三苯基锡对褐菖鮋精巢发育的影响及其作用机制

三丁基锡(tributyltin,TBT)和三苯基锡(triphenyltin,TPT)广泛应用于海洋船只防污涂料。但相对于TBT,对TPT的毒性研究还很少。本实验以海洋经济鱼类褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)为对象,研究环境水平TPT对精巢发育的影响。研究发现,TPT降低精巢的精子数目和密度,增加精小叶间隙脂滴数量和精巢总脂质水平。另外,TPT降低精巢睾酮酯化水平,增加游离睾酮水平,降低游离17β-雌二醇水平。TPT对精巢发育的抑制可能与精小叶间隙脂质水平的增加及精巢17β-雌二醇水平的降低有关。实验结果为全面了解TPT产生鱼类生殖毒性效应、途径和机制提供了新的重要资料。环境水平的TPT能够抑制精巢的发育,而且毒性要高于TBT。这些结果为海洋环境政策的制定和评估有机锡污染对海洋鱼类资源的影响提供了重要的依据。     

三苯基锡对褐菖鮋卵巢发育的影响

尽管三苯基锡(triphenyltin,TPT)与三丁基锡(tributyltin,TBT)在海洋环境中经常同时存在,但相对于TBT,对TPT的毒性研究还较少。本实验以海洋经济鱼类褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)为对象,研究环境水平TPT对卵巢发育的影响。结果发现,TPT抑制了卵巢发育,表现为性腺指数的降低。TPT还诱导卵巢总脂质水平的增加,而卵巢脂质蓄积可能影响卵巢的正常生殖功能。另外,TPT暴露后,卵巢游离睾酮水平增加,卵巢游离17β-雌二醇水平降低;同时,血清三碘甲腺原氨酸水平降低。因此,TPT对性激素和甲状腺激素水平的影响可能是其抑制卵巢发育的重要机制。实验结果为全面了解TPT产生鱼类生殖毒性效应、途径和机制提供了新的重要的资料。     

三苯基锡和三丁基锡对海胆的急性毒性研究

采用发育生物学和生态毒理学的模式生物海胆检测两种典型的有机锡化合物三苯基锡(TPT)和三丁基锡(TBT)对水生生物的急性毒性,同时对上述物质对海胆的安全性进行初步评估,以期为有机锡的防控提供基础数据。半静水条件下,通过概率单位法(Bliss)得到TPT和TBT对黄海胆24h,48h,72h,96h的LC50,分别为:25.007、18.743、9.514、6.662μg·L-1和19.850、15.986、7.888、4.916μg·L-1,并计算TPT和TBT对海胆的安全浓度分别为0.666和0.492μg·L-1。结果发现,TPT和TBT对黄海胆均表现为剧毒作用,TBT毒性大于TPT。海胆对上述毒物具有很高的敏感性,结果稳定,重现性好,建议将海胆作为海洋环境中有机锡污染的监测生物。     

三苯基锡对鲫稚鱼肌肉组织学的影响

三苯基锡(triphenyltin,TPT)和三丁基锡(tributyltin,TBT)在环境中经常同时存在.以淡水常见经济鱼类鲫(Carassius auratus)稚鱼为试验对象,研究不同水平TPT(10、100、1 000 ng/L)对其肌肉组织学的影响.结果表明,TPT暴露16d后引起鲫稚鱼肌肉组织损伤,主要表现为肌纤维间隙变宽、肌丝断裂与紊乱以及糖原代谢变化;100 ng/L TPT暴露组中,鲫的肌肉损伤最为严重,肌纤维直径较对照组显著降低,肌糖原出现显著累积现象;而1 000 ng/L TPT暴露组中,鲫的肌纤维直径较对照组则显著增加,糖原水平显著降低.     

