荧光定量RT-PCR检测高致病性PRRSV疫苗免疫仔猪攻毒前后抗原在体内的动态分布

为了更好地了解高致病性PRRSV疫苗的免疫机理,试验应用荧光定量RT-PCR方法比较了PRRSV变异株(HuN4)活疫苗和PRRSV变异株(JXA1)灭活苗免疫仔猪攻毒前后PRRSV在体内动态分布的差异。结果表明:HuN4活疫苗组攻毒后,病毒在各组织中的含量明显低于JXA1灭活苗组和对照组;JXA1灭活苗组攻毒后,病毒在各组织中的分布、载量与对照组相似,但较对照组轻。说明HuN4活疫苗免疫仔猪攻毒后,能明显抑制病毒在各组织中的复制,其免疫效果明显优于JXA1灭活苗。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用

为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25 600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。     

高效防控猪蓝耳病很简单

为什么猪蓝耳病阴魂不散?为什么对猪蓝耳病防控的认识混乱?为什么猪蓝耳病疫苗免疫防控效果不一且不稳定?为什么有人不惜牺牲生产成绩放弃尝试更有效的猪蓝耳病防控方法?究其原因是,在猪蓝耳病防控实践中,我们忽视猪群所感染PRRSV野毒毒力存在强弱差异,不了解PRRSV弱毒活疫苗残留毒力也存在差异,不知道当今PRRSV疫苗研发前沿技术成果,导致盲目选择疫苗,进行不合理的免疫;忘记我们的初衷是高效防控猪蓝耳     

猪繁殖与呼吸综合征病毒对动物机体免疫机制的挑战

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种病毒性传染病,对养猪业造成严重威胁.对PRRSV的研究是兽医免疫学中最具挑战性的课题之一,至今人们对PRRSV所引起的免疫应答过程仍不十分了解.通过对PRRS的研究中获得的知识及存在问题的回顾,会对今后研究PRRS疫苗起到一定的推动作用.论文对PRRSV的获得性免疫反应、PRRSV的免疫调节及免疫逃逸、PRRSV的遗传多样性及其对疫苗开发的影响、现有疫苗防控措施、PRRSV疫苗的发展前景等方面的研究进展做了简要概述.     

山东省规模化猪场PRRSV NSP2变异株的感染情况调查

为了解山东省规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV) NSP2变异株的感染情况,2010～2011年本研究从山东省未免猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)疫苗猪场、免疫进口PRRS弱毒苗猪场和免疫国产PRRS弱毒苗猪场选择20个临床表观健康的规模化猪场,采集830份血清,利用RT-PCR方法对其进行PRRSV NSP2变异株病原学检测.结果表明山东省规模化猪场普遍存在PRRSV NSP2变异株感染,而且临床表观健康的未免疫PRRS疫苗猪场、免疫进口PRRS弱毒苗猪场及免疫国产PRRS弱毒苗猪场中PRRSV NSP2变异株的检出率由高到低,同一猪群中存在PRRSV NSP2变异株野毒和疫苗毒.     

“单点式”与“两点式”生产流程对生长猪感染蓝耳病的影响

<正>通过比较某公司两个不同生产模式下的猪场,在蓝耳病疫苗以及相同的免疫程序下PRRSV抗体的动态变化以及生产成绩的对比,结果表明两点式养殖模式与自繁自养的养殖模式相比更利于猪群蓝耳病的控制,也具有更好的生产效益。     

不同猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗在猪体内的动态学及临床免疫效果比较

为了比较国内不同猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)弱毒疫苗的安全性和有效性,本研究将17头PRRSV抗原和抗体双阴性的28日龄仔猪随机分为4组,TJM-F92株弱毒疫苗组,JXA1-R株弱毒疫苗组,经典株弱毒疫苗(VR2332来源)组和注射生理盐水对照组。免疫后7,14,21,28d分别采血,ELISA抗体检测试剂盒检测PRRSV抗体,结果从免疫后14d起PRRSV抗体开始转阳,但各试验组的抗体水平无明显差异。对免疫后14d所采血样进行病毒分离,TJM-F92株免疫组未分离到PRRSV疫苗毒,JXA1-R株免疫组2头猪分离到PRRSV疫苗毒,经典株免疫组只1头猪分离到PRRSV疫苗毒。免疫后28d,所有猪接种PRRSV强毒株TJ株进行攻毒试验,观察各组猪的体温、临床症状;攻毒后21d,所有猪安乐死,剖检观察肺部病理变化。结果显示,TJM-F92株和JXA1-R株免疫组均未出现临床发病猪,经典株免疫组2头猪出现临床发病,对照组全部临床发病,死亡1头。经典株免疫组临床发病猪出现典型PRRSV感染肺部病理变化,而TJM-F92株和JXA1-R株免疫组均未发现典型PRRSV感染肺部病理变化。本研究证实TJM-F92株和JXA1-R株对高致病性PRRSV的免疫效果优于经典株弱毒疫苗,TJM-F92疫苗株与JXA1-R疫苗株相比,疫苗毒在体内带毒时间更短,安全性更高。     

