市售15种猪场消毒剂消毒效果的比较

为评价市售的15种消毒剂的消毒效果,采用悬液定量杀菌试验对15种消毒剂的杀灭能力进行实验室评价,从中选择最有效的3种进行喷雾消毒,检测其杀菌率。结果:15种消毒剂中百毒杀S、百胜-30和新大卫均能够在10 min内100%的杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,而作用10 min对枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢的杀灭率分别能达到82.9%,56.8%和59.3%,喷雾消毒后30 min和48 h的杀菌率分别为81.5%,65.1%,80.9%和54.2%,43.5%,55.2%。表明:15种消毒剂中百毒杀S、百胜-30和新大卫的杀灭能力最强,现场消毒后以百胜-30和百毒杀S的杀菌和持续的效果最好。     

神蜂精的药效学研究(三)杀菌消毒抗炎作用与药物稳定性

采用病源菌为对象，对蜜蜂生物中成药外擦剂-“神蜂精”进行杀菌，消毒，抗炎作用与药物稳定性的药效学试验。结果显示：1、神蜂精杀菌消毒抗炎作用；对大肠杆菌作用5min杀灭率可达99.9%；对金黄色葡萄球菌，白色念珠菌作用20min杀灭率均可达99.9%；现场消毒对手上的自然菌作用10min杀灭率均可达90%以上。2、药物稳定性：25%、50%小牛血清对神蜂精杀菌作用无影响；高温54℃下存放14天后对神蜂精杀菌作用无影响。由此表明生物中成药外擦剂神蜂精杀菌消毒抗炎作用强，且药物稳定性好。     

枸橼酸碘溶液对4种病原菌的载体消毒效果研究

通过载体定量试验考察枸橼酸碘溶液的消毒效果,同时选择百胜-30溶液作对照。结果表明,在橡胶片载体、室温条件下(20℃左右),枸橼酸碘溶液按1∶500稀释、作用5 min对大肠杆菌杀灭率达99.90%以上;按1∶1000稀释、作用5 min对金黄色葡萄球菌即可起到杀菌作用;按1∶1200稀释,最低作用10 min,杀菌率才能达标;当稀释倍数为1∶1200、作用30 min对马腺疫链球菌才能达到杀菌效果,当药物浓度提高至1∶800以上时,作用10 min杀菌率即可达到99.90%以上;按1∶10稀释、作用1.5 h对蜡样芽孢杆菌杀灭率才达99.90%以上,当药物浓度提高到1∶8及以上时,作用30 min杀灭率才能达标。与受试消毒剂药物相比,百胜-30溶液对大肠杆菌和马腺疫链球菌的杀灭效果好,对金黄色葡萄球菌起作用时间略晚,对蜡样芽孢杆菌的杀灭效果不如枸橼酸碘溶液。两种消毒剂对不同病原菌的载体消毒效果不同。     

过氧乙酸和来苏尔对大肠杆菌杀灭效果的比较研究

为比较过氧乙酸和来苏尔对大肠杆菌杀灭效果。本研究从犬粪便中分离1株大肠杆菌,采用悬液定量杀灭试验,比较过氧乙酸和来苏尔对大肠杆菌杀灭效果。2%过氧乙酸作用1min,大肠杆菌杀灭率为100%,且其杀菌效果随浓度增高和作用时间延长而增强;2%来苏尔作用10min,大肠杆菌杀灭率为98.08%。在同一杀菌时间、同一消毒剂浓度下,过氧乙酸对大肠杆菌的杀菌效果较好。     

过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对羊舍环境真菌的消毒效果评价

为了测定过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对环境真菌的消毒效果,为其使用提供依据,以黑曲霉、青霉分离株和白色念珠菌标准株为指示菌,应用5种消毒剂分别进行悬液定性、定量杀灭试验,并应用复方消毒剂进行了羊舍现场消毒效果监测。结果显示:复方消毒剂在推荐中剂量组作用30 min可完全杀灭指示菌,而其他4种消毒剂在推荐中、高剂量组不能完全杀灭3种指示菌;复方消毒剂对真菌消毒合格所需的有效成分浓度均低于其他消毒剂;复方消毒剂以1:256稀释、20 mL/m~3剂量喷雾消毒,对羊舍气载真菌作用6 h后的效果最佳(杀灭率为47.8%~68.1%),对地面、墙壁和笼具等表面载体消毒30 min的杀灭率分别为89.3%、72.3%和88.7%,可维持24 h以上。结果表明,过氧乙酸戊二醛复方消毒剂在实验室消毒和现场消毒试验中1:256稀释作用10 min即可高效杀灭真菌孢子,比市售常见消毒剂所需有效成分浓度更低,用时更短,但在生产应用中应根据实际情况适当加大使用浓度和剂量。     

氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果观察

利用物体表面现场消毒试验方法,观察了氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果。结果表明,氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果随消毒剂浓度的升高和作用时间的延长而增强。当高于0.1%氯甲酚纳米乳消毒剂对卫生间水泥地面的自然菌作用5 min以上时,杀灭对数值均大于1,消毒合格;0.5%氯甲酚纳米乳消毒剂对兔舍地面的自然菌作用10 min以上,高于1.0%氯甲酚纳米乳消毒剂作用5 min以上时,杀灭对数值均大于1,消毒合格。结果提示,氯甲酚纳米乳消毒剂的消毒效果良好,值得在畜牧兽医实践中推广应用。     

环保型桑树叶面消毒剂——消微灵的研究

本文报道了家蚕叶面消毒剂消微灵对家蚕微粒子原虫的消毒效果,并对杀菌机理进行了探索研究。研究结果表明消微灵对家蚕微粒子原虫有显著、快速的杀灭效果：浓度为50mg／L,作用5min,对孢子的杀灭率可达95％以上;在10％有机物存在的情况下,浓度为75mg／L,作用5min,对孢子的杀灭率达99％。根据光镜和电镜的观察结果,推测消微灵的作用机理是药物通过孢壁进入孢内灭活孢原质达到杀灭作用。     

过硫酸氢钾复合粉消毒作用试验研究

采用纸片琼脂扩散、定量和定性的杀菌试验方法,对过硫酸氢钾复合粉的消毒效果进行研究。结果显示,0.125%-1%的过硫酸氢钾复合粉消毒剂对大肠杆菌8099、金黄色葡萄球菌ATCC6538、多杀性巴氏杆菌C48-1、链球菌C55100均有抑菌作用,对前三种菌的最低杀菌浓度为0.25%,对链球菌C55100的最低杀菌浓度为0.125%。对受试菌作用10 min,杀菌率均为100%;作用5 min,杀菌率也可达到99.9%以上,符合杀菌率要求。     

聚维酮碘在养殖场消毒效果的研究

本试验采用定量杀菌和现场消毒评价5%聚维酮碘溶液定量杀灭细菌繁殖体和现场消毒的效果。对于细菌繁殖体,5%的聚维酮碘溶液分别进行1︰3500和1︰6000稀释度时,室温条件下(20℃左右)作用5 min,其杀灭率均达99.90%以上。现场消毒结果表明,无论是地面、墙面、圈槽、空气消毒,5%聚维酮碘溶液高浓度(1︰200)、中浓度(1︰300)消毒10 min,杀菌率均可达99.90%以上。     

猪种布鲁氏菌对4种常用新型消毒剂敏感性的研究

为了确定常用新型消毒剂对布鲁氏菌的杀菌/抑菌效果,本研究将聚维酮碘、戊二醛、戊二醛癸甲溴铵复方溶液、二氯异氰尿酸钠4种常用消毒剂与定量B.suis混合均匀,分别作用3 min、10 min与30 min,取0.1 m L涂布于TSA培养基中进行菌落计数;通过对不同消毒剂、不同作用时间其杀菌率的对比,确定不同消毒剂对B.suis的敏感程度。研究表明,B.suis对聚维酮碘溶液敏感性最强,10%聚维酮碘溶液1 000倍稀释作用3 min便能有效杀灭B.suis;其次戊二醛与癸甲溴铵混合溶液效果显著优于戊二醛单独使用,100倍稀释后可有效杀灭B.suis,1 000倍稀释后作用30 min可100%杀灭B.suis;而单独使用戊二醛,仅在10倍稀释时3~30 min能有效杀灭该菌,100倍稀释时作用30 min,其杀菌率仅达93%;而二氯异氰尿酸钠在4种消毒剂中消毒效果最不理想,其最高杀菌率仅为67%;因此,在布鲁氏菌病的防控中,消毒剂以聚维酮碘与戊二醛癸甲溴铵复方制剂为最佳选择。     

