紫外诱变对绿僵菌素生产的影响

利用金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae var.ansopliae MaQ10 菌株作为出发菌株,应用紫外线(UV)诱变其分生孢子和原生质体,分别测定了40个突变株的绿僵菌素产量.结果表明,出发菌株MaQ10的绿僵菌素A和B(DA和DB)产量分别为(106.81±9.55)和(29.53±2.70)μg/mL,分生孢子突变株的DA和DB平均产量分别为(45.05±7.77)和(10.83±1.05)μg/mL,原生质体突变株的DA和DB平均产量分别为(68.97±6.07)和(11.80±1.35)μg/mL;绿僵菌素产量最高的分生孢子突变株是 08 菌株,其DA达到(158.29±3.85)μg/mL,比出发菌株增产48.21%;产量最高的原生质体突变株是24菌株,其DA和DB产量分别达到(146.95±12.28)和(36.91±5.37)μg/mL,比出发菌株分别增产37.59%和25.11%.分生孢子诱变的DA和DB正突变率分别为15.00%和0,负突变率分别达到85.00%和97.50%;原生质体诱变的DA和DB正突变率分别为17.50%和5.00%,负突变率分别为70.50%和95.50%.原生质体诱变效果优于分生孢子诱变效果.另外,紫外线诱变不会改变DA与DB产量的正相关性.     

高效液相色谱—电化学法检测蜜蜂脑部单胺类神经递质及其酸性代谢产物含量

建立同时测定蜜蜂脑部神经物质左旋多巴(l-DOPA)、去甲肾上腺素(NE)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)和5-羟色胺(5-HT)的高效液相色谱—电化学检测(HPLC-ECD)法.采用Acclaim C18色谱柱,以磷酸二氢钠、辛烷磺酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸及乙腈的混合液为流动相,流速0.2 m L·min-1,进样量10μL,柱温38℃,检测电压300 m V.蜜蜂脑组织样品经高氯酸、焦亚硫酸钠和乙二胺四乙酸混合溶液去除蛋白,再由0.22μm滤膜过滤后上样检测.结果表明:脑组织中各待测神经物质线性回归方程相关系数均大于0.997,加样回收率平均值大于90%,日内、日间精密度指数RSD平均小于5.7%.经初步研究,意大利蜜蜂脑部l-DOPA、NE、DOPAC、DA和5-HIAA的含量分别为(0.232±0.107)、(1.288±0.630)、(2.555±1.201)、(0.574±0.233)、(0.393±0.123)ng·脑-1,中华蜜蜂脑部的对应物质含量分别为(0.331±0.162)、(0.894±0.395)、(2.819±0.974)、(0.636±0.255)、(0.353±0.163)ng·脑-1.     

罗布麻叶总黄酮提取物对抑郁大鼠脑内单胺类神经递质含量的影响

[目的]探讨罗布麻（Apocynum venetum L.）叶总黄酮提物抗抑郁作用的机理。[方法]采用大鼠慢性应激抑郁模型,利用液相色谱-质谱串联法测定大鼠脑内单胺类神经递质[去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）]的含量。[结果]慢性应激抑郁组动物组织内DA、5-HT和NE含量与正常组相比均极显著降低（P〈0.01）。罗布麻总叶黄酮提取物处理组大鼠脑中DA和NE含量与慢性应激抑郁组相比显著或极显著上升,且随着剂量的增大,这种作用更加明显;70.0 mg/kg罗布麻叶黄酮提取物处理与盐酸氟西汀（3.5mg/kg）效果一致;但罗布麻叶总黄酮提取物处理组大鼠脑中5-HT含量与慢性应激抑郁组相比没有明显变化,阳性对照药氟西汀显著增加了抑郁大鼠脑组织中DA、NE和5-HT含量。[结论]该研究证实了抑郁症发病的神经递质假说,同时发现罗布麻叶可以逆转抑郁大鼠脑内单胺类物质NE、DA含量的降低,这也可能是其抗抑郁作用的机理之一。     

