高压液相色谱——荧光检测法测定蜂蜜中诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星残留量

建立了一种在碱性条件下，利用乙酸乙酯去除蜂蜜中的基质干扰物，通过SCX固相萃取小柱净化样品，从而检测不同品种的蜂蜜中诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星残留量的方法。不同加标水平的诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的检测回收率范围为59．5％～111％，变异系数范围为0．84％-8．56％，以信噪比S／N=3计，检测限分别为：2．3ng／g、3．3ng／g、3．2ng／g。     

高效液相色谱法同时测定诺氟沙星和盐酸小檗碱的含量

以C18为固定相,0.1%磷酸溶液（用三乙胺调节pH值至3.5±0.1）-乙腈（70∶30）为流动相,348 nm为检测波长,采用高效液相色谱法同时测定诺氟沙星、盐酸小檗碱预混剂中诺氟沙星和盐酸小檗碱的含量。诺氟沙星和盐酸小檗碱线性范围分别为0.5-10μg和0.1-2μg,平均加标回收率分别为103.2%和97.7%,RSD分别为0.82%和1.3%（n=5）。     

大豆凝集素的分离纯化和血凝活性研究

大豆种子经过浸提、离心、硫酸铵逐级沉淀和D-半乳糖-Epoxy-Sepharosc-4B亲和层析，获得单一的大豆凝集素（Soybean agglutinin SBA）样品。纯化的大豆凝集素经pH8．9的聚丙烯酰胺凝胶电泳（胶浓度7．5％），可以显示一条清晰的着色带。在血凝活性鉴定中，采用2％兔细胞悬液，测定凝集红细胞的能力和检测它们与糖结合后对红细胞的凝集作用的影响。结果表明，使兔红细胞50%凝集的蛋白质最低浓度为4μg／mL左右。浓度为0．1mg／ml凝集素溶液分别与D-半乳糖、D-氨基半乳糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）、a-乳糖、几丁质溶液结合后，使兔红细胞50％凝集的糖配体溶液浓度分别为1mg／ml、2．5mg／ml、10mg／ml、30mg／ml，而几丁质几乎对SBA没有影响。     

家兔腹泻原因及综合控制(二)

治疗：5％诺氟沙星肌肉注射，每千克体重0．5mL，每天2次，连用数天：恩诺沙星肌肉注射，每千克体重0．2mL（25mg／mL），每天2次，连用数天。同时辅以葡萄糖盐水静注、皮下注射或腹腔注射10～50mL，口服酵母片、维生素C片各1片，每天2次。     

高效液相色谱法测定饲料级L-赖氨酸盐酸盐含量

用高效液相色谱法测定饲料级L-赖氨酸盐酸盐含量。VenusilABS—C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,以水（pH=1．5±0．2）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长为195nm,柱温为30±2℃。在该色谱条件下,L-赖氨酸盐酸盐在0．205～0．821mg／mL浓度范围内呈良好线性关系（r=0．99997）,样品加标平均回收率为99．0％,相对标准偏差（RSD）为0．9％（n=9）。该法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料级L-赖氨酸盐酸盐含量测定。     

L-谷氨酰胺产生菌的分离及其发酵培养基的优化

本试验利用纸层析法从活禽摊土中分离出一株产L-谷氨酰胺的菌株BL-12,对其进行紫外线和硫酸二乙酯诱变处理,经磺胺胍、高浓度硫酸铵定向筛选,得到一株产L-谷氨酰胺较高的菌株BLCC7-0162.经培养特征、形态观察及16SrDNA序列分析,确定该菌株为谷氨酸棒状杆菌.正交试验确定的该菌株的最佳发酵培养基为葡萄糖12％、硫酸铵5％、玉米浆1％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸锾0.04％、硫酸锰2 mg/L、硫酸锌2.5 mg/L、碳酸钙3％、初始pH 7.0～7.5.在此条件下,经过60 h摇瓶培养,其L-谷氨酰胺产量达到47 g/L左右.     

