1株水产用益生枯草芽孢杆菌液体发酵初步研究

通过正交试验、单因素试验和100L发酵罐中试确定了枯草芽孢杆菌HJ02工业生产用的优化液体培养基和发酵工艺条件。最佳培养基配方为：葡萄糖10g/L、玉米粉8g／L、豆粕粉25g／L、硫酸锰30．8mg／L、硫酸镁5g/L、磷酸二氢钠0．52g/L、磷酸氢二钠2．33g/L；最优发酵工艺条件：培养温度30℃，初始pH值7．0，最佳接种的菌龄是18小时。     

枯草芽孢杆菌固态发酵工艺研究

对枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）的固态发酵工艺进行了研究，包括碳源、氮源、含水量、初始pH、接种时间、接种量等影响因素，并通过单因子试验和正交试验优化，确定了枯草芽孢杆菌的固态发酵工艺为：（1）培养基：麸皮19．5g，稻谷壳0．5g，豆粕1．0g，水22mL；（2）发酵条件：初始pH为7．0、接种时间20h，接种量为0．9mL。照此工艺发酵，枯草芽孢杆菌的活茵数高达435亿个／g。     

来自鳗鲡的二株益生菌适宜培养基的研究

用正交试验法,通过研究培养基基础成分、主要添加成分和无机盐对养殖鳗鲡(Anguilla japonica)肠道益生菌枯草芽孢杆菌(A40209CDC4)和少动鞘氨醇单胞菌(A31009NA)的生长影响,确定了优化的培养基。菌株A31009NA的优化配方为:蛋白胨1.0%,牛肉膏0.1%,食盐0.5%,酵母膏0.5%,葡萄糖1.0%,硫酸铵0.05%,MgSO4.7H2O 0.1 g/L,CuSO4.5 H2O 0.15 mg/L,MnSO4.H2O 1.5 mg/L,CoCl.H2O 0.15 mg/L;A40209CDC4优化培养基配方为:蛋白胨1.0%,牛肉膏0.1%,食盐1.0%,酵母膏0.5%,硫酸铵0.05%,MgSO4.7 H2O 0.1 g/L,MnSO4.H2O 1.5 mg/L,CoCl.H2O 0.15 mg/L,CaCl20.02 g/L。优化培养基与普通营养肉汤(蛋白胨1.0%,牛肉膏0.3%,食盐0.5%)培养对照试验结果表明,优化培养基有效地提高了细菌产量。     

海洋红酵母RH1菌株发酵培养条件的研究

该研究比较了不同碳源、氮源、无机盐对海洋红酵母菌（Rhodotorula sp.）RH1菌株发酵产量的影响,通过葡萄糖、蛋白胨、酵母膏和硫酸镁（MgSO4）4因素3水平的正交试验,确定了RH1菌株的最优培养基为蛋白胨10 g.L-1,酵母膏15 g.L-1,葡萄糖20 g.L-1,MgSO40.25 g.L-1,磷酸二氢钾（KH2PO4）0.25 g.L-1,氯化钠（NaCl）10 g.L-1。结果显示,该菌株最佳摇瓶发酵条件为接种量10%,初始pH 5.0,摇瓶装液量80 mL/500 mL三角瓶,培养温度28℃,经48 h培养,菌量可达10.46×108cfu.mL-1,比优化条件前提高23.9%。还进行了RH1菌株25 L发酵罐扩大培养试验,在接种量为8%、初始pH 5.0、搅拌速率350～400 r.min-1、通气量9 L.min-1、温度28℃的条件下,经28 h的培养,菌量可达33.6×108cfu.mL-1。预计通过连续补料的方式进行培养,有望进一步提高菌量。     

不同浓度的枯草芽孢杆菌对罗非鱼鱼苗的养殖水体水质及其抗病力的影响

罗非鱼鱼苗的养殖水体中引入不同浓度的枯草芽孢杆菌,检测水体的水质指标、鱼苗体内与免疫相关酶的酶活力、鱼苗的生长率和成活率。实验结束时,引入1.0×10^4 cfu/mL枯草芽孢杆菌实验组,氨氮和亚硝酸盐氮含量分别为2.72 mg/L、0.15 mg/L,显著低于对照组（P〈0.05）;AKP活力、抗菌活力分别达249.9 U/g prot、0.59μg/mL,显著高于对照组（P〈0.05）;鱼苗成活率也显著高于对照组（P〈0.05）,比对照组提高了11.0%。结果显示：适合浓度的枯草芽孢杆菌能有效地改善鱼苗养殖水体的水质,提高机体免疫力和成活率。     

