江蔬1号番茄子叶离体再生体系的建立

以番茄品种江蔬1号和金陵之星101F1为试材,MS为基本培养基,研究70%酒精和20%次氯酸钠溶液不同时间处理对种子表面的消毒效果和对种子萌发的影响,并研究不同基因型、不同植物生长调节物质及浓度对番茄子叶再生的影响。结果表明,70%酒精处理50 s后,再用20%次氯酸钠溶液浸泡30 min,江蔬1号和金陵之星101F1种子萌芽率分别为98%、63.2%,而污染率分别为0、2.2%;不同的番茄品种在相同的培养基上愈伤组织诱导率和不定芽的分化率存在着显著差异,江蔬1号优于金陵之星101F1。适于江蔬1号子叶再生的培养基为MS ZT0.5 mg/L IAA0.3 mg/L,再生频率可达49.14%;适宜的生根培养基为MS NAA 0.5 mg/L,生根率为100%。     

番茄组织培养与试管苗繁育

[目的]建立番茄的高效再生体系,为下一步进行番茄叶绿体遗传转化研究奠定基础。[方法]通过培养经无菌处理的番茄种子获得无菌苗,切取无菌苗的叶片置于附加有激素组合为3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA的MS培养基中诱导愈伤组织产生,再利用愈伤组织,比较不同浓度激素组合对番茄愈伤组织分化不定芽与不定芽生根的影响。[结果]MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+30 mg/L蔗糖培养基对诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;1/2MS+1.0 mg/L IAA培养基对生根最好。[结论]适宜激素浓度的选择是番茄高效再生体系建立的关键。     

"保冠一号"番茄子叶与下胚轴的愈伤组织诱导与植株再生

目的:研究不同浓度的CPPU诱导"保冠一号"番茄子叶及下胚轴在培养条件下的植株再生情况,确定CPPU诱导番茄植株再生的最佳浓度.方法:采用CPPU与NAA的不同浓度组合,诱导"保冠一号"番茄子叶及下胚轴的愈伤组织形成、不定芽发生及植株生长.结果:各种浓度在CPPU和NAA组合对"保冠一号"番茄的植株再生有不同的影响.子叶以MS+CPPU 0.05 mg/L+NAA 0.01 mg/L,下胚轴以MS+CPPU 0.025 mg/L+NAA 0.01 mg/L为最佳再生培养基,对愈伤组织的形成和不定芽的分化都有良好的效果;不定芽在1/2MS+IBA 0.5 mg/L和1/2MS+NAA 0.5 mg/L培养基上生根效果最佳.     

加工番茄下胚轴再生体系的建立

[目的]建立加工番茄模式品种M82的再生体系,为加工番茄M82的遗传转化奠定基础.[方法]研究不同灭菌剂对加工番茄表皮灭菌效果,及运用正交组合设计不同浓度的激素配比,研究不同浓度的激素对加工番茄愈伤组织诱导和不定芽诱导的影响.[结果]加工番茄种皮灭菌,以15;次氯酸钠(NaClO)+吐温-20 30 min对加工番茄M82种皮的灭菌效果最佳;愈伤组织诱导,以MS B5 +3 mg/L6-BA+0.25 mg/LNAA诱导出的愈伤组织平均直径最大;不定芽诱导,以MS B5+0.5 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA中诱导的愈伤组织平均出芽数最多.[结论]获得了加工番茄M82的再生体系,并得出细胞分裂素ZT对于加工番茄不定芽的诱导具有较好的效果.     

