牛支原体的分离鉴定及药敏试验分析

本试验的目的是对四川某肉牛养殖场的疑似病例进行牛支原体的分离鉴定。采集24头病牛的鼻腔棉拭子,用特异性检测牛支原体的PCR方法进行检测,并对阳性样本进行药敏试验。结果显示:从24份临床样本中检测出23份牛支原体阳性样本,且成功分离到10株牛支原体;药敏试验显示分离的牛支原体对泰乐菌素、氧氟沙星、土霉素、庆大霉素、头孢喹诺、氟苯尼考敏感,对恩诺沙星和头孢噻呋有耐药。可见牛支原体感染是该牛场发病的重要原因,筛选出的敏感药物可用于治疗发病牛。     

塔城地区某奶牛场牛支原体的分离鉴定及药敏试验

为确定新疆塔城地区某奶牛场部分断奶犊牛出现咳嗽、流脓性鼻涕、腹泻等症状的发病病因,本试验通过对采集到的发病犊牛鼻拭子样品进行分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因和oppD/F基因PCR扩增与测序、药敏试验等。分离培养显示3株分离株在改良Thiaucourt’s琼脂培养基平板上生长出典型的“煎蛋样”菌落,狄氏染色菌落中心呈深蓝色。生化试验中分离株不发酵葡萄糖与甘露醇,不水解精氨酸,不分解尿素,明胶液化试验为阴性。PCR扩增分离株16S rRNA基因测序结果显示,分离株与GenBank数据库中牛支原体16S rRNA基因序列的相似性在98.73%以上;牛支原体特异性基因oppD/F阳性且相似性达99.74%以上。通过药敏试验从9种药物里选择出替加环素、红霉素2种最为敏感的药物。研究结果表明,造成此次犊牛肺炎的病原菌为牛支原体,为临床防治牛支原体病提供了参考。     

一株牛支原体的分离鉴定及致病性初步研究

对采集到的疑似牛支原体肺炎肺组织病料进行病原的分离,并对分离株进行形态学、生化和分子生物学鉴定,结果显示成功分离获得1株牛支原体,命名为NM001。该分离株的菌落形态呈典型的“荷包蛋状”,不能发酵葡萄糖,不能水解精氨酸,不分解尿素。PCR能够扩增出牛支原体特异的P48基因条带,16S rRNA基因序列与Ningxia-1序列同源性为99.03%。将该分离株接种2头6月龄犊牛均出现明显的临床症状,剖检后胸腔中少量淡黄色渗出液,肺脏出现肉样实变。试验结果表明,分离到的牛支原体NM001株对牛具有较强的致病性,为牛支原体攻毒模型的建立奠定了基础。     

鸡滑液囊支原体贵州株的分离鉴定及VlhA基因序列分析

【目的】 获得鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)贵州流行株,以进一步开展其病原学及免疫学相关研究。【方法】 从贵州省织金县某肉鸡场共采集107份疑似MS感染病鸡的咽拭子、肿胀关节和脚垫、肿胀组织渗出物进行PCR检测,对PCR筛选的阳性组织样本进行MS分离培养,并进行瑞氏染色、生化试验及VlhA基因序列分析。【结果】 PCR检测筛选到20份阳性样本,从关节和爪垫阳性样本中分离到1株疑似MS,分离株在平板上生长出"煎蛋状"菌落;瑞氏染色可见蓝色细小的球形菌;生化试验中,分离株分解葡萄糖和麦芽糖,但不分解精氨酸、尿素等,与MS标准株生化结果一致;分离培养物经PCR扩增得到821 bp的目的片段;分离株VlhA基因核苷酸相似性分析表明该分离株为MS,与GenBank登录的国内其他地区流行株相似性有地域差异。与安徽、重庆、福建、广东、广西、湖北、湖南、江苏和云南等地区流行株相似性在90.3%~99.7%之间;该分离株与湖南MS流行株相似性最高,达到99.7%;但与国外参考流行株的相似性低;VlhA基因遗传进化树分析显示,该分离株与国内参考株亲缘关系较近,与国外参考株亲缘关系较远。【结论】 本研究成功从引起关节和足垫肿胀的鸡中分离鉴定了1株MS贵州流行株,该分离株存在一定变异,为贵州省MS的分子生物特征及本病的诊断和防控研究提供了基础依据。     

