液质串联法测定饲料中16种β-受体激动剂

建立检测饲料中16种β-受体激动剂的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS)分析方法。样品经酸性甲醇提取,浓缩后用甲醇:0.1%甲酸(20:80)溶解进样,经超高效液相色谱-串联质谱在多反应检测(MRM)模式下测定。结果显示:16种β-受体激动剂基质添加标准曲线在50～1 000μg/kg质量浓度范围内线性良好。在50～1 000μg/kg添加水平下,16种β-受体激动剂的加标回收率在65%～105%,相对标准偏差(RSD)均小于10%(n=6);该方法对动物饲料16种β-受体激动剂的定量限为0.05 mg/kg(信噪比>10),检出限为0.01 mg/kg(信噪比>3)。     

高效液相色谱-串联质谱法测定动物尿液中23种β-受体激动剂

建立了同时测定动物尿液中23种β-受体激动剂的高效液相色谱-串联质谱检测法.样品用2 mol/L盐酸酸解,经过SLS固相萃取柱净化、富集后,以甲醇和0.2％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式进行定性和定量分析.23种β-受体激动剂的定量下限为0.1 ～1.0 μg/L.用猪、牛及羊尿样为研究对象,23种β-受体激动剂在0.5、1.0和10 μg/L三个水平下的平均回收率为68％ ～ 115％,批内相对标准偏差为0.5％ ～9.6％,批间相对标准偏差0.6％ ～ 14.1％.结果表明,该方法具有准确、简便、灵敏,重现性好等特点,能满足β-受体激动剂类药物的残留检测任务.     

多壁碳纳米管分散固相萃取结合LC-MS/MS测定饲料中11种β-受体激动剂

本研究建立了采用多壁碳纳米管(MWCNTs)为吸附剂的分散固相萃取(dSPE)净化、液相色谱串联质谱测定饲料中11种β-受体激动剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、苯乙醇胺A、氯丙那林、妥布特罗、西马特罗、特布他林、马布特罗、班布特罗和喷布特罗)的方法。饲料样品经甲酸水溶液提取后,调节pH值至10,加入50 mgMWCNTs进行分散固相萃取,被吸附的化合物经1.0%甲酸水甲醇(91)洗脱,洗脱液过滤膜后进行LC-MS/MS分析。采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正电子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式监测,内标法校准进行定量。结果表明:11种β-受体激动剂在0.1～20μg/L浓度范围内呈良好的线性,线性相关系数均大于0.997,猪配合饲料样品中最低定量限为0.05～0.48μg/kg。猪配合饲料中添加0.5～500μg/kgβ-受体激动剂的回收率在89.6%～112.9%,相对标准偏差RSD均小于15%。     

猪肝、牛肉、羊肉中5种β-受体激动剂残留的超高效液相色谱-串联质谱分析方法的建立

本试验旨在建立猪肝、牛肉、羊肉中5种β-受体激动剂残留的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)快速检测方法。样品用80%的乙腈提取,经过PRiME HLB固相萃取柱一步净化,氮吹浓缩,最后用10%甲醇复溶。以10 mmol/L乙酸铵水溶液-10 mmol/L乙酸铵甲醇溶液(pH=5)作为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式进行测定,内标法定量。5种β-受体激动剂浓度在0.5～50.0 ng/mL呈现良好的线性关系,相关系数(R2)在0.999 63～0.999 96。5种β-受体激动剂浓度为0.5、1.0、5.0μg/kg时,在猪肝中回收率为93.7%～106.1%,牛肉中回收率为95.2%～104.0%,羊肉中回收率为95.1%～106.0%。通过试验得出该方法具有较好的准确度和重复性。按照特征离子色谱峰信噪比(S/N)=3得出,5种β-受体激动剂检出限为0.01～0.04μg/kg,定量限为0.02～0.15μg/kg。本法操作简便,灵敏度高,准确度好,适合大批量畜产品中β-受体激动剂残留的检测分析。     

β-激动剂的作用机理及其在动物组织内的放射性残留

作者简要介绍了β-激动剂(pagonist)的药理、毒性及作用机理，综述了其在动物组织内的放射性残留，指出今后研究的重点方向，为我国β-激动剂的药物残留监控提供参考。     