PRRSV抑制Ⅰ型IFN信号通路研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起猪的一种病毒性传染病,给全球的养猪业带来了巨大的经济损失。Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)是主要的抗病毒细胞因子,被认为是先天性免疫和适应性免疫之间的桥梁。PRRSV可以通过其编码蛋白来抑制干扰素的产生和阻碍干扰素激活的抗病毒信号通路,从而造成PRRSV在猪体内持续性感染。论文主要对PRRSV基因组、干扰素产生的信号通路和PRRSV抑制干扰素产生的机理进行综述。通过了解PRRSV和机体天然免疫应答之间的关系,以期为深入认识PRRSV的致病机理,并为PRRSV的疫苗研制提供理论基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的控制策略研究进展

正猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种具有高度传染性的猪病毒性疾病,其主要临床症状表现为母猪繁殖障碍和仔猪呼吸困难与高死亡率,对世界猪养殖业造成了严重的经济损失。免疫PRRS灭活疫苗或减毒活疫苗是目前防控猪繁殖与呼吸综合征的主要手段,但由于PRRSV具有抗原变异快、持续性感染和免疫抑制等特点,临床上常常会出现免疫失败或疫情加重的情况。目前我们对PRRSV的病毒学、起源和进化的了解以及宿主对PRR     

猪繁殖与呼吸综合征未免疫猪群的抗体消长规律研究

为研究未免疫猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗的猪场的PRRSV抗体消长规律,试验采集A、B、C三个规模化猪场共147头猪的血液样本,分离血清,用IDEXX试剂盒检测血清中的PRRSV抗体。检测结果表明A、B、C三个猪场的猪群具有相似的PRRSV抗体消长规律,即哺乳仔猪体内存在PRRSV抗体,随着猪周龄的增长,PRRSV抗体水平降低,PRRSV抗体水平下降到最低后,随着PRRSV的感染,机体产生免疫应答,PRRSV抗体水平快速上升。可为猪场制定合理的PRRSV疫苗免疫程序提供指导。     

感染PRRSV弱毒株后仔猪病毒血症和抗体产生规律

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1R弱毒株在仔猪体内的增殖及其诱导抗体产生的规律。本试验将PRRSV CH-1R弱毒株肌肉注射免疫9头45日龄健康仔猪,于免疫后0,7,14,28,35和42 d通过前腔静脉采取新鲜血液,利用实时荧光定量PCR方法检测PRRSV在猪体内的增殖,ELISA方法检测抗PRRSV抗体,并利用基于PAM细胞建立的中和试验检测中和抗体。结果显示:PRRSV CH-1R弱毒株免疫仔猪后7 d病毒在100%仔猪体内开始复制,免疫后7～14 d时100%仔猪出现病毒血症,且病毒拷贝数达到最高,28～35 d时56%仔猪病毒血症消失,42 d时67%仔猪病毒血症消失;ELISA检测发现免疫后7～14 d仔猪均未产生抗PRRSV抗体,28 d时44%仔猪开始产生抗PRRSV抗体,42 d时78%仔猪抗PRRSV抗体水平达到最高,有2头猪在0～42 d一直未检测到抗PRRSV抗体;利用基于PAM细胞上建立的检测中和抗体的方法检测,免疫后7～14 d均未产生中和抗体,28 d时仅有22%仔猪产生低水平的中和抗体,35 d时78%仔猪产生中和抗体,且在42 d时其中和抗体水平达到最高。结果表明,PRRSV CH-1R弱毒株免疫仔猪后病毒血症在7～14 d达到高峰,免疫接种后28～42 d大部分仔猪病毒血症逐渐消失,即病毒增殖随时间呈递减趋势;抗PRRSV抗体及中和抗体均在免疫接种后28 d开始出现且在42 d抗体水平达到顶峰,即抗体水平随时间呈递增趋势。抗PRRSV的ELISA抗体与中和抗体水平呈正相关,而抗PRRSV中和抗体水平与病毒增殖呈负相关,但是有33%仔猪体内一直存在病毒,表明PRRSV CH-1R弱毒株免疫仔猪后,可诱导较低水平的抗体免疫保护反应,同时也可引起较低水平的病毒血症。     

