枯草芽孢杆菌培养基配方优化的研究

枯草芽孢杆菌培养基的组分是由葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钾、碳酸钙等5种原料构成，采用L1（4^5）正交表，将5种原料作为枯草芽孢杆菌培养有影响的因素，通过试验数理统计的直观和理论分析，对其配方进行优化：试验结果表明，当培养基的配方为无水葡萄糖3．50g／L、蛋白胨0．83g／L、酵母膏0．50g／L、磷酸二氢钾0．35g／L和碳酸钙0．25g／L，温度（34±2）℃时，培养16h即可达到生长峰值。由于枯草芽孢杆菌光学密度（optical density，OD）与活菌数量的关系：Y=0．5182x^2＋1．4462x＋1．9714（r=0．996343），接种的枯草芽孢杆菌由1．9714×10^8cfu／mL提高到3．3124×10^8cfu／mL。优化的枯草芽孢杆菌培养基条件能有效促进枯草芽孢杆菌生长。     

枯草芽孢杆菌固态发酵工艺研究

对枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）的固态发酵工艺进行了研究，包括碳源、氮源、含水量、初始pH、接种时间、接种量等影响因素，并通过单因子试验和正交试验优化，确定了枯草芽孢杆菌的固态发酵工艺为：（1）培养基：麸皮19．5g，稻谷壳0．5g，豆粕1．0g，水22mL；（2）发酵条件：初始pH为7．0、接种时间20h，接种量为0．9mL。照此工艺发酵，枯草芽孢杆菌的活茵数高达435亿个／g。     

1株水产用益生枯草芽孢杆菌液体发酵初步研究

通过正交试验、单因素试验和100L发酵罐中试确定了枯草芽孢杆菌HJ02工业生产用的优化液体培养基和发酵工艺条件。最佳培养基配方为：葡萄糖10g/L、玉米粉8g／L、豆粕粉25g／L、硫酸锰30．8mg／L、硫酸镁5g/L、磷酸二氢钠0．52g/L、磷酸氢二钠2．33g/L；最优发酵工艺条件：培养温度30℃，初始pH值7．0，最佳接种的菌龄是18小时。     

养虾如何选用菌制剂

养虾用的菌制剂首选芽孢杆菌,其次是光合细菌以及乳酸菌产品。芽孢杆菌一般产品为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、腊状芽孢杆菌,是所知极少数可以分解大分子有机质如残饵粪便的菌种。     

山姜对益生芽孢杆菌体外抑菌活性试验研究

为研究中草药山姜粗提液对益生芽孢杆菌体外抑菌效果,特采用试管二倍稀释法和管碟法检测不同浓度的山姜煎煮液和乙醇提取液在体外对蜡样芽孢杆菌PAS38菌株和枯草芽孢杆菌Pab04菌株的最小抑菌浓度(MIC)和抑菌直径,并以肠毒性大肠杆菌(ETEC)、4μg/mL硫酸庆大霉素作阳性对照,生理盐水作阴性对照。结果表明,山姜煎煮液和乙醇提取液对两株益生芽孢杆菌和ETEC无抑菌作用,硫酸庆大霉素对蜡样芽孢杆菌PAS38和枯草芽孢杆菌Pab04菌株MIC均为1.25μg/mL,对ETEC的最低抑菌浓度MIC为0.625μg/mL。山姜煎煮液和乙醇提取液对受试菌株抑菌直径与生理盐水相比差异不显著(P>0.05),硫酸庆大霉素与其相比差异极显著(P<0.01)。山姜粗提液对两株益生芽孢杆菌无明显抑菌作用。     

