中华绒螯蟹卵黄发生期卵母细胞和卵泡细胞超微结构观察

通过透射电镜技术观察了中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中卵巢的超微结构变化.结果表明:(1)中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中卵黄发生期可分为初期和后期;(2)卵黄发生初期(雌蟹第一次排卵后的16 d内),卵黄生成以卵母细胞内源性合成为主,此时卵母细胞胞质中存在大量内质网囊泡、高尔基体和线粒体,这些细胞器参与胞内卵黄物质的合成.内源性合成后期,卵母细胞膜形态多样,呈现触手状、波浪状和断裂状,为外源合成期做准备.此期卵泡细胞还未向卵母细胞靠近,两类细胞间存在着由淋巴细胞吐出的絮状物;(3)卵黄发生后期,首先为卵泡细胞与卵母细胞的结合阶段(排卵后16～21 d),此后,卵泡细胞胞质中含有大量内质网囊泡、卵黄颗粒和脂滴,卵母细胞与卵泡细胞膜变为链珠状便于物质交换,卵母细胞的卵黄合成能力减少,转由卵泡细胞进行外源性物质吸收和卵黄物质合成(21～36 d);(4)卵黄发生结束后,双层卵膜形成,卵黄体和脂肪滴均匀分布在卵母细胞胞质中.     

文蛤卵母细胞卵黄发生的超微结构

取不同发育阶段文蛤 (MeretrixmeretrixLinnaeus)活体解剖取出生殖腺 ,常规方法制成切片 ,以透射电镜(TEM )观察其卵母细胞的卵黄发生过程。结果表明 ,文蛤的卵母细胞卵黄发生期间 ,线粒体、内质网、高尔基复合体、溶酶体、微吞饮泡等细胞器均参与了卵黄粒的形成。卵黄合成早期的卵母细胞质膜伸出大量的微绒毛 ,并出现卵黄膜 ,胞质中有大量膜性小泡 ,溶酶体、线粒体、高尔基复合体和粗面内质网发达 ,卵黄前体物质逐渐增多。在卵黄合成中期 ,胞质内线粒体和内质网活动活跃 ,卵母细胞大量合成和积累卵黄物质 ,细胞质膜外凸 ,与外界进行物质交换。卵黄合成后期 ,卵质内贮存了大量的卵黄粒 ,细胞器不发达。此外 ,还对卵母细胞发育过程卵黄颗粒的细胞内、外原料来源进行了讨论     

中华绒螯蟹离体卵巢发育的调控作用

通过卵巢离体实验研究性激素、大豆黄酮、生物胺及神经组织对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)卵巢发育的影响。结果表明，雌二醇可显著地增大卵黄发生前期、初级卵黄发生期和次级卵黄发生期卵巢卵母细胞的直径，黄体酮可显著增大卵黄发生前期卵巢卵母细胞直径，对初级卵黄发生期和次级卵黄发生期的卵母细胞直径有极显著地促进作用；大豆黄酮具有增大卵母细胞直径的作用，但作用不显著；脑和胸神经团对卵黄发生前期、初级卵黄发生期的卵母细胞直径有显著增大作用，对于次级卵黄发生期卵母细胞直径有极显著增大作用；视神经节作用不明显；5-羟色胺通过脑可显著促进卵黄发生前期、初级卵黄发生期卵巢卵母细胞直径的增大，极显著促进次级卵黄发生期卵巢卵母细胞直径的增大，还通过胸神经节极显著增大各期卵巢的卵母细胞直径；多巴胺作用不明显。     

池养鲻的卵巢发育和卵子发生过程

通过卵巢切片的组织学分析揭示，幼鲻在土池养殖3个月后可见线状卵巢，大约5个月后卵原细胞进入第一次成熟分裂前期的双线期转变为早期初级卵母细胞。接着卵母细胞生发泡(核)和胞质体积增加，核质比从3．5：1减少至2：1。此后卵巢中卵母细胞停滞发育持续至养殖的第3年。在第3年卵巢切片看出卵母细胞进入脂肪泡时相，在第3年秋季进入卵黄发生时相。但在人工养殖条件下卵母细胞仅能发育到卵黄发生后期，即卵母细胞胞质充满卵黄颗粒，生发泡居中而不移位。这些结果对于用人工养殖鲻为亲鱼开展人工繁殖提供重要的科学依据。并讨论了卵子发生6个时相的生物学特点及其重要的细胞器在卵黄发生中可能的生理作用。     

