柳枝稷的组织培养技术研究

[目的]探索柳枝稷的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。[方法]以柳枝稷幼穗为外植体进行组织培养获得组培苗,建立相应的植株再生系统。[结果]愈伤组织诱导培养基为MS＋5．00mg／L2,4-D＋0．15mg／L6．BA＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;继代与增殖培养基为MS＋4．00mg／L2,4-D＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;分化培养基为MS＋0．2mg／L KT＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;生根培养基为1／2MS＋0．80％蔗糖＋0．70％琼脂。愈伤组织诱导和继代培养阶段培养温度为24℃,在分化和生根培养阶段培养温度为28℃。幼穗外植体的出愈率达95％,愈伤组织增殖率在800％-1000％以上,分化率达80％以上,生根率在98％以上。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达95％以上。[结论]采用优化激素搭配的培养基可得到高效的诱导率、分化率和生根率。     

荷兰月季快繁技术研究

[目的]探讨荷兰月季快速繁殖技术。[方法]以荷兰月季一年生枝条为试材,以MS为基本培养基,添加不同浓度激素,组配成具有不同激素组合的12种培养基,研究不同浓度的激素组合对无菌芽诱导、丛生芽增殖、成愈率、分化率及生根的影响,筛选出适合无菌芽诱导、丛生芽增殖和诱导愈伤的培养基和适合愈伤分化的培养基。[结果]在12种培养基中,适合无菌芽诱导的培养基为MS＋BA1．0mg／LBA＋0．2mg／LNAA,腋芽诱导率最高达68．0％;适合丛生芽增殖培养基为MS＋1．0mg/L BA＋0．1mg/L NAA,增殖倍数为3．6倍;适合产愈培养基为MS＋3．0mg／LBA＋0．2mg／L NAA,产愈率最高达41．6％;适合分化培养基为MS＋2．0mg／LBA＋0．2mg/L NAA,分化率最高为21．1％;适合生根培养基为MS＋0．1mg／L NAA＋2．0g／L活性炭,小苗移载成活率高达90％以上。[结论]该研究为实现荷兰月季工厂化育苗奠定了基础。     

甜魔芋愈伤组织诱导与植株再生研究

以甜魔芋球茎为外植体,进行愈伤组织诱导、芽分化及植株再生研究。结果表明：球茎在MS附加1.5mg／LBA和1．5mg／LNAA的培养基中,愈伤组织诱导率达100％;在MS附加1．0∽1．5mg/LBA和0．2mg/LAA分化培养基中,其分化率达90％以上;不定芽在生根培养基MS附加0．5mg／LBA和0．2mg/LNAA上,能100％生根形成完整的植株。     

显齿蛇葡萄离体快繁体系的建立

[目的]利用组织培养的方法建立快速、高效的显齿蛇葡萄快速繁殖体系。[方法]以显齿蛇葡萄带芽茎段为材料,研究了不同灭菌方法、培养基和激素组合对显齿蛇葡萄离体快繁的影响。[结果]外植体采用75％乙醇浸泡20s＋0．1％HgCl2处理8min＋吐温-801-2滴灭菌效果较好;腋芽诱导适宜的培养基为B5＋1．00mg／LBA＋0．05mg／LNAA;增殖培养以MS／B5＋1．50mg／LBA＋0．05mg／LNAA为宜;生根以1／2MS＋O．50mg／LIBA的培养基效果好。[结论]建立了一个显齿蛇葡萄离体快繁的高频率发生体系,为其愈伤再生体系、遗传转化及无性系变异筛选奠定了技术基础。     

花魔芋组织培养的研究

[目的]筛选适合花魔芋生长的诱导、分化和生根培养基。[方法]以湖北省秭归县的花魔芋球茎和鳞片作为外植体,以MS培养基为基本培养基,添加不同激素,分别组配成10种诱导培养基和分化培养基进行组织培养,然后将诱导的魔芋丛芽切成单株后接入MS＋NAA0．1—0．5mg／L生根培养基。研究不同激素配比对愈伤组织形成和芽分化以及生根的影响。[结果]球茎和鳞片在MS＋6-BA1.0mg／L＋NAA1．0mg／L培养基上容易诱导愈伤组织,诱导效率分别为92％和90％,且愈伤组织容易分化。球茎在MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．15mg／L培养基上分化效率为86．7％,鳞片在MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L培养基上分化效率为83．3％。将球茎和鳞片分化出的不定芽转至MS＋NAA0．5mg／L的培养基上,生根率可达94％,20d后培养出完整植株。[结论]该试验初步建立魔芋的再生体系,为进行大规模生产魔芋种苗提供良好技术支持。     

