鸭肉肌内磷脂水解酶的提取及相关酶系的酶活测定

为了优化肌内磷脂水解酶的提取过程,建立各种鸭肉肌内磷脂水解酶活的测定方法。采用pH 7.5、8.0、8.5的0.1 mol.L-1的Tris-HCl缓冲液提取鸭肉肌内磷脂水解酶,用饱和度范围为0～90%的硫酸铵进行盐析,研究新鲜鸭肉及板鸭中酸性脂肪酶、中性脂肪酶、总磷脂酶、磷脂酶A2(PLA2)、磷脂酶C(PLC)和磷脂酶D(PLD)的活力。结果表明,肌内磷脂水解酶的最佳pH为8.0,最佳盐析条件为70%饱和度的硫酸铵溶液。透析过后的粗酶液中酸性脂肪酶活略大于中性脂肪酶,磷脂酶活次之。     

超声波处理对鸭肉肌内磷脂酶解反应的影响

以脂质体为反应介质、鸭肉肌内磷脂水解酶为酶液,研究了超声温度、超声时间以及超声功率对鸭肉肌内磷脂酶解的影响。结果表明:随着超声温度的升高,磷脂酶解程度显著增加,但超过50℃时,磷脂酶解程度降低;随着超声时间的延长,磷脂酶解程度增加,在0.5 h内即可产生大量的酶解产物;随着超声功率的增大,磷脂酶解程度增加。鸭肉肌内磷脂酶解最优化的反应条件为:超声温度50℃、超声时间0.5 h、超声功率270 W。     

磷脂酰胆碱反应体系的建立

采用2-油酸-1-棕榈酸磷脂酰胆碱为表面活性剂、低级醇为助表面活性剂、异辛烷为油相、蒸馏水为水相,以伪三元相图微乳面积大小为指标,考察磷脂酰胆碱微乳体系.结果表明,磷脂/正丙醇/异辛烷/水W/O徽乳体系、磷脂/正丁醇/异辛烷/水W/O微乳体系以及磷脂/正丙醇/异辛烷/水O/W微乳体系均为稳定的磷脂酰胆碱微乳体系.3种微乳体系和脂质体分别与鸭肉肌内磷脂酶振荡反应10h后,采用TLC联用Quantity One软件鉴定反应产物中的脂肪酸,以脂肪酸斑点分析的Trace Qty值为指标,最终确定磷脂酰胆碱反应体系.因此,以脂质体作为反应体系所产生的脂肪酸最多,即脂质体为磷脂酰胆碱最佳反应体系.为进一步研究磷脂酰胆碱的酶解机制和磷脂酶的分离纯化提供技术方法.     

肌内脂质参与形成板鸭风味的模拟体系研究

初步研究了肌内脂质参与形成板鸭风味的模拟体系。通过模拟体系中肌内脂质的去除与否或是否添加磷脂酶,比较风干(依据板鸭加工的风干条件)后腊香味的产生的强弱。结果表明,肌内脂质特别是磷脂对板鸭腊香味产生的作用很大。     

检测磷脂酶A2的气相色谱法的建立与应用

磷脂酶A2(Phospholipase A2,PLA2),即磷脂-2-酰基水解酶(EC 3.1.1.4),广泛存在于生物体内,是磷脂分解代谢中起重要作用的酶。它催化甘油磷脂C-2位脂肪酸的水解反应,生成溶血磷脂和脂肪酸。PLA2具有重要的生理意义,在代谢过程中能够消化磷脂分子,而且在激素的信号传递以及发炎过程等方面都起重要作用。PLA2也具有广泛的应用价值,可以用于生物膜构造和机能的研究、溶血磷脂的制造、油脂精炼、疾病治疗、饲料添加剂制造等方面。     

磷脂酶D参与的植物信号转导

磷脂酶D（PLD）是植物中一种重要的磷脂水解酶。介绍了PLD的特性及其在植物信号转导中的作用。     

亚临界流体酶催化制备富含多不饱和脂肪酸的磷脂研究

以亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R134a)为介质,固定化脂肪酶Lipozym TL IM催化鱼油多不饱和脂肪酸与大豆磷脂的酸解反应制备EPA/DHA磷脂,探讨了压力(2～8 MPa)、温度(30～60℃)、水分、接触时间(1～12 h)对酶稳定性的影响,研究了固定化脂肪酶Lipozyme TL IM在亚临界R134...     