三丁基锡对罗氏沼虾卵黄蛋白原（VTG）表达和性腺发育的影响

将罗氏沼虾成虾浸浴于含三丁基锡（Tributyltin, TBT） (0.1、0.2、0.4mg/L）的水体中,研究TBT对其肝胰脏和性腺中卵黄蛋白原(VTG)表达和性腺发育的影响。结果表明,罗氏沼虾在TBT中浸浴10d,TBT能够诱导雌虾的肝胰腺VTG基因表达,而对卵巢VTG基因的表达则表现为抑制作用;TBT对雄虾的肝胰腺VTG基因表达有抑制作用,而对精巢VTG基因的表达无明显影响。性腺组织切片显示,TBT浸浴能够促进罗氏沼虾精巢的发育,且随浸浴剂量的增加对精巢发育的促进作用逐步增强,但TBT对罗氏沼虾卵巢发育无明显影响。     

三苯基锡对褐菖鲉脑雌激素受体和视黄酸X受体表达的影响(英文)

尽管三苯基锡(triphenyltin,TPT)能够影响鱼类生殖功能以及性腺的发育,但其作用机制并不十分清楚。由于鱼脑在生殖调控中具有重要作用,本研究以海洋鱼类褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)为研究对象,研究TPT对脑中芳香化酶(Cyp19b)、雌激素受体(ERα和ERβ)、视黄酸X受体α(RXRα)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)基因表达的影响。暴露48 d后,TPT对雌性和雄性褐菖鲉脑中Cyp19b和PPARγ的表达均未产生显著性影响。TPT诱导了雄性褐菖鲉脑中ERα的表达并抑制了ERβ的表达;尽管TPT也抑制雌性褐菖鲉脑中ERβ的表达,但对ERα的表达却未产生显著性影响。另外,TPT诱导了雄性褐菖鲉脑中RXRα的表达,而在雌鱼脑中却产生了相反的作用,抑制了RXRα的表达。因此,TPT对褐菖鲉脑中ER和RXR表达的影响可能具有性别差异性,表明TPT具有复杂的内分泌干扰效应。另外,结果表明,TPT可能通过干扰鱼脑ER和RXR产生生殖毒性。     

三丁基锡对褐菖鲉胚胎卵黄囊吸收的影响

鱼类胚胎期的营养对各种器官的发育至关重要,环境条件对营养吸收的影响会增加畸形率和死亡率。研究三丁基锡(tributyltin,TBT)对鱼类胚胎期营养吸收的影响有助于深入认识TBT对鱼类胚胎发育的毒性。本实验以海洋经济鱼类褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)为对象,研究环境水平TBT(0.01、0.1、1、10 ng.L-1)对胚胎卵黄囊吸收的影响。通过油红O染色,发现TBT暴露引起褐菖鲉胚胎血管系统中脂类染色信号减少,而卵黄中的脂类染色正常,说明TBT可能影响了胚胎正常血液循环,从而影响了正常的营养运输。另外,TBT对Na+,K+-ATP酶、碱性磷酸酶活性的抑制以及对甲状腺激素受体α和糖皮质激素受体基因表达的影响可能和其对卵黄囊的吸收抑制有关。TBT对鱼类胚胎卵黄吸收的抑制将影响鱼类的生长和发育,增加畸形率和死亡率,最终导致鱼类种群数量减少。     

环境激素对鱼类生殖毒性的研究进展

文章综述了水环境激素的种类及其对鱼类生殖毒性的常用的研究方法,并以三丁基锡(TBT)和三苯基锡(TPT)等有机锡污染物为例,详述了环境激素对鱼类生殖毒性的研究进展。研究表明,有机锡化合物会导致鱼类性腺结构和功能受损,生殖行为异常,引起雌鱼雄性化,并产生隔代毒性效应。其毒性机理主要是抑制雌激素合成途径关键酶,干扰雌激素核受体基因表达,此外还可能涉及脂毒性、氧化应激反应等其他复杂机制。建议在今后的研究中,加强学科融合,发展新的研究技术手段,开展复杂条件下的生殖毒理研究,结合地区特点和养殖模式开展养殖鱼类生殖毒理研究,不断开展各种新型化合物环境行为和毒理效应研究。     

久效磷对金鱼精巢超显微结构和特征性酶活性的影响

用0.01、0.10、1.00 mg.L-1久效磷暴露金鱼21 d,测定了精巢乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)的活性,并观察了精巢显微和超微结构的变化。结果表明:久效磷暴露21 d,精巢小叶基膜断裂,Leydig氏细胞水肿,小叶间质扩大,支持细胞核膜溶解,胞质内脂滴和髓磷脂象数量增多。1.00 mg.L-1久效磷造成了生殖腺指数的显著下降,对精巢发育有一定程度的延迟作用。随着久效磷暴露浓度的升高,LDH,ACP,ALP的活性逐渐下降,0.10、1.00 mg.L-1久效磷暴露组精巢LDH,ACP的活性下降显著,而各暴露组的精巢ALP活性呈现不显著下降趋势。推测久效磷可能通过损伤精巢超显微结构和降低LDH,ACP和ALP活性,干扰精巢能量代谢,造成对雄性金鱼的生殖毒性。     