番茄高效离体再生体系的建立

以中蔬四号番茄子叶和下胚轴为外植体进行离体培养,研究了不同激素及不同浓度的组合对愈伤诱导、不定芽分化及生根的影响。结果表明,MS+2,4-D0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导所得愈伤最好,MS+IAA0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导分化不定芽效果最佳,1/2 MS+蔗糖20 g/L是诱导不定芽生根的理想培养基。建立起高效番茄离体再生体系。     

海岛棉丛生芽的诱导及再生

[目的]探索最佳海岛棉丛生芽诱导及再生的激素组合,为海岛棉的遗传转化奠定基础.[方法]以海岛棉品种新海13号、新海14号和新海16号的茎尖为材料,研究不同激素浓度和激素配比对海岛棉茎尖丛生芽诱导和生根的影响.[结果]在MSB培养基中添加1.0 mg/L的6-BA时,丛生芽生长状况最好,平均丛生芽率最高,为41;;在1/2 MSB培养基中添加浓度为0.3 mg/L的NAA和3.0 mg/L的IBA,平均生根率达到60;.[结论]不同品种海岛棉丛生芽的诱导存在一定差异,但均可获得再生植株.     

草莓茎尖快速繁殖体系的研究

以"红颜"草莓匍匐茎茎尖为外植体,研究了不同次氯酸钠质量分数及处理时间、不同浓度激素配比对茎尖增殖、组培苗生根的影响,以筛选出外植体最适的消毒处理和最适合的培养基。结果表明,草莓"红颜"匍匐茎茎尖消毒以2%次氯酸钠处理10~15 min为宜;不定芽增殖以1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA组合与0.5 mg/L6-BA+0.1 mg/L IBA较佳;适宜生根的培养基为1/2 MS+0.1~0.3 mg/L IBA。     

番茄叶片高频再生体系的建立

以番茄叶片为外植体,比较不同基因型在含有不同激素浓度配比的培养基上的再生能力,目的在于获得某特定番茄品种的高频再生体系,并结合该番茄品种对除草剂的敏感性实验,为建立番茄遗传转化受体系统奠定基础。结果表明,‘绿樱桃’在含有3.0 mg/L 6-苄基氨基嘌呤(6-benzyl amino purine,6-BA)和0.2 mg/L 3-吲哚乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)的MS培养基中再生最好,愈伤组织形成率为96.88%,不定芽诱导率达90.63%;每个外植体的平均不定芽诱导率为252%,其最适的生根培养基为MS附加IAA 0.2mg/L;除草剂草丁膦的致死浓度为1.5 mg/L。     

野生枸杞茎尖分生组织再生研究

以茎尖分生组织为外植体,在MS附加各种不同浓度激素组合的培养基上诱导丛生芽,进而诱导生根,建立了枸杞茎尖分生组织高效再生快繁体系.IAA 6-BA激素组合较IAA KT组合的直接萌发率和成苗率高.分别达94.0%,81.3%,最高组合为MS IAA 0.10 mg/L 6-BA 1.00 mg/L;MS IAA 0.50 mg/L 6-BA0.10 mg/L适于丛生芽的诱导及增殖,增殖倍数达7.5;1/2MS IAA 1.50 mg/L有利于生根,生根率最高达100%.     

易感线虫番茄品种Rutgers遗传转化体系的建立

【目的】旨在建立Rutgers番茄品种的遗传转化体系。【方法】以易感线虫番茄品种Rutgers为实验材料,采用农杆菌介导法,对无菌苗的苗龄、筛选培养基中Hyg的浓度大小、不定芽诱导培养基的激素配比和生根培养基4个方面进行优化,从而建立Rutgers品种的遗传转化体系。【结果】选择9～11 d的无菌苗的叶片分化愈伤组织的效果最好,筛选培养基中Hyg的浓度为10 mg/L时可以有效的筛选转基因的抗性芽,愈伤组织诱导不定芽培养基中最佳激素配比为6-BA 2 mg/L+IAA 0.1 mg/L。以1/2MS添加不同浓度IBA(0.05、0.1、0.15、0.20 mg/L)进行生根比较,再生芽在1/2 MS+IBA 0.1 mg/L生根培养基上生根最好。【结论】首次建立了Rutgers番茄品种的遗传转化体系,为番茄的抗根结线虫转基因育种打下基础。     

黄河蜜瓜子叶组培技术研究

以甜瓜品种黄河蜜3号的无菌子叶为材料,对6-BA与NAA不同配比的16种激素组合进行不定芽分化培养基的筛选及添加IAA的4种生根培养基进行生根培养研究的结果表明,在MS 6-BA 1.50 mg/L NAA 0.20 mg/L的培养基上,不定芽的诱导率最高,达到66.7%,获得了较高的不定芽再生率;在1/2 MS IAA 0.20 mg/L的培养基上生根效果最好,生根率达100%.     

