培养液磷含量和pH对鸡离体小肠磷吸收的影响

探讨了培养液不同pH和磷含量对鸡离体小肠磷吸收的影响,为体外培养鸡小肠合理选择培养液pH和用外翻肠囊法评定饲料有效磷时合理选择培养液磷浓度提供参考依据.采用2个单因子随机试验,每个因子4个处理.48只30日龄体重相近的三黄肉公鸡的十二指肠、空肠和回肠肠囊随机分配到8个处理中,每个处理6个重复,每个重复1个肠囊,40℃培养50 min.结果表明:培养液pH和磷含量对鸡离体小肠的磷吸收量有明显影响,pH 5.0～7.0时,肠囊的磷吸收量线性增加,与pH 5.0比较,pH 7.0时,肠囊的磷吸收量极显著增加(P＜0.01),pH 8.0时,肠囊的磷吸收量开始降低;磷含量在50～200μg/ml时,肠囊的磷吸收量与磷含量呈正相关,当磷含量增加到400μg/ml,十二指肠肠囊和空肠肠囊的磷吸收量开始降低.结果提示:用外翻肠囊法评定饲料有效磷时,鸡离体小肠培养液pH以6.0～7.0最佳;培养液中磷含量不能超过200 μg/ml.     

大球盖菇液体培养生育条件研究

为了给大球盖菇液体菌种的应用推广提供科学的技术参考,用摇床培养方法研究了大球盖菇液体培养的最佳生育条件,结果表明:碳源以蔗糖为最好,氮源以硫铵为最佳,碳氮比值以24为最宜.培养基pH值在4.5～7.5,最适pH值在5.5～6.5.液体培养基pH值对茵丝生长影响较大且最适pH值与固体培养基不同,培养时应特别注意.大球盖菇茵丝生长对培养液pH值影响不大,培养时不必考虑培养液的pH值变化.250mL.锥形瓶中装量在40～80mL.茵丝生长较为适宜.转速120r/min为佳.制种或以收获茵丝为目的的培养以培养12d为宜.     

温度和pH对黄金鲈消化酶活力的影响

【目的】研究温度和pH对黄金鲈消化酶活力的影响。【方法】采用酶学分析方法,研究不同温度和pH对黄金鲈蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力的影响。其中,蛋白酶采用福林-酚法测定,淀粉酶和脂肪酶分别采用淀粉酶试剂盒和脂肪酶试剂盒测定。【结果】在设定的温度和pH范围内,黄金鲈各组织器官消化酶的活力均随着温度和pH的升高呈先升高后下降的变化趋势。其中,胃和肝脏蛋白酶的最适温度为40℃,前肠、中肠和幽门盲囊蛋白酶的最适温度均为50℃;胃、中肠、肝脏淀粉酶的最适温度均为35℃,前肠和幽门盲囊的淀粉酶最适温度为30℃;各组织器官脂肪酶活力最适温度均为40℃。黄金鲈胃、幽门盲囊、前肠、中肠和肝脏蛋白酶的最适pH分别为2.5,8.0,9.0,9.0和6.0,淀粉酶的最适pH分别为6.0,6.0,7.0,7.0和6.0,脂肪酶的最适pH分别为6.0,7.0,7.0,7.0和7.0。黄金鲈不同组织器官的消化酶活力不同。在最适温度下,不同组织器官蛋白酶活力顺序为幽门盲囊前肠胃中肠肝脏,淀粉酶的活力顺序为肝脏前肠中肠幽门盲囊胃,脂肪酶的活力顺序为肝脏胃前肠幽门盲囊中肠。【结论】黄金鲈消化酶活力的最适温度均高于其生长的最适水温。胃蛋白酶在强酸性时活力较高,肝脏蛋白酶活力在偏酸性条件下较高,肠道和幽门盲囊蛋白酶活力在偏碱性时较高;淀粉酶活力在中性偏酸性时较高;脂肪酶在中性时活力较高。     

