AccQ-Tag-HPLC法测定烟叶生长过程中游离氨基酸的变化

[目的]在AccQ-Tag分析包的基础上建立一种适合烟草中游离氨基酸测定的方法。[方法]采用WATERS公司的AccQ-Tag试剂包作为构建方法的基本条件,通过优化烟草中游离氨基酸的前处理和色谱条件,以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂与各氨基酸柱前定量衍生后,再用AccQ-TagTM柱梯度洗脱,建立了烟叶中游离氨基酸的AccQ-Tag-HPLC测试方法。[结果]用该方法测定烟叶杀青样品中的游离氨基酸,能够分离检测烟叶中的16种游离氨基酸,其回收率均在82.8%～105.3%,标准偏差均在2.5%以内,具有较好的重现性和回收率。烤烟杀青样中游离氨基酸以脯氨酸、天门冬氨酸、丝氨酸和丙氨酸含量较高。[结论]AccQ-Tag-HPLC法是一种实用的烟草中游离氨基酸的分析方法,适于烟叶中游离氨基酸从旺长期到成熟期的不同时段含量变化的测试。     

硅烷化衍生/气相色谱法测定烟草中的脱氧果糖嗪

[目的]以2,5-脱氧果糖嗪为标样,采用气相色谱方法准确测定烟草中脱氧果糖嗪的含量。[方法]以吡啶与二甲基亚砜（V/V=1∶1）的混合溶剂为衍生溶剂,双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（BSTFA）为衍生试剂对脱氧果糖嗪进行硅烷化衍生,衍生后的烟草样品以2,5-脱氧果糖嗪为标样,用气相色谱进行定量分析。[结果]80℃下衍生60 min后,脱氧果糖嗪标准曲线的线性回归系数为0.999 4,线性范围7.08~70.80μg/ml。脱氧果糖嗪的检出限为1.42μg/ml,回收率为93.0%,RSD值为5.95%。[结论]该方法可靠,具有良好的分析效果,可用于准确测定烟草中脱氧果糖嗪的含量。     

高效液相色谱荧光检测法测定22种桑叶中1-脱氧野尻霉素含量的研究

[目的]采用柱前衍生高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD),对22种桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的含量进行测定。[方法]采用水浴超声提取法提取桑叶中的DNJ,以9-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)为衍生化试剂,在p H 8.5的K3BO3缓冲液中对DNJ进行衍生,生成的荧光物质FMOC-DNJ用高效液相色谱荧光检测法检测。色谱流动相为乙腈—浓度0.1%乙酸水溶液。同时,对分离条件做了改进,采用梯度洗脱的方法对桑叶提取物中衍生化的DNJ进行分离。[结果]该方法的线性范围为2.02~40.50μg/ml,线性相关系数为0.999 1;方法检出限、定量限分别为0.15、0.50μg/ml。对样品进行加标回收试验,回收率范围为93.73%~97.91%。[结论]该方法用于测定桑叶中DNJ的效果令人满意。     

柱前衍生RP-HPLC法测定犀牛角中氨基酸的含量

[目的]建立柱前衍生法测定犀牛角中氨基酸含量的方法。[方法]犀牛角以酸水解法制备水解氨基酸样品溶液,采用柱前衍生-液相色谱法(RP-HPLC)法测定氨基酸含量。色谱条件为:色谱柱为Waters Nova-Pak C18柱(150 mm×3.9 mm,5μm),以乙腈-缓冲盐为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,紫外检测器检测波长为248 nm,柱温为37℃。[结果]17种氨基酸在0.003 4～0.191mg/ml范围内有良好的线性关系(r0.999 4),平均回收率(n=6)为97.8%。[结论]犀牛角中含有大量的氨基酸,其总氨基酸含量高达41.3%。该方法对研究犀牛角的药用价值与寻找犀牛角药用替代物有积极意义。     