乳牛L-选择素在中性粒细胞中表达与分布的定位研究

采用间接荧光标记及胶体金标记方法通过流式细胞仪和低压扫描电子显微镜，检测了L-选择素在健康泌乳中期乳牛（A组）及患金黄色葡萄球菌型临床型（B组）和亚临床型乳腺炎乳牛（C组）中性粒细胞上表达的基本规律。结果表明：三者表达L-选择素的中性粒细胞阳性率分别为97．90％、97．69％和96．67％（收集5000个细胞），组间差异不显著（P〉0．05），但患亚临床型乳腺炎乳牛的阳性率从3次测定的结果看是逐渐增加的；L-选择素表达的间接荧光强度组间差异极显著（P〈0．01）；而患亚临床型乳腺炎的乳牛组内差异也极显著（P〈0．01）；扫描电镜观察到的中性粒细胞表面脊样结构的分布及形态与流式细胞仪检测的结果具有相似性。     

HPLC-PDAD法检测3种中兽药散剂中违规添加4种喹诺酮类药物的研究

为了建立检测中兽药散剂中违规添加氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星4种喹诺酮类药物的反相高效液相色谱法（HPLC-PDAD）,采用Atlantis T3（十八烷基硅烷键合硅胶．4．6min×250mm,5μm）色谱柱,流动相为磷酸溶液：乙腈：甲醇（85．5：7.0：7．5）,流速为1．0mL／min。检测波长为283nm。4种喹诺酮类药物检查方法的线性关系良好,r〉0．9999;回收率均在98．4％～104．6％范围内,RSD均在0．9％～2．3％之间;4种喹诺酮类药物在肥猪散、健胃散、银翘散3种中兽药散剂中的检出限均为200mg／kg。该方法可用于中兽药散剂中违规添加喹诺酮类药物的检测。     

植物叶蛋白提取技术及开发利用研究

研究了6种不同的叶蛋白提取方法，采用不同浓度（饱和度）的（NH4）2SO4盐析法和加热法，通过调节原液的pH值（5．0－8．0）并分别从光叶紫花苕、紫花苜蓿、白三叶、多花胡枝子、大叶胡枝子、葛藤及多年生黑麦草中提取叶蛋白，结果表明，上述植株均是较好的原料，其中光叶紫花苕、紫花苜蓿、白三叶LPC提取率较高，分别为89．51％、89．2％、76．32％。单位提取量为19、17．5、16．35g/110g鲜草。就方法论，（NH4）2SO4处理随浓度增高而提取率增高，加热法（60－80℃）中以快速加热效果最好。     

饮水中添加口服补液盐对肉仔鸡增重的试验效果研究

以葡萄糖为主要成分，具有促进钠和水吸收的口服补液盐，添加于肉仔鸡的饮水中，供其自由饮用。前期（０～４周）以１％的浓度添加，后期（５～８周）以２％的浓度添加。自开食后进行添加至第八周末停止。第八周末称重。试验组与对照组相比，仔鸡死亡率降低２．５７％，平均每只鸡增重０．１９５千克，肉料比降低了０．１４。     

诺氟沙星在鲤鱼体内的药代动力学

按 10 m g/ kg的剂量给鲤鱼肌注、口服诺氟沙星 ,用高效液相色谱法检测用药后不同时间血浆中药物的质量浓度 ,然后用 90 0 0 3P87实用药代动力学软件处理药时数据。结果 ,肌注和口服诺氟沙星在鲤鱼体内的药时数据均符合开放性二室模型。主要药代动力学参数 ,肌注 :t1/2α( 0 .12 79± 0 .0 130 ) h,t1/2β( 3.4 0 32±0 .5873) h,t1/2 ka( 0 .0 0 6 7± 0 .0 0 0 8) h,AU C ( 2 4 .94 81± 6 .314 6 )μg/ ( m L· h) ,CLS( 0 .4 0 0 8± 0 .10 35)mg/ ( kg· h) ,Tpeak( 0 .0 32 2± 0 .0 0 35) h,Cmax( 16 .8992± 4 .372 6 ) mg/ L;口服 :t1/2α( 3.4 0 71± 1.0 6 98) h,t1/2β( 77.12 39± 2 1.3875) h,t1/2 ka( 0 .14 91± 0 .0 130 ) h,K2 1( 0 .0 4 19± 0 .0 0 38) h- 1,K10 ( 0 .0 4 36±0 .0 0 2 1) h- 1,K12 ( 0 .12 70± 0 .0 30 1) h- 1,AU C ( 150 .6 0 2 9± 35.4 2 78)μg/ ( m L· h) ,CLS( 0 .0 6 6 4±0 .0 0 2 1) m g/ ( kg· h) ,Tpeak( 0 .730 0± 0 .0 10 2 ) h,Cmax( 5.7998± 1.36 75) m g/ L。肌注与内服的主要药代动力学参数差异显著 ( P <0 .0 1)。     