芜菁离体培养再生体系建立

【目的】研究不同激素对芜菁再生不定芽,不定根的影响;并建立芜菁再生体系。【方法】设置2种浓度NAA激素0.1 mg/L,0.5 mg/L;和4种浓度6-BA激素0.25、0.5、0.75、1.0 mg/L处理2种新疆芜菁、1种温州盘菜的子叶、下胚轴。观察记录子叶、下胚轴的不定芽再生频率和再生根频率。【结果】三种芜菁下胚轴产生不定芽的频率为:柯坪芜菁(75.32%)>温州盘菜(73.73)%>喀什芜菁(72.55%)。NAA为0.5 mg/L时下胚轴的生根率要高于NAA为0.1 mg/L时的生根率。【结论】三种芜菁的下胚轴诱导不定芽的效果要优于子叶的诱导效果;柯坪芜菁与喀什芜菁不定芽诱导最适激素浓度为6-BA 0.75 mg/L、NAA 0.1 mg/L;温州盘菜最适激素浓度为6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.1 mg/L。     

龙选蕉组培快繁技术

[目的]探讨不同灭菌剂对外植体的灭菌效果及不同激素浓度和组合对不定芽诱导和增殖的影响,建立龙选蕉的高频再生体系.[方法]以龙选蕉吸芽为外植体,以升汞和0.2%次氯酸钠对外植体灭菌;采用0~6.0 mg/L 6-BA、0.1~0.2 mg/L NAA激素组合对不定芽进行诱导或增殖培养.[结果]相对于升汞,次氯酸钠对龙选蕉外植体灭菌的效果更理想,灭菌率达到90.47%,且外植体生长良好,无中毒现象.在不定芽诱导培养基中,随着6-BA浓度的升高,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6-BA3.0mg/L的诱导效果最理想,萌发率为66.67%;随着6-BA和NAA浓度的提高,不定芽的增殖系数也随之增加,其中以4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA为最佳组合,不定芽增殖效果最理想,增殖系数为4.05,芽苗粗壮,叶片颜色正常.[结论]次氯酸钠对龙选蕉吸芽的消毒效果优于升汞,操作简便,易于获得无菌外植体并利于不定芽生长;不定芽诱导最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA;不定芽增殖最佳培养基为MS+ 4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA.     

亚麻品种范妮再生体系的建立和抗生素阈值筛选

[目的]建立亚麻品种范妮器官发生途径的高频再生芽、再生根体系,确定抗生素筛选阈值,为遗传转化改良亚麻品质奠定基础.[方法]以亚麻品种范妮幼苗下胚轴为外植体,用软件SPSS17.0进行正交试验设计,在不同激素组合的20种培养基上进行愈伤和芽诱导,9种生根培养基上进行再生根诱导.用不同浓度抗生素Kan、Hyg确定适于抑制范妮下胚轴切段出愈的阈值.[结果]20种不同激素组合的培养基均能诱导出愈伤并直接得到再生芽,以1/2MS+ 0.5 mg/L 6-BA+ 0.9 mg/L KT+ 0.2 mg/L IAA诱导的外植体出芽块数最多,出愈率达(99.7±0.65);,褐化率(0.83±1.44);,出芽块数占总数的(93.2±5.89);,诱导再生根最佳培养基组成为:1/2MS+0.3 mg/L NAA+ 0.05 mg/L IBA.Kan和Hyg适于范妮的筛选阈值为120和40mg/L.[结论]不同基因型的亚麻品种所需的最佳再生体系不同,通过直接器官发生途径确立的范妮高频再生体系,为加快亚麻品质改良的遗传转化和筛选工作奠定了基础.     