人参方对血虚小鼠抗疲劳作用及其机制研究

研究人参方对血虚模型小鼠的抗疲劳作用及其机制。采用化学药物损伤法,通过环磷酰胺造成小鼠血虚模型,以血象(白细胞数目、红细胞数目、血红蛋白含量)、负重游泳时间、爬杆时间、血清尿素氮含量、肝糖原含量、乳酸脱氢酶活力、肌肉组织ATP酶活力、运动后血乳酸含量为指标,考察人参方对血虚型小鼠的抗疲劳作用。人参方能明显升高血虚小鼠红细胞总数和血红蛋白含量;中、高剂量组能显著延长小鼠负重游泳时间和爬杆时间、降低血清尿素氮含量、降低运动后血乳酸含量、升高肌肉组织ATP酶活力和血清乳酸脱氢酶活力;但组方低、中、高剂量均对小鼠肝糖原含量无明显影响。人参方能提高血虚型疲劳小鼠的抗疲劳能力。其机制可能是通过降低血清尿素氮,提高血清乳酸脱氢酶活力,从而降低血乳酸的生成,提高肌肉组织ATP酶活力,并没有明显提高肝糖原的储备量或减少其消耗。     

大口黑鲈主要消化器官蛋白酶活力的研究

从酶学分析角度研究了大口黑鲈Micropterus salmoides主要消化器官蛋白酶的活力分布,以及不同温度、pH和底物浓度条件下其胃、幽门盲囊、肠中蛋白酶的活力变化。结果表明:不同消化器官中蛋白酶的活力存在明显差异,由高到低依次为胃>幽门盲囊>前肠>中肠>后肠;蛋白酶的活力随温度和pH变化呈现一定的规律性,不同消化器官蛋白酶的最适温度、pH依次为胃(40℃,2.4)、幽门盲囊(55℃,7.6)、肠(45℃,8.0),蛋白酶的最适温度高于体温,胃蛋白酶在强酸环境下活力最大,幽门盲囊与肠在中性和偏碱条件下活力最大;蛋白酶的活力与底物浓度有关,最大活力的底物酪素浓度依次为胃20 g/L、幽门盲囊20 g/L、肠10 g/L。     

不同温度及时间对白及种子萌发的影响

研究白及种子不同温度及处理时间对其萌发及原球茎生长影响。25℃为对照,白及种子分别用40～60℃不同时间(5～60min)处理,在纯净水、光照下培养15d后对萌发及生长进行观察。结果显示:培养15d时对照处理的种子萌发率达100%,原球茎直径约为0.38mm; 40℃处理5～60min对白及种子萌发率和原球茎生长无显著影响; 50℃、55℃、60℃处理时间越长,萌发率越低; 60℃下10min和55℃ 30min种子萌发率为0%;50℃≥35min、55℃≥15min、60℃≥5min对原球茎生长有显著抑制作用,50℃(15min和20min)、55℃5min对已萌发种子的原球茎生长具有促进作用。一些处理组合可以作为其它兰科植物种子处理的参考。     

pH值和甘油平衡时间对藏獒精液冷冻保存活力的影响

以6只2~4岁公藏獒为试验动物,研究了不同pH梯度(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5)稀释液和不同甘油平衡时间(10、20、30、40、50、60、70、809、0 min)对藏獒精液冷冻保存活力的影响.结果表明:藏獒精子在pH为6.5的稀释液中有较高冷冻前和冷冻后活力;甘油平衡时间对藏獒精液活力也有较大影响,以甘油平衡时间为20 min时藏獒精液的冻后活力最高.     

木薯茎尖包埋-玻璃化法超低温保存及植株再生

主要探讨装载时间、蔗糖浓度、预培养时间和PVS2处理时间对木薯种质超低温保存后成活率的影响.结果表明,长约1.5 mm的木薯茎尖用海藻酸钙包埋后,在含有2 mol.L-1甘油和0.4 mol.L-1蔗糖的装载液装载30～40 min,然后在含有0.5mol.L-1蔗糖的改良MS培养基上预培养2 d,0℃下PVS2处理4 h后快速投入液氮(LN),1 h后取出,在40℃水浴中化冻90 sec,用含有1.2 mol.L-1蔗糖的改良MS培养液洗涤20 min,接种于恢复培养基中(MS 0.02mg.L-1NAA),暗培养3～5 d,转移至正常光下,最高成活率接近70%;再生植株生长和分化正常.     