榅桲离体培养繁殖的研究

利用榅桲茎尖进行继代培养,建立了榅桲的离体再生体系。结果表明,适合离体叶片愈伤组织诱导的培养基为1／2MS＋KT0．5mg／L＋2,4-D1．0mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L;适合愈伤组织分化不定芽的培养基为MS＋TDZ3．0mg,／L＋NAA0．3mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L;适合叶片再生不定芽的培养基为MS＋TDZ2．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L;适合榅桲茎段生根的培养基为1／2MS＋IAA0．3mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L。     

多年生黑麦草成熟种子愈伤组织的诱导和植株再生研究

[目的]探索多年生黑麦草的愈伤组织诱导和植株再生,为多年生黑麦草的转基因研究奠定基础。[方法]以多年生黑麦草成熟种子为外植体,施以浓度不同的外源激素,探讨不同激素组合对愈伤组织诱导、继代培养以及植株分化的影响。[结果]在附加了8,ooomg／L的2,4-D．0．025mg／L的6-BA的MS培养基中诱导率最高,达56．42％。愈伤组织经过2～3次继代后分化,分化培养附加了2．0mg／L的6-BA的培养基中分化率最高为34．14％,且愈伤组织继代后的状态明显影响分化率。在大量元素减半的MS培养基中附加0．5mg／LNAA进行生根培养,生根率达98％。[结论]建立了高频的遗传再生体系。     

龙胆草组织培养及其无性系的研究

[目的]建立龙胆草组织苗繁育体系。[方法]以龙胆草的嫩茎为材料,进行愈伤组织的诱导与分化、不定芽的分化与生根、试管苗移栽与移植的研究。[结果]MS＋0.2mg/LBA＋1.0～1.5mg/L2,4-D是诱导嫩茎形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;MS＋1.2mg/LAgNO3＋0.6mg/LBA＋0.1mg/LNAA是愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1/2MS＋0.1mg/LIAA＋0.3mg/LNAA是龙胆草试管苗生根培养和生根继代培养的理想培养基;移植到山坡上的试管苗保持了龙胆草的各项植物学性状。[结论]在该试验条件下,培育的试管苗移栽成活率达96%,说明此方法完全可以用于大田生产。     

菊花脑叶片组织培养再生植株的研究

[目的]建立菊花脑叶片组织培养再生技术。[方法]以菊花脑叶片作为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同激素设计10种培养基,研究不同种类和浓度的激素组合对菊花脑不定芽和根诱导率的影响,筛选愈伤组织诱导、芽诱导及生根的最佳培养基。[结果]将无菌苗的叶片外植体接种于最佳愈伤组织诱导培养基MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg/L NAA,培养15d可获98．0％的诱导率;之后将带有少量外植体的愈伤组织切下,接种到最佳芽诱导培养基MS＋1．0mg／L6-BA＋0．5mg／L NA量上培养,可获94．0％的出芽率;然后再将1cm以上的再生芽转接至最佳生根培养基MS＋IBA 0．05mg／L上生根,生根率这100％;生根25d以上的幼苗经炼苗和移栽后,成活率在95％以上。[结论]建立了菊花脑叶片组织培养再生植株的技术程序．     

印楝(Azadirachta indica A.)高频植株再生系统的建立

[目的]建立印楝高频植株再生系统。[方法]以印楝带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,分别附加6-BA 0．1、0．3、0．5、0．8、1．0mg／L和N从0、0．1、0．3、0．5mg／L组配14个培养基配方处理进行芽分化的诱导培养试验,生根培养采用MS＋IBA0．2mg／L、1／2MS和Ms的3种培养基,研究外植体最适宜的消毒时间和取材部位,筛选诱导印楝芽分化和生根的最佳培养基配方。[结果]初代培养中,印楝外植体最适宜的消毒时间为10～12min,最适宜的取材部位为茎尖及植株的上部。14个培养基处理中,诱导芽分化的最佳培养基为：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋0．65％琼脂＋3％蔗糖（pH5．8）。诱导生根的最佳培养基为：1／2MS＋0．65％琼脂＋3％蔗糖（pH5．8）,生根率85．13％,小苗移栽成活率80％。[结论]该研究为印楝规模化快繁和遗传转化体系的建立奠定了基础。     