细鳞鱼卵巢滤泡细胞的发育及功能

通过光镜和透射电镜对细鳞鱼（Brachymystax lenok）的卵巢滤泡细胞进行了研究。结果表明，滤泡细胞起源于非生殖细胞，并且其整个发育过程可分为4个时期：零散细胞期、单层扁平细胞期、多层扁平细胞期和颗粒细胞分泌期。滤泡细胞在初级卵母细胞早期并不具备任何功能，到卵母细胞卵黄积累初期，滤泡细胞上皮协同其合成部分卵膜；卵黄积累旺盛时期，滤泡细胞在此过程中起到信号介导、物质转运和储存的作用；在卵巢退化阶段，滤泡细胞与未发育的卵母细胞形成闭锁卵泡，对卵细胞残体和碎片还具有吞噬、消化等作用。     

四指马鲅卵巢发育和卵子发生的组织学观察

为了解四指马鲅（Eleutheronema tetradactylum）的卵巢发育和卵子发生过程，本研究运用组织切片HE染色方法对其卵巢发育的组织结构变化和卵子发生过程中各时相卵母细胞的结构进行观察。结果显示，四指马鲅卵巢为被膜型卵巢，紧贴中肾腹面，两支卵巢前端分离于后端融合，呈"Y"字形。卵子发生过程分可分为5个时相，在II时相中期卵母细胞周围开始出现滤泡细胞，II时相晚期形成单层滤泡细胞，直至III时相中期滤泡细胞层外形成鞘膜细胞层；卵黄核在II时相中期开始出现至III时相早期消失；卵黄泡在III时相早期的细胞核附近及胞质边缘出现；卵黄颗粒在III时相晚期开始出现于卵黄泡之间，并在IV时相早期填充卵黄泡，至IV时相晚期形成卵黄小板。卵巢发育过程分为6个时期，每个时期都存在不同时相的卵母细胞；V期卵巢的卵径呈双峰分布，分别在50.00~100.00 μm和300.00~350.00 μm区间出现峰值。四指马鲅卵巢发育模式为非同步发育-分批产卵类型。     

克氏原螯虾不同发育时期5-HT与DA在卵巢和肝胰腺中的分布

为了研究5-HT与DA阳性物质在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)不同发育时期的卵巢细胞和肝胰腺细胞中的分布特征,运用免疫组化法对卵巢发育4个不同时期的卵巢与肝胰腺进行观察。结果表明,各期卵巢卵细胞和肝胰腺细胞中均存在5-HT与DA阳性物质。Ⅰ期卵巢5-HT阳性物质分布于卵母细胞胞核,胞质未出现阳性;Ⅱ期～Ⅳ期5-HT阳性物质主要集中在卵母细胞胞质以及胞核。在发育各期的肝胰腺中5-HT的免疫物质均呈阳性。Ⅰ～Ⅳ期卵巢中,DA阳性物质主要分布于卵母细胞的胞核以及肝胰腺细胞,其强度呈递减趋势。结果提示5-HT具有促进卵巢发育作用,而DA则抑制卵巢发育。     

孔雀鱼雌性生殖器官组织结构及卵子发生的研究

应用光镜技术研究了孔雀鱼（Poecilia reticulata）雌性生殖器官组织结构和卵子发生的特点,以期为孔雀鱼的良种繁育工作提供基础资料。结果表明,孔雀鱼雌性生殖器官由卵巢、卵子输送管和泄殖孔构成。卵子发生过程经历了6个时相：第Ⅰ时相主要为卵原细胞;第Ⅱ时相是处于小生长期的初级卵母细胞,形成生长环、卵黄核和单层扁平滤泡细胞膜;第Ⅲ时相是进入大生长期的初级卵母细胞,卵黄开始积累,形成2层滤泡细胞膜和2层卵包膜;第Ⅳ时相为发育晚期的初级卵母细胞,细胞发生了极化,卵包膜发育完善;第Ⅴ时相发育成熟,卵黄颗粒凝结呈块状,卵黄泡主要分布于细胞膜内缘,滤泡细胞膜萎缩;第Ⅵ时相是闭锁卵泡,被滤泡细胞消化和吸收转变为卵巢内结缔组织。     

