条浒苔多糖的酶法辅助提取及其抗氧化活性

以多糖提取率为指标,通过单因素试验确定提取条件,采用均匀设计优化纤维素酶辅助提取,采用普鲁士蓝反应法及Fenton体系测定条浒苔多糖的还原力及对羟自由基的清除活性。试验结果表明,条浒苔多糖的提取条件为料液比1∶20,pH 9.0,温度80℃,时间6h;纤维素酶辅助提取条件为温度25℃,pH 3.0,时间6.5h,料液比1∶5,加酶量0.5%。条浒苔多糖的提取工艺为经酶处理后调整料液比至1∶20,pH及温度调整至9.0及80℃,提取6h,在此条件下多糖提取率为31.05%～37.41%。条浒苔多糖的还原力及羟自由基清除率EC50分别为32.79mg/mL和4.10mg/mL。     

超声波辅助提取泥鳅多糖的工艺优化

以泥鳅为原料,采用超声波辅助技术提取泥鳅多糖,运用硫酸-苯酚法检测泥鳅多糖的含量,利用单因素试验结果设计正交试验,探讨料液比、超声时间和超声功率对泥鳅多糖提取率的影响。经工艺优化,获得超声波提取泥鳅多糖的最佳工艺为料液比1∶20、超声时间20 min、超声功率100 W,在最佳工艺条件下提取泥鳅多糖提取率最高,达到2.79%。     

响应面法同步优化褶牡蛎中蛋白和多糖提取工艺

于单因素试验基础上,以牡蛎蛋白和多糖提取率(Y1和Y2)为响应值,利用响应面法对牡蛎中蛋白和多糖提取工艺进行同步优化.试验结果表明,液料比(X1)、提取时间(X2)、提取温度(X3)及pH值(X4)4个因素对Y1和Y2均有显著影响.由响应面三维及等高线叠加图得到牡蛎蛋白和多糖提取率均高的最佳提取工艺参数:液料比33∶1,提取时间2.6h,提取温度40℃,pH值4.2.在此条件下,验证试验得到牡蛎蛋白提取率为21.15％,牡蛎多糖提取率为12.07％,与数学模型预测值非常接近.可见,响应面同步优化法对牡蛎蛋白和多糖提取条件进行同步优化合理可行.     

响应面优化红毛藻多糖提取工艺及抗光氧化活性

采用纤维素酶、果胶酶辅助提取红毛藻多糖,通过单因素试验分别考察pH、酶活性、酶解温度、酶解时间等关键因素对红毛藻多糖提取率的影响,并对多糖的抗光氧化活性进行探究。以单因素试验为依据选择因素水平,以多糖提取率为指标,基于Box-Behnken中心组合试验和Design-Expert 8.0.5软件,进行三因素三水平响应面法优化红毛藻多糖提取工艺,并测定红毛藻多糖对人皮肤成纤维细胞的抗光氧化损伤作用。试验结果显示,酶辅助提取红毛藻多糖的优化工艺条件为:选用果胶酶,pH 6.0、酶活性0.22 U/mL、酶解时间100 min、酶解温度50℃。优化条件下红毛藻多糖提取率为(16.60±0.13)%,接近预测值(16.72%),此优化工艺切实可行。同时,红毛藻多糖在0～200μg/mL质量浓度范围内具有抗人皮肤成纤维细胞光氧化损伤能力,当多糖质量浓度为10～20μg/mL时,细胞活力可恢复至96.53%～98.49%。     

蛋白核小球藻对碘的生物富集作用

通过向培养液中添加KIO3和KI,研究蛋白核小球藻对碘的生物富集作用。结果表明培养液中加入2种碘盐后,小球藻细胞对碘有明显的富集作用,添加KIO3的培养液中藻细胞的最高富集量可达藻体干重的67%,添加KI的培养液中藻细胞的最高富集量为藻体干重的18%,而且小球藻在富碘的过程中伴随有可溶性蛋白含量的升高。2种碘盐在低浓度时都能促进小球藻的生长,但蛋白核小球藻对KIO3的耐受度要远高于KI。对小球藻生物富碘机制进行了探讨。     