Clinical pharmacokinetics of norfloxacin-glycine acetate after intravenous and oral administration in pigs

The pharmacokinetics and dosage regimen of norfloxacin-glycine acetate (NFLXGA) was investigated in pigs after a single intravenous (i.v.) or oral (p.o.) administration at a dosage of 7.2 mg/kg body weight. After both i.v. and p.o. administration, plasma drug concentrations were best fitted to an open two-compartment model with a rapid distribution phase. After i.v. administration of NFLXGA, the distribution (t_1/2α) and elimination half-life (t_1/2β) were 0.36 ± 0.07 h and 7.42 ± 3.55 h, respectively. The volume of distribution of NFLXGA at steady state (Vd_ss) was 4.66 ± 1.39 l/kg. After p.o. administration of NFLXGA, the maximal absorption concentration (C_max) was 0.43 ± 0.06 µg/ml at 1.36 ± 0.39 h (T_max). The mean absorption (t_1/2ka) and elimination half-life (t_1/2β) of NFLXGA were 0.78 ± 0.27 h and 7.13 ± 1.41 h, respectively. The mean systemic bioavailability (F) after p.o. administration was 31.10 ± 15.16%. We suggest that the optimal dosage calculated from the pharmacokinetic parameters is 5.01 mg/kg per day i.v. or 16.12 mg/kg per day p.o.     

菌速灭对鸡白痢的临床疗效观察

为了评价人工合成的新兽药“菌速灭”不同剂量对沙门菌所致鸡白痢的临床疗效,采用“菌速灭”高、中、低3个剂量组及药物对照组通过饮水给药方式治疗雏鸡白痢,并与感染、健康对照组进行临床治疗效果比较。结果表明,“菌速灭”高、中剂量组治愈率和相对增重率效果均优于诺氟沙星,能较好的治疗雏鸡白痢。     

碱性诺氟沙星在健康猪体内的药动学

按 10 mg/kg单一剂量对健康猪分别肌注和静注碱性诺氟沙星注射液后 ,研究了其在猪体内的药代动力学。应用 HPL C法测定猪体内的血药浓度 ,所得数据应用 MCPKP药动学软件处理 ,结果为 :肌注碱性诺氟沙星 ,Cmax(2 .6 30 80± 0 .6 830 6 ) mg/L,T1 /2 (6 .0 75 17± 3.0 4 76 1) h,AUC(12 .4 99± 2 .4 2 3) mg/L· h,F4 8.4 % ;静注碱性诺氟沙星 ,Co(12 .736 4 8± 5 .1835 2 ) mg/L,T1 /2 (3.312 89± 0 .4 84 39) h,AUC(2 5 .74 7± 3.14 9) mg/L·h。     

烟酸诺氟沙星注射液配方和工艺的初步研究

通过正交试验设计,研究确定烟酸诺氟沙星注射液的最佳配方和生产工艺。结果表明,最佳配方为NaHSO30.15%、EDTA-2Na 0.05%、活性炭0.05%、pH值调节在6.0,灭菌温度控制在115℃、时间30 min,制备的烟酸诺氟沙星注射液产品符合标准规定。     

Pharmacokinetics of norfloxacin after intravenous,intramuscular and subcutaneous administration to rabbits