多刺裸腹溞孤雌溞的卵子发生

采用光镜和透射电镜技术观察多刺裸腹溞（Moina macrocopa）孤雌溞卵子的发生过程。根据卵母细胞细胞核的形态、卵黄的合成、积累情况及核物质的形态变化等观察结果,将卵子发生分为3个时期：卵原细胞期、卵母细胞期和成熟卵母细胞期。卵原细胞核大,胞质层薄,有少量线粒体分布,核物质浓缩为一团;卵母细胞发育的早期和中期细胞体积增大,细胞质层增厚,线粒体迅速增多,细胞核变圆,核物质分散成多块;后期卵母细胞胞质中开始出现大量卵黄颗粒和少量脂滴,细胞核边缘波浪化,线粒体空泡化,其中卵黄合成初期,核物质重新聚集在细胞核中央,在卵黄合成中期又分散开来;成熟卵母细胞质中充满卵黄颗粒,呈强嗜酸性,细胞核的形态呈不规则状,核物质分散。多刺裸腹溞生殖腺的外部形态随着生殖周期的变化而不同。在孤雌溞的整个生活史中生殖腺内卵子的发育经历了“同步一不同步一局部同步”的发育模式。发现1龄幼溞生殖腺中不存在卵原细胞,成龄溞的生殖腺有多个发育时期的生殖细胞并存。同时在亚显微水平上发现卵黄主要由线粒体演变而来,也通过吞饮作用吸收成熟的卵黄颗粒,内源与外源性共同作用形成卵黄。[中国水产科学,2006,13（4）：547—554]     

太平洋牡蛎卵母细胞发育及卵黄发生的超微结构

利用透射电镜观察了太平洋牡蛎（ Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａ ｇｉｇａｓ） 卵母细胞的发育及卵黄发生。卵母细胞的发育可分为卵黄合成前卵母细胞与卵黄合成期卵母细胞２ 个阶段。卵黄颗粒来源于线粒体、内质网、高尔基体、吞饮小泡等多种细胞器。     

凡纳滨对虾卵子发生的超微结构

利用透射电镜研究凡纳滨对虾卵子发生过程中细胞内部结构的变化。结果显示，卵原细胞结构简单，代谢水平低，核孔稀少，通过核周池来完成核、质之间的物质交换。卵黄发生前晚期和卵黄发生初期的卵母细胞变化显著：核膜凹凸不平，核仁数量多，核孔密集，大量核仁外排物经核孔输送到卵质中；卵质中胞器极为丰富和发达，代谢活性极强。卵黄发生旺盛期是卵黄大量形成的阶段，卵质边缘还呈辐射状排列了一圈椭圆形皮质棒，细胞出现微吞饮活动并形成卵黄膜。卵黄发生晚期卵质中充满了粗大的卵黄粒和脂滴，胞器锐减。另外，探讨了卵细胞内部结构的变化和卯黄形成的关系以及皮质棒的来源与功能。     

葛氏鲈塘艚卵子发生的组织学观察

采用组织切片技术系统观察和描述了葛氏鲈塘鱧（Perccottus glenii Dybowski）卵巢各时相卵母细胞的形态结构、特征及变化。卵巢切面显示：卵母细胞发育分为6个时相：第Ⅰ时相卵母细胞由处于原始分化阶段的卵原细胞构成;第Ⅱ时相卵母细胞进入滤泡细胞期,胞外形成滤泡细胞膜：第Ⅲ时相卵母细胞由质膜向核膜逐渐积累皮质液泡：第Ⅳ时相卵母细胞主要形成卵黄颗粒：第Ⅴ时相卵母细胞为成熟的卵子,胞内含有丰富的卵黄;第Ⅵ时相卵母细胞是未排出的处于退化吸收阶段的卵细胞,卵膜破裂,卵黄被吸收。根据卵巢切片及性腺系数变化推测葛氏鲈塘鱧属于一次产卵类型。     