17β- 雌二醇对鲻早期精子发生的影响及其作用机制

应用组织学和免疫组织化学的方法,对17β-雌二醇(E2)影响鲻(Mugil cephalus)早期精巢的精子发生及其作用机制进行了研究.饲喂含15 mg/kg和50 mg/kg 17β-雌二醇的饲料60 d,以不添加17β-雌二醇的饲喂组为对照.结果表明,幼鲻投喂含E2饲料前,对照组和实验组精巢均属早期精巢,胞囊中原始的精原细胞占优势,Sertoli细胞紧贴精原细胞.投喂含E2饲料后1个月,低剂虽组(15 mg/kg)的4尾幼鲻均出现精原细胞的有丝分裂,有丝分裂细胞的数量多于高剂量组(50 mg/kg),对照组精巢未见精原细胞的有丝分裂,说明E2能够诱发精原细胞的分裂.实验结束后投喂E2组精巢发育处在小生长期,可见精巢中有初级精母细胞存在于精小叶中,而埘照组刚刚出现精原细胞的发育分化.用雌激素受体α和β亚型抗体进行免疫组织化学染色发现,对照组和实验组早期精巢中的精原细胞和sertoli细胞均显示强的免疫阳性反应,这为E2诱发精原细胞有丝分裂的作用机制提供了新的形态学证据.     

17β-雌二醇激发鲻早期精子发生的作用机制

将雄性幼鲻(Mugil cephalus)分为4组,分别投喂含17β-雌二醇饲料组、含三苯氧胺(Tamoxifen)饲料组、含17β-雌二醇和三苯氧胺(Tamoxifen)混合饲料,以及对照组,旨在进一步研究17β-雌二醇对幼鲻精子发生的作用机制.同时,采用组织学和免疫组织化学方法对17β-雌二醇影响鲻精巢精子发生及其作用机制进行分析,结果表明,雌激素明显促进鲻精原细胞有丝分裂及增殖和精子发生;Tamoxifen组与混合组于实验后30 d取材观察,两组精巢切片均显示,雄性鲻精巢发育停滞,精原细胞坏死、凋亡,Sertoli's细胞形态结构发生改变、数量下降.这进一步证实雌二醇激发精子发生必须经其受体的介导.雌激素受体(ER)在精巢的免疫组织化学定位揭示,ER在雌激素组免疫活性最高,对照组次之,混合投喂组免疫活性非常弱,而Tamoxifen组则显免疫阴性反应,这为雌激素对鲻精巢的精子发生起着关键作用的论点提供可靠确凿的新证据,同时表明在鲻早期精子发生中,一旦雌激素不足或缺失,精巢的发育质量和生精能力就会受到严重的影响.     

壬基酚对河川沙塘鳢性腺分化和发育影响的研究

利用组织学方法研究了环境雌激素化合物壬基酚(4-nonylphenol,NP)对河川沙塘鳢性腺分化和发育的影响.将人工孵化河川沙塘鳢仔鱼暴露于3个质量浓度(100、300、500 μg/L)的NP中,同时设空白对照组和溶剂对照组,暴露150 d,显微观察性腺组织.试验结果表明,河川沙塘鳢性腺分化的过程是由中性的性腺直接分化出卵巢或精巢.暴露于500 μg/L NP以下的各处理组中的河川沙塘鳢性别比例约为1∶1,与对照组无差异;但是精巢未发育的个体数量随NP浓度提高而增加,在NP 300 μg/L和NP 500 μg/L暴露组中分别占样本总数的20%和22%;此外,NP对精巢组织结构产生一定的伤害,精巢中出现坏死细胞和纤维化现象.     

