马铃薯酸胁迫植株诱导试管薯过程中干物质含量变化

[目的]提高马铃薯试管薯的繁殖系数,降低试管薯生产成本。[方法]探讨了高、低浓度蔗糖对马铃薯试管薯形成的影响及其诱导试管薯过程中植株的根、茎、叶片等部位干物质含量变化。[结果]经过适当酸胁迫的马铃薯植株在高浓度和低浓度蔗糖条件下,分别在第5天和第13天可诱导试管薯;而未经酸胁迫植株在高浓度蔗糖条件下于第9天形成试管薯,在低浓度蔗糖条件下未能形成试管薯。酸胁迫植株在诱导试管薯过程中,在高浓度蔗糖条件下,根的干物质含量在诱导试管薯第1天明显增加,茎和叶片中的干物质含量均呈单峰曲线变化;在低浓度蔗糖条件下,根的干物质含量呈单峰曲线变化,茎和叶片干物质含量呈先增加、后减少、再增加的趋势。[结论]适当的酸胁迫可促进试管薯提前结薯,且在不同浓度蔗糖条件下,植株不同部位的干物质积累规律有差异。     

转基因马铃薯内源农杆菌脱除

[目的]解决采用抗生素抑菌导致转基因马铃薯植株生长与分化受到抑制的问题。[方法]利用转基因植株诱导试管微型薯,由试管微型薯抽枝获得转基因脱菌植株。[结果]参试3个马铃薯品种中,SⅠ、SⅡ最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋6-BA0.5mg/L＋GA30.1mg/L＋cef150mg/L,NT最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋ZT0.5mg/L＋GA30.1mg/L＋cef150mg/L;薯块抽枝最佳培养基为MS＋ZT0.5mg/L＋NAA0.1mg/L;薯块直径0.5-0.7cm抽枝数最高;转基因脱菌植株在无抗生素快繁培养基中经30d培养污染率为0,脱菌植株茎段粗壮,无分枝现象。[结论]建立的方法脱菌简单易行,为转基因个体的筛选和生长排除了障碍。     

转基因马铃薯内源农杆菌脱除

[目的]解决采用抗生素抑菌导致转基因马铃薯植株生长与分化受到抑制的问题。[方法]利用转基因植株诱导试管微型薯,由试管微型薯抽枝获得转基因脱菌植株。[结果]参试3个马铃薯品种中,SI、sⅡ最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋6-BA0．5ms／L＋GA,0．1mg／L＋cef 150me／L,NT最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋ZT0．5mg／L＋GA,0．1mg／L＋cef150mg／L;薯块抽枝最佳培养基为Ms＋ZT0．5mg／L＋NAA0．1mg／L;薯块直径O．5～0．7cm抽枝数最高;转基因脱菌植株在无抗生素快繁培养基中经30d培养污染率为0,脱菌植株茎段粗壮,无分枝现象。[结论]建立的方法脱茵简单易行,为转基因个体的筛选和生长排除了障碍。     

马铃薯茎尖组织培养技术研究

[目的]提高离体马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。[方法]从马铃薯上取生长健壮的芽,经消毒后在显微镜下切取1．0到1．5min长度的茎尖,接种于诱导分化培养基上,研究了不同浓度的GA3、KT与6-BA和不同激素配比以及不同浓度的基础培养基的诱导效果,探讨了茎尖组织诱导分化的最适培养条件。[结果]低浓度的GA3可促进愈伤组织的形成,过高的GA3浓度会抑制愈伤组织的形成;KT比6BA具有更好的诱导效果;在MS＋GA30．1mg/L＋NAA0．1mg／L＋BBA0．5mg／L培养基中激素配比的诱导效果较好。[结论]MS＋0．5mg／LKT＋0．2mg／LGA3＋0．1mg／LNAA是最为适宜的茎尖组织培养基。在28℃、每天光照16h、光照强度〉2000lx的培养条件下,经7d左右即可得到形态良好愈伤组织,经15d左右即可得到分化良好的试管植株。     

蔗糖浓度和光照对马铃薯试管薯诱导的影响

以马铃薯栽培品种甘农薯1号的脱毒试管苗茎段为外植体,研究了蔗糖浓度和光照对试管薯形成和发育的影响,结果表明：马铃薯试管薯诱导培养基MS＋6-BA 3.0 mg/L中加入80 g/kg蔗糖的诱导效果明显优于其它添加蔗糖浓度的处理;黑暗处理优于光照处理;液态培养优于固态培养。     

无土栽培营养液浓度对马铃薯植株生长和微型薯形成的影响

为筛选适宜马铃薯珍珠岩基质无土栽培的营养液,以马铃薯"诺兰"组培苗为材料,研究了韩国"高试园"马铃薯植株生长(KS)和块茎形成(KT)营养液不同倍数对植株生长和微型薯形成的影响,并对微型薯形成过程中植株各部分中干物质含量变化进行了研究。结果表明:1.25KS最适合植株营养生长,植株高度达到52.4cm,3.3个分枝,形成5.2个匍匐茎;诱导微型薯过程中,1.25KT为最佳营养液,每株结薯量为4.7个。马铃薯块茎形成过程中,其叶片和块茎中的干物质含量在淀粉积累期和块茎成熟期最高。     