东海鳓卵巢发育的组织学观察

于光镜于对东海鳓卵巢切片作了组织学观察，结果表明，5月－7月为东海鳓的繁殖期，其卵巢在Ⅳ期、Ⅴ期、Ⅵ－Ⅳ‘期和Ⅴ‘期，8月－9月鳓卵巢处在产后休整阶段；10月－翌年2月为越冬Ⅱ期卵巢；3月－4月卵巢处在产前发育阶段，在小生长期，卵核的体积较核质的体积增大快，核质比大，大小长期，随着卵黄物质的积累，卵母细胞体积快速增加, 比下降。在鳓卵母细胞发育中，曾见有两层卵膜结构，但接近成熟的卵母仅有一层卵膜。东海鳓的产卵方式为短期分批产卵类型。在一个生殖周期内，一般产卵2次。     

养殖金乌贼卵子发生和卵巢发育的组织学观察

为了深入了解金乌贼(Sepia esculenta Hoyle)的生殖生理特性,本研究采用解剖学方法及组织切片技术,观察和描述了金乌贼卵巢形态和卵子各个时相结构特征及其变化规律。研究结果表明,金乌贼卵子发生过程的主要特征表现为,卵子成熟之前滤泡细胞一直存在且伴随着其结构变化,滤泡细胞解体与卵黄物质出现同步发生,卵黄物质从无到有再到大量积累直至充满整个卵母细胞,细胞核则随着滤泡细胞内折逐渐发生偏移直至最后消失。研究还发现金乌贼卵巢内卵子发生不同步且形态差异显著,未成熟的卵子粘连在卵巢基质上,依次环布于卵巢基质周围,越靠近中心,卵母细胞发育程度越低;成熟后的卵子游离在卵巢腔中,经过输卵管排出体外。根据卵巢内卵子的大小和形态、滤泡细胞形态及卵黄形成情况,将金乌贼卵子发生分为增殖期(卵原细胞期)、小生长期(无滤泡期,单层滤泡期,双层滤泡期)、大生长期(滤泡内折期,卵黄形成早期,卵黄形成晚期)、成熟期、退化吸收期共5个时期9个时相。卵巢发育分期则是以卵子时相为基础,根据卵巢的外观形态、性腺系数以及切面上优势卵子的时相,把卵巢分为Ⅰ~Ⅵ共6个时期。金乌贼卵巢发育和卵子发生的动态观察与描述,对丰富头足类繁殖生物学理论及提升人工繁殖技术都具有重要意义。     

Classification of differentiating oocytes during ovarian cycle in the giant freshwater prawn, Macrobrachium rosenbergii de man