广西南宁市疑似牛支原体肺炎的病原分离和PCR鉴定

为了对广西南宁市一起疑似牛支原体病例进行病原鉴定,试验对采用细菌和支原体分离、PCR检测、动物致病性试验和药敏试验对病牛的鼻拭子液进行鉴定。结果表明:分离得到2株细菌,但对小白鼠无致病性;用PPLO固体培养基培养2~4 d后可见针尖大小的菌落,在4×10倍视野下观察为"煎蛋样"菌落;经PCR检测,其序列与Gen Bank登录的牛支原体CQ-W70株、HB0801株和Hubei-1株的同源性为100%;分离的支原体对阿奇霉素、大观霉素、替米考星、卡那霉素、诺氟沙星、左氟沙星、氧氟沙星、新霉素、四环素、强力霉素高度敏感。说明该病例的病原为牛支原体。     

新疆石河子地区牛支原体的分离鉴定及药物敏感性分析

【目的】确定引起新疆石河子地区集约化牛场常发性肺炎的主要病原同时进行病原的体外药物敏感性分析。【方法】采集有典型咳嗽、流涕症状的牛鼻拭子10份和病死牛肺脏组织1份,用牛支原体特异性引物进行PCR检测,将检测为阳性的样本进行病原培养纯化,对纯化后的分离株菌落进行形态学观察、Dienes染色、生化试验及16S rRNA测序和进化分析,通过测定颜色变化单位(CCU)测定分离株生长曲线,并对分离株进行药物敏感性试验。【结果】PCR结果显示,10份鼻拭子中检测出7份牛支原体阳性样本,1份病死牛肺脏组织也检测为阳性;在涂有肺脏组织研磨液培养液的PPLO固体培养基上长出针尖状的菌落,纯化后分离株菌落形态为典型的煎蛋状;Dienes染色可见明显的深蓝色中心脐;生化试验结果显示,分离株不水解明胶、精氨酸、七叶苷,不发酵乳糖、葡萄糖和甘露醇,不分解尿素,可还原氯化三苯基四氮唑;16S rRNA测序结果显示,分离株与牛支原体国际标准株PG45相似性为99.7%,与国内牛支原体地方流行株XBY01、Ningxia-1、NM2012、Tibet-10的相似性最高,均为99.9%;生长曲线测定结果显示,分离株在培养基中生长6 h后进入对数生长期,54 h时达到高峰进入稳定期,72 h后进入衰亡期;药物敏感性试验结果显示,分离株对呋喃妥因、四环素和多西环素、庆大霉素和卡那霉素敏感,对诺氟沙星和氧氟沙星中介,而对环丙沙星、洛美沙星及阿奇霉素和红霉素耐药。【结论】本研究成功从肺脏组织中分离鉴定出1株牛支原体,培养54 h是该分离株的最佳收获时间,与国内大多数牛支原体地方流行株差异较小,整体遗传进化相对稳定,有一定的耐药性,本研究结果可为当地对牛支原体的防控提供参考,也为牛支原体致病机制研究及疫苗研发奠定基础。     

山羊传染性胸膜肺炎的实验室诊断

为明确贵州省开阳县1例疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原种类,实验通过病原分离培养、形态学观察、生化试验和PCR方法对病原进行了分离与鉴定。结果显示,所分离病原具有支原体的生长特性,菌落形态与支原体相似;支原体分离株与Mo模式株生化试验结果相同,与Mmc模式株存在差异;PCR试验进一步确定分离株为Mo模式株。试验结果表明,本次山羊传染性胸膜肺炎疫情应为绵羊肺炎支原体感染所致。     

山羊莱氏无胆甾原体FJ-NP株的分离鉴定

为明确福建省某羊场发生的疑似羊支原体性肺炎病例的病原,利用支原体培养基对发病羊肺脏组织的病原进行分离培养和纯化,通过生化试验和特异性PCR方法进行鉴定,并对分离株16S rRNA进行测序分析。结果显示,分离株菌落呈油煎蛋状,有棕黄色中心突起;能发酵葡萄糖,不能水解精氨酸,不分解尿素,氯化四氮唑还原反应、胆固醇需要试验、血细胞吸附试验及溶血试验的结果均为阴性,美兰还原反应阳性。经PCR扩增出莱氏无胆甾原体支原体（Acholeplasma laidlawii,AL）大小为505 bp的特异性目的片段,分离株16S rRNA序列与莱氏无胆甾原体标准株PG8同源性为99.8%。鉴定结果表明,本次从山羊肺脏组织分离到的支原体为莱氏无胆甾原体,命名为FJ-NP株,但该分离株与山羊发病性的关系有待进一步研究。     

重庆市某肉牛场牛支原体肺炎的诊断

重庆市某肉牛场新进育肥牛群发生以呼吸系统感染为主的传染性疾病,为确诊病因,对表现明显临床症状的病牛进行迫杀,无菌采集肺脏、肝脏、血液和心肌进行病原分离,共分离到4株菌,分别编号为CQ1、CQ2、CQ3、CQ4.经16S rRNA序列比对,CQ1与牛支原体同源性达99.9％,CQ2与羊创伤球菌同源性达99.8％,CQ3、CQ4分别与大肠杆菌和沙门氏菌同源性达99％.通过培养特性、菌落形态观察、牛支原体特异性引物PCR扩增,确定CQ1为牛支原体;药物敏感性试验和动物试验表明,该分离株对环丙沙星、氧氟沙星、四环素、壮观霉素敏感,不致死小白鼠.按牛支原体肺炎临床用药后,疫情很快得到控制,结合实验室检测结果,确认该场爆发的是以牛支原体感染为主的牛支原体肺炎.     