响应面优化酶法提取牡蛎糖原工艺条件研究

为研究制备牡蛎(Crassostrea angulata)糖原的最佳工艺条件,通过比较分析了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶等5种不同蛋白酶对牡蛎进行酶解提取糖原的效果,以碱性蛋白酶为最优酶制剂。在对碱性蛋白酶酶解工艺条件进行单因素实验的基础上,应用Box-Bhenken中心组合设计3因素3水平试验方案,通过响应面分析,建立数学模型优化牡蛎糖原的提取条件,以p H、酶解温度和加酶量为自变量,牡蛎糖原提取率为指标,获得碱性蛋白酶水解牡蛎提取糖原的最佳工艺条件,即加酶量4%、p H9、水解温度50℃,此时牡蛎糖原的提取率可达(48.55±0.01)%。试验结果表明,响应面法对牡蛎糖原提取条件的优化方案合理可行,该研究为牡蛎糖原的开发利用提供了理论依据。     

复合酶法提取石花菜粗多糖工艺的响应面优化

为优化复合酶法[m (木瓜蛋白酶)∶m (纤维素酶)=2∶1]提取石花菜(Gelidium amansii)粗多糖的工艺条件,在单因素实验基础上进行三因素三水平的Box-Benhnken中心组合实验,并根据回归分析确定石花菜粗多糖的复合酶法最佳提取工艺为复合酶添加量2.30%、酶解温度60.43℃、料液比1∶32 (g·mL-1)。在此条件下酶解120 min,石花菜粗多糖的提取率可达15.98%。     

纤维素酶法提取浒苔多糖的工艺条件

实验研究了纤维素酶法提取浒苔多糖的工艺条件 ,通过单因素试验和正交实验 ,确定了最适提取工艺条件为 :提取时间为 2 .5h ,温度为 4 0℃ ,pH值为 5 .0 ,加酶量为 8% ,浒苔多糖的提取率为 2 0 .2 2 %。     

热稳定脱脂米糠蛋白质碳水化合物酶-蛋白酶分步提取法酶的筛选和条件优化

热稳定脱脂米糠(HDRB)中蛋白质已严重变性,采用常规方法很难提取其中蛋白质。本研究其目的在于评价不同碳水化合物酶和蛋白质水解酶组合在HDRB蛋白质提取的作用,以及利用响应曲面方法优化蛋白质提取组合条件。结果发现使用果胶酶P-Ⅱ处理HDRB,继后对其残渣进行蛋白酶P处理,蛋白质提取率可达到80%。采用中心成分回归设计进一步对果胶酶P-Ⅱ、蛋白酶P、水糠比、温度、pH、提取时间进行RSM优化,最大蛋白质提取率可达到89%。本研究为合理利用米糠蛋白及利用米糠蛋白制备功能性短肽提供了可靠的方法。     

小球藻和盐藻利用石油烃富集油脂的研究

利用单细胞分离和紫外诱变技术分别获得海水小球藻和盐生杜氏藻的生长优势株,将其分别接种于不同石油浓度的海水培养液中,利用紫外和荧光分光光度法分别测定培养液中带共轭双键的烃类化合物和芳烃的含量,利用索氏提取法测定胞内油脂含量。结果表明,石油浓度为1.5~10.0μg/ml的培养液中,小球藻和盐藻均能有效降解带共轭双键的烃类化合物,降解率分别为25.3%~35.5%和17.9%~24.0%,芳烃降解率分别为22.1%~30.2%和18.7%~26.2%;石油浓度为3.5μg/ml时,两种微藻对带共轭双键的烃类化合物和芳烃的降解效率均最大,小球藻的降解能力略好于盐藻;石油浓度为1.5μg/ml和3.5μg/ml时,两种微藻的胞内油脂含量分别占细胞干重的14.0%和25.5%,分别是对照组的1.5倍和1.2倍,浓度为3.5μg/ml时两种微藻的胞内油脂含量均最高。该研究为利用石油污染海水培养微藻使其富集油脂及今后开发微藻燃料奠定了基础。     

