柔嫩艾美耳球虫rhomboid抗原基因在卡介苗中的克隆与表达

以含柔嫩艾美耳球虫rhomboid基因的重组质粒为模板,应用PCR方法扩增该基因完整开放阅读框,克隆至pMD18-T载体中.分别用限制性内切酶Pst I/Cla I和Pvu II/Cla I进行双酶切,将rhomboid目的基因克隆到大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pRho-261和pRho-361.将重组质粒电穿孔转化卡介苗,经热诱导后对其表达产物进行SDS-PAGE和western blot分析.结果表明成功构建了两个重组质粒,其表达产物与柔嫩艾美耳球虫阳性血清具有免疫反应性,为重组卡介苗在鸡球虫病防治方面的研究奠定了基础.     

犬卵泡囊肿的诊治

卵巢囊肿是引起犬发情异常及不孕的重要原因之一,临床上可分为卵泡囊肿和黄体囊肿。患卵泡囊肿的犬主要表现为雌激素过剩症,如发情期延长,阴蒂增大,阴道流出黏性分泌物,乳房变大且有时可见乳头流出奶水样液体,皮肤左右对称性脱毛等;还有的犬表现为多饮多尿,个别患犬伴有囊性乳腺病、子宫内膜增生等。笔者在临床工作中遇到犬卵泡囊肿1例,现将其病史和临床诊断隋况报道如下。     

植物叶绿素含量不同提取方法的比较研究

为探索不同提取液提取爬山虎叶绿素的效果,分别采用80%丙酮溶液、96%乙醇溶液、90%乙醇丙酮混合溶液、95%乙醇丙酮混合溶液四种提取溶液来提取五叶爬山虎叶片叶绿素。结果表明：叶绿素溶液吸收峰的峰值和不同提取液对植物叶绿素的提取能力随提取液的不同而不同,由大到小排序的顺序为95%丙酮乙醇溶液>90%丙酮乙醇溶液>80%丙酮>96%乙醇,相比于研磨法,用试剂浸泡法的叶绿素提取效率更高,这可为准确提取与检测植物叶绿素的提供一定参考作用。     

罗布麻叶总黄酮提取物对抑郁大鼠脑内单胺类神经递质含量的影响

[目的]探讨罗布麻（Apocynum venetum L.）叶总黄酮提物抗抑郁作用的机理。[方法]采用大鼠慢性应激抑郁模型,利用液相色谱-质谱串联法测定大鼠脑内单胺类神经递质[去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）]的含量。[结果]慢性应激抑郁组动物组织内DA、5-HT和NE含量与正常组相比均极显著降低（P〈0.01）。罗布麻总叶黄酮提取物处理组大鼠脑中DA和NE含量与慢性应激抑郁组相比显著或极显著上升,且随着剂量的增大,这种作用更加明显;70.0 mg/kg罗布麻叶黄酮提取物处理与盐酸氟西汀（3.5mg/kg）效果一致;但罗布麻叶总黄酮提取物处理组大鼠脑中5-HT含量与慢性应激抑郁组相比没有明显变化,阳性对照药氟西汀显著增加了抑郁大鼠脑组织中DA、NE和5-HT含量。[结论]该研究证实了抑郁症发病的神经递质假说,同时发现罗布麻叶可以逆转抑郁大鼠脑内单胺类物质NE、DA含量的降低,这也可能是其抗抑郁作用的机理之一。     

猫源胎儿三毛滴虫的形态学观察及分子鉴定

旨在进一步鉴定从1例长期慢性腹泻猫粪便中新分离到的1株毛滴虫，分别对其进行了分离与体外培养、形态学观察及18S rRNA基因序列相似性分析。形态学观察结果显示，分离株毛滴虫呈梨形或纺锤形，且具有3根前鞭毛和1根后鞭毛，为胎儿三毛滴虫形态结构。18S rRNA基因序列与GenBank中三毛滴虫基因序列比对及系统进化树结果显示，分离的猫源毛滴虫序列与胎儿三毛滴虫MH400076.1处于同一分支，且相似性达到了99%。综合判定，从患有长期慢性腹泻猫的粪便中分离到的毛滴虫为胎儿三毛滴虫。     