新疆裕民华卫红花GAP基地红花采收时间的研究

[目的]确定新疆裕民华卫红花GAP基地红花的最佳采收时间。[方法]采用HPLC法对2008～2010年红花采收期内5个不同时段采收的红花中羟基红花黄色素A、山奈素含量进行测定,并对指纹图谱进行分析。[结果]采收时间对红花中羟基红花黄色素A、山奈素含量及指纹图谱无明显影响。[结论]红花在采收期1 d内任一时间进行采收,对红花质量无明显影响,可以在红花GAP基地生产中进行推广应用。     

温度对不同品种红花种子萌发的影响

[目的]探讨温度对不同品种红花(Carthamus tinctorius L.)种子萌发的影响。[方法]选取裕民无刺、新红4号和吉红1号3个红花品种种子作试验材料,在不同温度下进行发芽试验。[结果]温度对3个品种红花种子萌发的影响很大。红花种子在温度5～35℃下均有萌发,随着温度升高,始发芽时间提前,发芽周期缩短,发芽率降低。在温度5～25℃下都可以保证很高的发芽率,最高发芽率在10℃,为87.89%。但考虑到地温与大气温度的差异性,所以播种红花的适宜温度范围为10～15℃。[结论]栽培红花时宜根据当地气候条件选择合适品种。     

抗松针褐斑病湿地松子代组培苗瓶内菌根化研究

[目的]研究抗松针褐班病湿地松子代组培苗瓶内菌根化。[方法]对湿松地再生植株离体条件下菌根的形成进行了研究,并对再生植株的生长状况进行了观察。[结果]菌根真菌培养基质和接种量对离体条件下菌根的形成有较大影响。湿地松丛生芽诱导出根原基后,以转接到珍珠岩为培养基质接种彩色豆马勃为最佳,有利于菌根的形成;在珍珠岩接种彩色豆马勃为2个菌块时,菌根化率高达84.4%,形成的二叉分枝状短根最多,平均每条主根上形成12.49条;菌根的形成提高了再生植株的驯化移栽成活率,菌根化再生植株在植物生长室长势良好,根系发达。[结论]为提高抗松针褐班病湿地松组培再生植株的成活率提供了依据。     

不同产地红花的矿质元素及羟基红花黄色素A含量分析

[目的]提高中药材红花的质量,为红花的质量控制和品质评价提供基础资料和理论依据。[方法]利用原子吸收分光光度法测定新疆红花中6种重金属和5种微量元素的含量,运用高效液相色谱法测定其羟基红花黄色素A的含量。[结果]161团的红花绒的Mg含量达5080．00mg／kg,红旗农场的红花绒的Mg含量为5．62mg/kg,相差902.9倍。161团的红花绒的Fe含量比红旗农场的高3．6倍。两个产地的红花绒的办含量很接近,仅相差0．30mg／kg。红旗农场的红花绒的Pb和As含量仅是161团的17．9％和61．4％。两个产地的红花绒的№含量仅相差0．0（303nee＇kg。161团的红花绒样品的羟基红花黄色素A的含量为1．95％,红旗农场红花绒样品的羟基红花黄色素A的含量为2．02％。[结论]红旗农场和161团生产的红花的重金属含量和羟基红花黄色素A的含量均符合国家标准。     

红花黄色素的提取研究

[目的]对红花黄色素提取条件进行了系统研究。[方法]以羟基红花黄色素A为对照品,对萃取红花黄色素影响因素,包括提取剂,提取温度、提取时间、提取溶剂体积等进行单因素的考察。[结果]在单因素试验基础上,选定蒸馏水为最佳提取剂。通过正交试验最终确定了红花黄色素的适宜提取条件为:提取温度60℃,提取时间50 min,液固比为100(ml/g),提取次数为4次。[结论]该研究确定了红花黄色素的适宜提取条件,为生产工艺参数的选择提供了依据。     

微波消解原子吸收法测定宁夏红花中微量元素含量的研究

[目的]测定宁夏红花中微量元素的含量。[方法]选择HNO3-H2O2作为红花样品消化的酸溶体系,利用微波密闭消解系统对样品进行消解,并采用原子吸收光谱法对宁夏红花中Cu、Fe、Zn、Ca、K、Mg、Na和Mn等8种无机元素进行检测;通过加样回收率试验,验证分析数据的可靠性。[结果]宁夏红花中Cu、Fe、Zn、Ca、K、Mg、Na和Mn元素的平均回收率分别为98.5%、96.45%、102.0%、95.3%、99.1%、96.8%、99.5%和98.9%;含量分别为25.311、808.61、110.52、16 885.92、10 611.01、1 820.3、52.35和2 285.4μg/g。[结论]该方法快速,简单,精确,可满足红花样品分析检测的要求,为研究红花中微量元素含量及其产品品质提供了科学方法。     

