抗苗勒氏管激素(AMH)及其在选择供体牛上的应用研究进展

抗苗勒氏管激素(AMH),又称苗勒管抑制物质(MIS),是转化生长因子(TGF)超家族成员之一,在卵巢生长卵泡的颗粒细胞中表达,在调控卵泡生长和发育中起重要的作用。本文综述了AMH的生理作用及其在牛超数排卵供体牛选择上的应用研究结果。结果表明,牛胚胎生产能力具有可重复性,而且是可能遗传的性状,测定供体母牛血液AMH含量,对确定母牛生产可用胚胎内在能力具有重要价值。     

抗缪勒氏管激素抑制山麻鸭卵泡发育分子机制的研究

【目的】探究抗缪勒氏管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)抑制山麻鸭卵泡发育的分子调控机制。【方法】选取40只29周龄产蛋山麻鸭,随机分为4组：AMH1、AMH2、AMH3和对照组,AMH1、AMH2和AMH3组给予2、20和200μg/d AMH多肽;对照组给予同等体积的生理盐水,整个试验持续21 d;每天记录产蛋量,在试验末采集卵巢和卵泡进行计数,称重计算卵巢指数,测定血清促黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、孕酮(progesterone, P₄)和雌二醇(estradiol, E₂)水平,检测等级卵泡(F6)、小黄卵泡(SYF)和大白卵泡(LWF)中卵泡刺激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)、类固醇生成急性调节蛋白(StAR)、3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、雌激素合成酶(CYP19A1)、生长分化因子9(GDF9)、骨形态发生蛋白15(BMP15)基因表达量,以及F6和SYF中StAR、GDF9蛋白表达水平。【结果】与对照组相比,AMH2和AMH3组的产蛋率显著下...     

TGF-β家族成员调控家禽卵泡发育的研究进展及展望

与哺乳动物不同,家禽的卵泡发育无明显发情周期,其卵泡发育遵循严格的等级发育体系。禽类卵泡的等级发育是一个复杂的调节过程,受卵泡细胞内外的内分泌激素、自分泌/旁分泌因子的共同调节。促卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体激素(Luteinizing hormone,LH)在调控卵泡发育、卵母细胞成熟和排卵中起着重要的作用。此外,局部产生的生长因子如转化生长因子β超家族(Transforming growth factor superfamily,TGF-β)成员,包括抗缪勒氏激素(Anti-Müllerian hormone,AMH)、骨形态蛋白家族(Bone morphogenetic proteins,BMPs)、抑制素(Inhibin)和激活素(Activin)等,与促性腺激素一起协同调控卵泡的生长发育、卵母细胞的成熟等过程。文章综述了TGF-β家族成员,包括AMH、BMPs、抑制素、激活素在家禽卵泡发育中的作用及其未来的研究方向。     

哺乳动物肺发生的调控

哺乳动物肺的发育起始于从前肠内胚层发育而来的成对肺芽突起，它以分支形态发生和肺特异性细胞分化的遗传预定模式侵入周围的中胚层间质。呼吸上皮 分化很可能受复杂的细胞－细胞间相互作用的影响，并且受影响前肠组织中转录因子表达的自分泌、旁分泌和体液信号的影响。在肺形态发生和基因表达中，若干个转录因子家庭起关键作用，包括同源[异型]域蛋白甲状腺转录因子－1（TTF－1），翼状－螺旋家族成员肝细胞核因子－3β（HNF-3β）和GIi家族中的锌指转录因子。TGF－β诱导不同类型停滞细胞（包括肺上皮细胞）的生长的一批蛋白的表达，其中一些蛋白沉积于肺泡外基质中。     

雪纳瑞的雌雄同体并发支持细胞瘤的病例报告

<正>持久性缪勒氏管综合征(PMDS)是一种遗传的雄性假两性畸形,其特征是外观表现为雄性但体内同时存在子宫和输卵管。在雄性发育过程中,性别的分化主要由睾酮和抗缪勒激素(AMH)控制。睾酮由间质细胞分泌,介导前列腺、输精管和附睾的形成以及外生殖器的雄性化;AMH由支持细胞分泌,负责缪勒氏管的退化。PMDS是由于受体对AMH缺乏反应导致本应退化的缪勒氏管会发育为子宫、输卵管和子宫颈。由于PMDS犬的睾酮不受     

