17α-甲基睾酮对日本沼虾生精细胞体外生长分化的影响

取发育早期日本沼虾(Macrobrachium,nipponense)的精巢,剪碎,分散成细胞悬液,用离体细胞培养法进行体外培养,培养基中不含17α-甲基睾酮(17α-MT)的为对照组,设定3种不同质量浓度水平组,分别为300 ng/mL、1 500 ng/mL和3 000 ng/mL,测定生精细胞的体外存活率并观察生精细胞体外培养的生长行为和分化情况.结果表明,3种浓度梯度下生精细胞的存活率没有显著差异,17α-MT的质量浓度为1 500 ng/mL组分化为精子细胞四分体的数量和长出棘突的精细胞数量均比对照组和其他实验组多,差异极显著(P<0.01).初步确定生精细胞体外培养过程中添加不同质量浓度的17α-MT不影响细胞的存活率,但影响生精细胞的体外分化,17α-MT的适宜质量浓度为1 500ng/mL.     

细胞凋亡的分子机理及其检测方法研究进展

细胞凋亡（apoptosis）是细胞接受某种信号或受到某些因素刺激后一种主动的、由一些凋亡相关基因相互作用的细胞消亡过程。凋亡的发生具有积极的生物学意义，是维持机体内环境稳定所必需。细胞凋亡与有丝分裂相互协调，共同控制胚胎发育、器官的发育与退化以及免疫、造血等生理过程。     

不育剂膦氧氮丙啶对雄性红耳龟生殖功能的影响

给160只健康成年雄性红耳龟分别腹腔注射0.1、3g/L和10g/L的膦氧氮丙啶染毒15d,每隔2d注射1次,每次注射2mL,对照组注射等剂量0.65%生理盐水,于第16d和第30d取样检测血清、睾丸中性激素及相关蛋白含量,恢复期(第30d和137d)显微观察了睾丸的组织结构。试验结果表明,高质量浓度膦氧氮丙啶组红耳龟死亡;低、中质量浓度组血清及睾丸性激素含量与对照组无显著差异(P0.05),表明膦氧氮丙啶对丘脑—垂体—性腺轴没有干扰作用。在试验第30d,中质量浓度组睾丸及血清抑制素B含量显著低于对照组,支持细胞受损;恢复期,处理组睾丸有不同程度损伤,低质量浓度组红耳龟睾丸微中毒,生精细胞间隙增大,中质量浓度组生精细胞破坏、溶解,没有再生现象,表现不可逆伤害。膦氧氮丙啶主要通过损伤红耳龟睾丸各级生精细胞和支持细胞,破坏睾丸生精环境,导致雄性不育。     

细胞凋亡的分子机理及其检测方法研究进展

细胞凋亡(apoptosis)是细胞接受某种信号或受到某些因素刺激后一种主动的、由一些凋亡相关基因相互作用的细胞消亡过程.凋亡的发生具有积极的生物学意义,是维持机体内环境稳定所必需.细胞凋亡与有丝分裂相互协调,共同控制胚胎发育、器官的发育与退化以及免疫、造血等生理过程.     

獭兔睾丸组织形态观察

獭兔是一种典型的经济动物,它既是毛皮动物又可食用,普遍应用于人类生产生活。目前已有研究报道了多种哺乳动物生精周期研究,但很少有关于獭兔的报道。本实验对2只完全性成熟的健康獭兔进行睾丸结构,生精周期相对频率,支持细胞效率研究。獭兔睾丸经石蜡包埋,HE染色以便进行组织形态学观察。不同的生殖细胞组合分析显示30%的曲精小管显示两个或两个以上的生精上皮周期阶段。獭兔生精周期阶段频率(%)分别为:阶段1:(15.5±2);阶段2:(14.0±1);阶段3:(11.5±1);阶段4:(8.5±1);阶段5:(10.5±1);阶段6:(18.5±2);阶段7:(13.0±1);阶段8:(8.5±1)。支持细胞效率(圆形精子:支持细胞=7:1)。本研究结果表明獭兔的生精效率较其他哺乳动物高。     

喹乙醇诱导鲤肝细胞凋亡的研究

细胞凋亡(apoptosis)是受基因控制的细胞自主的有序死亡。凋亡细胞的形态特征主要表现为细胞核的染色质浓缩,边移,聚集在核膜下,进而核发生裂解,核碎片与细胞碎片有单层膜包裹形成凋亡小体(apoptosisbody)[1]。目前已发现某些物理因素(辐射、高温等)、细胞因子、病毒感染和     