酶催化制备富含多不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸及其抗肿瘤活性研究

以亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R 134a)作为非水介质,以磷脂酶D催化鱿鱼卵磷脂与L－丝氨酸的酰基转移反应制备富含多不饱和脂肪酸(EPA/DHA)磷脂酰丝氨酸(PS),探讨了亚临界R134a体系条件对酶促反应的影响.采用四氮唑蓝还原法(MTT法),研究所制备的EPA/DHA磷脂酰丝氨酸对人宫颈癌细胞(Hela细胞)和结肠癌细胞(Caco-2细胞)的体外抗肿瘤活性.结果表明,磷脂酶D在亚临界R134a中显示出高活性,在6 MPa 、40℃、加水2.4 mL、反应240 min的条件下,酰基转换反应制备EPA/DHA磷脂酰丝氨酸的转化率为84.77％;制备的EPA/DHA磷脂酰丝氨酸对Hela细胞和Caco-2细胞增殖有显著抑制.200 μg/mL PS作用于Hela细胞72 h,可使其存活率下降30％;200 μg/m LPS作用于Caco-2细胞72 h,可使其存活率下降40％.     

不同品种冰鲜鸭肉加工特性和游离脂肪酸组成的比较分析

[目的]为生产高品质鸭肉提供参考依据。[方法]测定并比较番鸭、高邮鸭、荆江鸭3种鸭肉中的水分、粗脂肪、蛋白质含量、pH值、失水率、剪切力和游离脂肪酸含量。[结果]3种鸭肉的水分含量、脂肪含量和失水率均存在一定差异。不同品种鸭肉的剪切力差异显著(P<0.05)。一般来说,肌内脂肪含量越高,剪切力值越低。鸭肉肌内脂肪中含量最高的游离脂肪酸为油酸,其在番鸭、高邮鸭和荆江鸭的提取脂肪中含量分别为7.65、16.10和12.80 mg/g。棕榈酸、亚油酸、硬脂酸和花生四烯酸含量也较高,而棕榈油酸和亚麻酸的含量较低。肌内脂肪主要是饱和脂肪酸,其含量占总脂肪酸含量的40%~50%。[结论]肉鸭的脂肪酸组成与地方鸡种和肉鹅类似。     

亚临界R134a体系中的绿色酶促反应研究(英文)

以环境友好的亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R134a)作为反应介质,用磷脂酶D催化卵磷脂(PC)的酰基转移反应制备磷脂酰丝氨酸(PS)。探讨了压力、温度、水分、酶量、底物对酶促反应的影响。结果表明,磷脂酶D在亚临界R134a中(303～323 K、2～8MPa)表现出较高的催化活性。与传统的有机溶剂反应体系相比,亚临界R134a体系能够改善酶促反应动力学,即需要较少的酶量即可迅速达到较高的转化率;在亚临界R134a体系压力6 MPa、体系温度313 K的条件下,9.6 U磷脂酶D催化反应240 min,磷脂酰丝氨酸的含量达到84.88%。     

蛇毒突触前磷脂酶A_2神经毒素的作用机制研究进展

蛇毒突触前磷脂酶A2神经毒素(Snake presynaptic phospholipase A2 neurotoxins,SPANs)是蛇毒中毒性最大的成分之一,主要作用于脊椎动物神经-肌肉接头(Neuromuscular junction,NMJ)处,阻断神经递质乙酰胆碱的释放致使动物肌肉麻痹、呼吸衰竭直至死亡。SPANs与突触前膜特异性结合,水解膜磷脂生成溶血磷脂(Lysophospholipids,LysoPC)和脂肪酸(Fatty acids,FA),改变膜构象、膜通透性提高导致Ca2+大量内流至神经末梢、突触囊泡(Synaptic vesicles,SV)枯竭、线粒体功能障碍等。对蛇毒突触前磷脂酶A2神经毒素的受体分子及其引发的一系列胞内分子事件进行综述。     

磷脂酶D(PLD)在植物信号转导中的作用

磷脂酶D是植物中一类主要的磷脂水解酶。它的作用不仅在于通过水解细胞膜中的磷脂而影响到膜的结构、功能和稳定性。而且最近几年的研究发现它在细胞的信息传递、激素作用的发挥、膜运输、细胞增殖、细胞骨架组装、细胞的防御反应、分化和生殖等过程中都有重要作用。由于这一发现,使对磷脂酶D(PLD)的研究掀起了一场热潮。本文就PLD基因分离与克隆,PLD的特性和PLD在信号转导中的作用等研究进展情况作一介绍。     

植物非特异性磷脂酶C的研究进展

非特异性磷脂酶C(non-specific PLC,NPC)能够水解磷脂酸胆碱和磷脂酰乙醇胺生成二酰基甘油(diacylglycerol,DAG),虽然非特异性磷脂酶C没有PLC家族基因的C2、X、Y、EF等结构域,但它仍含有1个磷酸酯酶结构域,能够水解磷脂。近年来研究发现,非特异性磷脂酶C在植物逆境胁迫和信号转导的过程中起着重要的调节作用。因此本文对非特异性磷脂酶C的结构、生理功能及其作用机制进行概述,并对其研究前景进行了展望。     