柱前衍生化-HPLC检测亚氨基二乙酸法制备双甘膦反应进程的研究

[目的]建立一种利用亚氨基二乙酸制备双甘膦的新检测方法。[方法]以9-芴基甲氧羰酰氯为衍生化试剂对合成双甘膦的反应物进行衍生化。采用Gemini C_(18)(150.0 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,室温下以0.05 mol/L NaH_2PO_4(pH=3.5)溶液-乙腈(V/V,60∶40)为流动相,流速为1.0 m L/min,检测波长265 nm,对反应液中的亚氨基二乙腈、亚氨基二乙酸和氨气衍生物进行分离检测。[结果]反应液中的亚氨基二乙腈、亚氨基二乙酸和氨气衍生物,分别在0.02~1.20、0.02~1.20、0.10~2.00 mg/m L浓度范围内呈现良好的线性关系(r≥0.999 8),检出限分别为0.000 4、0.000 4、0.003 0 mg/m L,加样回收率分别为99.96%、99.86%、99.89%,相对标准偏差均不超过1.6%。[结论]该研究建立的方法可用于亚氨基二乙酸法制备双甘膦反应体系的跟踪分析。     

川金丝猴粪样内皮质醇激素保存时效的研究

野生动物新鲜粪便内激素的测定是探查动物生理状态的非损伤性方法,但新鲜粪便的保存时效因物种等而异。因此,掌握目标物种的新鲜粪便内激素的保存时效是应用该方法的前提。采取95%乙醇(以下简称乙醇)、低温((4±1)℃,以下简称低温)方法保存川金丝猴的新鲜粪样,设保存0(标准参照)、5、6、7、8、10、20、30d8个处理。在各处理的保存时间段到期时,运用RIA法测定粪样内皮质醇激素的含量。结果显示:低温条件下,雌性川金丝猴粪样内皮质醇含量在保存6d时的平均值显著低于标准参照值(P0.05),因此可以稳定保存5d;雄性川金丝猴粪样内皮质醇含量在保存6d时的平均值显著高于标准参照值(P0.05),因此可以稳定保存5d。针对川金丝猴生存环境的特点,并据此设定该物种新鲜粪便保存方法和低温条件,所获得的测定结果是该物种野外粪样采集及保存的重要依据,可应用于该物种的野外相关研究。     

气相色谱法测定莜麦中非淀粉多糖组成单糖的方法研究

本文研究了测定莜麦中的非淀粉多糖含量的方法为衍生化-气相色谱法。通过对衍生方法、衍生试剂及衍生条件等的实验摸索,确定了使用烷基化衍生化法,采用三甲基氯硅烷作为衍生试剂,在80℃衍生,衍生时间为80min时,无论单糖标准物还是莜麦中的非淀粉多糖提取物均可制备得最佳衍生物,并可得到较理想的色谱分离峰。本方法的线性相关系数在0.995 84-0.999 09之间,可适用于莜麦中可溶性和不可溶性非淀粉多糖相关组成单糖的分离和测定,为进一步分析非淀粉多糖其它组成单糖的分析提供了一定的理论依据。     

骆驼刺根状茎中3种植物激素的分离与含量测定

[目的]建立有效的植物内源激素提取方法,并探讨利用反相高效液相色谱法同时测定骆驼刺根状茎分株处3种植物内源激素的色谱分析条件。[方法]采用反相高效液相色谱法,对骆驼刺分株处根状茎中植物内源激素赤霉素(GA3)、玉米素(ZR)和生长素吲哚-3-乙酸(IAA)进行了分离和含量测定。[结果]GA3、ZR和IAA的平均回收率为98.3%,90.3%和101.3%,说明该方法符合定量分析要求,且误差小。分离骆驼刺根状茎植物内源激素的高效液相色谱条件为:以流动相甲醇:0.75%乙酸为45∶55、流速0.7 ml/min、检测波长254 nm和柱温为25℃。[结论]该研究初步建立了分离骆驼刺根状茎植物内源激素的高效液相色谱条件。     

野生动物粪样内类固醇激素保存方法研究进展

野生动物粪样内类固醇激素是研究和监测野生动物多项生理状态的有效途径,而如何在野外条件下保存粪样并使之满足室内测定的要求成为目前野生动物类固醇激素研究的焦点问题之一.各种冷冻方法可便捷有效地保存动物粪样,但受制于野外的保存和运输条件;有机溶剂法及干燥法可在常温下一定时间内有效保存野生动物粪样,因而可行性较高,但保存期限尚处于探索之中.各种保存野生动物粪样的方法均存在其利弊,研究者需谨慎选择才能达到试验的要求.     

