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采用C48-1全菌抗原烘干包被聚苯乙烯微量反应板,建立了检测禽霍乱血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被浓度为0.5×108cfu/mL,被检血清最佳稀释度为1∶800,确立了用于定量检测ELISA效价的回归方程:y=1.611 2+0.431 4x(r=0.96)。通过阻断试验、交叉试验、重复试验等方法证明本方法在特异性、灵敏性、稳定性上均达到了较为满意的结果,且易于操作,适用于疫病诊断和大规模的血清流行病学调查。 相似文献
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鸡新城疫卵黄抗体IgY的分离提纯研究 总被引:7,自引:0,他引:7
本文对母鸡经鸡新城疫疫苗免疫接种后产生并富集在卵黄中的抗体IgY的提取纯化工艺条件进行了研究与优化,确定了去脂、提取抗体最佳工艺为:卵黄液用0.05mol/L,pH5.0的乙酸一乙酸钠缓冲液1:9倍稀释,搅拌15min,4℃静置10小时,抗体回收率为90%,去脂率为99%;该提取液用40%饱和度的硫酸铵盐析,得到的盐析液抗体回收率为82%,纯度达到69%。盐析液经截留分子量为100KD的有机陶瓷膜超滤后,截留液抗体回收率达到92%。纯度为85%。 相似文献
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益生素作为一种理想的绿色添加剂,具有改善肠道微生态环境,提高饲料转化率,增加产蛋量,改善蛋的品质,降低动物舍内氨气、臭气等有害气体的浓度等作用,已广泛应用于生产中。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建 总被引:1,自引:1,他引:0
根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5′端具有完整的T7RNA聚合酶启动子的核心序列,3′端具有polyA尾巴结构。通过T7RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救。采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定。结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础。 相似文献
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比较不同ELISA包被抗原对禽霍乱免疫血清的检测结果,选择最佳的包被抗原建立禽霍乱血清抗体的间接ELISA检测方法.分别 使用超声波裂解抗原、脂多糖蛋白抗原和全菌抗原作为包被抗原,应用间接ELISA方法检测 禽霍乱免疫血清,并对不同抗原建立的ELISA方法进行重复性试验.根据三种抗原对 免疫血清的检测结果以及重复性试验,发现全菌抗原的敏感度、特异性、稳定性均优于其他 两种抗原.全菌抗原作为ELISA包被抗原用于禽霍乱血清学检测具有敏感度高、特异性强、稳定性好的特点. 相似文献