硒影响公鸡睾丸组织发育的形态学研究

150只海兰白公鸡雏分为5组,分别饲喂不同硒含量的日粮,Ⅰ～Ⅴ组日粮硒含量为lmg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg,在21周龄屠宰,观察睾丸组织结构。结果表明,I组发育最好,生精上皮细胞层数多、管壁厚,管径大,精子簇密集;Ⅱ组到V组随硒浓度的增加中毒症状明显,生精细胞散乱,生精上皮脱落,曲细精管溶解。实验结果表明,公鸡日粮中含硒量以不超过lmg/kg为宜。     

温度和白消安对星点东方鲀成鱼生殖细胞枯竭的影响

为了解高温和白消安注射对星点东方鲀(Takifugu niphobles)成鱼生殖细胞发生的影响,设置32℃高温组、32℃高温-白消安组和空白对照组,比较3组的生长、存活率以及生殖细胞凋亡情况。结果显示,高温-白消安组的体重、肥满度显著低于其他组(P0.05),而全长与其他各组差异不显著(P0.05),各组的存活率均在90.9%以上。高温-白消安组对生殖细胞的凋亡作用比高温组更加明显,卵巢基本看不到正常的生殖细胞,且有大量的吞噬作用造成的黄褐色沉积,生殖细胞凋亡造成的空白面积比例要显著地高于高温组(P0.05);精巢中生殖细胞凋亡的精小囊占总的精小囊的比例高达100.0%±0.0%,也显著高于高温组空泡精小囊占总的精小囊的比例(P0.05)。得出结论:高温-白消安组较高温组更易诱导星点东方鲀内源生殖细胞凋亡,从而可制备出生殖细胞移植的适宜受体。     

芦丁对吉富罗非鱼幼鱼组织切片及细胞凋亡的影响

在快速生长期日粮中添加较高浓度芦丁(0、0.1和0.3 g/kg),通过免疫、生殖器官组织切片和Tunel细胞凋亡分析,探究芦丁作为饲料免疫增强剂对吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼组织切片及细胞凋亡的影响。结果表明低浓度芦丁会使肠道血小板增多,杯状细胞不规则;肝脏kupffer细胞少;并会造成肠道和肝脏细胞凋亡阳性率增高。高浓度芦丁组肝、脾脏出现细胞凋亡和含铁血黄素沉着;且造成肝脏和脾脏细胞凋亡阳性率增高;脾脏黑色素巨噬细胞中心少。此外,高浓度芦丁会对精巢、卵巢的发育起到抑制作用。芦丁作为水产行业免疫增强剂需慎用。     

三倍体雌性虹鳟卵巢发育的类雄性化趋势

以4～35月龄三倍体雌性虹鳟(Oncorhynchus mykiss)为实验材料,以同源二倍体为对照,采用组织学和放射免疫方法,从性腺发育和生殖激素变化2个方面对其类雄性化现象进行了研究,并分析了类雄性化的原因.结果表明,三倍体虹鳟的卵原细胞可正常发育至卵黄发育前期卵母细胞(8月龄左右),此后卵母细胞败育,基质细胞包围卵原细胞形成卵原细胞簇,17月龄后卵巢中卵原细胞簇减少,出现与雄性精小囊结构相似的类生精细胞囊结构;26～35月龄类生精细胞囊逐渐成为性腺的主要成分,在类生精细胞囊内出现大量坏死的细胞;13月龄后三倍体雌性虹鳟血清中GtH-Ⅰ、GtH-Ⅱ、17β-E2含量显著低于同期二倍体虹鳟,睾酮(T)在21月龄后持续上升,并显著高于同期二倍体(P＜0.05).17月龄后三倍体雌性虹鳟卵巢发育呈现类雄性化趋势,但不能完成精子发生全部过程.由于性腺中生殖细胞与体细胞之间正常的相互作用缺失,合成类固醇的滤泡细胞发育分化受阻,T芳化为17β-E2途径中断,导致血液中T浓度升高,进而使性原细胞的分化受到了诱导,因而卵巢发育呈现类雄性化趋势.     

黄芪多糖和当归多糖对维氏气单胞菌诱导鲫细胞凋亡的影响

为研究黄芪多糖(APS)和当归多糖(ASP)对维氏气单胞菌诱导鲫细胞凋亡的影响,实验设阴性对照组、阳性对照组,黄芪多糖组和当归多糖组,通过对鲫用维氏气单胞菌攻毒处理,用流式细胞仪测定血细胞的凋亡比例和细胞周期变化,并用荧光显微镜和透射电镜观察凋亡细胞的形态。结果显示,维氏气单胞菌攻毒后阳性对照组鲫血细胞的细胞凋亡率均极显著高于多糖组和阴性对照组;多糖组能显著降低鲫的细胞凋亡率且黄芪多糖组效果更显著;攻毒后鲫肝细胞和肾脏淋巴细胞出现染色质凝集、细胞核固缩边集和细胞空泡化及凋亡小体;同阴性对照组相比;维氏气单胞菌攻毒可以引起鲫血细胞周期中S/G2+M期细胞比例极显著下降,sub-G1极显著升高,抑制细胞分裂诱发凋亡;多糖组则G0/G1期细胞极显著降低,S/G2+M期细胞极显著升高,sub-G1极显著降低,促进细胞分裂抑制凋亡。黄芪多糖和当归多糖添加量在1%时能抑制维氏气单胞菌攻毒引起的细胞凋亡。     