微山湖河蟹养殖区异养细菌产酶情况对河蟹养殖的影响研究

为了解微山湖河蟹养殖区水体和底泥中异养细菌胞外产酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、脲酶)情况,对微山湖养殖区微生物进行了初步分离和筛选,并在含有蛋白质、脂肪、淀粉、尿素的固体培养基上培养观察并测量记录菌落和水解圈大小。结果表明:产蛋白水解酶和脂肪水解酶的细菌明显多于产淀粉水解酶和脲酶的细菌数量,同时菌株一般多产蛋白水解酶和脂肪水解酶,少产淀粉水解酶和脲酶,这对河蟹养殖的酶用饲料具有很大的影响。     

利用磷脂酶A2提高动物对饲料的利用率

介绍了动物饲料中磷脂的消化过程、磷脂酶A2 在磷脂消化过程中所起的作用以及磷脂酶A2 作为饲料添加剂的应用前景。     

肌原纤维蛋白结构变化对鸭肉品质的影响

[目的]探究肌原纤维蛋白结构变化与鸭肉品质的关系。[方法]采用水浴、微波、红外3种加热方式处理鸭肉,并对鸭肉肌原纤维蛋白的结构性质(羰基含量、巯基含量、二级结构)以及鸭肉品质指标(pH、颜色、持水性、质构)进行测定。[结果]随着温度的升高,硬度、白度值(L~*)、羰基值、无规卷曲呈显著上升的趋势(P<0.05),红度值(a~*)、持水力、蛋白质二级结构(α螺旋)呈显著下降的趋势(P<0.05);硬度与α螺旋呈现极显著负相关(P<0.01),弹性与无规卷曲呈正相关(P<0.01),L~*值与持水力呈负相关(P<0.01),a~*值与羰基值呈负相关(P<0.01)。[结论]鸭肉肌原纤维蛋白结构变化对鸭肉品质产生明显的影响,表现在肌原纤维二级结构变化即α螺旋下降、无规卷曲上升导致鸭肉硬度和弹性上升,羰基值上升导致a~*上升。     

南京板鸭加工过程中肌内磷脂与游离脂肪酸含量的变化

研究了南京板鸭各个加工工艺阶段的股二头肌肌内磷脂与游离脂肪酸含量的变化.采用氯仿-甲醇溶液提取肌内脂质,采用固相萃取法将游离脂肪酸和磷脂与其他脂类分离,用高效液相色谱分析各种磷脂组分的含量,通过毛细管气相色谱分析了游离脂肪酸的含量.结果表明,在南京板鸭加工过程中,各种磷脂含量显著降低,游离脂肪酸含量显著提高,游离脂肪酸含量的提高与磷脂含量的降低与脑磷脂含量的下降关系密切.     

PI-PLC基因调节植物花粉管生长作用的研究进展

磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)能够水解植物细胞中的磷脂生成三磷酸肌醇(IP3),而IP3可以促进花粉管细胞中Ca~(2+)的释放,从而促进植物花粉管生长。深入了解PI-PLC调节植物生长的作用,从而为PI-PLC基因在植物生长中的进一步研究提供参考,从PI-PLC基因的定位与结构、PI-PLC与质膜的结合方式、IP3促进Ca~(2+)释放的途径以及PI-PLC调节植物花粉管极性生长的作用机制等方面进行综述,并对磷脂酶C的水解产物及其调控植物生长发育的分子机制研究进行了展望。     

磷脂酶D高效产生菌的筛选及鉴定

采用蛋黄平板法,从河南某香油作坊附近土样中筛选到2株降解磷脂的菌株X2和X10,产物分析和酶活测定表明,X2所产磷脂酶主要为磷脂酶D,酶活3.2 U/mL,X10除产少量磷脂酶D外,可能还产磷脂酶A.根据形态观察、生理生化特征和Biolog自动微生物分析系统的鉴定,初步判定X2为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),X10为嗜麦芽糖寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia).     

磷脂酶Lecitase Ultra用于花生油脱磷工艺的研究

利用磷脂酶将花生油中的非水化磷脂转化为水化磷脂是一种代替化学脱胶的新方法。采用新型磷脂酶Lecitase Ultra对花生油进行脱磷脂研究,确定了该方法的反应条件:酶添加量25 mg/kg,反应温度55℃,pH值5.0,反应时间2 h。在此条件下花生油磷脂残留量降到4.2 mg/kg。