高效液相色谱-串联质谱法快速测定乳与乳粉中20种同化激素

建立了液相色谱-电喷雾串联质谱同时测定乳与乳粉中11种甾类和9种β-受体激动剂类同化激素的快速确证方法.样品经体积分数0.1％甲酸乙腈溶液提取,正己烷脱脂,HLB固相萃取柱净化后,以0.1％甲酸甲醇-0.1％甲酸水为流动相梯度洗脱,通过C8色谱柱分离,电喷雾正离子多反应监测模式检测.在优化条件下,20种目标物在0.05～50 μg/L范围内线性良好,相关系数均大于0.996;方法定量限(RSN=10)在0.1～1.0 μg/kg之间;不同添加水平回收率为52.8％～97.4％,相对标准偏差(n=6)为2.8％～9.6％.多种市售纯牛奶和乳粉的测定结果表明,该方法操作简单、测定结果准确,可用于乳与乳粉中甾类和β-受体激动剂类激素多残留的快速测定.     

液质联用法测定猪肝中β-受体激动剂残留的不确定度评定

采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定猪肝中9种β-受体激动剂残留量,对标准溶液、标准曲线、样品称量、称量重复性、定容体积等因素进行分析,通过评定各不确定度分量及标准不确定度,得出9种β-受体激动剂的合成相对标准不确定度为5.60%~8.90%,影响较大的因素为标准曲线和测量重复性。     

在麦秸日粮条件下添喂β-受体激动剂对绵羊采食量与消化的影响

将8只新疆美利奴羯羊喂以麦草占88 %的粗饲料日粮 ,并在试验期喂给β-受体激动剂。结果表明 ,添喂 β-受体激动剂可使动物的干物质采食量由每只羊(713.8±107.1)g/d增加到(1028.0±152.6)g/d(P<0.05) ,并且使有机物、粗纤维和粗蛋白的消化率( %)分别由48.1±2.2、49.0±2.2和56.9±2.6提高到56.5±9.0(P<0.05)、60.1±8.5(P<0.01)和68.5±5.6(P<0.001)。不过 ,β-受体激动剂提高绵羊采食量、消化率特别是纤维素消化率的作用机理需进一步研究。     

QuEChERS净化结合UHPLC-MS/MS同时测定饲料中β-受体激动剂类和喹噁啉类药物

研究旨在建立超高效液相色谱串联质谱法同时测定饲料(配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料)中β-受体激动剂类和喹噁啉类药物的分析方法。样品先用1%乙酸水溶液水解浸润,经1%乙酸乙腈提取、Cleanert LipoNo和Cleanert PSA净化、InfinityLab Poroshell 120 ECC18色谱柱分离,三重四极杆液质联用系统检测,外标法或内标法定量。结果表明:在1～50 ng/ml范围内线性关系良好(R~20.99),β-受体激动剂类定量限为5μg/kg、喹噁啉类定量限为50μg/kg,添加回收率在88.2%～105%范围内,相对标准偏差(RSD)均小于8.4%。该方法简单、快速、准确、成本低、通量高,通过对实际样品的检测进一步证实了可为各类饲料中β-受体激动剂类和喹噁啉类药物的含量水平测定、研究和控制提供技术支持。     

苯恶唑和狄普诺啡对麻醉大鼠血浆、垂体和下丘脑β-内啡肽的影响

用二甲苯胺噻嗪(xylazine)+双氢埃托啡(DHE)腹腔注射麻醉大鼠,30 m in时再腹腔注射苯恶唑(Rx781094)+狄普诺啡(M5050),重新记时,放射免疫分析法测定给药后0、5、10、60、120 m in时大鼠血浆、垂体和下丘脑β-内啡肽(β-EP)的含量。结果表明,Rx781094+M5050能够颉颃xylazine+DHE麻醉大鼠引起血浆β-EP的升高,垂体β-EP的下降和下丘脑β-EP的升高。这3种改变均从5 m in开始,持续至60m in。提示:α2-肾上腺素受体(α2-AR)和阿片受体激动剂组成的麻醉合剂xylazine+DHE对大鼠的镇痛和麻醉过程中,激发了内源性阿片肽β-EP的参与。     