污水处理厂中氯贝酸分析检测方法的建立和优化

[目的]建立并优化污水处理系统中氯贝酸的分析检测方法。[方法]以上海市两个污水处理厂的污水为样品,对样品的固相萃取和衍生化方法进行了优化,GC/MS检测时采用选择离子扫描(SIM)模式定性定量检测样品。[结果]固相萃取过程中,氯贝酸的最优萃取条件为:HLB小柱,使用3 ml乙酸乙酯,3 ml甲醇和3 ml去离子水(pH=2～3)活化和8ml乙酸乙酯洗脱。衍生化条件为:衍生化试剂150μl,在70℃反应60 min。方法的检出限和定量检出限分别为0.31和1.03μg/L,回收率96.2%,相对标准偏差为6.61%(n=6)。[结论]用优化后的方法检测上海市东区污水厂和曲阳污水处理厂进水氯贝酸的含量分别为66.3和20.3 ng/L,出水浓度分别为49.9和17.5 ng/L。     

花椒籽油的提取及GC-MS分析

[目的]研究花椒籽油的最佳提取工艺,并对其脂肪酸种类及含量进行测定。[方法]分别采用索氏法和超声波法提取花椒籽油,采用单因素试验和正交试验确定2种方法的最佳提取工艺。采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对提取的花椒籽油成分进行分析。[结果]索氏法提取的最佳工艺条件为以石油醚为溶剂,料液比1∶13,提取温度75℃,提取时间2.0 h;超声波提取的最佳工艺条件为以石油醚为溶剂,料液比1∶13,提取时间90 min。花椒籽油含有9种主要脂肪酸,不饱和脂肪酸含量较高。[结论]该研究为花椒籽油的开发和利用提供了理论依据。     

木瓜中熊果酸提取工艺的优化及含量测定

[目的]优化黔北产木瓜（FRUCTUS CHAENOMELIS）熊果酸的提取工艺,并测定熊果酸含量,为木瓜的开发利用及质量控制提供科学依据。[方法]采用正交试验优化木瓜熊果酸的提取工艺,用HPLC法测定熊果酸含量。[结果]木瓜熊果酸的最佳提取工艺为：提取时间30 min,无水乙醇用量为25.0 ml,乙醇浓度为100%,在最佳条件下提取的熊果酸含量为0.324%。熊果酸在0.650～3.250μg/ml范围内,与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 1）,熊果酸平均回收率为99.20%,RSD值为0.30%。[结论]优选的提取工艺稳定可行,HPLC法简便、灵敏、准确,该研究为木瓜的开发利用及质量控制提供了科学依据。     

几种植物激素对光合细菌生长的影响

[目的]探讨几种植物激素对光合细菌生长的影响,以期为光合细菌增殖培养的促生长因子研究提供参考依据。[方法]研究了不同浓度的吲哚乙酸、α-萘乙酸和赤霉素以及混合植物激素对光合细菌生长的影响。[结果]3种植物激素对光合细菌的生长均具有促进作用,其中赤霉素效果最为明显,其次为混合植物激素。吲哚乙酸、α-萘乙酸和赤霉素促生长的最佳浓度分别为0.5、1和0.5 mg/L。[结论]该研究结果表明在增殖培养基中加入某些植物生长激素来促进光合细菌的生长是可行的。     

八角尺蠖幼虫粪便提取物抑菌活性的初步研究

[目的]研究八角尺蠖幼虫粪便提取物的抑菌作用,为其合理开发利用提供理论依据。[方法]用蒸馏水、乙醇、丙酮和正己烷4种溶剂对八角尺蠖幼虫粪便进行提取。以4种细菌和4种真菌为供试菌种,使用滤纸片法测定4种溶剂提取物的抑菌活性。[结果]八角尺蠖幼虫粪便的蒸馏水提取物对枯青霉、根霉菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和产气杆菌的抑菌效果较强;乙醇提取物对枯青霉、根霉菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较强;丙酮提取物对枯青霉、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果较强。[结论]八角尺蠖幼虫粪便的4种溶剂提取物均具有一定的抑菌活性,其中蒸馏水、乙醇和丙酮提取物的抑菌活性较强,且不同提取物对不同的供试菌种的抑菌效果也存在差异。     