利用纤维素酶辅助提取紫菜藻红蛋白的研究

利用纤维素酶辅助破壁,显著提高了紫菜藻红蛋白的提取率.比较了纤维素酶结合反复冻融破壁、超声波破壁、自溶破壁等各种方法的提取效果,最终确定选用纤维素酶+反复冻溶破壁法提取藻红蛋白.并确定提取条件:添加纤维素酶50 μl/g干紫菜,于4 ℃、pH 7.0条件下作用2 h,反复冻融3次,在此条件下提取率达1.55%,纯度1.36.室温、光照、Fe2+、Zn2+和Cu2+等金属离子存在均会破坏藻红蛋白.     

小球藻藻渣替代豆粕对凡纳滨对虾生长性能和氮磷排放的影响

为探究小球藻藻渣替代凡纳滨对虾饲料中的豆粕对其生长性能及氮磷排放的影响,实验设计6种等氮等能饲料:使用6%、11%、16%、21%(A1、A2、A3、A4组)的藻渣分别替代饲料中5.5%、10.0%、14.5%、19.0%的豆粕,使用8%的藻渣替代饲料中5.1%的鱼粉(B组)和不使用藻渣的对照组。用上述6种饲料饲喂初始体质量为(5.02±0.73)g的凡纳滨对虾45 d。结果发现,存活率A3组显著低于对照组;增重率和特定生长率A2组和A4组与对照组差异不显著,其他各组显著低于对照组;饲料系数A3组显著高于对照组,其他各组无显著性差异;蛋白质效率A3组最低,B组其次,其他四组无显著性差异。肌肉鲜样中蛋白质含量组间无显著性差异;对照组总磷含量最低,A4组最高。肌肉总氨基酸和总必需氨基酸呈现先上升后下降的趋势,A2组含量最高;总非必需氨基酸A1、A2和A4组显著高于对照组,其他组与对照组无显著性差异。肠道中,除A1组外,其他各组蛋白酶活力显著低于对照组;脂肪酶A2组显著高于对照组;淀粉酶A4组显著低于对照组。肝胰脏中,蛋白酶活力A1组最低,其他组与对照组差异不显著;5个实验组脂肪酶活力均显著高于对照组,且A3组最高;淀粉酶除A3组外,其他各组显著低于对照组。耗氧率各组间差异不显著;排氨率呈先上升后下降的趋势,A3组最高。各替代组排放率均不高于对照组;氮排放率A3最高,其他组均不高于对照组。研究表明,小球藻藻渣可以部分替代凡纳滨对虾饲料中的豆粕,当其用量为11%时,可使豆粕的用量从19.0%降至10.0%而不影响凡纳滨对虾的生长和氮排放,并降低磷排放。     

铜藻的褐藻糖胶、褐藻淀粉和褐藻胶的分离及提纯

本文研究了从铜藻中分离提取褐藻糖胶、褐藻淀粉和褐藻胶的方法。用稀盐酸溶液加温搅拌提取藻粉后，在提取液中含有褐藻糖胶和褐藻淀粉，可加乙醇至50％和80％分别将其沉淀出来。藻渣含有褐藻酸钠，可加温加碱而制备出。并用正交实验设计求出提取条件中的温度、pH和时间的最适配比。对于褐藻糖胶的提取，以温度70℃、时间2小时和提取液pH为4时最适。对于褐藻淀粉的提取，以温度70℃、时间1小时和提取液的pH为2时较优。本文还对粗褐藻糖胶和褐藻淀粉的提纯进行了研究，证明二者均可用酒精分级沉淀法处理而得到纯品，不需要采用较复杂的季胺盐法和离子交换树脂法。本工作证实铜藻是我国褐藻中含有三种多糖的较好藻种，从中可提褐藻糖胶3．5%，褐藻淀粉3．1％和褐藻酸钠17．8％。     

提取方法对淡水鱼油提取率及品质的影响

以白鲢(Hypophthalmichthys molitrix)内脏为原料,采用复合蛋白酶(Protemax)水解法提取鱼油,研究酶解条件和提取方法对鱼油提取率、品质及脂肪酸组成的影响,以获取高品质的鱼油制品.结果表明:提取方法和条件对鱼油的提取率、酸价及过氧化值(POV)均有明显影响;采用复合蛋白酶水解法提取鱼油时,其适宜的条件为酶解起始pH 7.5,酶解温度50 ℃,酶用量2 000 U/g粗蛋白,酶解时间3 h,鱼油的提取率达到85.67%,鱼油品质较好.复合蛋白酶水解法和碱性蛋白酶(Alcalase)水解法的提取率高于稀碱水解法,且复合蛋白酶水解法得到的n-3系列多不饱和脂肪酸含量更高.     