[4]东海三疣梭子蟹精子发生及精荚形成

为探究东海三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus Miers,1876)雄性群体的性腺发育规律,通过定期采样,运用形态学、组织学方法对东海三疣梭子蟹精子发生及精荚形成过程进行了研究,并结合精小叶生殖节段法对处于不同发育阶段的精巢进行了定性分析.结果表明,三疣梭子蟹精巢属于叶型,由精小叶和精小管组成的叶状管交织而成.精子发生过程与其他高等短尾派蟹类相似,精子成熟后即进入精小管中.输精管可能起源于精小管.三疣梭子蟹精巢和输精管的发育存在一定的年际变化.4-5月份,精巢小叶内精原细胞占优势,输精管内精荚零星分布;6-7月份,精母细胞与精细胞比例增加;8月份精母细胞为主.到了9月份,整个精巢完全被精细胞等发育程度较高的精小叶所占据,输精管内充满精液和精荚,为即将到来的交配季节做好准备.三疣梭子蟹交配活动主要集中在10月份.12月份精巢精小叶中出现游离精子.此后,精巢逐渐退化(1-3月),但输精管中一直储存着精液和精荚.三疣梭子蟹精荚形成过程始于前输精细管,精荚膜两层,分别由来自前输精细管分泌的第一种不定物质和其中、后端分泌的第二种不定物质.精荚内的基质可能直接源于精巢的精小叶部分.输精管中的强嗜酸性颗粒与第二种不定物质有融合作用,使输精管中贮存的精荚膜嗜酸性.     

尼罗罗非鱼Smoothened的鉴定、表达模式及在精巢中的作用

为探究Smoothened (Smo)信号在精巢不同细胞增殖与存活中的作用,实验分离鉴定了尼罗罗非鱼smo (命名为Onsmo),检测了其在不同组织中的表达分布及在精巢中的细胞表达模式,在尼罗罗非鱼精巢组织的体外培养体系中,用Smo特异性激动剂SAG或抑制剂环巴胺分别进行处理,EdU掺入法及TUNEL法检测了处理后生殖细胞(Vasa⁺)、Sertoli细胞(Amh⁺)与Leydig细胞(Cyp17a1⁺)增殖或凋亡情况。结果显示,Onsmo开放阅读框全长2 478 bp,编码825个氨基酸,含有7次跨膜结构域,与人SMO氨基酸一致性达77%;Onsmo表达于包括精巢在内的多个组织;在精巢中,Onsmo在多种不同类型细胞表达,包括精原细胞、精母细胞、Sertoli细胞以及Leydig细胞;在精巢组织的体外培养体系中,SAG处理对精原细胞增殖具有显著促进作用,而环巴胺处理对Sertoli细胞、Leydig细胞凋亡具有显著促进作用。研究表明,On Smo信号在尼罗罗非鱼精巢精原细胞增殖与体细胞存活中具有重要作用。该研究首次证实...     

青虾幼虾发育时期性腺发育组织学研究

采用组织切片及类固醇激素含量测定等方法,研究青虾Macrobrachium nipponense幼虾发育第1~31d的精巢、卵巢及促雄腺发育的起始时间、发育过程及成熟时间。结果表明:青虾幼虾发育到第10d(PL10)时促雄腺呈索状结构开始发育,随后经历增殖期(PL10)、合成期(PL13)和分泌期(PL19)3个发育阶段发育成熟,形成完整的促雄腺。青虾精巢和卵巢均在幼虾发育第13d(PL13)开始发育,精巢形成不规则排列的精原细胞,而卵巢生殖上皮开始分化为椭圆或多边形的卵原细胞。精巢经精原细胞期(PL13)、精母细胞期(PL16)、精细胞期(PL19)和精子期(PL22)4个发育阶段成熟,此时成熟的精巢生精小管内充满成熟的精子。卵巢经卵原细胞期(PL13)、初级卵母细胞期(PL16)、次级卵母细胞期(PL16)和卵子期(PL19)4个时期发育成熟,此时卵巢充满成熟卵子。从PL1到PL22,睾酮分泌量逐渐增加,维持在稳定水平至PL25后逐渐下降;从PL1到PL19,17β-雌二醇的分泌量逐渐增加,维持在稳定水平至PL25后逐渐下降。本研究显示:促雄腺与精巢发育过程均持续10d,但促雄腺早于精巢3d开始发育和成熟,这可为性别和生殖相关基因的筛选及性别调控机制的研究提供参考。     