不同树龄茶树套种滇龙胆对药材矿质元素含量的影响

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.)与不同树龄(3年、4年、5年、9年、12年和15年)茶树(Camellia sinensis)套种后其根、茎、叶3个部位及生长土壤中7种矿质元素(B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni和Zn)的含量。结果显示,滇龙胆中矿质元素平均含量高低顺序为Ca(5 238±2 111)μg/g、Fe(622±238)μg/g、Mn(379±301)μg/g、Cu(75±9.1)μg/g、Zn(46±13)μg/g、B(17±4.9)μg/g、Ni(5.6±3.1)μg/g,与土壤矿质元素含量变化趋势基本一致。根部的B、Ca、Fe、Mn、Ni元素在树龄15年茶树-滇龙胆套种后含量最高,分别为18、3 797、1 050、254、11μg/g,Cu、Zn元素在树龄12年的茶树-滇龙胆套种中含量最高,分别为244、38μg/g。相同营养器官不同树龄的茶树-滇龙胆套种后矿质元素含量具有差异,以根部的Cu、Mn元素含量差异显著,变化范围分别为19~244μg/g和79~254μg/g,分别相差12.8倍和3.2倍;树龄15年、9年的茶树-滇龙胆套种后茎部的Cu含量分别为177、11μg/g,相差16.1倍;树龄3年、5年的茶树-滇龙胆套种后叶部的Cu含量分别为325、11μg/g,相差29.5倍。不同树龄的茶树-滇龙胆套种后根部与土壤矿质元素的相关性以及生物富集系数不同,树龄15年的茶树-滇龙胆套种后根部对Ca、Cu、Mn、Ni、Zn元素的富集能力较强,生物富集系数分别达21.0、3.3、2.2、1.8和4.7。说明茶树复合种植可改变土壤矿质元素的分布,自身生物学特性与复合种植的生态环境共同影响了滇龙胆对矿质元素吸收与运输的能力。     

弓形虫感染对大鼠的学习记忆与脑单胺类神经递质含量的影响

探明弓形虫感染对大鼠的学习记忆及脑内单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的影响。取40只雄性SD清洁级(220±20)g成年大鼠随机分成4组,即高、中、低感染剂量的弓形虫腹腔感染组(2×107ml、2×105ml、2×103ml各2 ml)和腹腔注射灭菌生理盐水2 ml的正常对照组。感染后进行被动回避试验和Morris水迷宫试验,观察弓形虫感染对大鼠的学习记忆能力等行为学变化。行为学试验结束后,采用高效液相色谱电化学法检测各组大鼠脑内单胺类神经递质NE、DA、5-HT含量。结果表明:弓形虫感染对大鼠的记忆获得没有影响,但高、中剂量弓形虫感染使大鼠的记忆消失早于对照组(P0.05),低感染剂量对大鼠记忆消失无影响(P0.05);各感染组大鼠Morris水迷宫测试中逃避潜伏期均明显延长,其距离百分比明显降低(P0.05);高、中剂量弓形虫感染大鼠脑组织中的NE、5-HT显著降低(P0.05),而DA则显著升高(P0.05);低感染剂量大鼠脑内单胺类神经递质含量与对照组的差异不显著(P0.05)。因此,弓形虫感染可能通过影响脑内单胺类神经递质的合成而降低学习记忆能力。     

RP-HPLC法测定中华绒螯蟹主要组织中的恩诺沙星及其代谢产物

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定中华绒螯蟹肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢组织内的恩诺沙星、环丙沙星含量。结果表明,恩诺沙星和环丙沙星在四种组织中的平均回收率分别为70.5%±12.61%,70.25%±14.73%;日内精密度分别为3.27%±0.84%,2.14%±0.68%;日间精密度分别为5.38%±2.46%,3.48%±1.16%。恩诺沙星、环丙沙星的最低检测限分别为0.02μg/g和0.004μg/g。以10 mg/kg蟹体重剂量单次肌肉注射给药后,恩诺沙星在中华绒螯蟹肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢内的Tmax,Cmax分别为:1 h,4.323±0.56μg/g;1 h,6.042±0.72μg/g;3 h,2.381±0.43μg/g;3 h,2.101±0.29μg/g,各组织的药物消除半衰期(t1/2β)分别为:45.186 h,73.93 h,45.577 h,38.081 h。各组织中均能检测到环丙沙星,但含量均处较低水平,且代谢和消除起伏波动较大。本方法快速、灵敏、准确,适合于中华绒螯蟹组织中恩诺沙星、环丙沙星含量分析。     