碱裂解法小量制备质粒DNA应注意的问题

质粒DNA的小量制备是基因克隆中的常规操作 ,可快速提取质粒DNA进行各种鉴定或进一步操作 ,本文就碱裂解法谈一下质粒DNA提取操作中应注意的问题。1)无菌条件下挑取琼脂培养板上的单菌落 ,移至 2～ 5ml,含适当抗生素的LB培养液中 ,37℃培养 8～ 10h为最适。2 )取 1 5ml培养液至离心管 12 0 0 0r/min离心 30s,离心机启动时间不应计算在此 30s内。3)弃上清 ,要使菌体和管壁上不残留液体 ,旨在去除细菌生长过程中代谢废物和脱落的细胞壁 ,否则会影响质粒的质量和内切酶酶切效果。4 )溶液Ⅰ、Ⅲ在使用前要预冷。5 )溶液Ⅱ现用现配 ,加溶液…     

新疆鲜马奶粉的抗疲劳作用研究

[目的]探索新疆鲜马奶粉抗疲劳作用。[方法]192只雄性SPF级昆明种小鼠被随机分为正常对照组、新疆鲜马奶粉高剂量组、新疆鲜马奶粉中剂量组、低剂量组,连续灌胃45 d后分别测定游泳时间、爬杆时间、血清尿素氮含量、血乳酸含量、血乳酸脱氢酶活力和肝糖原含量。[结果]新疆鲜马奶粉高剂量组小鼠游泳时间为(28.6±0.69)min,较正常对照组明显延长;新疆鲜马奶粉高剂量组爬杆时间为(36.8±0.12)min,较正常组明显延长。新疆鲜马奶粉高剂量组肝糖原含量为(28.24±3.36)mg/g,较正常对照组明显增加,血清尿素氮含量为(2.69±0.36)mmol/L,较正常对照组显著减少(P0.05)。血清乳酸脱氢酶活力为(548.33±58.8)U/L,较正常对照组明显提高。血乳酸含量为(28.84±5.64)mmol/L,较正常组明显减少。[结论]新疆鲜马奶粉具有抗疲劳作用。     

白桦木材蓝变生防菌(Bacillussubtilis)B26液体发酵条件的优化

采用单因素试验法和正交试验法对生防菌株B26液体发酵条件进行了优化,得到最适发酵培养基配方为:蔗糖1.5％、蛋白胨1.5％、CaCl2 0.15％、MgSO4·7H2O 0.20％;采用单因素试验法对其培养条件进行优化,确定最适培养条件为:温度35℃、初始pH值7.5、锥形瓶体积为250 mL,发酵液为120 mL,接...     

气动生物反应器油松胚性愈伤增殖体系的建立研究

目的大量具有活性的胚性愈伤组织的增殖可为油松体细胞胚胎发生研究和植株再生提供充足的材料,锥形瓶悬浮培养体系下胚性愈伤组织的增殖率低且易酸化坏死,建立气动生物反应器油松胚性愈伤增殖体系可促进油松胚性愈伤组织的增殖。方法本研究以油松愈伤组织为材料,利用L₉（34）正交试验设计,探究了生物反应器中愈伤接种量、新旧培养基的配比和激素浓度3个因素对愈伤组织增殖的影响,建立了增殖体系。而后在相同条件下与锥形瓶悬浮培养进行对比。结果结果表明:气动生物反应器中每100 mL液体培养基内接种胚性愈伤10 g,2,4-D 0.2 mg/L,保留20%的旧培养基时能使胚性愈伤增殖率达到最高,可达216.18%;结论与锥形瓶悬浮培养体系相比,ALB系统在一周内胚性愈伤生长速度更快,为锥形瓶悬浮培养体系的3.15倍;显微观察显示增殖的胚性愈伤组织稳定且优质。该研究为基于油松体胚体系的大规模扩繁提供技术支持。      