不同方法提取的金钱草叶挥发油化学成分的GC-MS分析

[目的]研究水蒸气蒸馏法和溶剂萃取法提取金钱草鲜草与干草叶中挥发油成分。[方法]采用气相色谱-质谱法(GC-MS)对金钱草鲜草与干草叶中挥发油成分进行分析,并采用峰面积归一法确定各组分的相对含量。[结果]采用水蒸气蒸馏法从金钱草鲜叶和干叶所得挥发油中分别鉴定出了19和14种化合物,采用溶剂萃取法从金钱草鲜叶和干叶所得挥发油中分别鉴定出了20和11种化合物。用两种方法提取的挥发油中化学成分的组成不同。水蒸气蒸馏法提取的挥发油中,相对含量最高的成分都为β-香叶烯(鲜叶和干叶中分别达到39.67%和42.80%),而用溶剂萃取法提取的挥发油中,相对含量最高的都为邻苯二甲酸二乙酯(鲜叶和干叶中分别达到18.05%和28.64%)。[结论]不同的提取方法所得金钱草挥发油的化学成分不同,且不同的预处理方式对挥发油的成分也会产生影响。     

回流提取川楝子中川楝素工艺的优化

[目的]优化川楝子中川楝素溶剂回流提取法的最佳提取工艺。[方法]采用HPLC法检测,以川楝素含量作为指标,考察提取溶剂、料液比、提取温度、提取时间、提取次数对川楝素提取率的影响,筛选出最佳的提取工艺。[结果]溶剂回流法的最佳条件：以甲醇为溶剂,料液比为1∶30,提取温度为80℃,提取时间为1.0 h,提取次数为2次。在最佳工艺条件下,川楝素提取率达1.344 9 mg/g。[结论]该工艺简单、稳定、可行,为川楝素的提取提供了一种有效的方法。     

激素对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果

[目的]寻求诱导也门铁叶片愈伤组织的最佳激素配方。[方法]以也门铁无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,分别添加不同浓度的2,4-D、BA和NAA,配制成24种激素组合,通过离体组织培养,探讨不同激素配比对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果。[结果]当NAA为0 mg/L,2,4-D与BA 2种激素以不同浓度组合,在2,4-D浓度是BA浓度的1.0~1.5倍时,也门铁愈伤组织诱导效率较高,但质量较差。当2,4-D为0 mg/L时,BA与NAA 2种激素组合的诱导率为0。当2,4-D、NAA与BA 3种激素组合且2,4-D与NAA的浓度比值为1时,也门铁愈伤组织的诱导时间短,愈伤组织质量较好。也门铁叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS＋0.5 mg/L2,4-D＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L BA,诱导率为44.4%。[结论]该研究为探索高效的也门铁组培快繁新方法提供科学依据。     

文冠果籽油的索式萃取及其组成分析

[目的]研究萃取文冠果籽油的最佳工艺条件,分析文冠果籽油的组成。[方法]以文冠果仁为原料,采用索氏萃取法萃取文冠果籽油。通过单因素试验研究萃取文冠果籽油的工艺条件,考察溶剂种类、液料比、萃取回流次数等因素对文冠果籽油萃取率的影响。采用GC-MS方法分析文冠果籽油的组成。[结果]索氏法萃取文冠果籽油的最佳工艺参数是：较合适的溶剂为乙醚,最佳液料比为5∶1（ml∶g）,适宜的萃取回流次数为5次,在此条件下,文冠果籽油的萃取率为46.0%。文冠果籽油的主要成分为油酸、亚油酸、油菜酸和棕榈酸等。[结论]文冠果籽油中不饱和脂肪酸含量高达86%,其种类比花生油和橄榄油更多,其中首次发现存在11,14-二十碳二烯酸,表明其作为高级食用油具有的良好前景。     

国内外婴幼儿配方奶粉激素含量比较

[目的]对国内外婴幼儿配方奶粉中的16种激素含量进行比较。[方法]采用高效液相色谱-串联质谱法分别测定样品中8种糖皮质激素和8种性激素的含量;分别对国内外婴幼儿配方奶粉中16种激素的检测结果、检出率、含量范围进行比较。[结果]16种激素中有15种未检出;国产奶粉和进口奶粉的黄体酮检出率分别为97%和95%,含量主要在20μg/kg（含20μg/kg）以下;在20～60μg/kg之间的,国产奶粉有11个样品,进口奶粉有2个样品,超出90μg/kg的只有2个进口奶粉样品。[结论]16种激素物质中,有15种在国内外婴幼儿配方奶粉中均没发现,而黄体酮在国内外婴幼儿配方奶粉中具有一定的普遍性,而且其含量范围有一定的相似性。