黄瓜离体培养植株再生技术及影响因素分析

以3个不同的黄瓜(Cucumbis sativus L.)品种作为试验材料,研究了不同苗龄外植体和激素组合对黄瓜离体再生的影响.结果表明,黄瓜离体再生最适外植体苗龄为5～6 d,苗龄太小或太大都不利于不定芽的诱导发生;激素在调控诱导不定芽方面起着决定性的作用,诱导不定芽分化的最适培养基为MS+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA,不定芽伸长后在MS+30 g/L,蔗糖+7 g/L琼脂+0.2 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA的生根培养基上诱导不定根效果最佳.本试验条件下黄瓜植株再生率为76%.     

白菜类作物子叶高频再生体系的建立

以大白菜品种北京80号、油青矮脚45天菜心、四季菜心王的带柄子叶为外植体,研究不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂质量浓度对不定芽再生的影响。结果表明,北京80号的最佳培养基为MS+5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2mg/L AgNO3,再生频率为83.6%;油青矮脚45天菜心和四季菜心王的最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+2 mg/L AgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。3个基因型的带柄子叶在0.5～1mg/L 2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。4～5d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的质量浓度以12g/L为宜。通过不定芽继代培养和生根驯化建立白菜类作物较高再生频率的再生体系。     

影响银白杨再生体系建立的因素分析

为了获得银白杨离体再生体系的优化方案,通过对离体再生体系中银白杨无菌苗的获得、生芽培养基激素组合及诱导出芽、生根培养基激素组合及诱导生根进行了一系列优化试验。结果显示:影响银白杨植株再生的最主要因素是激素浓度和类型,其次是培养基种类和外植体类型;最利于银白杨再生植株的培养基条件为:芽增殖培养基以MS 6-BA1.0mg/L NAA0.3mg/L IBA0.6mg/L为宜,生根培养基以1/2MS NAA0.05mg/L IBA0.2mg/L为宜。     

六月酥梨叶片培养和植株再生

以六月酥梨叶片为外植体,研究了基本培养基、不同质量浓度BA和IBA的组合、不同暗培养时间、不同碳源种类和质量浓度、叶片放置方式和乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对六月酥梨叶片再生体系的影响。结果表明,六月酥梨叶片再生芽的适宜组合为NN69+BA 5.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+山梨醇40 g/L+琼脂7 g/L,远轴面向下,暗培养30 d。在适宜条件下,六月酥梨叶片再生频率高达83.3%,平均再生芽数为2.84。不同碳源种类和质量浓度对六月酥梨叶片再生有不同的影响,其中40 g/L山梨醇对叶片不定芽诱导效果显著。硝酸银质量浓度为0.1~1.0 mg/L时六月酥梨叶片再生频率高于对照,但无显著差异;当硝酸银质量浓度为2.0 mg/L时,显著降低了叶片再生频率。叶片再生苗在生根培养基1/2MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L,暗培养5 d,生根率为50%,平均生根数为3.33。     

大青杨再生体系的优化

采用正交试验设计,研究不同培养基和不同激素质量浓度配比对大青杨无菌苗叶片植株再生体系的影响,优化大青杨植株再生体系。结果表明:对大青杨不定芽诱导的影响最大为激素NAA,其次是培养基类型,最后是激素6-BA;不定芽增殖的影响最大是NAA,其次是培养基类型,最后是6-BA;对丛生苗生根的影响最大是激素类型,然后是培养基类型;培养基类型和激素的质量浓度对大青杨再生体系有着较明显的影响。最适宜大青杨分化的培养基为:WPM+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,诱导率达100%;最适宜大青杨丛生芽增殖的培养基为:MS+0.05 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,芽健壮;最适宜大青杨生根的培养基为:1/2MS+0.1 mg/L IBA,经过14 d生根,生根率达100%。     

番茄叶片再生系统建立的研究

比较了不同基本培养基、不同激素及其不同浓度组合对4个番茄栽培品种叶片诱导愈伤组织、不定芽分化及其生根的效果.结果表明:MS+6-BA 3.0mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30 mg/L(pH=5.8)对愈伤组织诱导及诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;MS+IAA 0.1mg/L+蔗糖20mg/L培养基对生根最好。