早熟和正常中华绒螯蟹精子形态、顶体酶活力和抗氧化能力的比较研究

Eriocheir sinensis）进行了比较，结果表明，早熟雄性蟹生精小管的细胞构成明显不同。早熟雄性蟹精巢生精小管主要管型为精母细胞型，而正常雄蟹管型以精原细胞加精母细胞型为主；早熟雄蟹性腺发育速度明显快于正常雄蟹；正常雄蟹的生精小管和精荚横截面积分别为（0     

铜鱼精子发生中的超微结构研究

用透射电镜观察了铜鱼精子发生过程中细胞形态结构变化和核形演变规律以及拟染色质体的超微结构特点。生精细胞发育中，核形由不规则变为椭圆形，核内染色质电子密度逐渐增大，减数分裂形成精细胞后，核内染色质先呈不规则条状，浓缩后成宽带状位于核膜内缘四周，最后形成致密的核（位于精子头部）。精子头部无顶体。精原细胞含有大量拟染色质体。其上常聚集一群线粒体，形成“线粒体区”。随着细胞分化，拟染色质体逐渐减少直至消失。     

黄芪多糖和当归多糖对维氏气单胞菌诱导鲫细胞凋亡的影响

为研究黄芪多糖(astragalus polysacharin,APS)和当归多糖(angelica sinensis polysaccharide,ASP)对维氏气单胞菌诱导的鲫细胞凋亡的影响,实验设阴性对照组、阳性对照组,黄芪多糖组和当归多糖组四个处理组,通过对鲫用维氏气单胞菌攻毒处理,用流式细胞仪测定血细胞的凋亡比例和细胞周期变化,并用荧光显微镜和透射电镜观察凋亡细胞的形态。结果显示,维氏气单胞菌攻毒后阳性对照组鲫血细胞的细胞凋亡率均极显著高于多糖组和阴性对照组(P0.01);多糖组能显著降低鲫的细胞凋亡率且黄芪多糖组效果更显著;攻毒后鲫肝细胞和肾脏淋巴细胞出现染色质凝集,细胞核固缩边集和细胞空泡化及凋亡小体;同阴性对照组相比维氏气单胞菌攻毒可以引起鲫血细胞周期中S/G2+M期细胞比例极显著下降,sub-G1极显著升高,抑制细胞分裂诱发凋亡;多糖组则G0/G1期细胞极显著降低,S/G2+M期细胞极显著升高,sub-G1极显著降低,促进细胞分裂抑制凋亡。黄芪多糖和当归多糖添加量在1%时能抑制维氏气单胞菌攻毒引起的细胞凋亡。     

龙须菜多糖对肺癌细胞增殖能力及形态的影响

为了探讨龙须菜多糖（PGL）对肺癌细胞增殖活力的抑制作用及其形态学的影响,将不同浓度的PGL分别作用24、48、72h于肺癌A549细胞,采用CCK-8和台盼兰拒染法检测PGL对细胞增殖活力及生长的抑制作用,计算死亡细胞数及细胞存活率;相差显微镜和DAPI染色观察PGL对肺癌细胞的形态学影响;AnnexinV-FITC/PI双染法和流式细胞术检测PGL对细胞凋亡的作用。结果显示,随PGL作用浓度及时间的增加,细胞增殖能力及存活率逐渐降低,抑制率逐渐增加,以50 g/mL 作用72 h 最为显著（P<0.01）。细胞形态发生不规则改变,接触生长状态减少,数量减少,细胞核受到损伤,细胞发生凋亡,72h后上述改变更为明显。研究表明,PGL能够抑制肺癌细胞增殖能力、降低细胞活力、改变细胞形态、诱导细胞凋亡,且具有时间—浓度的依赖性;龙须菜的抗肿瘤活性是多种机制共同作用的结果。     