单胞藻饵料强化对太平洋纺锤水蚤营养成分的影响

采用生化手段对舟山附近海域中浮游桡足类夏季优势种—太平洋纺锤水蚤(Acartia pacifica)进行营养成分测定,比较分析两种单胞藻饵料小球藻(Chlorella sp.)和三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)对其营养价值的影响。结果表明,太平洋纺锤水蚤在投喂三角褐指藻和投喂小球藻后,其体内粗蛋白湿重含量分别为(6.51±0.46)%和(5.21±0.98)%,比对照组(2.44±0.63)%显著上升(P0.05);投喂三角褐指藻后太平洋纺锤水蚤粗脂肪湿重含量(0.25±0.03)%显著上升(P0.05),投喂小球藻后粗脂肪湿重含量(0.15±0.03)%显著下降(P0.05);但总糖和灰分湿重含量变化不明显(P0.05)。本研究检测出太平洋纺锤水蚤体内共含17种氨基酸,其中鱼类必需氨基酸(EAA)9种,非必需氨基酸(NEAA)8种,对照组与投喂两种饵料后太平洋纺锤水蚤中EAA含量均较高,干重含量为(47.56±0.04)%~(49.84±0.07)%;检测出太平洋纺锤水蚤共含21种脂肪酸,投喂三角褐指藻后太平洋纺锤水蚤的DHA和EPA干重含量之和最高(28.00%),其次为投喂小球藻(21.51%),均高于对照组(9.77%),而对照组干重(9.77%)也仍高于强化后轮虫DHA和EPA干重含量(0.8%)和强化后卤虫DHA和EPA干重含量(8.40%)。通过本实验发现,自然状态下的太平洋纺锤水蚤DHA和EPA含量较高,营养价值高,而投喂后三角褐指藻后太平洋纺锤水蚤营养价值明显增加,表明人工培养条件下太平洋纺锤水蚤具有作为水产经济动物活体开口饵料的潜在开发价值。     

海带硫酸酯多糖的酶法提取工艺条件

实验研究了纤维素酶提取海带硫酸酯多糖的工艺条件,通过单因素实验和正交实验,确定了最佳提取工艺条件为:粒度80~100目,固液比1∶50,提取时间4h,酶加入量60g/kg,提取率为5.641%,是热水提取工艺的1.93倍。     

拟除虫菊酯类农药灭扫利对3种海水单胞藻生长的影响

为了评估拟除虫菊酯类农药(甲氰菊酯)对藻类的毒性作用,筛选出合适的敏感藻种用于海水池塘水质农业污染监测,研究了不同浓度的灭扫利(20%甲氰菊酯)对3种海水单胞藻,即蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)、盐生杜氏藻(Dunaliella salina)、强壮前沟藻(Amphidinium carterae)的毒性效应。本研究采用8个不同浓度梯度的灭扫利评估暴露7 d后3种藻类的密度变化,计算半抑制效应浓度(EC_(50))。结果表明:灭扫利对3种藻类的毒性均随着时间的延长逐渐降低,蛋白核小球藻和盐生杜氏藻在0~72 h时藻密度随灭扫利浓度增加而明显减少,强壮前沟藻在0~48h时藻密度随灭扫利浓度升高而降低。灭扫利对蛋白核小球藻24、48、72和96 h的半抑制效应浓度(EC_(50))分别为2.6、2.9、2.8和7.6 mg/L;对盐生杜氏藻别为2.6、4.1、4.8和16.8 mg/L;对强壮前沟藻分别为4.1、4.8、7.0和6.9mg/L。由此得出灭扫利对3种藻毒性敏感程序依次为蛋白核小球藻盐生杜氏藻强壮前沟藻。按照农药对藻类的毒性等级标准划分:灭扫利对蛋白核小球藻、盐生杜氏藻和强壮前沟藻均为中等毒性农药。因此,在海水养殖池塘中,以灭扫利作为杀藻剂对蛋白核小球藻和盐生杜氏藻具有较大影响,对强壮前沟藻的影响较小。本研究将为确定海水养殖池塘中灭扫利杀藻浓度和筛选农药污染指示藻种提供参考。     