黔北麻羊TGFβ2基因克隆、表达及生物信息学分析

为探究转化生长因子β2基因(Transforming Growth Factor beta 2,TGFβ2)在黔北麻羊性腺轴组织的表达水平和蛋白结构功能。本研究以健康成年黔北麻羊母羊为对象,采集子宫、输卵管、垂体、下丘脑、卵巢5个组织并提取总RNA,逆转录合成cDNA第一链,使用RT-qPCR技术检测TGFβ2基因在黔北麻羊性腺组织中的差异表达;进一步使用RT-PCR法克隆黔北麻羊TGFβ2基因CDS区,并构建pMD-19T-TGFβ2亚克隆载体。克隆测序结果显示:通过RT-PCR法成功获得的黔北麻羊TGFβ2基因CDS区,包含1 329 bp,与NCBI上山羊TGFβ2基因序列相似度达到99.85%,共编码442个氨基酸;TGFβ2蛋白存在信号肽位点,且主要定位于细胞质的相对不稳定分泌蛋白;分子式为C_(2245)H_(3535)N_(615)O_(662)S_(25);遗传进化树分析得出,与9个物种相比较,黔北麻羊TGFβ2基因与绵羊和牛的遗传距离最近,与马和狗的遗传距离最远。RT-qPCR结果显示,TGFβ2基因在子宫组织中表达最高,极显著高于输卵管和下丘脑组织,显著高于垂体及卵巢组织。本实验完成了黔北麻羊TGFβ2基因T-克隆和蛋白结构的功能预测,揭示了TGFβ2基因在黔北麻羊性腺轴组织中的表达差异性,这为进一步探索TGFβ2基因对黔北麻羊繁殖性能的分子机制提供了基础数据。     

TGFβ-SMAD信号通路基因在梅山猪与杜洛克猪不同级别卵泡中的表达分析

为探索TGFβ-SMAD信号通路基因在卵泡中的表达规律,采用Real-time PCR方法检测TGFβ-SMAD信号通路基因THBS1、DCN、LTBP1、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、SMAD2、SMAD3、SMAD4基因在梅山、杜洛克S、M1、M2、L卵泡中的表达量变化。结果表明:TGFβ配体1、2、3型及正向调控因子THBS1、LTBP1、负向调控因子DCN、受体TGFβRⅠ、TGFβRⅡ以及受体调控SMAD2、SMAD3和辅SMAD4都在梅山与杜洛克的中等卵泡中存在表达差异,TGFβ1基因、TGFβRⅠ基因在梅山猪各级卵泡中的表达量均极显著高于杜洛克(P0.01)。研究提示,TGFβ-SMAD基因可能参与卵泡发育过程。     

孕酮对小鼠妊娠早期子宫内膜转化生长因子β1Ⅰ型受体表达的影响

采用免疫组织化学SABC法，研究了外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1Ⅰ型受体(TGFβRⅠ)表达的影响。结果显示：(1)孕4d，注射2mg孕酮组，子宫表面上皮、腺上皮及基质中TGFpRI表达增加，与对照组和注射孕酮4mg组差异显著(P＜0．01)。注射孕酮4mg组，表面上皮TGFβRⅠ表达无显著增加；腺上皮细胞TGFβRⅠ表达稍有下降，但与对照组差异不显著；基质细胞TGFβRⅠ表达明显增加，与对照组差异显著(P＜0．01)。(2)孕5d，试验组表面上皮和腺上皮TGFβRⅠ随着孕酮剂量的加大，其表达下降；基质细胞TGFβRⅠ表达则随孕酮剂量的增加而增多，且3组间差异显著(P＜0．01)。(3)孕6d，注射2mg组，表面上皮及基质细胞TGFβRⅠ表达增加，与对照组差异显著(P＜0．01)，而腺上皮TGFβRⅠ表达呈下降趋势。注射4mg组，表面上皮、腺上皮及基质表达变化趋势同孕5d。结论：外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1型受体表达有一定影响，即孕酮可显著提高基质TGFβRⅠ表达，但对腺上皮TGFβRⅠ的表达有下调作用；对表面上皮TGFβRⅠ的表达作用不定，2mg使表面上皮TGFβRⅠ表达增多，4mg使TGFβRⅠ表达降低。     