哺乳仔猪外周血5-羟色胺的合成与代谢研究

[目的]探讨哺乳仔猪外周血5-羟色胺的合成与代谢随日龄变化的规律。[方法]选用15只0、5和15日龄的英系大白猪为试验动物,采用反相高效液相色谱——紫外检测法对其外周血血清中L-Trp、5-HT和5-HIAA的含量进行测定。[结果]仔猪初生时L-Trp的含量为（16.92±1.74）μmol/L,5日龄时为（59.94±10.88）μmol/L,15日龄时为（70.42±6.48）μmol/L;仔猪初生时5-HT的含量为（12.85±1.79）μmol/L,5日龄时为（4.81±2.05）μmol/L,15日龄时为（5.49±1.09）μmol/L;代谢产物5-HIAA在各日龄仔猪血清中均未检出。[结论]随日龄增加,哺乳仔猪外周血L-Trp的含量显著增加（P〈0.05）,而5-HT的含量与L-Trp-5-HT通路转化率在初生时最高（P〈0.05）,此后趋于稳定（P〉0.05）。     

不同基因型依兰资源光合特性及内源激素含量差异分析

本研究比较了2个不同基因型依兰光合特性及4种内源激素含量差异。结果表明:在450μmol/(m^2·s)下,科摩罗依兰净光合速率、气孔导度、胞间CO_2浓度和蒸腾速率分别为12.68±1.56μmol CO_2/(m^2·s)、0.25±0.11 mol/(m^2·s)、267.16±25.4μmol/mol和5.07±1.2 mmol/(m^2·s),泰国依兰分别为7.79±0.99μmol CO_2/(m^2·s)、0.28±0.07 mol/(m^2·s)、321.32±18.83μmol/mol和3.88±0.84 mmol/(m^2·s);科摩罗依兰生长素、赤霉素、脱落酸和独脚金内酯含量分别为0.43±0.03μg/g、0.38±0.26μg/g、0.74±0.01μg/g和23.43±8.99 ng/g,泰国依兰分别为0.12±0.07μg/g、0.84±0.28μg/g、0.45±0.03μg/g和13.18±0.65 ng/g;科摩罗依兰、泰国依兰2个依兰资源在光合特性及内源激素含量上存在显著差异。     

凉山州引进油橄榄品种初榨油品质分析

采用高效液相色谱法对凉山州引进油橄榄品种初榨油的多酚含量、α-生育酚含量、甾醇含量进行分析,采用气相色谱-质谱法(GC-MS)对橄榄油脂肪酸组成进行分析。结果表明:凉山州引进油橄榄品种初榨油的4种多酚类化合物含量均较高,分别为没食子酸2.76μg/g、羟基酪醇1.69μg/g、儿茶素0.19μg/g和阿魏酸1.43μg/g;α-生育酚、豆甾醇、β-谷甾醇的含量分别为166.39、492.03、822.90μg/g;棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸的相对含量分别为15.50%±0.17%、1.70%±0.09%、63.70%±0.78%和9.20%±0.71%。凉山州引进油橄榄初榨油具有较好的品质,达到了优质保健型食用油的标准,值得推广食用。     

