乐昌含笑不同类型鉴定的ISSR-PCR分析

利用inter -简单重复序列 (ISSR)标记对乐昌含笑 6种类型的遗传变异进行了研究 ,从 30个引物中筛选出 12个多态性引物用于正式扩增 ,共扩增出 134条DNA带 ,其中多态性DNA带 6 7条 ,占 5 0 % ,平均每个引物扩增的DNA带的数目为 11 16 7条。其中引物ISSR16、ISSR19能区分全部类型。引物ISSR16、ISSR19和ISSR2在不同的类型中扩增出了一些特有条带 ,对乐昌含笑类型和品种鉴定以及检验品种的真实性方面非常有价值。本研究对ISSR分析技术的关键步骤进行了讨论 ,并利用DNA扩增结果对供试类型进行了聚类分析     

欧美杨107木质素生物合成酶CCR基因的克隆及其鉴定

木质素作为草类饲料消化性的限制因子,直接影响饲料的利用率,而CCR是木质素生物合成关键酶之一。从正在分化的2a生欧美杨107次生木质部RT-PCR扩增出的基因片段,与pMD20-T载体连接,重组质粒经限制性内切酶酶切、特异引物PCR扩增和测序鉴定。结果表明该扩增片段长为961bp,含一个编码301氨基酸的完整开放阅读框,其核苷酸序列与Leple等发表的白杨杂种Populus trichocarpa CCR的cDNA序列(AJ224986)同源性达到98.2%,并且反向插入到pMD20-T载体,因此构建了CCR的反义大肠杆菌表达载体,为后续的基因操作打下基础。该基因序列已提交国际核苷酸序列库,登录号为AM921698。     

基于CODEHOP克隆杉木种子14-3-3基因片段

对于未测序的物种,利用常规的引物设计很难扩增出蛋白质组获得的蛋白质基因。利用CODEHOP设计杉木种子14-3-3蛋白质的简并引物来进行反转录PCR,从杉木未成熟的种子中扩增出1 000 bp左右的产物。将PCR产物构建p MD-19Vector载体上并转化JM109菌感受态细胞中,菌落PCR扩增测序。结果显示,利用CODEHOP方法设计简并引物扩增的目标片段的大小及序列与预期的一致。这将为杉木其他蛋白质基因的克隆和研究提供参考。     

适于草果遗传多样性分析的RAPD引物筛选

以云南省文山州西畴县和德宏州陇川县的12株草果优良无性系为材料,利用RAPD标记技术,选用192个RAPD随机引物,对草果进行PCR扩增,并用UPGMA法对RAPD引物扩增条带进行聚类分析,计算其遗传相似系数,以期筛选出适用于草果遗传多样性分析的RAPD有效引物。实验共筛选出21个条带清晰、多态性丰富并具有可重复性特点的有效引物。21个引物在实验选用的12份样品中共扩增出177条DNA带,其中多态性带数为119条,占扩增总带数的67.2%,每个引物平均扩增出8.4条带。结果表明,12份草果样品聚为A组和B组,其中A组又分为两个亚组,聚类结果与所选用材料的地理来源基本一致,这也说明该研究所筛选得到的21个RAPD引物适用于草果的遗传多样性分析。该研究为应用RAPD标记技术对草果进行遗传多样性分析等研究奠定了基础。     

14个油茶良种遗传多样性的SRAP分析

对14个油茶良种进行SRAP标记(序列相关扩增多态性)的遗传多样性分析。采用改良CTAB法提取的油茶叶片基因组DNA为模板,利用优化的SRAP-PCR反应体系,从16个正向引物和20个反向引物中筛选出条带特异、多态性好、稳定性高的8对引物组合。利用这些引物组合对14个油茶良种扩增出65条清晰可重复的条带,其中22条是多态性条带,多态性条带百分率为33.85%。通过生物学软件对所得数据进行遗传学分析,计算出遗传相似系数,绘制出分子聚类图,为油茶良种的后续分子鉴定及分子育种提供了科学基础。     