海洋芽孢杆菌N11-8产蛋白酶的发酵条件优化

本研究采用响应面法(RSM)对南极海洋芽孢杆菌(Bacillus sp.)N11-8液体发酵产蛋白酶PBN11-8的发酵条件进行快速优化。通过单因素实验初步确定南极海洋芽孢杆菌N11-8产蛋白酶的最佳碳源和氮源分别为可溶性淀粉和蛋白胨；并通过Plackett-Burman(PB)设计对影响其产酶相关因素进行评估，筛选出具有显著效应的3个因素：温度、氮源和碳源；以最陡爬坡实验逼近至上述因子最大响应区域，进而采用RSM法对其最佳水平范围进行研究，确定最优发酵条件为：可溶性淀粉3 g/L，蛋白胨13.1 g/L，酵母浸粉2.9 g/L，NaCl 5 g/L，KH2PO4 1 g/L，FeCl3·6H2O 2 mmol/L，初始pH值为7.0，温度为34.0℃，转速为200 r/min，装液量为50 ml/250 ml，接种量为4%，培养时间为60 h。最终优化后的酶活达到90.5 U/ml，比初始酶活提高了23.6%。     

对虾养殖水环境无公害高效调控系列技术（下）

4有益菌调控技术 4．1芽孢杆菌调控技术 在养殖水环境中使用的芽孢杆菌主要为枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，在养殖池塘中能够快速降解养殖代谢产物，减少有机物在池底的累积，促进物质循环利用，促进优良浮游微藻繁殖，延缓池底老化，同时抑制有害菌繁殖，促进有益菌形成优势，改善水体质量。     

一株水产芽孢杆菌的鉴定及其培养基优化的研究

对从水产养殖环境中筛选出一株菌MM01进行了鉴定和培养条件优化研究。结果显示:此菌MM01能有效的降低养殖水水体中的氨氮和亚硝酸盐含量,经生理生化实验及16S rDNA测序鉴定其为枯草芽孢杆菌。单因素和正交实验结果显示:枯草芽孢杆菌MM01最佳发酵培养基配方为,玉米淀粉18 g/L、玉米浆12 g/L、NH4Cl6 g/L、MnSO4.H2O 0.2 g/L、KH2PO43 g/L、CaCl20.2 g/L、MgSO4.7H2O 0.2 g/L。     

芽孢杆菌对斑节对虾饲料表观消化率的影响

研究了斑节对虾(Penaeus monodon)饲料中添加不同剂量的芽孢杆菌制剂(Bacillus sp.,109 CFU/g)对饲料干物质、粗蛋白、脂肪、磷、氨基酸和脂肪酸的表观消化率的影响.饲料1(对照组)、饲料2、饲料3、饲料4、饲料5和饲料6中芽孢杆菌制剂的添加量分别为0、1.0 g/kg、2.0 g/kg、3.0 g/kg、4.0 g/kg和5.0 g/kg饲料.养殖实验在室外水泥池进行,每池养虾40尾,每组实验设3个重复.以Y2O3为指示剂,添加量为0.01%,连续收集粪便20 d.6个实验组中,对饲料中各营养素的表观消化率分别为:干物质,74.35%～77.89%;粗蛋白,87.29%～89.01%;脂肪,86.46%～89.67%;磷,35.83%～44.17%;必需氨基酸,93.01%～94.04%;非必需氨基酸,91.05%～92.42%;饱和脂肪酸,86.88%～89.95%;单不饱和脂肪酸,90.39%～93.40%;多不饱和脂肪酸 高不饱和脂肪酸,87.97%～91.32%.对照组的脂肪表观消化率高于饲料2、饲料5和饲料6组,但低于饲料3和饲料4组.饲料3组的脂肪和部分脂肪酸的表观消化率最高.对照组的干物质、粗蛋白、氨基酸和磷的表观消化率最低,芽孢杆菌添加量在1.0～3.0 g/kg饲料范围内,随着芽孢杆菌添加量的增加,表观消化率逐渐上升,饲料4组的表观消化率最高,与其他组相比差异显著(P＜0.05),添加量超过3.0 g/kg的各组,随着芽孢杆菌添加量的增加,表观消化率又逐渐下降.实验结果表明,在饲料中添加适量的芽孢杆菌可以显著的提高干物质、粗蛋白、氨基酸和磷的表观消化率.     