烟台市肉品中β-受体激动剂残留及其健康风险评估

采用高效液相色谱串联质谱法对2016-2018年烟台市肉类样品中4种β-受体激动剂的残留水平进行了检测,并在此基础上对烟台市肉品中的β-受体激动剂的残留风险进行了评估。结果显示,2016年的肉类样品中β-受体激动剂残留的检出率为3.33%,检出的2种β-受体激动剂是沙丁胺醇和特布他林,检出率均为1.67%,最高残留浓度分别为0.82μg/kg和3.63μg/kg;2017年和2018年的肉类样品中未有β-受体激动剂残留检出,烟台人民每天通过食用肉类而摄入的β-受体激动剂兽药的安全限值的平均值小于1。总体表明,烟台市肉品中β-受体激动剂残留损害人体健康的风险较低,但存在违规使用β-受体激动剂的现象,相关部门应加强对牲畜养殖使用β-受体激动剂类药物的监管力度。     

β-激动剂对体外培养的瘤胃微生物活力的影响

β-激动剂在提高反刍动物饲料转化率和胴体瘦肉率等方面比对其它动物的作用更明显。为探讨其作用是否与瘤胃代谢有关 ,本实验研究了 β-激动剂对瘤胃微生物活力的影响。实验选用了3种 β-激动剂———盐酸肾上腺素、克伦特罗(Clenbuterol)和塞曼特罗(Cimaterol) ,各设5个不同剂量(0.125 ,0.250 ,0.500 ,1.000 ,2.000mg/kg) ,研究不同剂量的β-激动剂对体外培养的瘤胃微生物产气量、微生物蛋白含量、底物消失率的影响。结果表明 :产气量、微生物蛋白含量和底物消失率与 β-激动剂之间存在着显著的量效关系。盐酸肾上腺素在0.5mg/kg 时微生物蛋白浓度最高(0.0917mg/ml) ,底物消失率最大(37.79 %) ,气体累计产量最大(269.06ml)。克伦特罗在0.5mg/kg 时微生物蛋白浓度最高(0.1167mg/ml),底物消失率最大(39.63 %) ,气体累计产量最大(269.38ml)。塞曼特罗在0.5mg/kg时 ,微生物蛋白浓度最高(0.1125mg/ml) ,1mg/kg 时气体累计产量最大(265.39ml)。3种 β-激动剂都显著促进了瘤胃微生物体外培养的活力(对照组微生物蛋白浓度为0.087mg/ml,底物消失率31.53 %,气体累计产量209.3ml) ,其中克伦特罗的作用最显著。本实验提示瘤胃微生物细胞本身可能存在 β-受体。     

猪肝中β-受体激动剂残留检测能力验证结果分析

为了解我国食品检测实验室的β-受体激动剂检测能力,CNAS于2010年委托中国兽医药品监察所组织实施了猪肝中克仑特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺三种β-受体激动剂残留检测的能力验证工作.全国22个省、市、自治区的共68个实验室参加了本次能力验证,采用的测试方法主要是液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和气相色谱-质谱法(GC-MS).结果显示:克仑特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的实验室满意结果率分别为77.8%、89.6%和92.2%,可疑结果率分别为11.1%、4.17%和0,不满意结果率分别为11.1%、6.25%和7.84%,说明参加能力验证的绝大多数实验室可以准确检测以上三种β-受体激动剂残留.     

猪尿中6种β-受体激动剂残留的超高效液相色谱-串联质谱法同时测定

建立了猪尿中苯乙醇胺A、莱克多巴胺、克仑特罗、西马特罗、特布他林、沙丁胺醇等6种β-受体激动剂在多反应监测模式下超高效液相色谱．串联质谱同时检测的方法。尿样经酶解,调至酸性,经固相萃取技术（SPE）净化富集。6种受体激动剂在0．2-5ng／mL的浓度范围内线性关系良好。方法的检出限和定量限分别为0．2ng／mL和0．5ng／mL。考察了0．5ng／mL、1ng／mL和2ng／mL三个添加浓度的回收率。6种化合物的加标回收率为87．2％-106．6％：RSD为1．2％-13．8％。该方法精密度好,灵敏度高,重现性好,能简便、快速、准确地测定猪尿中六种β-受体激动剂。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛乳中19种β-受体激动剂残留

建立同时检测牛乳基质样品中19 种β-受体激动剂类兽药残留的方法。样品经酸化乙腈溶液提取，利用Oasis PRiME HLB固相萃取小柱通过式净化处理除去磷脂，使用超高效液相色谱-串联质谱仪进行检测。结果表明：经过前处理方法与仪器条件优化后，19 种β-受体激动剂质量浓度在0～10 ng/mL呈良好线性关系（R2≥0.995）；牛乳中19 种β-受体激动剂添加量为0.2～1.0 μg/kg时，加标回收率均为70%～110%，相对标准偏差＜15%。本检测方法前处理简单快捷，具有较高灵敏度和稳定性，可以满足牛乳中β-受体激动剂类兽药残留的快速检测。     