复方季铵盐泡沫消毒剂成泡性能的优化及对病毒的杀灭效果评价

【目的】研究复方季铵盐泡沫消毒剂的成泡性能,并评估该消毒剂对新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）和猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）的杀灭效果,以及不同作用浓度和时间对消毒效果的影响。【方法】通过响应面法对复方季铵盐泡沫消毒剂中苯扎溴铵、癸甲溴铵和癸基葡萄糖苷3种成分的含量进行优化;采用悬浮杀灭试验,以细胞感染方法,测定该消毒剂稀释度为1：100、1：200、1：400、1：500、1：600、1：800和1：1 000时分别作用5、10和15 min对NDV LaSota株的灭活率;采用悬液定量法,测定该消毒剂稀释度为1：200、1：300、1：400、1：500、1：600时分别作用3、5、7、10和15 min对CSFV Thiveral株的灭活率。【结果】复方季铵盐泡沫消毒剂中主要成分苯扎溴铵、癸甲溴铵和癸基葡萄糖苷含量配比分别为1.4%、3.8%和0.75%时,成泡时间达到83 min。该消毒剂在稀释度最高为1：400（以总含量计约为137.5 mg/L）时,最短作用时间5 min,对NDV LaSota株灭活率为100%;最短作用时间为3 min时,对CSFV Thiveral株灭活率达到100%;作用时间延长至15 min时,对2种病毒的灭活率均稳定保持在100%。复方季铵盐泡沫消毒剂的稀释度低于1：400时,对NDV LaSota株杀灭效果不佳;稀释度为1：500（以总含量计约为110 mg/L）、1：600（以总含量计约为91.67 mg/L）时,作用时间10 min,对CSFV Thiveral株灭活率达到100%,作用时间延长至15 min时,灭活率稳定保持在100%。【结论】复方季铵盐泡沫消毒剂中苯扎溴铵、癸甲溴铵和癸基葡萄糖苷含量为1.4%、3.8%和0.75%时成泡效果最优,该消毒剂对NDV和CSFV杀灭效果较好,为其在养殖场的规范使用提供参考与理论依据,也为畜禽养殖业场地环境消毒效果评价提供更多的可能性。     

淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

采集吉林省白城地区镇赉县周边6个鱼塘的各种鱼类,用直接压片镜检法和人工消化法分别对采集回来的麦穗鱼感染华支睾吸虫囊蚴的情况进行统计调查,结果表明,感染率最高、感染强度最大的鱼塘是四方坨六分场。随即对四方坨六分场鱼塘中各种鱼类华支睾吸虫囊蚴感染情况也采用同样方法进行调查,结果显示,感染率最高的是麦穗鱼、银飘鱼、尖头鱥,均为100%;其次是细鳞鱼,为80%;其他种类的鱼虾均未检测到有华支睾吸虫囊蚴寄生。     

12味中药对鸡血清型O_(78)大肠杆菌的抗菌活性观察

本研究旨在观察乌梅、芦荟等12味中药的水煎液对鸡致病性大肠杆菌O78的抗菌活性。选取乌梅、芦荟等12味中药加水煎煮以获得中药水提取物,测定其对鸡致病性大肠杆菌O78的最低抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并对体外抑菌效果较好的单味中药进行体内试验。乌梅、芦荟、白头翁抗菌活性较好,桔梗、连翘、大黄、白芍、白术几乎无抗菌活性,其中乌梅、白头翁与芦荟水提取物对鸡致病性大肠杆菌O78的MIC分别为2.57、2.06和2.31mg/mL。乌梅、芦荟、白头翁具有一定的抗鸡致病性大肠杆菌O78的作用,将为开发新的抗鸡致病性大肠杆菌的药物奠定理论基础。     

犬型钩端螺旋体外膜蛋白OmpL1基因的克隆与序列分析

作者以犬型钩端螺旋体菌株的DNA为模板,采用PCR方法扩增目的基因OmpL1,克隆到pVAX1载体上,并对OmpL1基因测序后进行序列分析。结果获得960 bp片段,DNA序列分析结果表明,该菌株的OmpL1基因与报道的七日热型、秋季型、波摩那型、澳洲型钩体的OmpL1基因核苷酸序列相似性分别为99.38%、93.77%、99.58%、99.38%,氨基酸序列相似性分别为100%、95%、100%、100%。证明OmpL1为致病性钩体所具有的保守性抗原成分,可在钩体病的预防和诊断中发挥重要作用。     

5株堆形艾美耳球虫线粒体cox3基因的扩增及序列分析

以5株堆形艾美耳球虫为研究对象,对其线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅲ亚基(cox3)的部分基因(pcox3)进行了PCR扩增、测序及序列分析,并与GenBank上已发表的顶复门原虫相关序列进行比较,研究其线粒体cox3基因遗传变异情况。结果每个虫株均获得572bp的目的片段,利用DNAStar软件进行序列比对,5株堆形艾美耳球虫线粒体pcox3序列完全一致,与疟原虫和住白细胞虫相应序列的相似性分别为51%和50%,而与泰勒虫的相似性少于50%。本研究首次报道了堆形艾美耳球虫pcox3序列,结果显示不同来源的堆形艾美耳球虫pcox3序列没有差异,与毒力无关,为进一步研究艾美耳球虫的群体遗传学奠定了基础。     