阻断式PRRSV免疫抑制试验

根据PRRSV会对猪瘟免疫产生抑制作用的原理,以猪瘟免疫抗体效价为PRRSV对猪瘟免疫产生抑制作用的示性指标,设计以山羊球蛋白为猪蓝耳疫苗的免疫抑制剂,与猪蓝耳灭活苗同时免疫30日龄PRRSV自然感染猪,同时设置PRRSV感染对照组和预防控制组。77日龄时采血检测猪瘟免疫抗体显示:PRRSV预防控制组的猪瘟平均效价为8 log;使用抑制剂1次组其猪瘟平均效价为3 log;使用抑制剂2次组和PRRSV感染对照组的猪瘟效价均为1. 8 log。实验提示PRRSV对猪瘟的免疫抑制危害是严重的。     

PRRSV GP5蛋白及猪IL-18基因共表达核酸疫苗免疫原性试验

本试验通过分子克隆技术分别构建了单独表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5基因以及PRRSVGP5基因和猪IL-18基因共表达的重组核酸疫苗质粒（pEGFP—GP5和pEGFP—ILl8-GP5）,并进行仔猪免疫原性研究,对构建的PRRSV核酸疫苗所诱导的体液免疫和细胞免疫水平进行检测,进一步研究了PRRSV核酸疫苗免疫效果以及猪IL-18基因对PRRSV核酸疫苗免疫调节作用的影响。同时,调查了商业上应用不同类型的PRRSV疫苗诱导的免疫效果,并与核酸疫苗免疫效果进行比较。结果表明,IL-18作为免疫佐剂在疫苗免疫猪后诱导的病毒特异性细胞免疫反应方面具有很好的调节作用,共表达IL18-GP5蛋白能够明显的改善DNA疫苗的免疫效力,增强抗PRRSV的免疫保护。因此,DNA疫苗做为一种新一代疫苗可用于对抗高致病性PRRSV感染。     

猪繁殖与呼吸综合征免疫防制新途径的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种主要表现为母猪繁殖障碍与仔猪呼吸道症状的传染病。近年来,猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异株不断出现,免疫逃避及持续性感染使得猪群发病率或复发率均相继增高,给养猪业带来了巨大的损失。目前所采用的胃肠道途径接种活疫苗或灭活疫苗的方法无法诱导对猪群的全面保护作用。为减少养猪业的经济损失,亟需研制新防制方法和新疫苗接种途径。作者主要从黏膜免疫的免疫部位、呼吸道保护性黏膜免疫反应诱导、黏膜免疫途径、佐剂的选择及病毒的免疫抑制反应等方面简要论述了有效防制PRRSV的黏膜免疫方法的研究进展,为进一步了解黏膜免疫抵御PRRSV突变株感染及黏膜疫苗研制等方面提供有用的信息。     

PRRSV-VR2332减毒活疫苗不影响猪瘟疫苗和猪圆环病毒2型灭活疫苗诱导的抗体产生

本研究拟评估仔猪接种猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗对猪圆环病毒病疫苗、猪瘟疫苗免疫的干扰情况,并分析不同免疫方式对仔猪生长性能的影响,以期为探究PRRSV减毒活疫苗与PCV2、CSF疫苗的联合免疫提供数据参考。本研究先以100头仔猪为研究对象,将其随机分为A、B、C、D 4组。其中A组仔猪免疫PRRSV减毒活疫苗7 d后免疫PCV2疫苗;B组仔猪同期分点注射PRRSV减毒活疫苗和PCV2疫苗;C组仔猪仅免疫PCV2疫苗;D组仔猪仅免疫PRRSV减毒活疫苗。另外再筛选100头仔猪,随机分为E、F、G、H 4组。E组仔猪于免疫PRRSV减毒活疫苗12 d后免疫CSF疫苗;F组仔猪同期分点注射PRRSV减毒活疫苗和CSF疫苗;G组仔猪仅免疫CSF疫苗;H组仔猪仅免疫PRRSV减毒活疫苗。免疫4周后,测定仔猪血清中相关抗体水平。同时,称量免疫前后各组仔猪的体重,计算不同免疫方案仔猪的平均日增重。结果表明：A~D组中, A组和B组仔猪在免疫4周后均产生了较高水平的PRRSV及PCV2抗体,且A组抗体水平略高于B组。C组仔猪仅产生了PCV2抗体,D组仔猪产生了较高水平的PRRSV抗体。E~H 4组中,E组和F组仔猪均产生了较高水平的PRRSV及CSFV抗体。G组仔猪仅产生了高水平的CSFV抗体,H组仔猪仅产生了高水平的PRRSV抗体。A、B、C、D 4组中B组仔猪的平均日增重最高;而E、F、G、H 4组中E组仔猪的平均日增重显著高于其他3组。PRRSV减毒活疫苗与PCV2疫苗或CSF疫苗同期分点免疫、免疫PRRSV减毒活疫苗一段时间后再免疫PCV2或CSF疫苗均能诱导仔猪产生高水平的抗体;在体液免疫方面,PRRSV减毒活疫苗免疫与否均未对另外二种疫苗表现出明显的干扰作用。在仔猪28日龄时同期分点免疫PRRSV减毒活疫苗与PCV2疫苗,12 d后再免疫CSF疫苗的免疫方案不仅能诱导仔猪产生高水平抗体,还可以使仔猪具备较高的平均日增重。     

猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起,以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道综合征为主要特征。PRRSV具有不断变异的能力,毒力更强的新型PRRSV毒株不断出现。2006年我国就出现了美洲型PRRSV变异株,严重危害着我国养猪业。为了更好地认识猪繁殖与呼吸综合征在我国的发生与流行,对PRRS的病原学、流行病学、致病机制、遗传变异、诊断与控制技术等方面的研究进展进行综述。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒M/GP5糖蛋白复合物以唾液酸依赖方式与Sn受体结合

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是世界范围内威胁猪健康的主要病原之一,其所引起的病毒病也是当今养猪业最重要的猪病。在过去研究多集中在病毒侵入宿主细胞必须识别的许多病毒受体和侵入介质,但病毒作用物的分子机制仍不清楚,以致难以研制出有效的疫苗。本研究的主要目的是鉴定sialoadhesin(Sn)受体作用的主要病毒作用物,Sn受体是巨噬细胞上PRRSV的主要受体。为此本试验构建了可溶性Sn,其能通过唾液酸依赖途径与PRRSV结合,从而中和巨噬细胞感染的PRRSV,因此Sn是巨噬细胞上重要的PRRSV受体。虽然唾液酸作用于GP3、GP4和GP5整个糖蛋白,但只有PRRSVM/GP5糖蛋白复合物才能作为Sn的配体。试验证明了Sn具有唾液酸结合力及GP5存在唾液酸,该研究结果不仅有助于更好的了解PRRSV的生物特性,更能为研究新的PRRSV疫苗提供了主要思路。     

猪繁殖与呼吸综合征免疫学所面临的挑战(续完)

<正>上期回顾:上期介绍了猪繁殖与呼吸综合征总体简况和免疫适应性反应3PRRSV的免疫调节与免疫逃避3.1干扰素PRRSV适应性免疫应答的独特特性表明,该病毒能够强有力地调节该免疫应答反应。     

某规模化猪场主要猪繁殖障碍性传染病抗体检测及分析

为了解某规模化猪场猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)的抗体水平以及猪伪狂犬病野毒感染情况,研究应用ELISA检测技术对该场307份血清进行了CSFV、PRRSV抗体检测,63份血清进行了PRV-gB、PRV-gE蛋白抗体检测,猪群总体CSFV抗体阳性率为81.11%;PRRSV抗体阳性率为90.23%;PRV-gB蛋白抗体阳性率为95.24%;PRV-gE蛋白抗体阳性率为69.84%,并对不同类别猪群的抗体水平做出具体分析。该结果为了解该猪场3种常见传染病的整体免疫水平,进一步制定合理的免疫程序和防治措施提供参考。     

高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM-F92疫苗株对低剂量猪瘟兔化弱毒株的免疫干扰研究

为研究高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM-F92疫苗株对低剂量猪瘟病毒(CSFV)C株是否存在免疫干扰作用,本研究对不同方式免疫动物从体液免疫水平、免疫攻毒保护水平及病理学变化等方面进行免疫干扰评价。结果表明,高剂量PRRSV TJM-F92疫苗株与低剂量CSFV C株联合免疫组CSFV抗体水平与低剂量CSFV C株单独免疫对照组CSFV抗体水平无显著差异,联合免疫组中高剂量PRRSV TJM-F92株未抑制低剂量CSFV C株抗体生成;攻击CSFV石门血毒后,联合免疫组与低剂量CSFV C株单独免疫对照组均未出现猪瘟临床症状,组织器官病理变化轻微,两组免疫组均可对CSFV石门系血毒攻击产生良好的保护效果。阴性对照组实验动物均表现出猪瘟明显临床症状并全部死亡。本研究表明,高剂量PRRSV TJM-F92株对低剂量CSFV C株无免疫干扰作用。本研究为PRRSV免疫防制措施的制定提供了实验依据。