枯草芽孢杆菌改善水质提高凡纳滨对虾幼体抗逆性的研究

投放不同浓度梯度的枯草芽孢杆菌于凡纳滨对虾幼体养殖环境中,监测不同枯草芽孢杆菌使用浓度下与养殖环境相关的水质因子（氨氮、亚硝酸盐氮、化学需氧量）的变化;观察不同枯草芽孢杆菌使用浓度下凡纳滨对虾幼体对人工制造的胁迫环境的抗逆性;观测不同枯草芽孢杆菌使用浓度下凡纳滨对虾幼体的成活率与体重增长率。研究枯草芽孢杆菌对水质改善和凡纳滨对虾幼体抗逆性的影响。结果表明,枯草芽孢杆菌能显著（P〈0.05）降低化学需氧量、氨氮含量,抑制亚硝酸盐氮的产生;当枯草芽孢杆菌投放浓度为1.25×10^4cfu/ml时,水体中化学需氧量、氨态氮、亚硝酸盐氮含量均值比对照组分别降低了65.30%、59.70%、88.64%,成活率比对照组提高了10.00%,体重增长率是对照组的2.44倍;当枯草芽孢杆菌使用浓度为1.25×10^4～1.25×10^6cfu/ml时,对虾抗逆性显著（P〈0.05）增强,对虾在氨氮、亚硝酸盐氮、高锰酸钾、甲醛胁迫下24小时的成活率均值分别比对照组提高了16.94%、24.44%、44.17%、18.61%。     

几种免疫因子对九孔稚鲍免疫力的影响

选用浓度分别为5×10^-6、10×10^-6、0．5×10^-6、1×10^-6的维生素B6（维生素类）、益母草膏（中草药类）、腐殖酸（天然螯和剂）和大蒜素（免疫药物）4种制剂，采用浸浴的方法，对11-39日龄的九孔稚鲍（Haliotis diversicolor supertexta）进行免疫刺激。试验期间每两天换水、补药一次，以维持各组原有的药物浓度，同时对稚鲍的脱板情况进行计数；最后取样测定各组幼体酚氧化物酶、溶菌酶的活性。试验结果表明。各药物组的酚氧化物酶和溶菌酶含量均显著高于对照组（p〈0．05），且稚鲍成活率亦有显著性提高。试验结束时大蒜素组的成活率最高，可达60．00±3．33％；其次为益母草膏、腐殖酸和维生素B6组，成活率分别为56．60±1．66％、45．05±2．44％和42．67±3．13％；均极显著高于对照组的8．59±7．14％（0〈0．01）。由此可见，增强机体的抗氧化能力可提高稚鲍的成活率；本试验所选用的4种免疫因子均可提高九孔稚鲍的免疫力．能有效地提高鲍鱼的附板率。     

枯草芽孢杆菌对水质及凡纳滨对虾幼体免疫指标影响的研究

研究了不同浓度的枯草芽孢杆菌（Bacillus substilis）对养殖环境水质和凡纳滨对虾（Penaeus vannamei）幼体抗病力相关酶活性的影响。结果表明，枯草芽孢杆菌能显著（P〈0．05）降低化学需氧量（COD）和氨氮（NH3-N）含量，抑制亚硝酸氮（NO2-N）的产生；当枯草芽孢杆菌投放浓度为1．25×10^4cfu·mL^-1时，水体中COD、NH3-N和NO2-N含量均值比对照组分别降低了65．30％、59．70％和88．64％；20d后测定对虾的碱性磷酸酶（AKP）、过氧化物酶（POD）、酚氧化酶（PO）、超氧化物歧化酶（SOD）、抗菌和溶菌活力，各值相对于对照组分别提高了3．67、1．64、0．45、3．06、2．57和1．14倍；成活率比对照组提高了10％，增重率是对照组的2．44倍。因此，一定浓度的枯草芽孢杆菌能改善凡纳滨对虾幼体的养殖水质进而提高凡纳滨对虾幼体的抗病力。     

光合细菌培养基配方的优化研究

光合细菌培养基的组分是由乙酸钠、氯化铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、酵母膏等5种原料构成。采用L16(45)正交表,将5种原料作为光合细菌生长有影响的因素,通过试验数理统计的直观和理论分析,对其配方进行优化。试验结果表明,当培养基的配方为乙酸钠3.3 g/L、氯化铵0.6 g/L、磷酸二氢钾0.9 g/L、硫酸镁0.5 g/L、酵母膏1.5 g/L、光照3 000 lx和温度(32±2)℃时,培养72 h即可达到生长峰值,细菌总数可以从起初的1.75×109cfu/mL提高到3.19×109cfu/mL。优化的培养基条件能有效促进光合细菌生长。     

一株水产用益生枯草芽孢杆菌液体发酵初步研究

为解决工业化生产中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)活菌数量低、成本高的问题,通过正交试验、单因素试验和100 L发酵罐中试,确定了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HJ02工业生产用的优化液体培养基和发酵工艺条件。最佳培养基配方为:葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L;最优发酵工艺条件为:培养温度30℃,初始pH 7.0;最佳接种菌龄是18 h。优化后培养基成本降低了50%以上,细菌浓度达到了7.19×109个/mL。