大气CO2浓度升高对大型海藻孔石莼生长和色素含量的影响

在实验室模拟研究了大气CO2浓度升高对海洋中大型绿藻孔石莼Ulva pertusa的生长和色素含量的影响。设置4个独立试验,每个试验的CO2浓度分别为387、500、600、800 mg/L。每个试验设6个海水培养系统,其中3个通入一定浓度的CO2作为试验系统,另外3个通入大气作为对照系统。在每个海水培养系统中,分别装入25 L过滤海水(滤膜孔径为0.22μm),放入(50.0±1.0)g的孔石莼进行培养,试验进行7 d。结果表明:高浓度CO2对孔石莼生长无显著影响(P>0.05),但降低了孔石莼中叶绿素a和类胡萝卜素的含量;试验结束时,CO2浓度为387、500、600、800 mg/L时,试验系统中孔石莼的叶绿素a含量分别为(855.9±31.6)、(780.8±6.2)、(677.3±22.1)、(585.1±16.9)μg/g(鲜质量),分别为对照系统的98.3%、91.8%、78.4%和71.7%,试验系统中孔石莼的类胡萝卜素含量分别为(185.6±5.0)、(167.8±2.4)、(150.6±2.3)、(128.3±4.3)μg/g(鲜质量),分别为对照系统的97.7%、91.5%、80.4%和69.4%;而对照系统中试验开始时和试验结束时,孔石莼的叶绿素a含量和类胡萝卜素含量均无显著性差异(P>0.05)。     

CrCl3催化果糖制备5-羟甲基糠醛的研究

以CrCl3.6H2O为催化剂,考察溶剂种类、反应温度、反应时间、催化剂用量等条件对果糖制备5-羟甲基糠醛(HMF)产率的影响。结果表明,二甲基亚砜(DMSO)是果糖制备HMF的优良溶剂;以DMSO为溶剂,当反应温度为180℃、反应时间140 min、CrCl3.6H2O催化剂用量为果糖质量5%时,果糖制备HMF的产率可达49.2%。     

Study on Insecticidal Activities and Effect on Three Kinds of Enzymes by 5- Aminolevulinic Acid on Oxya chinensis

Insecticidal activities and effects on three enzymic activities caused by 5-aminolevulinic acid (ALA) on Oxya chinensis were studied. Fourth-instar nymphs of O. chinensis were treated with different doses of ALA (A 1,250 mM; A2, 450 mM; A3,750 mM; A4, 1 000 mM). Mortality and the activities of acetylcholinesterase (ACHE), glutathione S-transferase (GSTs), and glutathione peroxidase (GPx) were determinated. The mortality of O. chinensis rose with an increasing dose of ALA. The mortality of high-dose treatments A3 and A4 reached 66.19 and 80.21%, respectively. The value of LD50 was 3.61 (3.29-3.93) mg g-1 body weight (95% confidence interval). Biochemical studies showed that the activities of AChE and GPx in the A4 treatment declined by 51.53 and 42.82% in the female, and 42.65 and 43.85% in the male compared to the control, respectively, and the degree of decline reached a significant level at P < 0.05. Meanwhile, the GSTs activities of O. chinensis enhanced with increasing dose of ALA. The GSTs activities of female and male O. chinensis in the A4 treatment remarkably increased by 171.05 and 97.42% compared to the control (P < 0.05). ALA had an obviously toxic effect on O. chinensis. Moreover, ALA caused the photoinactivation of AChE and GPx, which induced nerve transmission blocking and the capability to defend oxidation damage declining. Meanwhile, a high dose of ALA could activate GSTs, which caused a feedback inhibition of the insect to the phototoxic substance.     

诃子及其炮制品对小鼠小肠5-羟色胺分泌的影响

为探究诃子的2种藏医特殊炮制品(茜草制诃子和白狼毒制诃子)对小鼠小肠5-羟色胺(5-hydrox-ytryptamine,5-HT)免疫反应(immunoreactive,IR)细胞分泌活动的影响,采用免疫组织化学方法对小肠内5-HT的细胞定位及蛋白表达进行研究。结果表明,5-HT在小肠各段均有分布,其蛋白表达量从十二指肠到回肠逐渐降低。给药28 d后,茜草制诃子(1.0、4.0 g·kg^-1)、白狼毒制诃子(1.0、4.0 g·kg^-1)和原药诃子(4.0 g·kg^-1)处理组小鼠小肠各段5-HT蛋白表达量均显著减少。药效表现为茜草制诃子>白狼毒制诃子>原药诃子,且4.0 g·kg^-1剂量的效果优于1.0 g·kg^-1。5-HT-IR细胞形态多样,主要呈锥体形、椭圆形、梭形等。对照组5-HT-IR细胞主要分布在肠腺上皮和肠固有膜,而试验组在肠黏膜上皮细胞之间和肠腺上皮分布多一些。由此可知,诃子及其白狼毒制、茜草制炮制品能不同程度地抑制小肠5-HT的分泌,其中以4.0 g·kg^-1的茜草制诃子效果最好。     