适用于厚朴的SRAP反应体系的建立与优化

利用正交试验L16(45),结合单因素试验对厚朴相关序列扩增多态性(Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)标记反应体系的5个因素(Mg2+,dNTPs,引物,Taq酶和模板DNA)进行优化试验,结果表明:各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小依次为:dNTPsTaq酶模板DNAMg2+引物;筛选出各反应因素的最佳水平,建立厚朴SRAP-PCR反应的最佳体系(25μL)为:Taq酶1.5 U,Mg2+1.8 mmol.L-1,模板DNA100 ng,dNTP 0.24 mmol.L-1,引物0.40μL。试验表明,该体系重复性好、稳定性强。     

普陀樟SRAP-PCR反应体系的建立

以舟山群岛的普陀樟（Cinnamomum japonicum var.chenii）新鲜叶片为实验材料,采用L16（45）正交试验设计,对影响普陀樟SRAP-PCR反应的Mg2+浓度、dNTPS、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA用量5因素组合进行了筛选。结果表明：适于普陀樟的SRAP-PCR反应体系（20μL）为2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、1.5 U Taq DNA聚合酶、0.4μmol/L引物、10 ng模板DNA、2μL 10×PCR buffer,该体系位点清晰,扩增稳定;利用该反应体系从100对SRAP引物组合中筛选出多态性好的引物24对。     

诺丽Actin基因片段克隆及实时荧光定量PCR方法的建立

为了解决诺丽实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测中无内参基因的现状,根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以诺丽果实总RNA反转录成c DNA为模板,进行PCR扩增,扩增出的基因片段克隆到p MD-18T载体,阳性克隆经PCR鉴定后测序。序列结果表明:该片段长393 bp,编码131个氨基酸;所得序列与麦蓝菜actin 1有最高的一致性(96%)和相似性(98%)。q RT-PCR结果表明,诺丽Actin基因在诺丽的各个组织、果实不同发育时期都能稳定表达,且表达水平基本一致,适合在诺丽基因表达研究中作为内参基因。     

南苍术与苍术素相关的ISSR-SCAR分子标记筛选

为了探索鉴别茅山地区野生南苍术中高苍术素含量植株的分子学方法,为快速筛选高苍术素含量的植株提供理论依据,在茅山地区野外采集30株南苍术,提取根茎中挥发油,根据液相色谱法测定的挥发油中苍术素含量,筛选出5个高含量和5个低含量的单株,分别构建高含量和低含量植株DNA混合池,用于南苍术与苍术素相关的ISSR-SCAR标记研究。结果显示,在所选的29条ISSR引物中,引物ISSR-846(5’-CACACACACACACACART-3’)可以在苍术素含量高的南苍术中扩增出片段长度为948 bp的特异性条带。针对该特异性条带的序列,设计了正向引物(5’-AAGAGATCATTGGTATTAAAATTAAGTGTTATTAGTAG-3’)和反向引物(5’-CATAGATTCAATGGCAATCCTCACATCAACTTCAGATTCA-3’),验证发现,设计的ISSR-SCAR引物仅能在茅山南苍术高苍术素含量个体中扩增出条带,其他含量个体均未扩增出条带。认为本研究筛选的位点特异性引物,可用来快速鉴别高苍术素含量的南苍术植株。     

刺槐AFLP分析体系的建立与优化

以10份刺槐种质资源为试材,通过对影响AFLP反应体系关键因素的优化,建立了刺槐AFLP分析的反应体系,即15ng/μL模板DNA在37℃下双酶切(MseI、EcoRI各0.15U/μL)2h,0.075U/μL T4DNA连接酶连接12h,连接产物、预扩增产物稀释10倍后扩增效果最佳。并利用该体系筛选出引物E+3/M+3,构建了刺槐种质资源的AFLP指纹图谱。     

SPOT5卫星遥感影像解译方法

山西省森林资源二类调查首次大规模、全方位应用"3S"技术,并采用法国最新的高分辨率SPOT 5卫星影像数据。作者就在二类调查中如何对SPOT 5影像进行解译,如何建立解译标志提出一些可行的方法。     

法国Spot5卫星遥感影像自动分类研究

在山东省林业上首次应用Spot5遥感影像进行了自动分类研究,有林地分类精度达到88.5%.     