不同β-受体激动剂添加模式对肉牛血液生化指标和激素水平的影响

试验旨在研究不同β-受体激动剂添加模式对肉牛血液生化指标和激素水平的影响。选取15头体况良好、体重相近(257.9kg±33.3kg)的西门塔尔肉牛,随机分为3组,每组5头。对照组饲喂基础日粮;试验Ⅰ组添加莱克多巴胺,添加剂量为670.0μg/kg体重;试验Ⅱ组添加莱克多巴胺、沙丁胺醇和克伦特罗的混合物,添加剂量分别为223.3、50.0、5.3μg/kg体重。给药期28d,停药期28d。结果表明,与对照组相比,在给药第28天时,试验Ⅰ组肉牛血浆中游离脂肪酸(FFA)浓度显著降低(P0.05),试验Ⅱ组肉牛血浆中葡萄糖(GLU)和游离脂肪酸浓度均显著降低(P0.05);整个试验过程中,除停药第28天时试验Ⅰ组肉牛血浆中胰岛素(INS)水平显著高于对照组外(P0.05),β-受体激动剂对各试验组血浆中激素水平均无显著影响(P0.05)。综合上述试验结果,肉牛血浆中的FFA可作为β-受体激动剂潜在的生物标志物,可通过对其的监测来监管β-受体激动剂在肉牛生产环节中的非法使用。     

几种促生长剂对反刍动物的研究与开发前景

本文简要介绍了近年来我们对三种促生长剂(CS87、β-受体激动剂、苯二氮卓类F89)在反刍动物的实验研究情况。CS87主要通过耗竭体内生长抑素,提高生长激素、IGF-Ⅰ和其他代谢激素水平;同进加强消化代谢机能,从而促进动物生长和提高饲料转化率。β-受体激动剂对反刍动物的效率比单胃动物更为显著,可能瘤胃微生物存在β-受体,改善蛋白质代谢;但应使用规范,防止残留量超标,以利保证肉品卫生。初步研究表明,F89可提高动物采食量和营养消化量。上述三种生理调节剂都有良好的开发前景。     

胰高血糖素样肽-1及其受体激动剂治疗2型糖尿病的研究进展

胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是小肠L细胞分泌的一种内源性活性多肽,以葡萄糖依赖的方式促进胰岛素分泌,具有降低血糖作用。与口服糖尿病治疗药物相比,GLP-1优点突出:控制血糖效果良好,可避免低血糖的发生、保护胰岛β细胞功能等。因此,以GLP-1为研究对象,开发糖尿病治疗药物具有良好的前景。本文就笔者在长效多肽GLP-1受体激动剂的研究过程中就胰高血糖素样肽-1及其受体激动剂治疗2型糖尿病的研究进展进行了阐述,为后续的进一步开发研究提供了思路。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中残留的9种β-受体激动剂探讨

笔者以动物源性食品作为研究对象,探讨超高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中残留的9种β-受体激动剂。对9种β-受体激动剂进行了简要说明,通过试验方面的具体操作与介绍,对超高效液相色谱-串联质谱法具体检测动物源性食品中的相关因素进行了讨论。希望能够通过笔者初步论述为该方面的理论研究工作与检测实践提供一些有价值的信息。     

β-受体激动剂药物残留检测方法研究进展

β-受体激动剂可提高动物的瘦肉率并降低动物养殖成本,但β-受体激动剂通过食物链进入人体后会严重危害人体健康,因此世界多国都禁止在养殖业中非法添加β-受体激动剂,而一些非法分子为了利益在养殖环节使用β-受体激动剂,因此,有必要建立快速、准确、灵敏的分析方法用于检测β-受体激动剂。目前常见的检测方法有液相色谱串联质谱法、气相色谱串联质谱法、电化学法、表面增强拉曼散射光谱法、化学发光法、免疫分析法等,文章对上述方法在检测β-受体激动剂中的应用进行了简要介绍,同时分析了这些方法的优缺点,并对今后β-受体激动剂残留检测的新技术进行了展望。可以预见,未来的发展方向可能会是可用于现场检测的可靠性更高、特异性更强的免疫试纸条分析与具有前处理方法简单、高度自动化等优点的液相色谱串联质谱法。