张素芳：治疗鱼病四部曲

第一曲：调水 每亩水深1m，用芽孢杆菌300g＋藻种50g调水。芽孢的具体使用方法是：用池塘水浸泡，在阳光下照射两小时，再全池泼洒。芽孢使用，一定要在晴天上午使用。     

5种芽孢杆菌对水体中无机磷的去除效果

在蒸馏水+KH₂PO₄的环境条件下进行了地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、凝结芽孢杆菌(B.coagulans)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)和胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)对水中无机磷的去除效果研究,结果表明,地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌基本不具备除磷能力,解淀粉芽孢杆菌和胶冻样类芽孢杆菌有一定除磷能力且除磷效果相近,均是从10⁴ CFU/mL开始随着菌液浓度的增加,除磷效果逐步提高,在10⁷ CFU/mL浓度组达到最佳除磷效果;同时除磷效果与水力停留期间随时间的演化规律相似,都是在处理6 h时基本达到最佳除磷效果,而6～8 h期间除磷效果明显降低。     

关于芽孢杆菌(Bacillus)应用概述

芽孢杆菌属拉丁学名(Bacillus Cohn,1872),细胞呈直杆状,0.5～2.5μm×1.2～10μm,常以成对或链状排列,具圆端或方端。革兰氏染色阳性菌。产生芽孢,需氧或兼性厌氧。大多数有动力,无荚膜,多数溶血,通常过氧化氢酶阳性。包括对人和动物致病的炭疽芽孢杆菌,可引起食物中毒的蜡状芽孢杆菌,非致病性的枯草芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌等。其广泛应用于水产上、农业、科学研究、工业、医药卫生。     

添力口甘蔗潼和芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长和养殖环境的影响

分别向凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）养殖水体中添加芽孢杆菌（处理A）、芽孢杆菌＋粉碎甘蔗渣（处理B）、芽孢杆菌＋粉碎-蒸煮甘蔗渣（处理c）,检测养殖环境中的氨氮、亚硝态氮和硝态氮含量、水体中总菌数、水体中絮团含量和对虾生长指标,评估添加甘蔗渣和芽孢杆菌对对虾生长及养殖环境的影响。60天的养殖结果表明,养殖前期处理组B、处理组c的氨氮（TAN）浓度显著低于处理组A（P〈0．05）;甘蔗渣和芽孢杆菌的添加能够提高水体中生物絮团含量,养殖10天以后,处理组B和处理组C的生物絮团含量分别维持在6-3～20 ml／L、8．3～30 ml／L,各时期都显著高于处理组A（维持在2．7～8.3 ml／L）（P〈0．05）;处理组B、处理组c收获时对虾平均体重分别为8．56±0．21 g、8．84±0．26 g,显著大于处理组A（7．66±0．40 g）（P〈0．05）。     

芽孢杆菌对泥蚶和养殖底质中菌群的影响

在泥蚶养殖水体中（1000L）投喂浓度分别为1、5和10g微生态制剂（芽孢杆菌），在30天的投喂期内，采用平板计数法检测底泥中、泥蚶体内的细菌总数和弧菌总数。结果表明，在投喂冻干菌粉后，养殖底泥和泥蚶体内菌群在前7天均呈明显上升趋势，7-30天内缓慢下降。由于芽孢杆菌的抑制作用，弧菌的数量下降，以泥蚶体内的弧菌最明显。芽孢杆菌对养殖底泥和泥蚶体内的细菌菌群影响很大，芽孢杆菌对养殖水体底泥和体内菌群的影响与抗生素具有相近的效果，表明芽孢杆菌作为饲料添加剂可以取代抗生素应用于泥蚶养殖。     

有益微生物对虾塘淤泥中有害物质的控制作用

本通过对斑节对虾池塘养殖．应用以芽孢杆菌为主导菌的复合微生物制剂，进行改善养殖环境．控制池塘淤泥中有毒物质的试验，含活菌数为10％^9个／g菌剂，用量为7．5—15#kg/hm^2，经二个月的试验，结果表明：试验塘与对照塘相比，NO2-N、NH4-N分别降~E；99．54％—85.99％和16．29％—30．92％；硫化物降低66．44％—14.6％，而淤泥中有机物及有机氮相应也得到分解和缓解．使对虾生长迅速，生长速度达9.15mm／d。说明以芽孢杆菌为主导菌的微生物制剂．能够起到改善养殖环境，促进对虾健康生长的作用。     