外源5-氨基乙酰丙酸对红香芋试管苗耐冷性的影响

为探讨外源5-氨基乙酰丙酸对芋试管苗耐冷性的影响,以红香芋为试材,通过人工模拟低温逆境,研究了不同浓度外源ALA处理下芋试管苗耐冷性相关生理指标的变化。结果表明:短期(16 h)低温胁迫下,添加2～20 mg/L外源ALA可减轻芋试管苗冷害程度,提高超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性,降低超氧阴离子(.O2-)产生速率和过氧化氢(H2O2)含量,抑制丙二醛(MDA)含量和质膜透性的上升,同时增强细胞渗透调节能力。以上结果说明,适宜浓度的ALA处理可缓解低温胁迫对芋试管苗的伤害,提高其耐冷性;ALA处理浓度以10 mg/L效果最好。     

绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究

【目的】利用体外培养的绵羊附睾上皮细胞（EECs）探究谷胱甘肽过氧化物酶5（GPX5）的抗氧化功能。【方法】体外分离培养并鉴定绵羊EECs后备用。筛选合成3条GPX5的siRNA序列（siRNA-N.1、siRNA-N.2、siRNA-N.3）,同时随机设计一段不与GPX5重合的扰码（scramble）序列（siRNA-NC）,采用瞬时转染法转染EECs,以正常的EECs为对照（CK）,于转染34 h后取样,从mRNA和蛋白水平检测GPX5的干扰效果。采用CCK-8法检测GPX5干扰组、siRNA-NC组和CK组EECs的增殖能力,采用DCFH-DA探针法检测其活性氧（ROS）水平,采用TBA法检测其丙二醛（MDA）水平,采用免疫荧光法检测其8 羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平。【结果】分离培养的细胞可与角蛋白18（CK18）特异性抗体反应,表明细胞为EECs,可用于后续试验。siRNA-N.3（即siRNA-GPX5）对EECs GPX5mRNA和蛋白表达的干扰效果最优,可用于后续试验。随着过氧化氢（H₂O₂）处理浓度的增加,与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs的增殖能力持续下降。与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs中的ROS和MDA水平分别极显著（P＜0.01）和显著（P＜0.05）升高,8-OHdG水平明显上升。【结论】GPX5可以有效保护绵羊EECs,使其免受脂质过氧化损伤及DNA氧化损伤。     

高分子量麦谷蛋白亚基基因Dx5的PCR检测

为 Dx5基因设计了 1对特异引物 ,选用 HMW- GS在 Glu Dx1位点已知的 2 2个材料对其进行了验证。结果表明 ,该引物的准确率达到 10 0 %,完全可以作为 Dx5基因的检测引物。利用这 1对引物 ,通过 PCR技术对 4 0种材料的 Dx5基因进行了检测 ,发现仅有 986 0 5 ,陕 2 5 3,郑州 891,97- 2 14 3,绵阳 96 171- 10 ,绵阳 19,中 1813- 1和绵阳 11等 8个品种 (系 )携带 Dx5基因 ,占待测材料总数的 2 0 .0 %,远远低于北美小麦品种中 Dx5基因的携带率。研究中还发现 ,对检测优质面包烘烤品质基因而言 ,PCR方法是最简便、快速、准确的方法之一。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清5a型ApxⅣA全基因的序列测序及其分子特征