养殖与野生银鲳精巢发育形态学和组织学的初步比较

采用组织学与形态学等方法研究养殖与野生银鲳(Pampus argenteus)精巢结构、细胞形态、发育过程的异同点。结果表明:银鲳精巢结构为典型的小叶型结构,由精小叶、精小囊、小叶间质、小叶腔和输出管构成;生殖细胞可划分为5类;精巢发育与其他海水鱼类一样,可划分为6个时期。通过实验得知,养殖银鲳个体普遍小于野生银鲳的个体,且同等大小个体的养殖银鲳的精巢发育也不如野生银鲳精巢饱满,推测可能由于营养和环境温度的差异所造成。     

三倍体和二倍体银鲫精巢组织学的比较

通过光学显微镜对染色体数为150±的三倍体和染色体数为100的二倍体银鲫(Carassius ouratus gibclio Bloch)的精巢组织学结构进行了比较观察.三倍体和二倍体银鲫的精巢组织学结构基本相同,属于小叶型,都是由外膜和实质构成,各精小叶呈辐射状分布,一个小叶由数个精小囊组成.其精原细胞存在于精小叶内壁上,精母细胞和未成熟的精子细胞位于精小囊中,精子成熟后从精小囊进入小叶腔.三倍体银鲫成熟精子的体积为(11.8±2.8)μm3,二倍体平均为(6.8±1.8)μm3,二者的比例接近3:2.结果表明三倍体银鲫的精巢能够发育成熟,其精子发生过程正常,经过减数分裂,能产生正常的精子;因此三倍体的黑龙江银鲫是具有双倍性特征的多倍体群体.     

条斑星鲽精巢年周期发育规律和血液性类固醇激素含量变化

采用组织学方法和放射免疫法(RIA)等技术方法,研究了人工养殖条件下条斑星鲽雄性亲鱼精巢发育规律和性类固醇激素的年周期变化规律。实验结果表明,条斑星鲽精巢中可见5个时相的生殖细胞类型,精巢发育可分为5期。条斑星鲽雄鱼GSI值自10月开始升高,12月达峰值(P≤0.05),之后显著下降并保持较低值至下一次生殖周期开始。HSI值在11～12月保持较高表达值,其他各月份保持相对稳定水平。CF值在5～8月保持较高水平,其他月份保持平稳状态。雄鱼血浆中睾酮(T)水平自9月开始升高并在12月(Ⅴ期精巢)达到峰值,其后显著下降并在其后的月份保持较低水平,而雌二醇(E2)在2月出现峰值,其他月份保持相对稳定水平。     

单环刺螠精巢年周期发育及精子发生

采用组织学方法观察了单环刺螠(Urechis unicinctus)精巢的形态结构及其年周期发育,并利用超微技术观察了精子的发生过程。结果表明,单环刺螠的精巢呈条带状,位于虫体尾部,两端通过肌束分别与呼吸肠管壁外侧和体壁内侧相连。精巢由生精细胞团与结缔组织组成,结缔组织位于精巢中央,精原细胞团分布于结缔组织外周,精母细胞团散布于结缔组织内,各级精母细胞脱离精巢落入体腔液中,历经精母细胞、精细胞,最后形成精子脱离细胞团进入肾管。根据精巢的组织学特征,将单环刺螠的精巢年周期发育划分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5个时期。光镜和电镜下观察了精巢和体腔液中精子发生各时期的结构变化,包括细胞核形态的变化、顶体发生以及尾部的形成。本研究揭示了单环刺螠的精巢发育特点、精子发生历经的场所和分化特征。     

红鳍东方鲀人工育苗技术探讨

红鳍东方鲀Fugu rubripes(Temmiack & Schlegel)为底栖、肉食性海水鱼类。性凶猛贪食,生长快,个体大,肉质鲜美,卵巢和肝脏有毒,血液、精巢、皮肤和肌肉基本无毒。本种在日本作为“河鲀理料”是河鲀鱼中最为主要品种,被誉为“上等佳肴”,商品价值居各种经济鱼类之首位。小野英雄(1982) 报道,1960年山口县曾试行人工育苗研究,由于日本当时海洋捕捞业甚为兴盛,用种苗进行人工养殖不被人们所接受。到七十年代因海洋捕捞过度,天然资源受破坏,加上国外渔场不断减少,海捕量供不应求。从1979年开始大力发展人工养殖,种苗人工培育得到高度重视,现已成继(鱼师)、鲷之后第三重要养殖品种。我国至今对红鳍东方鲀的养殖还是个空白,从事对该品种的研究也很欠缺。