枯草芽孢杆菌的分离及其净化水质的研究

对水产养殖水体及底泥中的芽孢杆菌进行分离,得到一株枯草芽孢杆菌,并研究了枯草芽孢杆菌对养殖凡纳滨对虾池水质的净化作用。试验池中枯草芽孢杆菌密度4×109个/L,间隔7 d后再以相同的剂量施放1次,于施放菌液后的第1、3、5、7、9、11天上午采集水样。试验池中COD、亚硝酸盐、H2S比对照池显著降低,总碱度显著上升,表明枯草芽孢杆菌对养殖凡纳滨对虾池水质具有明显的净化作用。     

饲料中添加芽孢杆菌Z5株对凡纳滨对虾生长、免疫指标和抗病力的影响

摘要研究了在配合饲料中添加108CFU／g芽孢杆菌z5株对凡纳滨对虾生长、免疫指标和抗病力的影响。结果显示：芽孢杆菌组对虾生长速度较快,成活率显著提高,产量比对照组提高了24％。饲喂21天后,芽孢杆菌组对虾血清酚氧化酶活力显著升高;42天后,芽孢杆菌组对虾血清酚氧化酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶活力均显著升高。攻毒结果表明,芽孢杆菌组对虾半数致死时间比对照组延长了35％。表明饲料添加芽孢杆菌能够提高对虾成活率,增强机体免疫功能,提高对虾抗病能力。     

混合微生态制剂对幼刺参生长免疫的影响

将3种微生态制剂产品（免疫增强剂,复合芽孢杆菌,EM菌）以不同浓度（0,2μl/L或mg／L,4μl/L或mg／L）按L9（3^4）正交设计法配制成9种混合制剂进行刺参饲养试验。结果表明,3种菌制剂对幼刺参生长的影响显著性的顺序为：免疫增强剂〉复合芽孢杆菌〉EM菌;对酸性磷酸酶影响显著性的顺序为：免疫增强剂〉EM菌〉复合芽孢杆菌;对过氧化氢酶影响显著性的顺序为：免疫增强剂〉复合芽孢杆菌〉EM菌;对溶菌酶影响显著性的顺序为：复合芽孢杆菌〉EM菌〉免疫增强剂。     

两种芽孢杆菌体外体内拮抗气单胞菌的试验

将蜡样芽孢杆菌Y1和巨大芽孢杆菌BM1259混合培养,结合平板活菌计数、抑菌活性测定及体内拮抗试验,研究其对水产动物气单胞菌的抑菌效果。体外拮抗试验结果表明,这两种芽孢杆菌均能明显抑制嗜水气单胞菌NQ的增殖,抑制率分别为53.74%和56.12%。不同温度下的抑菌活性试验显示,2种芽孢杆菌的抑菌活性温度分别为32℃和29℃。体内拮抗试验结果表明,巨大芽孢杆菌能显著降低异育银鲫肠道气单胞菌的数量。提示巨大芽孢杆菌可作为潜在的水产专用微生态制剂。     

益生菌在凡纳滨对虾育苗中的应用

实验研究了在凡纳滨对虾育苗中添加益生菌(芽孢杆菌、光合细菌或芽孢杆菌 光合细菌)对水体中pH值、H2S、COD、NH 4N、NO-2N和幼体成活率的影响。结果表明:光合细菌对提高水体的pH值有一定作用,而芽孢杆菌对pH值无显著影响;益生菌能显著降低水体中的H2S、NH 4N和NO-2N含量,其中光合细菌去除H2S和NO-2N的效果略优于芽孢杆菌,而芽孢杆菌去除NH 4N的能力比光合细菌强;实验中COD均在较适宜范围,益生菌对COD无显著影响。5mg·L-1芽孢杆菌和1mg·L-1芽孢杆菌 10mg·L-1光合细菌能显著提高育苗成活率。在实验中,1mg·L-1芽孢杆菌 10mg·L-1光合细菌的综合效果最佳,芽孢杆菌和光合细菌具有协同作用。