根据GenBank上公布的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清型1型和血清型3型ApxⅣA基因全序列,设计了7对引物,对APP血清5a型毒株263株ApxⅣA基因全序列进行了分段PCR扩增和克隆。序列测定结果表明:该基因核酸序列全长5856 bp,比GenBank上公布的血清1型和3型的相应基因核酸序列分别长438 bp和1287 bp,与其核酸和氨基酸序列同源率均分别为95.5%和87.6%;与GenBank刚公布的血清5b型毒株L20株的核酸和氨基酸序列的同源性均为98.2%。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白具有较强的亲水性,共有66个抗原决定簇,存在较多的可能性功能位点。     

小鼠角蛋白10(K10)基因启动子的克隆及活性分析

【目的】角蛋白10 (K10) 是黑色素细胞中黑素体向周围角化细胞迁移的分子标记之一,在研究基因在黑色素细胞与角化细胞相互作用的功能时,可以作为特异的启动子。本研究欲筛选K10较强的启动子片段,为研究K10以及相关基因的功能提供理论依据和奠定理论基础。【方法】从小鼠尾巴提取基因组DNA,经质量鉴定后,采用PCR法扩增K10的6个不同片段（F1-F6）,并将其分别亚克隆到pMD18-T载体,经测序验证是否正确;将K10的6个亚克隆片段再克隆到pGL0载体中,产生pGL0 - F1-F6构建,用脂质体法转染293T细胞,转染结束后将细胞裂解,并通过双荧光素酶报告基因检测6个片段转染细胞后引起的荧光素酶活性变化,以筛选启动效果最好的启动子片段;用筛选到的K10启动子片段作为特异启动子,替换pGL0载体上的CMV强启动子,并与周期素依赖蛋白激酶5（CDK5）基因进行重组,形成pGL0-F-CDK5构建,用脂质体法转染小鼠皮肤角化细胞,待转染结束后,分别进行细胞爬片、细胞裂解和细胞总RNA的提取,之后用免疫荧光化学、双荧光素酶报告基因检测法和实时荧光定量PCR法检测CDK5的表达定位、表达水平及荧光素酶活性,以检测其在角化细胞中的启动效果;用生物信息法Promoter Scan分析所得到的活性最强的K10启动子片段,发现其可能的转录因子结合位点。【结果】PCR扩增、克隆得到K10启动子的6个片段（F1-F6）,片段大小分别为1 201、908、664、787、790、656 bp;质粒pGL0 - F1-F6分别转染293T细胞后,通过双荧光报告检测发现长度为787bp的F4启动子活性最强;但F1-F6启动子的活性均弱于pGL0-basic中CMV的启动活性;F4序列中含有基本启动子保守区域的共同序列即TATAAAA,经Promoter Scan分析发现F4序列中含有C/EBPβ、GATA、HSF、CAP等多个转录因子的结合位点,这些位点利于K10在角化细胞中表达;pGL0-F4-CDK5转染角化细胞后,通过荧光蛋白的表达检测载体上GFP报告基因的表达,发现pGL0-F4-CDK5转染角化细胞后引起GFP的表达量明显强于pGL0-basic-CDK5转染组;同时用荧光素酶活性检测pGL0-F4-CDK5在角化细胞中的启动效果,结果发现pGL0-F4-CDK5转染组的荧光比值明显高于对照组,差异显著（P＜0.01);经实时荧光定量PCR检测CDK5的表达变化,结果发现pGL0-F4-CDK5转染角化细胞后引起CDK5 mRNA表达量明显高于对照组,差异呈极显著(P＜0.01)。上述结果说明F4具有较强的启动子活性,是K10启动子的核心区。【结论】成功筛选了K10的核心启动子区域F4,在角化细胞里具有启动目标基因CDK5表达的功能,因此,F4可作为黑色素细胞与角化细胞相互作用过程中基因功能研究的特异性启动子,为研究K10基因功能提供理论依据。     

