍生物中在1230cm^-1和810cm^-1有硫酸酯键的特征吸收峰。为了初步探讨硫酸化人参总皂苷的免疫学活性．以MTT法测定了人参总皂苷及其衍生物对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响。结果表明，150μg／m1人参总皂苷和衍生物均能显著抑制鸡外周血淋巴细胞的增殖（P〈0．05），10μg／ml的衍生物能极显著促进淋巴细胞增殖，与同浓度人参总皂苷相比活性极显著增强（P〈0．01）。实验结果提示，对人参总皂苷进行硫酸化修饰是可行的，经硫酸化后人参总皂苷衍生物的免疫活性明显增强。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定原料乳和奶粉中三聚氰胺的含量

该试验建立了使用超高效液相色谱-串联四极杆质谱测定原料乳和奶粉中三聚氰胺含量的检测方法.用三氯乙酸溶液和乙酸铅提取,提取液经MCX固相萃取柱净化后用UPLC-MS-MS进行检测.色谱条件:CAPCELL PAK CR1:4柱(2.0 mm×100 mmi.d.,5 μm),流动相:乙腈-0.01 mol/L乙酸铵溶液,梯度洗脱流速0.3ml/min.采用正离子模式的电喷雾质谱检测,以一级质谱得到的准分子离子m/z 126.8作为母离子,进行碰撞诱导解离(CID)二级质谱(MS2)分析,选择母离子和MS2的碎片离子m/z 84.9、67.8定性确证.提取m/z 84.9离子质量色谱峰面积定量.基质标准线性范围为0.01～1.00 μg/ml,检出限10 μg/kg(S/N=10),原料乳回收率为82.4%～97.8%,奶粉回收率为80.7%～95.7%.     

三七花总皂苷的回流提取工艺研究

为了建立三七花总皂苷含量的测定方法,优化其回流提取工艺,试验采用香草醛-高氯酸法测定总皂苷的含量,以皂苷含量为指标优化其提取工艺。结果表明:人参皂苷Rg1在0.008 3～0.049 6 mg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.999 4),平均回收率为99.3%(n=4),变异系数为3.4%;最佳提取工艺条件为将三七花粉末浸泡在10倍量的60%乙醇中12 h,回流提取3次,每次2 h。说明该测定方法简便、准确、重现性好,提取工艺经济、合理。     

HPLC-ESI-MS/MS法检测N-氨甲酰谷氨酸的含量

建立了检测样品中N-氨甲酰谷氨酸含量的HPLC-ESI-MS/MS分析方法。采用负离子多反应监测方法（MRM）测试,以碎片离子m/z 147.9和m/z 83.9进行定性,以碎片离子m/z 129.9进行定量。色谱柱为Agilent Zorbx SB-C18（4.6×150 mm,5μm）柱;流动相为乙腈—0.1%甲酸水溶液（5∶95,V/V）;柱温为20℃。结果表明,N-氨甲酰谷氨酸在20.0~500.0 g/L内呈良好的线性关系,相关系数为0.999 8;精密度和准确度等均符合样品检测的要求。建立的方法准确、灵敏、特异性强,适用于样品中N-氨甲酰谷氨酸的含量检测。     

牛奶中吡利霉素残留检测高效液相色谱-串联质谱法研究

建立了牛奶中吡利霉素残留检测的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法。液相色谱条件为:色谱柱为Waters XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液(30∶70,V/V),柱温为30℃,流速为0.2 mL/min,进样量为10μL。质谱条件为:电喷雾离子源(ESI ),多反应监测(MRM)方式进行采集;监测离子质荷比(m/z)为411.5>112.0,411.5>363.4。以吡利霉素的同分异构体异吡利霉素作内标,内标法定量。结果表明:吡利霉素的线性范围为20~400 ng/mL,相关系数R2=0.999 9;方法检测限为2 ng/mL,定量限为5ng/mL;从50、100和150 ng/mL三个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率为90.4%~104.3%(n=6),批内、批间RSD均小于5%。     

HPLC法测定兽用白头翁颗粒中白头翁皂苷B4含量

为了建立兽用白头翁颗粒中白头翁皂苷B4的含量测定方法。利用HPLC法,采用HypersilC18柱(250mm×4.6mm,5μL),以乙腈-0.1%磷酸(27∶73,V/V)为流动相,检测波长为205nm,流速1.0mL/min,柱温30℃。以白头翁皂苷B4对照为参比,在白头翁颗粒色谱图中,对白头翁皂苷B4的保留时间及峰面积的RSD进行分析。采用外标法测定3批白头翁颗粒中白头翁皂苷B4的含量。试验结果显示,白头翁皂苷B4在0.1~2.0mg/mL范围内呈良好的线性关系,(r=0.9995,n=6),平均含量为11.29mg/g,平均回收率为99.28%(RDS=2.09%,n=9)。该方法操作简便、结果准确,重复性好,可用于兽用白头翁颗粒的质量控制。