具抑菌活性的诺丽内生真菌发酵条件的优化

为了研究发酵条件对诺丽内生真菌M2抑菌性的影响，笔者采用传统方法和ITS rDNA测序方法相结合，将本实验室筛选出的抑菌效果突出的诺丽内生真菌M2初步鉴定为棘孢曲霉（Aspergillus aculeatus）,在NCBI数据库中登录号为MK560191。通过单因素试验和正交设计对内生真菌M2进行发酵优化，筛选出最优发酵条件:（1）内生真菌M2优化后的培养基方案为200 g土豆煮沸30 min浸出液、葡萄糖20 g、硝酸钠5 g、磷酸二氢钾0.2 g、七水合硫酸镁0.2 g、1 000 mL双蒸水；（2）发酵条件为150 mL锥形瓶装液50 mL、温度25 ℃、培养基初始pH8、转速170 r·min?1。     

复合氨基酸螯合锌、锰对肉鸡生产性能的影响

选用1200只7日龄商品代AA肉用仔鸡,随机分成6个处理,每个处理4个重复,每个重复50只鸡,用3D复合氨基酸螯合锌、锰分别替代基础日粮中相应无机元素水平的0%,20%,40%,60%,80%,100%,研究其对肉用仔鸡生产性能、腿病发生率和死亡率的影响以及适宜替代比例。试验结果表明:饲粮添加复合氨基酸螯合锌、锰对肉仔鸡生产性能、腿病发生率和死亡率有一定的改善作用,与相应无机元素相比,饲养全期和相对增长率提高,其中试验组4(60%)和试验组5(80%)的体重增长率明显提高(P<0.05),其饲料转化率分别较对照组增加11.8%和11.0%。从本试验各项指标综合考虑,肉仔鸡饲料中3D复合氨基酸螯合锌、锰替代相应无机微量元素的适宜比例为60%。     

反相高效液相色谱法同时测定金银花中的绿原酸和木犀草苷方法的优化

[目的]研究反相高效液相色谱法同时测定金银花中的绿原酸和木犀草苷的优化色谱条件.[方法]采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷含量,并对色谱条件进行优化.[结果]最佳色谱条件为色谱柱Waters SunFireTMC18（4.6mm＆#215;150 mm,3.5 μm）、柱温40℃,流动相为乙腈-0.5％冰醋酸,梯度洗脱为0～15 min（10：90～20：80）、16 ～ 17 min（20：80 ～ 10：90）,流速1.0 ml/min,检测波长0～15 min 328 nm、16 ～ 17 min 350 nm.[结论]优化后缩短了测试时间,为金银花质量的快速检测提供参考依据.     

换气孔大小和培养瓶种类对甘薯脱毒苗生长的影响

研究了培养瓶的换气孔大小和种类对甘薯组培苗生长的影响,结果表明:换气孔直径为1.0 cm处理的甘薯地上部增殖生长及地下部根的生长均好于1.5和2.5 cm处理,未换气处理甘薯生长状态也良好,但地上部干物重不及1.0 cm处理.培养瓶种类影响甘薯组培苗的生长,三角瓶中甘薯苗地上部生长最佳,PC瓶内除了节数不如三角瓶外,地上部鲜、干物重与三角瓶处理无显著性差异,而根的生长PC瓶处理好于三角瓶处理,在柱状瓶内甘薯生长不良.     

发酵性丝孢酵母产生油脂条件的优化研究

通过摇瓶培养优化试验,对发酵性丝孢酵母菌体生长与产油脂相关影响因素进行了单因子试验,确定了发酵性丝孢酵母最佳生长及产脂条件:葡萄糖质量分数12%,碳氯比75,乙醇体积分数0.2%,接种量10%,发酵时间4 d,温度27℃,产脂培养基初始pH值5.8,震荡培养150 r·min~(-1),300 mL三角瓶装液量25 mL,优化后可得生物量31.26 g·L~(-1)发酵液,油脂含量60.20%,产油率迭15.81%.     