犬黑色素瘤的诊断病例

犬最常见的口腔恶性肿瘤为恶性黑色素瘤,其发病率位于犬恶性肿瘤发病率的第4位[1].恶性黑色素瘤常发生在齿龈或口唇黏膜,是一种高度恶性预后较差的肿瘤,临床上以颌下淋巴结和肺部的转移率最高.     

犬软骨肉瘤病例

犬的软骨肉瘤是临床上较为常见的恶性骨瘤,发病率仅次于骨肉瘤,位于第2位[1].软骨肉瘤常见于5岁~9岁之间的犬(平均为6岁),Boxer种犬和德国牧羊犬最易发生[2].较常发生在四肢长骨,以及肋骨、胸骨、肩胛骨、鼻骨、盆骨等扁平骨,最易发生肺部转移,如果临床上发现有转移,大约还有61 d的存活时间[1].笔者于2007年在临床上发现犬胫骨远端去分化软骨肉瘤1例,现将其病史及临床诊治情况报告如下.     

昌黎县貉貂大肠杆菌分离鉴定与耐药性检测

为确定致昌黎县5个貉、貂养殖场因腹泻死亡的貉、貂的病原及其耐药性,试验采集死亡貉、貂的病料进行病原分离、染色镜检和生化试验,并对分离菌进行药敏试验。结果表明:分离出的5株菌均为大肠杆菌,3株貉源大肠杆菌的耐药率分别为66.67%(14/21)、57.14%(12/21)和57.14%(12/21);2株貂源大肠杆菌的耐药率均为61.90%(13/21)。5株大肠杆菌对林可霉素、氨苄西林、阿莫西林、四环素、多西环素、多黏菌素B的耐药性高达100%;对头孢噻肟、头孢噻吩、磺胺甲氧异口恶唑、红霉素的耐药性为80%;对头孢曲松、氟苯尼考的耐药性为60%;对丁胺卡那均高敏;除貉场3分离的大肠杆菌对磷霉素耐药外,其他4株菌均对磷霉素高度敏感。     

貂源铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性检测

采用微量稀释法测定了20种药物对临床分离的27株貂源铜绿假单胞菌的体外最小抑菌浓度(MIC),以美国临床检验标准委员会(CLSI)的临界浓度做为判断标准,判定了貂源铜绿假单胞菌对20种药物的耐药谱.结果显示:临床分离的菌株以耐药菌为主,且88.9％的菌株呈多重耐药,菌株耐药谱型达10种,对哌拉西林(74.1％)、强力霉素(70.4％)、卡那霉素和妥布霉素(48.1％)耐药性最为严重,对头孢菌素类(77.8％～100％)、氟喹诺酮类(88.9％～96.3％)、碳青霉烯类(88.9％～92.6％)、多肽类(96.3％)药物敏感率较高.     

羊肉中貉源成分Real-time PCR检测方法的建立

[目的]检测羊肉中是否含有貉肉成分。[方法]通过实时荧光定量PCR方法,以cytB为靶基因设计特异性检测引物,选取8个不同物种的肌肉组织样本为研究对象,根据其ΔCt值函数关系进行线性拟合建立标准曲线。[结果]该检测方法所用引物能将貉与其他物种区分,特异性较强,且最低检测限可达到3.2 pg/μL,回收率在97.71%～104.36%,组内变异系数≤0.28%,组间变异系数≤1.08%。[结论]该研究建立的羊肉中貉肉源成分实时荧光定量检测方法具有良好的特异性和敏感性,可用该方法检测实际羊肉样品中是否有貉肉源成分,为羊肉制品掺假的检测提供简单快捷准确的技术手段和执法依据。