内蒙古某肉牛场呼吸道疾病病原的分离鉴定

2017年5月,内蒙古某肉牛场暴发呼吸道疾病,为了确诊该次疾病的病原,无菌采集牛鼻汁接种于鲜血琼脂培养基进行细菌的分离鉴定,同时对牛鼻汁中的病原进行PCR检测,并针对分离菌进行药物敏感性试验。根据细菌分离结果将该分离菌初步鉴定为链球菌;药敏结果显示,该分离菌对阿米卡星、壮观霉素、强力霉素和阿奇霉素高度敏感。PCR检测结果显示,病料中的牛呼吸道合胞体病毒和支原体PCR检测结果为阳性。由以上结果可以得出引起该肉牛场肉牛发病的病原为牛呼吸道合胞体病毒、支原体和链球菌。     

寻甸县肉牛主要疫病病原学监测和防控研究

2021年—2022年云南省寻甸县肉牛科技特派团成员对寻甸县肉牛主要疫病进行系统调查及疫病防治研究,2年来共完成了16个乡(镇)175个肉牛养殖场(户)的现场调查,并随机在全县16个乡镇71个肉牛养殖场(户)、1个屠宰场和1个大牲畜交易市场采集样品3267份,进行了口蹄疫、牛结节性皮肤病、牛蓝舌病、巴氏杆菌病、牛支原体、牛结核分枝杆菌、牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛布鲁氏菌病、巴贝斯虫10个病的病原学检测,结果显示：牛结节性皮肤病、蓝舌病病毒、牛巴氏杆菌病、牛支原体、牛结核病、巴贝斯虫病6个病种的病原监测均为阴性;在73个养殖场(户)1394份棉拭子中检出牛病毒性腹泻阳性3份、牛传染性鼻气管炎阳性2份;在29个养殖场(户)899份全血样品中检出牛巴贝斯虫病12份,样品阳性率分别为0.22%,0.14%,1.33%;场阳性率分别为1.37%、1.37%,24.13%。通过2年持续地边监测边排查隐患,精准指导养牛户科学防控疫病、规范使用兽药、强化生物安全等措施,使养殖户掌握了科学养牛和科学防病技术,切实提高肉牛疫病防控和养殖水平,提高肉牛养殖效率和肉牛产品品质。     

临泽县肉牛传染病和寄生虫病普查报告

为掌握临泽县肉牛传染病和寄生虫流行情况,临泽县动物疫病预防控制中心对全全县肉牛传染病和寄生虫病的感染情况进行了摸底普查.通过详细普查,掌握了全县肉牛传染病和寄生虫病发生显著,为有效防控提供了重要理论依据.     

Identification of genes responsible for hereditary diseases in Japanese beef cattle

In the breeding of domestic animals, selection of economically desired traits has been the most important consideration for the improvement of animals, but excluding negative factors in animal production, such as causative genes for hereditary diseases, is also required for the genetic improvement of domestic animals. The incidence of various hereditary diseases has been reported in Japanese beef cattle and these diseases have caused serious problems in the breeding and raising of healthy beef cattle. This article reviews the identification of causative genes for the following three hereditary diseases in Japanese beef cattle: (i) Chediak–Higashi syndrome; (ii) renal tubular dysplasia; and (iii) bovine chondrodysplastic dwarfism. Chediak–Higashi syndrome is a hereditary bleeding disorder reported in Japanese black cattle. To identify the cause of this disease, we cloned and sequenced the bovine LYST gene, which has been found to be involved in Chediak–Higashi syndrome in humans, and found that an amino acid substitution of histidine to arginine at amino acid residue 2015 is the causative mutation in the cattle disease. Renal tubular dysplasia is a hereditary disease of Japanese black cattle showing renal failure and growth retardation. We mapped the locus for this disease to the 4 cM region of bovine chromosome 1 by linkage analysis and found a large deletion in this region. The deleted region contained the PCLN1 gene encoding a tight‐junction protein of renal epithelial cells, and we concluded that deletion of the PCLN1 gene is responsible for the disease. Bovine chondrodysplastic dwarfism is a hereditary disease of Japanese brown cattle, displayed by short limbs and joint abnormalities. We mapped the locus for the disease to a region of bovine chromosome 6 by linkage analysis. By constructing YAC and BAC contigs covering this region and sequence analysis, we identified a novel gene (LIMBIN), which plays an essential role in bone formation in this region, and found two mutations responsible for the disease. The identification of these mutations provided the basis for DNA‐based diagnostic systems for these three diseases, and after development of the diagnosis systems, the incidences of these hereditary diseases have dramatically decreased.     

