基于高通量测序的露地菊(Chysanthemum×grandiflora)盐胁迫转录组分析

为揭示露地菊生长发育及耐盐胁迫的应答机制和分子基础,本研究以盐胁迫处理的露地菊及其对照为材料,使用Illumina Hiseq2500高通量测序平台对转录组进行测序,分别获得了60370448和71415448条Clean reads,通过序列拼接组装得到45591条Unigene,平均长度724 bp。有37675条Unigene在七大数据库(COG,GO,KEGG,KOG,Pfam,Swiss-Prot,NR)中得到注释。通过比对露地菊盐胁迫处理组和对照组样品间Unigene的表达量及在各数据库中的注释情况,统计得到:有4143条差异表达基因获得注释;有2441条差异表达基因在GO数据库中获得功能注释;注释到COG数据库中的2281条差异表达基因依据功能可分为25类;有1062条差异基因映射到KEGGPathway数据库中,涉及了199个代谢通路,包括核糖体途径、植物激素信号传导途径、淀粉蔗糖代谢、碳代谢、氨基酸的生物合成等。本研究获得的转录组数据将有助于揭示露地菊生长发育及耐盐胁迫的应答机制和分子基础,及相关抗性基因的挖掘和分子辅助育种等方面的研究。     

地被菊雪公主抗盐性研究

为探究地被菊雪公主耐盐能力的强弱,用0、100、200、300mmol·L-1的NaCl溶液对雪公主幼苗进行盐胁迫耐性处理,分别处理0、5、10、15、20d,进行取样,20d后测定幼苗叶片丙二醛及SOD、POD两种酶的活性等指标。结果表明:雪公主能忍受低浓度(200mmol·L-1)NaCl逆境胁迫。但随着NaCl胁迫浓度的升高和时间的延长,雪公主体内丙二醛含量均呈现升高趋势,SOD、POD的活性则随逆境胁迫程度的加大呈现先上升后降低的趋势。由此可推测地被菊雪公主自身具有抵御一定盐害的能力,可作为一种较优良的耐盐的地被花卉。     

NAC转录因子在植物非生物胁迫相关抗性中的作用

NAC转录因子是近十几年发现的植物特有的转录因子,其N端独特的DNA结合域及C端的转录激活域在植物非生物胁迫应答中发挥重要的调控作用,从而使植物发生一系列生理生化变化,增强植物对非生物胁迫的抗性。基因表达的转录调控在植物适应环境和抵御逆境胁迫中起重要作用。现从NAC转录因子的结构特点和分类、在非生物胁迫相关抗性中的作用及其调控机理等方面总结前人的研究进展,提出存在的问题与未来发展趋势。     

轻松上网不烦恼

互联网可以算得上是20世纪最伟大的发明之一。但网络在给人们带来便利的同时，也带来了电脑的克星——病毒。在这里，笔者向大家推荐Ad—aware系统安全工具。它能够通过扫描内存、硬盘以及注册表，并寻找、追踪、确认广告软件以及恶意插件模块，你将不用再担心自己的电脑被一堆广告插件、间谍软件入侵。     

过量表达甘菊CBF1基因提高拟南芥抗旱耐盐能力

CBF是一类植物特异性、具有多种功能的转录因子。本研究将从甘菊(Chrysanthemum lavandulifolium)中分离的ClCBF1基因构建到植物表达载体pBI121上,并采用农杆菌介导的花序浸染法对拟南芥(Arabidopsis thaliana)进行遗传转化,共获得4个转基因株系经过抗性筛选和RT-PCR验证,对其中表达量较高的3个转基因株系进行研究,结果表明:在150mmol·L~(-1)甘露醇培养基中转基因拟南芥的种子萌发率和根长平均为野生型的2.0倍和1.2倍,在150mmol·L~(-1) NaCl培养基中转基因拟南芥种子萌发率和根长平均为野生型的1.1倍和1.4倍;在干旱和盐胁迫条件下,转基因拟南芥幼苗的成活率高于野生型,并且超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性显著高于野生型(P0.05),丙二醛(MDA)含量及相对电导率显著低于野生型植株(P0.05)。说明ClCBF1基因在拟南芥受到干旱和盐胁迫过程中发挥一定作用。     

基于AHP的模糊综合评价在图书馆岗位竞聘中的应用

分别介绍了层次分析法(AHP)和模糊综合评价法的理论以及其在岗位竞聘中应用的必要性,并通过实例说明岗位竞聘中如何建立“基于AHP的模糊综合评价模型”,得出评价结果.该模型的运用能有效规避传统竞聘方式存在的弊端,保证公平性、精确性等问题,现代管理软件的应用也能大大简化岗位竞聘过程中模型的计算过程,提高工作效率.     