The disposition kinetics of norfloxacin, after intravenous, intramuscular and subcutaneous administration was determined in rabbits at a single dose of 10 mg/kg. Six New Zealand white rabbits of both sexes were treated with aqueous solution of norfloxacin (2%). A cross‐over design was used in three phases (2 × 2 × 2), with two washout periods of 15 days. Plasma samples were collected up to 72 hr after treatment, snap‐frozen at ?45°C and analysed for norfloxacin concentrations using high‐performance liquid chromatography. The terminal half‐life for i.v., i.m. and s.c. routes was 3.18, 4.90 and 4.16 hr, respectively. Clearance value after i.v. dosing was 0.80 L/h·kg. After i.m. administration, the absolute bioavailability was (mean ± SD ) 108.25 ± 12.98% and the C_max was 3.68 mg/L. After s.c. administration, the absolute bioavailability was (mean ± SD ) 84.08 ± 10.36% and the C_max was 4.28 mg/L. As general adverse reactions were not observed in any rabbit and favourable pharmacokinetics were found, norfloxacin at 10 mg/kg after i.m. and s.c. dose could be effective in rabbits against micro‐organisms with MIC ≤0.14 or 0.11 μg/mL , respectively.     

诺氟沙星对土壤细菌数量及耐药性影响

为了解诺氟沙星在环境中残留对土壤细菌的影响,在诺氟沙星作用于土壤后第35天对纯培养法分离的土壤细菌进行计数,并对土壤细菌进行抗菌药物敏感性试验。结果表明,添加药物组的细菌总数均低于对照组,且药物浓度越高,细菌数量越少;在供试的20种抗菌药中,诺氟沙星敏感菌对其中18种药物的敏感性与诺氟沙星耐药菌差异不显著(P>0.05)。     

The effect of induced fever on the biokinetics of norfloxacin and its interaction with probenecid in goats

The kinetic profiles of norfloxacin were evaluated in afebrile, febrile and probenecid pre-treated (70 mg/kg orally) febrile goats after a single intravenous (i.v) dose (5 mg/kg). Fever was induced and maintained for 12 h by injecting Escherichia coli endotoxin (0.2 g/kg, i.v.) and repeating it in half the dose (0.1 g/kg) 5 h later. The plasma pharmacokinetic values for norfloxacin were best represented using a two-compartment open model. The peak norfloxacin plasma level of 90.52±3.18 g/ml attained in the probenecid pre-treated febrile goats was higher than that in the febrile (75.46±0.72 g/ml) or afebrile goats (62.25±1.23 g/ml). Cl_B and K _el values were significantly (p<0.01) decreased in febrile compared with afebrile goats. These values were further reduced in febrile goats after probenecid pre-treatment. However, t _1/2 was not affected by the fever-probenecid interaction. Norfloxacin may be used as an infusion with probenecid in caprine diseases where very high plasma levels are required to combat resistant organisms such as Bacteroides.Abbreviations MIC minimum inhibitory concentration - LPS lipopolysaccharide - i.v. intravenous(ly)     

4种氟喹诺酮类药物在肉鸡组织中残留的研究

采用高效液相色谱法同时检测肉鸡肌肉、脂肪、肝脏和肾脏组织中4种氟喹诺酮类药物（FQS）的残留。检测条件为：采用HP-StableBond C₁₈分析柱(5 μm，250 mm×4.6 mm)，以15 mmol/L的四丁基溴化铵溶液-乙腈(体积比94∶6)为流动相(用乙酸钠缓冲液调pH3.6)，流速1.0 ml/min，柱温30℃；采用荧光检测器检测，激发波长280 nm，发射波长460 nm。测定结果表明，该方法对FQS的最低检测限为0.92 μg/kg，在5.00~100.00 μg/mg的线性范围内，溶液含量与峰面积的相关系数达0.9998以上。在高、中、低3种含量水平下对所测肉鸡组织中4种FQS进行回收率测定，结果为74%~99%，相对标准偏差低于6.5%，该方法能同时测定4种FQS在动物组织中的残留，具有简便、准确、灵敏度较高的特点，符合痕量测定的要求。