蚬精饮料的工艺技术研究

本文探讨了酶解法提取蚬多糖的影响因素和工艺条件以及蚬多糖辅以枸杞提取液研制蚬多糖饮料工艺。以加酶量、酶解时间、料液比为考察因素,L9(34)进行正交实验设计,以酶解时间90 min、加酶量1.5%、料液比1∶6、酶解温度55℃、p H7.5的最佳工艺条件得到的蚬粗多糖的提取率为312.6 mg/100 g;以感官评价为综合评价指标,通过正交法配比确定了以蚬多糖提取液(4.2 mg/m L)45 m L、枸杞提取液9 m L,香料提取液0.3%为最佳配方,具有蚬汤固有滋、气味,鲜咸适口,爽口宜人,弱腥味的蚬精饮料。     

响应面法对缢蛏粗多糖提取工艺的优化

以秦皇岛海域的缢蛏为原料,通过不同提取方法的比较,确定超声辅助酶解提取法为较优的多糖提取方法,并通过响应面法对缢蛏多糖提取工艺进行优化。试验结果表明,原料超声预处理30min后再进行酶解提取,在添加3.99%的木瓜蛋白酶、50.9℃、酶提8.94h条件下缢蛏多糖提取量达9.41mg/g(鲜)。该方法对研究海水贝类多糖功能性产品原料的选取及产品的开发与应用有重要意义。     

藻—溞系统对凡纳滨对虾养殖水体调控效果的研究

取5000 mL灭菌后的凡纳滨对虾养殖尾水于5000 mL高压灭菌的烧杯中,分为10组,分别为蛋白核小球藻组(C1)、蛋白核小球藻+大型溞组(C2)、衣藻组(C3)、衣藻+大型溞组(C4)、隐藻组(C5)、隐藻+大型溞组(C6)、蛋白核小球藻+衣藻组(C7)、蛋白核小球藻+衣藻+大型溞组(C8)、衣藻+隐藻组(C9)、衣藻+隐藻+大型溞组(C10),每个处理组设3个平行。各藻种原始藻液25 mL,接种初始密度为1×10^( 8) 个/mL,大型溞密度为1个/L。试验烧杯置于25 ℃、3000lx和14L∶10D光暗比的培养箱内常规培养。每间隔3 d的10:00测定溶液的pH、溶解氧、总氮、氨氮、硝态氮、亚硝态氮、总磷和叶绿素a等水质指标,研究不同藻—溞组合系统对凡纳滨对虾养殖水体净化效果及其生长的影响。试验结果显示,各处理组藻类及大型溞均可正常生长,且藻—溞组合系统具有较好的水质净化调控效果,尤其是蛋白核小球藻+衣藻+大型溞组,至试验结束时其硝态氮、亚硝态氮和氨氮的去除率分别为82%、77%和99%;混合藻生长速度要低于单一藻培养,其中蛋白核小球藻组和衣藻组微藻的相对生长速率最高,分别为27.7%和26.9%;且蛋白核小球藻最有利于大型溞的生长繁殖,至试验结束时由5个增至88个,其次是衣藻,增至80个,而隐藻最差,仅增至59个。培养初期,大型溞的扰动作用能够促进藻类的生长,随着大型溞数量的增多,大型溞的牧食压力能够阻止藻密度过密,从而能够长久维持有益藻相的稳定。在本试验研究条件下,接种蛋白核小球藻、衣藻以及大型溞最适于养殖水环境调控,维持藻相稳定。