小鼠角蛋白10(K10)基因启动子的克隆及活性分析

【目的】角蛋白10(K10)是黑色素细胞中黑素体向周围角化细胞迁移的分子标记之一,在研究基因在黑色素细胞与角化细胞相互作用的功能时,可以作为特异的启动子。本研究欲筛选K10较强的启动子片段,为研究K10以及相关基因的功能提供理论依据和奠定理论基础。【方法】从小鼠尾巴提取基因组DNA,经质量鉴定后,采用PCR法扩增K10的6个不同片段(F1—F6),并将其分别亚克隆到p MD18-T载体,经测序验证是否正确;将K10的6个亚克隆片段再克隆到p GL0载体中,产生p GL0-F1—F6构建,用脂质体法转染293T细胞,转染结束后将细胞裂解,并通过双荧光素酶报告基因检测6个片段转染细胞后引起的荧光素酶活性变化,以筛选启动效果最好的启动子片段;用筛选到的K10启动子片段作为特异启动子,替换p GL0载体上的CMV强启动子,并与周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)基因进行重组,形成p GL0-F-CDK5构建,用脂质体法转染小鼠皮肤角化细胞,待转染结束后,分别进行细胞爬片、细胞裂解和细胞总RNA的提取,之后用免疫荧光化学、双荧光素酶报告基因检测法和实时荧光定量PCR法检测CDK5的表达定位、表达水平及荧光素酶活性,以检测其在角化细胞中的启动效果;用生物信息法Promoter Scan分析所得到的活性最强的K10启动子片段,发现其可能的转录因子结合位点。【结果】PCR扩增、克隆得到K10启动子的6个片段(F1—F6),片段大小分别为1 201、908、664、787、790、656 bp;质粒p GL0-F1—F6分别转染293T细胞后,通过双荧光报告检测发现长度为787bp的F4启动子活性最强;但F1—F6启动子的活性均弱于p GL0-basic中CMV的启动活性;F4序列中含有基本启动子保守区域的共同序列即TATAAAA,经Promoter Scan分析发现F4序列中含有C/EBPβ、GATA、HSF、CAP等多个转录因子的结合位点,这些位点利于K10在角化细胞中表达;p GL0-F4-CDK5转染角化细胞后,通过荧光蛋白的表达检测载体上GFP报告基因的表达,发现p GL0-F4-CDK5转染角化细胞后引起GFP的表达量明显强于p GL0-basic-CDK5转染组;同时用荧光素酶活性检测p GL0-F4-CDK5在角化细胞中的启动效果,结果发现p GL0-F4-CDK5转染组的荧光比值明显高于对照组,差异显著(P0.01);经实时荧光定量PCR检测CDK5的表达变化,结果发现p GL0-F4-CDK5转染角化细胞后引起CDK5 m RNA表达量明显高于对照组,差异呈极显著(P0.01)。上述结果说明F4具有较强的启动子活性,是K10启动子的核心区。【结论】成功筛选了K10的核心启动子区域F4,在角化细胞里具有启动目标基因CDK5表达的功能,因此,F4可作为黑色素细胞与角化细胞相互作用过程中基因功能研究的特异性启动子,为研究K10基因功能提供理论依据。     

不同测定方法对聚维酮碘杀菌效果的比较研究

以6株黄鳝源嗜水气单胞菌分离株作为受试菌,研究聚维酮碘在两种测定方法下的杀菌率、有效碘含量,及其对黄鳝的急性毒性,评价不同测定方法的准确性及应用安全性。试验结果显示,采用试管二倍稀释法,在溶菌肉汤、营养肉汤和双倍浓度营养肉汤培养基中,聚维酮碘对6株菌的24h最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度均为24g/L(溶菌肉汤=营养肉汤≥双倍浓度营养肉汤)。采用直接作用法时,5mg/L和10mg/L聚维酮碘在10min内的杀菌率分别为99.99%、100%。试管二倍稀释法中有效碘的含量(溶菌肉汤营养肉汤双倍浓度营养肉汤)也远低于直接作用法,且有效碘含量在24h后均下降。聚维酮碘对黄鳝的24h半致死质量浓度为173.91mg/L,这一质量浓度远高于直接作用法测定的有效杀菌质量浓度。试验结果表明,聚维酮碘对嗜水气单胞菌具有良好的杀灭性,且在黄鳝养殖中可安全使用。但其有效性易受有机物影响,故在水产养殖中推荐使用直接作用法来测定其有效杀菌质量浓度。     

茶文化活动中钢琴曲的选择及弹奏技巧研究

钢琴演奏是比较常见的一种艺术表演形式,其曲目选择以及弹奏方式与活动性质息息相关。本文在简要论述了钢琴曲的选择与弹奏技巧后,又对我国茶文化活动中钢琴曲的选择及弹奏现状进行了分析,最后就茶文化活动中钢琴曲的正确选择及弹奏技巧提出了恳切建议。     

茉莉酸甲酯抑制小麦根生长及体内抗氧化酶活性变化

试验表明,采用聚丙烯酰胺电泳技术研究不同浓度的Me-JA处理小麦后其体内抗氧化物酶活性的变化.与对照相比,高浓度(10-5～10-3mol/L)的茉莉酸甲酯(Me-JA)对小麦根的生长均有明显的抑制作用,而低浓度(10-8～10-7 mol/L)的Me-JA却有轻微的促进作用.随外施的茉莉酸甲酯浓度梯度的升高,过氧化物酶的表达量依次增强,以10-4 mol/L浓度的表达量最为强烈.经过茉莉酸甲酯的处理,小麦根中总可溶性的过氧化物酶的活性能提高,茉莉酸甲酯对过氧化物酶(POD)活性提高明显 ,细胞中的过氧化物酶主要是防止细胞壁的延伸,从而可能达到阻碍小麦生长的作用.