水回流法提取河湟红花籽粕中5-羟色胺衍生物的工艺研究

[目的]优选水回流法提取河湟红花籽粕5-羟色胺衍生物的最佳工艺条件。[方法]以5-羟色胺衍生物含量为指标,采用正交试验法对影响水回流法提取河湟红花粉粕中5-羟色胺衍生物的提取温度、提取时间、提取次数和料液比4个因素进行考察,优选出最佳提取方案。[结果]影响蒸馏水回流法提取河湟红花籽粕中5-羟色胺衍生物含量的因素依次为提取温度提取时间提取次数料液比;提取温度对5-羟色胺衍生物提取率具有明显影响;最佳提取方案为:提取温度80℃,提取时间1.5 h,提取次数3次,料液比1∶20(g/ml);在此条件下提取的5-羟色胺衍生物含量为0.66%。[结论]优选出了最佳提取工艺,为河湟红花籽粕的开发利用提供了理论依据。     

中药对奶牛子宫内膜炎主要致病菌的体外抑菌研究

[目的]为开发治疗奶牛子宫内膜炎的中药制剂提供依据。[方法]选取连翘、黄连、丹参、大黄、大青叶、益母草、当归、红花对奶牛子宫内膜炎的主要致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌)进行单味中药抑菌试验,在此基础上配成3个复方,确定复方的抑菌效果。[结果]连翘、黄连、大黄对3种致病菌均有很好的抑菌效果,抑菌直径都超过了15.0 mm,其次是红花、大青叶和丹参。复方1、复方2、复方3对3种致病菌均有很好的抑制作用,其中复方1(连翘、大黄、益母草、红花按一定比例组成)对3种致病菌极度敏感,平均抑菌直径为22.3 mm,其他2个复方对3种致病菌高度敏感。[结论]选用复方中药治疗奶牛子宫内膜炎是可行的。     

外生菌对植物光合日变化的通径分析——以樟子松为例

[目的]揭示樟子松光合日变化特征及影响因子之间的作用关系。[方法]通过研究4年树龄的樟子松光合日变化特征,设置接种彩色豆马勃菌[Pisolithus tinctorius(Pers.)CokerCouch](接菌组)和不接菌(对照组)2种处理,采用便携式光合测定仪测定樟子松08∶00—18∶00的净光合速率(Pn)及其参数,研究其光合日变化特征。[结果]对照组和接菌组的Pn日变化绘制的都是"双峰"曲线。对照组的Pn是0.89~6.67μmol/(m~2·s),接菌组的Pn是0.51~10.90μmol/(m~2·s),最小值均出现在18∶00,最大值均出现在09∶00。接菌组Pn的日均值显著大于对照组。影响Pn的环境因子存在共线关系。得到多元逐步线性回归方程,对照组:Pn=-120.96+63.083Cond-0.157Ta+8.06Ls+0.001PAR-0.05Ca+1.644RH(R~2=82.9,F=161 279.83);接菌组:Pn=5 910.823+92.104Cond-11.807Ta+12.622Ls-0.006PAR(R~2=0.92.7,F=2 045.23)。通过通径分析得到对照组环境因子对Pn的通径系数(直接作用)的顺序是CondTaLsPARCaRH,间接通径系数(间接作用)的顺序是RHPARTaCaLsCond;接菌组环境因子对Pn的通径系数大小顺序是CondLsPARTa;间接通径系数顺序是LsPARCondTa。接菌组RH、Ca不是限制因子。[结论]试验结果为不同处理下影响Pn的主导因素研究提供了参考。     

铝胁迫下外生菌根真菌对土壤无机磷的溶解释放

[目的]研究铝胁迫下外生菌根真菌对土壤无机磷的溶解释放。[方法]铝胁迫下,以彩色豆马勃(Pisolithus tinctorius,编号Pt)和松乳菇(Lactarius delicious,编号Ld)为供试菌株,土壤为唯一磷源,采用液体培养试验研究菌丝生长情况,以及对土壤无机磷的活化。[结果]在铝胁迫下,2株外生菌根真菌的生物量随着铝离子浓度的升高,表现为先增高后降低的趋势,其中,在0~2.0 mmol/L铝离子浓度下,Pt的生物量均大于Ld,说明Pt的抗铝毒能力强于Ld。此外,p H在铝离子胁迫下显著下降,2株外生菌根真菌不同程度地活化土壤中无机磷。[结论]外生菌根真菌的抗铝和溶磷能力与其分泌的氢离子和有机酸有关。