microRNA-146a通过靶向MAPK4和Myosin Va基因调控羊驼黑色素细胞增殖、迁移

旨在研究microRNA-146a(miR-146a)对羊驼黑色素细胞增殖和迁移的调控及其分子机制。本研究使用双荧光素酶试验验证MAPK4和Myosin Va是miR-146a的靶基因;利用荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹试验检测在羊驼黑色素细胞中过表达miR-146a对相关下游基因表达的影响;利用CCK8和Transwell检测miR-146a过表达对羊驼黑色素细胞增殖和迁移的影响。结果显示,与对照组相比,将miR-146a和MAPK4或Myosin Va共转染293T细胞,双荧光素酶活性分别极显著下降36%和30%(P<0.001);MAPK4和Myosin Va基因转录水平分别极显著下调67%和47%(P<0.001,P<0.01);蛋白质水平的表达量分别显著或极显著下调38%和69%(P<0.05,P<0.01);增殖和迁移相关的基因CREB、MITF、MLPH和Rab27a在转录水平和蛋白水平的表达均极显著下调(P<0.01,P<0.001);CCK8和Transwell结果显示,过表达miR-146a使羊驼黑色素细胞的增殖和迁移能力极显著下调(P<0.01)。综上所述,miR-146a通过靶向调控MAPK4和Myosin Va,使增殖和迁移相关的基因MEK1、CREB、MITF、MLPH和Rab27a的表达下调,从而对羊驼黑色素细胞的增殖和迁移起抑制作用。     

微胶囊技术与应用

微胶囊技术的奠基人B．K.Green于1953年发明了微胶囊化的方法。1954年美国NCR(National Cash Reqist)公司最早将微胶囊技术成功地应用于无碳复写纸的生产，可以说微胶囊技术是从研制无碳复写纸发展起来的。在随后的二十多年时间内，英国、西欧、日本等国花费了很大的投资，在一些理论问题上取得了重大突破，又发展了许多微胶囊化方法，从而     

硝酸纤维素膜免疫吸附法纯化鸡IgM的研究

以抗鸡ＩｇＭ单抗包被硝酸纤维素膜，小牛血清封闭非结合点，吸附鸡ＩｇＭ后，以硫氰酸钾解吸．收集解脱液，透析后即为纯化ＩｇＭ．其比活性为８２．３％，每次可获得１．２５ｍｇＩｇＭ纯品．膜可反复使用．     

单一血清稀释度ELISA定量检测鸡新城疫抗体水平的研究

建立了—种以单一血清稀释度定量检测鸡血清中 NDV抗体的间接 ELISA 方法,经试验得出回归方程 LnET=5.878 0.537P/N。该方法特异性强,能被 NDV 单抗所特异性阻断,比 HI 方法敏感。通过对 SPF 鸡等进行的不同疫苗免疫前、后抗体动态测定表明,ET 值与 HI 值之间呈一定的相关性(r=0.8702),强毒攻击试验表明,ET值>4000时鸡群能得以保护,装配成的商品试剂盒保存期长达6个月.     

间接ELISA检测鸡多杀性巴氏杆菌抗体的研究

应用自然弱毒“1010”株包被ELISA板,以间接法检测鸡多杀性巴氏杆菌抗体.该方法简便,特异性强,比琼扩法敏感近千倍,与ND、IB等12种血清不发生交叉反应.在野外样本的调查中,鸡群自然感染率为43.1％.人工免疫鸡ET值在900以上时能耐受3个最小致死量强毒的攻击.用这种方法仅需检测一个稀释度即可知道血样的抗体滴度。     

使用液氮保存疫苗应注意哪些事项

液氮冰冻（－１９６℃）保存的疫苗应定期检查液氮罐中液氮含量是否足够，随时添加，厂家配备的专用稀释液应置于室温环境下存放。疫苗使用的具体操作程序如下：①带上保护眼镜和手套，右手用长镊子从液氮罐中小心取出疫苗安瓶；②每次只取出一安瓶的冰冻疫苗，然后立即放入２７℃的温水中进行解冻；③轻摇疫苗安瓶，并在６０秒之内使安瓶中的疫苗完全解冻；④疫苗解冻后应立即把瓶盖打开，用１８号针头把安瓶中的已解冻的疫苗慢慢地吸取出来；⑤缓慢地把疫苗沿稀释液瓶壁注入稀释液中，并反复冲洗安瓶数次；⑥轻轻地把稀释液瓶摇动数次，以…