Based on the light microscopic observations of cells' sizes, chromatin patterns, amount of lipid droplets and yolk granules, the female germ cells could be classified into four different phases, which include 1) oogonia (Oog), 2) primary oocytes (pOc), 3) secondary oocytes (sOc), and 4) mature oocyte (mOc). Oog are small oval-shaped cells with irregular-shaped nuclei sizing 4–6 μm in diameter. They rest on the connective tissue germinal cord at the tip of each ovarian pouch (lobule). Oogonia increase their number through mitotic division, and the daughter cells move into ovarian pouch where they undergo first meiotic division to become primary oocytes, which have various steps of 1st meiotic prophase accumulating at the innermost zone of the ovarian pouch. The primary oocytes are small oval-shaped cells (8.5–10 μm in diameter) with large nuclei containing chromatin in various states of condensation that finally transform into chromatids. Their nuclei are surrounded by thin rim of faint blue-stained cytoplasm. The secondary oocytes derived from 2nd meiosis and comprise five steps: Oc1 and Oc2, classified as previtellogenic oocytes, Oc3 and Oc4, classified as vitellogenic oocytes, and mature oocyte (mOc) The zones of ovarian pouch are defined based on the accumulation of various steps of developing oocytes, namely, oogenic, previtellogenic, vitellogenic and mature zones, respectively. The ovarian cycle is divided into five stages based on the number and types of oocytes present in each stage. Stage 0 and I are spawn and spent stages. Stage II and III are proliferative and premature stages, while stage IV is mature stage. During ovarian stage I, each ovarian pouch contains primarily oogonia, primary oocytes, Oc1 and a few Oc2. In stage II, the pouch contains mainly Oc2 and Oc3, while in stage III the predominant cells are Oc4. Mature oocytes appear synchronously, in stage IV. The ovulating mature oocytes pass through the thin disrupted wall of ovarian pouch into subcapsular space, that leads into the oviduct situated on the ventro-lateral side of the ovarian lobe. At spawning, the ovarian pouches break down and only connective sheaths and hemolymph sinuses remain. The germinal cords and islets of oogonia remain in the central area of stage 0 ovary. The ovarian capsule, including the muscular layer, becomes attenuated as the ovary progresses from stage 0 to IV. The hemolymph vessels become highly convoluted in the central area of the ovary, and they branch radially into smaller hemolymph sinuses around each oogenic pouch.     

Increased melanomacrophage centres in the liver of reproductively dysfunctional female greater amberjack Seriola dumerili (Risso, 1810)

The greater amberjack Seriola dumerili is a new aquaculture fish that may display reproductive dysfunctions. During extensive follicular atresia, which is a common reproductive dysfunction in females during vitellogenesis, part of the reabsorbed yolk returns to the liver to be metabolized and recycled. Melanomacrophage centres (MMCs) are aggregates of macrophage-like cells that play a role in the destruction, detoxification and recycling of endogenous and exogenous materials, and have been associated with systemic stress. Wild and captive-reared greater amberjack were sampled in the Mediterranean Sea during two different phases of the reproductive cycle. The liver of reproductively dysfunctional captive-reared females sampled during the spawning season showed a high density of both MMCs and apoptotic cells. A weak liver anti-cytochrome P450 monooxygenase 1A immunoreactivity was observed, suggesting that the examined fish were not exposed to environmental pollutants. We propose that the observed increase in MMCs and apoptosis in captive-reared fish was related to the hepatic overload associated to the metabolism of yolk proteins reabsorbed during extensive follicular atresia. Since follicular atresia is a frequent physiological and pathological event in teleosts, we suggest that the reproductive state should be always assessed when MMCs are used as markers of exposure to stress or pollutants.     

中华鲟血清卵黄蛋白原水平的初步观察

通过碱不稳定性蛋白结合磷法测定不同年龄中华鲟(Acipenser sinensis)血清中磷含量,以磷的含量变化反映卵黄蛋白原(VTG)变化情况。实验鱼为人工养殖0.5、1、2、3、4、5、6、8、9、10龄中华鲟和野生成熟中华鲟,共81尾,其中8尾野生雌鱼在人工繁殖前后各取样2~4次,共测97个血液样本。结果显示:低龄中华鲟VTG含量较低,最低值在5龄,含磷量为(4.6±1.6)mg/L,5龄后增加,成熟后达到最大,含磷量为(52.0±4.5)mg/L。在性腺不同发育时期,雌性个体在Ⅱ~Ⅴ期VTG的含量增加,Ⅱ~Ⅲ期增加速度较快,随后变缓,Ⅴ期达到最高水平,Ⅵ期降低;而雄性个体在Ⅱ~Ⅳ期VTG的增加量很少,Ⅳ期达到最高水平,含磷量为(28.7±12.2)mg/L。繁殖雌鱼产前VTG含量最高,含磷量为(62.5±8.7)mg/L,产后低于产前。此外,发现产后鲟鱼卵巢液中含量低于其血清中含量,但高于其他年龄组血清中的水平。本实验表明淡水养殖的中华鲟有可能达到性成熟。