基于RS的京津风沙源工程监测方法研究

结合SPOT5遥感数据的特点,根据京津风沙源工程监测的需要,利用SPOT5卫星遥感图像作为信息源,采用计算机分类和人机交瓦式解译的方法,提取出延庆县张山营镇的京津风沙源工程区,并与二类调查数据对比分析,通过抽样进行实地调查验证.结果表明,用该方法高效、快捷、科学并能取得较高的精度,为遥感数据辅助开展京津风沙源工程监测提供了科学依据.     

采用Pci软件处理遥感影像研究

为了提高森林资源二类调查质量,辽宁省改变传统的地形图调绘方法,利用法国Spot5 分辨率为10 m多光谱数据与分辨率2.5 m全色数据进行融合后的遥感影像作为二类调查调绘的图面资料。利用Pci图像处理软件对spot5 10 m、2.5 m影像进行几何精校、正射校正(orthoengine)、融合处理(xpace)以及对融合后的遥感影像增强、拉伸、亮度、对比度的调整完成spot5的影像处理过程。     

多源遥感数据融合及其对植被识别的影响

融合数据因其综合了不同遥感数据源的优势,充分协同利用了多源信息,被广泛应用于各个领域。SPOT-5遥感卫星集合了多重分辨率、多种遥感器于一身,该特点使得它在资源环境调查和规划与动态监测、地图制图与更新等领域得到广泛应用。本文从SPOT-5数据的自身融合和SPOT-5与ETM+数据融合两方面着手,利用遥感应用中常用的HIS变换、Brovey变换、HPF变换,探寻有利于植被识别的融合方法。结果表明:1)HPF变换对目视判读最为有利,依次是Brovey变换法、HIS变换法;2)SPOT-5数据自身融合的视觉效果优于SPOT-5与ETM+两种数据融合的;3)将植被分为5种类型,对SPOT-5自身融合影像进行目视判读,再通过实地验证,得出HPF变换、Brovey变换、HIS变换的加权精度分别为:82.99%、79.01%、71.02%。     

侧视角和DEM精度对SPOT5正射影像的影响分析

随着航天遥感技术和信息技术的飞速发展,高质量的航天遥感信息源能为森林资源调查提供分辨率高、质量好的影像资料,为快速掌握区域内的森林资源现状、建立地理信息系统、监测森林资源动态变化和林业经营管理活动、科学地进行森林资源管理提供了快捷的手段.     

QuickBird和Spot5在县级森林资源调查中应用的比较研究

在县级森林资源调查中,利用高分辨率的遥感影像数据进行区划判读已经成为数字林业发展的一种需要,文章通过运用QuickBird和Spot5两种遥感数据在森林资源调查中进行区划判读,分析比较了两者区划判读的结果,对利用遥感数据进行森林资源调查的区划判读工作提出了几点建议。     

5-硝基糠醛二醋酸酯的合成及其结构测定

本文研究了由糠醛制备5-硝基糠醛二醋酸酯的新方法,发现了熔点分别为91-92℃和105-106℃两种不同晶型的5-硝糠醛二醋酸酯,并测定了它们的晶体结构。     

GDEM在SPOTS林业遥感影像正射纠正中的应用研究

以一景地貌类型为低山、丘陵、岩溶等的SPOTS遥感影像为实验影像,基于GEOIMAGE软件,应用AsterGDEM对SPOTS遥感影像进行正射纠正研究.评估其正射纠正精度与质量,结果表明,应用GDEM对SPOTS遥感影像进行正射纠正,精度符合林业应用标准.     

邻菲罗啉系列衍生物的表征及分析

邻菲罗啉及其衍生物被广泛用作配体,用于制备稀土金属螯合物而研制有机电致发光材料.合成了5-硝基-1,10-邻菲罗啉、5-氨基-1,10-邻菲罗啉、5-丙烯酰胺基-1,10-邻菲罗啉系列邻菲罗啉衍生物,利用熔点、红外、紫外、核磁共振氢谱、质谱等手段对合成的邻菲罗啉系列衍生物进行分析和表征,确证了它们的结构.