金堂黑山羊TGFβR1基因克隆及表达分析

为了探讨金堂黑山羊转化生长因子β受体1(transforming growth factorβreceptor 1,TGFβR1)基因的基本特点,克隆了TGFβR1基因,并对其核酸序列及编码蛋白进行分析,同时采用qRT-PCR方法检测TGFβR1基因在金堂黑山羊7种组织/器官中的表达情况。结果表明:克隆获得TGFβR1基因的序列长度为1 715 bp(GenBank登录号为MK397779),其开放阅读框(ORF)长度为1 506 bp,共编码501个氨基酸;在同源性比较中,金堂黑山羊TGFβR1序列与西藏绒山羊的同源性最高,达99.9%;TGFβR1蛋白相对分子质量为55.9 ku,等电点为7.19,预测为亲水性蛋白,其二级结构主要为随机卷曲和α-螺旋,有5个O-糖基化位点、3个N-糖基化位点和50个磷酸化位点。组织表达分析显示TGFβR1基因在脾脏中表达量最高。说明TGFβR1基因可能参与了机体的免疫应答。     

TGFβ信号途径的一般模式及其在几种生物中的作用方式

本文对TGFβ信号通路特点、信号受体、信号传递重要分子等进行了综述。总结了果蝇TGFβ因子Dpp蛋白的信号作用方式及其对果蝇卵壳形成、翅的模式发育、背腹轴形成中的作用。简要介绍了TGFβ信号通路在其他生物中的研究状况。     

家蚕微孢子虫总蛋白两条大分子量主带的LC-MS/MS分析

为了深入认识家蚕微孢子虫高分子量蛋白的主要组成,我们采用LC-MS/MS技术鉴定分析玻璃珠破碎法提取的家蚕微孢子虫总蛋白中85kD以上两条主要蛋白带。我们从H1带(位于150～200kD之间)中成功鉴定出16个蛋白,包括极管蛋白3(PTP3)、极管蛋白2(PTP2)、真核蛋白翻译起始因子(eIF2C2)、延伸因子(EF1-alpha、EF2)、肌动蛋白(actin)等。这暗示两种结构蛋白PTP3与PTP2以及蛋白翻译延伸因子(EF1-alpha、EF2)与肌动蛋白(actin)可能各形成一个复合体。并且用SDS或β-巯基乙醇处理时,这两个复合物是稳定的,表明这些复合物的相互作用力不仅仅是通过二硫键。H2带(85～100kD)鉴定出主要集中在水解酶、蛋白合成与折叠、细胞结构、运动四个方面的20多个的蛋白。从两条蛋白带鉴定出PTP3与PTP2、三磷酸腺苷酶(ATPase)或过渡期内质网三磷酸腺苷酶(ATPase-TER94)、蛋白翻译因子(eIF2C、EF1-alpha、EF2)、HSP70、Actin、M1家族氨肽酶1(M1family aminopeptidase)6类蛋白。基于蛋白分子质量分析,暗示在家蚕微孢子虫中,这6类蛋白都可能是以复合体形式呈现的。研究结果丰富家蚕微孢子虫高分子量蛋白的数据,同时,为研究非二硫键间的蛋白互作提供了有价值的研究线索。     

外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1表达的影响

应用免疫组织化学 SABC法 ,研究了外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜内转化生长因子 β1 (TGFβ1 )表达的影响。结果显示 :试验组皮下注射不同剂量孕酮 (2 mg/只 ,4 mg/只 )后 ,在孕 4 d,上皮内 TGFβ1 阳性着色 ,有的腺导管内具有 TGFβ1 阳性着色 ;且随着孕酮剂量的增大 ,上皮内 TGFβ1 阳性着色由子宫腔面向基面延伸 ,而腺上皮的阳性着色则呈下降趋势 ,基质内 TGFβ1 阳性着色则呈上升趋势。在孕 5 d,上皮内 TGFβ1 阳性着色呈现随孕酮剂量增大而下降的趋势 ,腺上皮和基质的 TGFβ1 动态变化如同孕 4 d。在孕 6 d,上皮、腺上皮及基质 TGFβ1 阳性着色均与孕 5 d的变化趋势相同。由此认为 ,外源性孕酮对小鼠子宫内膜各组织 TGFβ1 蛋白表达有影响。主要表现为 ,外源性孕酮可促进基质中 TGFβ1 的产生 ,对腺上皮 TGFβ1 的表达则具有下调作用     