提取时间对鸡骨蛋白凝胶特性和蛋白二级结构的影响

【目的】研究提取时间对鸡骨蛋白(chicken bone protein,CBP)凝胶特性的影响,为利用鸡骨副产物制备食用凝胶提供参考。【方法】采用热压抽提法提取CBP,于4℃孵育制备CBP凝胶,测定不同抽提时间的抽提液中总固形物、粗蛋白、羟脯氨酸含量、蛋白质二级结构、分子量分布的变化,探讨抽提时间对CBP凝胶色差、凝胶强度的影响,并分析各指标之间的相关性。【结果】抽提时间显著影响鸡骨蛋白的提取率(P0.05),导致蛋白结构发生显著变化进而影响其凝胶特性。抽提时间从0—120 min,抽提液中总固形物、粗蛋白和羟脯氨酸含量均显著增加(P0.05);随着提取时间延长(40—120 min),蛋白发生显著降解,分子量10—30 k Da的肽段从40 min的59.82%降低到120 min的13.99%,分子量10 k Da的肽段从40 min的35.46%升高到120min的86.01%;提取时间延长引起蛋白发生部分程度变性,导致其二级结构改变,0—40 min时的CBP酰胺Ⅰ带由100%的α-螺旋组成,60—90 min时出现9.9%—17.6%的β-折叠结构,120 min时β-折叠全部降解;对CBP凝胶特性的分析表明,抽提时间为0 min时,鸡骨蛋白不形成凝胶,而抽提20、40和60 min时的凝胶强度无显著性差异,均优于90、120 min组;随着提取时间延长(20—120 min),提取液的透明度显著增加(P0.05),但40和60 min组的CBP制备的凝胶色泽最佳(P0.05);抽提时间(20—120 min)对凝胶持水性无显著影响(P0.05)。相关性分析表明,CBP中羟脯氨酸含量、CBP降解程度与凝胶特性显著相关(P0.05)。【结论】热压抽提时间对CBP凝胶特性有显著影响,综合考虑蛋白得率、凝胶色泽、强度等因素,40和60 min提取的鸡骨蛋白较适合制备凝胶。     

43-63日龄黄羽肉鸡锌需要量的研究

 【目的】研究日粮锌添加水平对黄羽肉鸡生长性能、抗氧化机能、免疫功能、组织锌沉积等的影响,探讨43—63日龄黄羽肉鸡的锌需要量。【方法】选用43日龄健康的快大型岭南黄羽肉公鸡1 080只,根据体重随机分成6组,每组6个重复,每个重复30只鸡。处理1(空白对照组)为基础日粮,锌水平为18 mg?kg-1,处理2、3、4、5、6分别在基础日粮上添加20、40、60、80、120 mg?kg-1锌。试验周期为21 d。【结果】在本试验条件下,日粮添加锌对鸡生长性能无显著影响(P＞0.05)。添加锌显著提高鸡血清GSH-Px、CuZnSOD、AKP活性(P＜0.05),显著增加血清GSH含量、血清及胫骨Zn含量、血清及肝脏MT含量(P＜0.05),其中添加60 mg?kg-1锌改善血清AKP活性和胫骨Zn含量效果最佳。日粮添加20—40 mg?kg-1锌显著提高鸡胸腺指数,添加20—80 mg?kg-1锌显著提高鸡法氏囊指数(P＜0.05),但日粮添加锌对63日龄鸡脾脏指数、肝脏CuZnSOD活性和胫骨灰分含量均无显著影响(P＞0.05)。【结论】仅考虑生长性能,玉米豆粕型日粮不需添加锌;以血清AKP活性、胫骨Zn含量为衡量指标,43—63日龄黄羽肉鸡日粮锌适宜水平为78 mg?kg-1。通过非线性回归模型估测日粮锌适宜水平分别为81、60 mg?kg-1。