山东省肉牛主要疫病的检测

对山东省肉牛饲养比较集中的８个县（市）部分马牛场及其周边区域肉“牛群的疫现部分老的疫病已不存在，但占疫病的种类数量仍在逐渐增多，且复杂多样。提醒人们在肉牛规模化养殖中防制疫病的任务还相当艰巨。     

牛肺疫临床症状及综合防治

牛肺疫又被称为牛传染性胸膜肺炎,是由肺炎支原体感染引发的急慢性呼吸道疾病,临床上主要表现为呼吸急促,呼吸困难,从鼻腔中流出脓性分泌物,主要对患病牛的肺脏、胸膜和淋巴结造成危害,典型的临床特征是肺小叶浆液性肺炎和肺实质纤维素性肺炎,被国际兽医局划归为A类动物疫病,我国将其划归为一类重大动物疫病,发生流行后,需要执行严格的扑杀、无害化处理制度,逐渐净化牛群,避免疫情进一步扩展蔓延到造成更为严重的经济损失。该文主要论述牛肺疫的临床症状和综合防治措施。     

张掖市肉牛传染病和寄生虫病感染状况的抽样监测

为了确实掌握张掖市百万头肉牛基地肉牛传染病和寄生虫病感染情况,建立健全百万头肉牛基地的动物卫生防疫体系,有效防治疫病的发生流行,确保百万头肉牛基地健康发展,对全市肉牛传染病和寄生虫病的流行情况进行了摸底调查和实验室检测。通过详细普查,掌握了全市肉牛传染病和寄生虫病发病情况,为有效防控肉牛疫病提供了重要理论依据。     

适度规模养殖中牛疫病种类及防治

畜牧业的发展在提高我国区域经济发展水平以及个人收入水平上发挥重要的作用,其中牛肉因其肉质鲜美而受到消费者的青睐,养牛业的发展势头也越来越好,不少乡镇地区的农户们开始发展养牛业,越来越多适度规模的养殖场开始崛起。但是养殖中的疫病流行问题比较常见,严重影响养殖户的经济效益获得。该文主要论述适度规模养殖中牛疫病种类及防治。     

张掖市百万头肉牛基地防疫模式的建立和推广

张掖市百万头肉牛基地建设工程是张掖市确立的十大工程之一,为了使工程建设确实取得实效,各级动物防疫部门就肉牛基动物防疫工作制定了“权责明确化,任务清晰化,工作规范化,信息网络化、运转高效化”的防疫模式.经过3年多的推广实施,全市百万头肉牛基地动物防疫工作取得显著成效,各种传染病发病率逐年下降,肉牛因病死亡率由1.8％下降...     

Mycoplasma bovis infections in cattle

Mycoplasma bovis is a pathogen causing respiratory disease, otitis media, arthritis, mastitis, and a variety of other diseases in cattle worldwide. It is increasingly recognized by the veterinary and livestock communities as having an important impact on the health, welfare, and productivity of dairy and beef cattle. M. bovis diseases can be difficult to diagnose and control because of inconsistent disease expression and response to treatments and vaccines, and large gaps in our understanding of the epidemiology and pathophysiology of these diseases. There are limited data on which to base evidence-based decisions for treatment and control, and the literature contains differing clinical biases and opinions. This document is intended for veterinarians dealing with cattle and is focused on the cattle production systems of North America. The goal of the consensus statement panel was to encourage an evidence-based approach to M. bovis problems. The scientific literature was critically reviewed, including peer-reviewed journal articles and reviews obtained by database searches using the terms "Mycoplasma bovis" or "mycoplasma + cattle." Where other data were lacking, conference proceedings were reviewed as a source of expert opinion.     

Bovine spongiform encephalopathy in ruminants and the new variant of Creutzfeldt-Jakob disease in humans]

The feeding of meat and bone meal which was contaminated with bovine spongiform encephalopathy (BSE) infectivity led to a huge epidemic in the British cattle population. After the emergence of a new variant form of Creutzfeldt-Jakob diseases (nvCJD) in 1996, European consumers lost confidence in beef meat. Given the coincidence by time and place and disease and agent specific characteristics, it must be assumed that nvCJD is caused by the transmission of BSE agent to man. This article gives an overview over the characteristics and diagnosis of transmissible spongiform encephalopathies, namely BSE and nvCJD, in animals and man.