影响哺乳动物繁殖行为的主要效应基因

在绵羊中发现的影响其生殖行为的几个主要效应基因都是转化生长因子β(transforming growth factor TGFβ)超家族成员:骨形态生成素蛋白15(bone morphogenetic protein 15B MP15),BMP15也称为GDF9b,生长分化因子9     

山羊AMH和AMHR2基因多态性及其与产羔数关联分析

本研究旨在分析抗苗勒氏激素(AMH)和抗苗勒氏激素II型受体(AMHR2)基因单核苷酸多态性(SNPs)与山羊产羔性状的关联性。通过MassARRAY~?SNP分型技术对AMH基因和AMHR2基因SNPs位点进行分型,检测其在云上黑山羊(n=544)、济宁青山羊(n=133)和辽宁绒山羊(n=91)3个群体中的遗传学特征,并将其多态性与产羔性能(产羔数、初生窝重、断奶窝重)进行关联分析。群体遗传学结果表明,AMH基因g.89172108TG和AMHR2基因g.26334739AG在3个群体中为中度多态(0.25PIC0.5);AMHR2基因g.26335365CT在3种山羊中为低度多态(PIC0.25)。卡方检验显示,AMH基因g.89172108TG在济宁青山羊中处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P0.05),在云上黑山羊和辽宁绒山羊中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P0.05);AMHR2基因g.26334739AG在辽宁绒山羊、g.26335365CT在济宁青山羊中处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P0.05),其余位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P0.05)。关联分析结果表明,云上黑山羊中,AMH基因和AMHR2基因候选位点均对产羔数无显著影响,候选位点对初生窝重和断奶窝重均无显著影响。综上所述,AMH基因和AMHR2基因的候选位点不适合作为山羊产羔数选择的潜在分子标记,也不适合窝重选择。     

TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、FSH和TGFβ1对猪颗粒细胞增殖凋亡的影响

为研究TGF-β通路对猪颗粒细胞增殖、凋亡的影响，本研究对TGF-β通路基因进行调控处理，设计并筛选可高效干扰TGFβRⅠ及TGFβRⅡ表达的载体，转染不同干扰载体及添加10 ng/m L TGFβ1和25 ng/m L FSH，采用Westernblot、MTT和流式细胞法检测不同处理对颗粒细胞TGFβ RI和TGFβ RII蛋白表达量和细胞增殖凋亡的影响。结果表明：成功筛选出干扰效率最高的p OSP1-TGFβRⅠ-sh5和p OSP1-TGFβRⅡ-sh3载体，对TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的抑制率分别为78.00%和84.10%；转染后TGFβRⅠ干扰组的TGFβRⅠ蛋白表达量显著低于其阴性对照组；TGFβRⅡ干扰组、TGFβ1组和FSH组的TGFβRⅡ蛋白表达量显著低于其阴性对照组；TGFβ RI干扰组、TGFβ RII干扰组的增殖抑制率极显著高于PLL3.7空载体组，TGFβ 1组细胞增殖抑制率极显著高于空白对照组且FSH组的增殖抑制率显著高于空白对照组；TGFβRⅠ干扰组和TGFβRⅡ干扰组细胞凋亡率极显著高于PLL3.7空载体组；TGFβ1组和FSH组细胞凋亡率极显著高于...     