扇贝多肽对氧化所致胸腺细胞凋亡的影响

观察扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys ferreri)(PCF)对实验性氧化所致小鼠胸腺细胞凋亡的影响。采用台盼蓝(Trypan Blue)活细胞拒染法在普通光学显微镜下观察细胞的存活率；以四甲基氮唑盐(MTT)法测定细胞的增殖活性；以生化检测(DNA ladder)法观察PCF对细胞DNA片断化的影响；用透射电镜观察细胞的超微形态结构变化。台盼蓝染色法证实PCF能增强细胞的活性并与PCF浓度成正比；MTT法表明PCF不仅能保护细胞免受损伤，而且还能促进细胞的增殖，并有PCF依赖性；生化检测显示PCF能减少细胞凋亡的DNA片断化数目；细胞的超微结构还表明PCF能维持细胞结构的完整性。PCF可明显抑制实验性氧化损伤小鼠胸腺细胞的凋亡并有药物依赖性，而且明显优于维生素C。     

镉胁迫诱导胭脂鱼血细胞凋亡的研究

以胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)离体血细胞为实验材料,用不同浓度的氯化镉溶液处理.通过瑞士姬姆萨和AO/EB荧光染色,在光学和荧光显微镜下观察了血细胞的形态变化,并统计了细胞的凋亡率.结果显示,在氯化镉的胁迫作用下,胭脂鱼血细胞呈现细胞变圆、核变圆、核边缘化、形成凋亡小体等细胞凋亡的形态特征.较低Cd2+浓度(0.01 mmoL/L)胁迫,1 h即可产生明显的细胞凋亡诱导效应,并且细胞凋亡率随着Cd2+浓度的增加和作用时间的延长而升高.表明Cd2+能诱导胭脂鱼血细胞发生典型的凋亡,而且细胞凋亡率与Cd2+浓度和处理时间成明显的剂量-效应关系.     

扇贝多肽的作用及其机制

综述扇贝多肽(PCF)在抑制紫外线诱导的细胞凋亡、增强机体免疫功能以及作为抗氧化剂保护细胞等方面的作用,简述其对细胞增殖周期的影响,并探讨PCF发挥这些作用的生物学机制。     

克氏原螯虾雄性生殖系统的超微结构

采用透射电镜研究了克氏原螯虾输精管的超微结构,采用石蜡切片法研究了克氏原螯虾的精巢、输精管和精荚的显微结构,并对精巢做了周年变化研究。结果表明,精巢由许多生精小囊和收集管组成,其结构呈葡萄串状,生殖细胞在生精小囊内发育成熟后由收集管输送到输精管;输精管有左右两条,相对于左侧输精管,右侧输精管比其约长一半,直径更大,卷曲程度更高,内容物含量更多,分泌细胞内的内质网含量更丰富;输精管根据形态不同分为前、中、后、生殖突4段,前中段具有分泌精荚壁物质的功能,后段具有储存、射出精荚的功能,末端生殖突为输精管出口;精荚呈长囊形或椭球形,由精子团、精荚基质和两层精荚壁组成,精子团偏向精荚一侧分布;克氏原螯虾雄虾精巢在一周年中的5—8月和10月处于精子细胞期的生精小囊比例很高,具有两个成熟时期。     

鸡干扰素生产条件的比较研究〈一〉

本试验用鸡白细胞。鸡脾细胞、鸡胚成纤维细胞以Ge－132、NDV－F、PHA、PolyI:C为诱生剂，诱生外源性IFN，将鸡胚成纤维细胞—水泡性口炎病毒作鸡IFN的检测系统，对不同种细胞、不同的细胞浓度、不同的IFN诱生剂及培养方法等诸因素对IFN产生的影响进行了比较：研究了Ge-1322、NDV－F、PHA、PolyI：C在鸡胚成纤维细胞上的最佳诱生剂量；同时也进行了不同诱生剂在不同细胞上产生的IFN的理化性状研究，结果表明：（1）在Ge－132、NDV－F、PHA、PolyI：C四种诱生剂中，诱生能力差异极显著（P＜0.01），且以Ge－132诱生IFN的能力为最强，其他依次为NDV－F、PolyI：CPHA（2）鸡脾细胞和鸡白细胞产生的IFN效价高于鸡胚成纤维细胞；（3）鸡脾细胞和鸡白细胞悬浮培养比静置培养产生的IFN效价高近1倍；（4）雏鸡脾细胞比成鸡脾细胞产生的IFN效价高；（5）未免疫鸡鸡胚成纤维细胞比免疫鸡鸡胚成纤维细胞产生IFN效价高；（6）鸡胚成纤维细胞在IFN诱生剂的作用下，4h即可产生IFN，20－24H达到最高产量；（7）IFN诱生剂最佳诱生剂量；鸡NDV－F为128HAU／ml;Ge－132为70ug／mlPolyI：C为50ug／ml;PHA为40ug／ml