布拉酵母菌海藻糖提取方法的比较研究

本试验对布拉酵母菌海藻糖提取方法做了初步研究,通过3种提取剂,采用单一及复合处理方法,摸索出布拉酵母菌海藻糖提取的最佳方法是以5%的三氯乙酸做提取剂,超声破碎10 min后100℃水浴30 min。提取后用5%盐酸水解提取液,然后用生物传感器测定葡萄糖含量,计算海藻糖含量。     

兰州地区宠物犬弓形虫病血清学检测分析

为了解兰州地区宠物犬弓形虫病的感染情况以及不同弓形虫检测方法检测结果的差异,本研究对兰州地区272例宠物诊所受检犬进行弓形虫阳性检出率的统计分析;对66份犬血样进行间接血凝试验（IHA）与酶联免疫吸附试验（ELISA）检测,并将2种方法进行比较。结果表明,弓形虫的感染率与年龄有关,随着年龄的增长感染率增加,犬小于1岁感染率最低,为3.77%,1～3岁感染率为10.59%,3～5岁感染率为15.28%,大于5岁时感染率最高,为22.58%,不同性别之间感染无显著差异（P>0.05）;IHA与ELISA检测结果经t检验比较差异不显著（P＞0.05）。     

羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因在杆状病毒中的串联表达

本研究通过构建含有3拷贝羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因的重组杆状病毒,旨在通过昆虫细胞表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白,为原核表达和真核表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白的免疫效果的比较奠定了基础。将细粒棘球蚴EG95s基因与3拷贝羊C3d基因串联,插入pTarget载体,获得重组质粒pTarget-EG95-(C3d)3,利用BamH Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切位点将目的基因EG95-(C3d)3克隆至Bac-to-Bac系统的转移载体pFastBac-Hta中,获得pFastBacHta-EG95-(C3d)3重组质粒,将该重组质粒转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中进行转座重组,获得携带3拷贝羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因的重组转座子rBacmid-EG95-(C3d)3,转染Sf9昆虫细胞后获得EG95-(C3d)3重组杆状病毒,并表达EG95- (C3d)3重组融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting进行重组蛋白的鉴定。同时利用昆虫细胞表达蛋白对羊棘球蚴病特异性抗体进行检测。结果表明,获得了EG95-(C3d)3重组杆状病毒,且EG95-(C3d)3重组融合蛋白在Sf9昆虫细胞得到了正确表达,大小约为132 ku,Western blotting鉴定结果显示表达的EG95-(C3d)3重组融合蛋白能与细粒棘球蚴阳性血清产生特异性反应,表明EG95-(C3d)3基因表达产物具有免疫活性。同时表达蛋白对羊棘球蚴病特异性抗体有良好的敏感性。EG95-(C3d)3基因在昆虫细胞获得表达,为原核表达和真核表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白的免疫效果的比较,及细粒棘球蚴病的高效检测方法的建立奠定了基础。     

培养时间和表皮生长因子对兔卵母细胞体外成熟的影响

本试验旨在探讨培养时间和表皮生长因子(EGF)对兔卵母细胞体外成熟及受精的影响。分别用切割法和针刺挤压法取经超排后母兔卵巢表面的卵母细胞颗粒细胞复合体(COCs),将COCs分别在不同时间(24、30、36及40h)和在基础培养液中添加不同浓度表皮生长因子(0、50、100ng/mL)进行体外成熟培养并观察其第一极体排出率。结果表明:①针刺挤压法获得COCs数明显高于切割法(P0.05);②体外成熟培养时间30(36)h的第一极体排出率高于24(40)h(P0.05);③添加50和100ng/mLEGF组卵母细胞第一极体排出率明显高于对照组(P0.05)。因此,①兔卵巢卵母细胞的获得方法以针刺挤压法较好;②兔卵母细胞成熟时间以30～36h为宜;③EGF对兔卵母细胞体外成熟有促进作用,在基础培养液中添加100ng/mLEGF为宜。     

牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用

根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。牛种布鲁菌可扩增出301和114 bp 2条带,羊种布鲁菌可扩增出301和253 bp 2条带,该方法对牛种布鲁菌544A和羊种布鲁菌16M混合DNA模板的最小检出量为100 pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。应用该方法对吉林省某牛场的106份粪便进行检测,虎红平板凝集试验作对照,结果PCR检测9份为阳性,且全为牛种布鲁菌阳性,对应的虎红平板凝集试验也为阳性。结果表明,建立的多重PCR方法具有良好的敏感性和特异性,为布鲁菌病的鉴别诊断提供了一种分子检测工具。