断奶时间对不同日龄湖羊羔羊瘤胃形态及表皮生长相关基因表达的影响

本试验旨在探讨断奶时间对不同日龄湖羊羔羊瘤胃形态及表皮生长相关基因表达的影响。采用两因子试验设计,设断奶时间和羔羊日龄2个因子。选择初生重[(3.51±0.57)kg]接近的54只湖羊羔羊,28日龄时随机屠宰6只后按照同质性原则将剩余48只湖羊分为28日龄断奶组[(8.21±0.97)kg]和56日龄断奶组[(8.06±0.53)kg],分别在42、56、70和84日龄从2组中各随机挑选6只羔羊进行屠宰。采集瘤胃腹囊组织样品测定瘤胃乳头长度、宽度和肌层厚度,提取瘤胃组织总RNA测定表皮生长相关基因表达量。结果表明:28日龄断奶组羔羊瘤胃乳头长度和宽度显著高于56日龄断奶组羔羊(P0.05),瘤胃肌层厚度显著低于56日龄断奶组羔羊(P0.05)。断奶时间和羔羊日龄之间的交互作用对瘤胃乳头长度和肌层厚度有显著影响(P0.05)。28日龄断奶组羔羊瘤胃上皮胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)3、IGFBP5和IG FBP6表达量显著高于56日龄断奶组(P0.05)。羔羊瘤胃乳头长度与转化生长因子β(TGFβ)1和IGFBP6表达量呈显著负相关(r=-0.318,P=0.001;r=-0.520,P0.001);瘤胃乳头宽度与TGFβ1表达量呈显著负相关(r=-0.275,P=0.004),与IGFBP3和IGFBP5表达量呈显著正相关(r=0.344,P0.001;r=0.256,P=0.001)。综上所述,28日龄断奶促进湖羊羔羊瘤胃乳头发育和瘤胃表皮生长相关基因表达,可能参与羔羊瘤胃早期发育的调控。     

血浆抗苗勒氏管激素水平预测荷斯坦牛胚胎生产能力的研究初报

为了验证抗苗勒氏管激素（AMH）作为标记物预测荷斯坦牛胚胎的生产能力,为选择供体牛进行胚胎生产提供一种简便有效的方法。本研究测定了10头供体牛在促性腺激素注射前后血浆中AMH浓度,结果表明促性腺激素处理前后AMH浓度无明显差异（P〉0.05）。试验还测定分析了30头供体牛血浆中AMH浓度与胚胎生产数量之间的关系,结果表明,AMH水平与卵巢的储备功能及卵巢反应性有关,与获得的胚胎数量呈显著正相关（r=0.60,P〈0.01,n=30）,可以作为一种预测荷斯坦牛超数排卵后胚胎生产能力的标记物。     

Smad介导TGF—β信号转导

Smad是介导TGF—β信号转导的核心信号蛋白。文章综述了Srnad家族成员co-Smad，anti-Smad和R-Smad的结构与功能，简要介绍了果蝇与人类中Smad信号蛋白的信号转导过程。讨论了Smad信号蛋白在TGF—β信号转导中的决定性作用，对家蚕中Bmsmad进行了预测。     

抗缪勒氏管激素对蛋鸡繁殖性能的影响

研究旨在阐明抗缪勒氏管激素(Anti-Müllerian hormone,AMH)在蛋鸡生殖系统中调节卵泡发育和卵泡选择的作用。将40只蛋鸡(29周龄)随机分为4组,2个试验组每天分别注射150 ng和300 ng AMH,注射等体积无菌注射用水组(CON~+),不进行处理组(CON~-)。连续处理25 d,每天记录产蛋情况。试验鸡于第26天时处死,取组织标本进行组织学观察。结果显示,注射AMH后蛋鸡的产蛋量和产蛋序列分别表现出下降和推迟的趋势,但影响均不显著;此外,注射AMH可显著降低F1卵泡的颗粒细胞层厚度。体外注射不同浓度的AMH会对蛋鸡的卵巢卵泡发育产生不同的影响。     

2004年《上海畜牧兽医通讯》总目次

第一期·综　述·猪伪狂犬病病毒检测方法研究进展牛春玲等 (2 )…………猪细小病毒VP2基因及其编码蛋白研究进展金喜新等 (5 )猪传染性胃肠炎病毒实验室诊断研究进展王宪文等 (6 )…微卫星DNA在猪育种中的应用符亚原等 (8)………………微量元素锌在肠道中的吸收柴映青等 (11)…………………脂肪酸合成酶基因的研究进展孟冬梅等 (12 )………………抗苗勒氏管激素 (AMH)对卵巢功能的调节…陈秀萍等 (15 )乳腺生物反应器表达载体和转基因方法的研究概况刘振江等 (16 )……………………………………………·试验观察·上海地区犬狂犬病病毒…