5-羟色胺对断奶腹泻仔鼠小肠组织学结构的影响

为研究5-羟色胺(5-HT)增多是否通过影响肠黏膜屏障引起断奶仔鼠的腹泻,检测断奶腹泻仔鼠小肠绒毛高度(VH)、隐窝深度(CD)变化。采用21d刚断奶ICR仔鼠,分为6组,第1组为正常对照组,第2组为应激腹泻组,番泻叶(0.4kg/L)按体重15mL/kg灌胃同时后肢束缚应激处理,第3组为氢溴酸西肽普兰(CH)对照组,用CH进行腹腔注射处理,第4组CH+腹泻组,CH药物处理4h后进行应激腹泻处理;第5组对氯苯丙氨酸(PCPA)对照组,PCPA腹腔注射;第6组PCPA+应激腹泻组,PCPA药物处理4h后进行应激腹泻处理。连续处理5日后处死小鼠,取十二指肠、空肠、回肠,4%多聚甲醛固定、石蜡包埋,制作石蜡切片,HE染色,测量肠绒毛高度、隐窝深度。由HE染色结果发现,应激腹泻组、CH+应激腹泻组和PCPA+应激腹泻组与正常对照组相比,肠绒毛顶端出现充血,绒毛变短,裸露固有层等病理现象。与正常对照组相比,应激性腹泻组小鼠肠绒毛高度降低:十二指肠,空肠,回肠分别降低14.80%(P0.01),6.89%(P0.01)和19.31%(P0.01),隐窝深度分别升高14.09%(P0.01)、4.85%(P0.05)、11.53%(P0.01),故VH和CD的比值(V/C)降低:CH处理组与应激腹泻组小鼠变化趋势相同;而PCPA处理组则无明显变化。与应激腹泻小鼠相比,CH+应激腹泻组小鼠肠绒毛高度降低,尤其空肠显著降低11.18%(P0.01),隐窝深度升高,尤其十二指肠显著升高4.86%(P0.05),故V/C值也降低,而PCPA+应激腹泻组小鼠绒毛高度升高,分别为4.83%(P0.05),4.15%(P0.01),10.60%(P0.01),隐窝深度降低,分别为27.46%(P0.01)、19.21%(P0.01)、16.74%(P0.01),故V/C值升高。断奶腹泻仔鼠小肠黏膜机械屏障遭到破坏,而肠道内5-HT含量的升高也会使断奶仔鼠出现腹泻现象,同时小肠绒毛高度降低,隐窝深度增加。因此5-HT升高可能通过损伤断奶仔鼠小肠的绒毛高度和隐窝深度,从而引发腹泻。     

外源ALA对NaCl胁迫下酸枣幼苗光合特性与膜脂过氧化的影响

【目的】研究NaCl胁迫下外源ALA对酸枣幼苗叶绿素含量、光合特性及膜脂过氧化的影响,筛选缓解NaCl胁迫的最佳ALA处理浓度。【方法】以酸枣幼苗为试材,测定幼苗叶片在150 mmol/L NaCl胁迫下喷施不同浓度的外源ALA(50、75、100和150 mg/L)后第3 d和第6 d的叶绿素含量、光合特性、抗氧化酶活性及MDA含量的影响。【结果】150 mmol/L NaCl胁迫下酸枣幼苗叶片的叶绿素含量、光合特性及抗氧化酶活性均显著下降。喷施外源ALA可以显著提高NaCl胁迫下酸枣叶片叶绿素含量光合指标和抗氧化酶的活性,降低Ci和MDA含量。其中,以ALA处理后第3 d的T3处理的效果最佳,叶绿素a、总叶绿素含量、Pn、Gs、Tr、SOD、POD和CAT分别增加了67.50%、72.74%、85.71%、135%、87.06％、20.79%、69.59%、和61.25%;Ci和MDA分别降低了22.53%和24.71%。【结论】NaCl胁迫对酸枣造成了明显的损害,抑制其光合作用,破坏了抗氧化酶系统;喷施外源ALA能够通过提高叶绿素含量,增强抗氧化酶活性,促进叶片的光合作用,缓解NaCl胁迫对酸枣幼苗的伤害,提高酸枣的耐盐性;Chl a、Chl、SOD和CAT可以作为评价喷施不同浓度ALA对NaCl胁迫缓解效果的主要指标;不同浓度的外源ALA均能有效缓解NaCl胁迫对酸枣幼苗的伤害,并以100 mg/L ALA处理在第3 d缓解效果最佳。