彩色马铃薯茎尖培养及病毒检测技术

为了探明彩色马铃薯茎尖培养方法,获得彩色马铃薯无毒试管苗,研究了不同质量浓度植物生长调节剂组合的培养基对21份彩色马铃薯后代品系组培苗形成的影响,并用RT-PCR方法对试管苗进行马铃薯主要病毒检测。结果表明,筛选出的组合(MS+NAA0.05mg·L~(-1)+6-BA0.1mg·L~(-1)+GA30.2mg·L~(-1)+泛酸钙0.2mg·L~(-1))可作为闽薯1号茎尖诱导分化的最佳培养基,优化的植物生长调节剂组合在不同的彩色品种茎尖分化和植株形成差异较大,试管苗经RT-PCR检测6种马铃薯病毒(PVX、PVY、PVS、PVA、PVM和PSTVd),获得了11份彩色马铃薯脱毒苗,可用于大田生产用试管苗。     

不同培养基对紫薇试管苗的诱导·增殖·生根的影响

[目的]提高紫薇的繁殖速度,建立紫薇的快速繁殖体系。[方法]以紫薇种子为外植体,在MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA、NAA、KT,研究不同培养基对紫薇试管苗的诱导、增殖和生根的影响。[结果]含有一定浓度激素的培养基中的种子的发芽率明显高于不含任何激素的培养基,紫薇试管苗的诱导培养基为：MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.01mg/L。随着6-BA、KT、NAA浓度的变化,茎段的出芽率、芽平均长度及生长情况都有较明显的变化,适宜增殖培养基是MS＋6-BA2.0mg/L＋KT1.0mg/L＋NAA0.01～0.05mg/L。适宜生根培养基为：MS＋NAA0.5mg/L,试管苗生长健壮,根系粗壮,生根数较多。[结论]6-BA、KT、NAA等激素的浓度对紫薇丛生芽的形成和生根有较大的影响。     

不同培养基对紫薇试管苗的诱导·增殖·生根的影响

[目的]提高紫薇的繁殖速度,建立紫薇的快速繁殖体系。[方法]以紫薇种子为外植体,在MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA、NAA、KT,研究不同培养基对紫薇试管苗的诱导、增殖和生根的影响。[结果]含有一定浓度激素的培养基中的种子的发芽率明显高于不含任何激素的培养基,紫薇试管苗的诱导培养基为:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L。随着6-BA、KT、NAA浓度的变化,茎段的出芽率、芽平均长度及生长情况都有较明显的变化,适宜增殖培养基是MS+6-BA2.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.01~0.05mg/L。适宜生根培养基为:MS+NAA0.5mg/L,试管苗生长健壮,根系粗壮,生根数较多。[结论]6-BA、KT、NAA等激素的浓度对紫薇丛生芽的形成和生根有较大的影响。     

马铃薯试管薯形成的影响因素研究

以马铃薯品种大西洋脱毒试管苗为材料,研究了切段苗龄、温度、激素、光照对马铃薯试管薯诱导的影响,在此基础上,进一步研究了蛭石覆盖茎节代替黑暗条件的不同培养方式对马铃薯试管薯诱导的影响。结果表明,结薯与切段的苗龄有关,用培养100 d左右的苗即老的切段、白天25℃,夜间18℃的室温变温、培养基中添加激素6-BA浓度为2.5~5.0 mg/L时,试管薯诱导率高;在上述条件下,将蛭石灭菌后按每瓶30mL直接倒入原来的培养瓶覆盖试管苗下部茎节2~4节,简称"固体 蛭石"培养方式,能够使覆盖茎节处快速生出匍匐茎,最终形成块茎,平均单株结薯1.9个。     

生长素和细胞分裂素对怀山药微型块茎诱导形成的影响

以B号山药试管苗为材料,研究了生长素NAA,2,4-D和细胞分裂素KT,6-BA单独使用对怀山药微型块茎诱导形成的影响。结果表明,与对照相比,生长素有利于微型块茎的有效数量、总重量、单株平均微型块茎数及块茎指数的显著提高,NAA和2,4-D诱导微型块茎形成的适宜浓度分别为0.5 mg/L和0.1 mg/L,且以2,4-D 0.1 mg/L的诱导效果最好;细胞分裂素对微型块茎的形成不利,其中6-BA效果更差,微型块茎各项指标均无显著提高,且浓度大于2 mg/L时无微型块茎形成。     

多效唑对马铃薯试管苗生长和块茎形成的影响

采用离体培养方法,研究了不同浓度多效唑处理对马铃薯试管苗生长和块茎形成的影响.结果表明,0.1～1 mg/L多效唑处理完全抑制了MS扩繁培养基中马铃薯试管苗的生长,而0.01 mg/L多效唑处理虽抑制了试管苗茎叶的生长,但叶色加深、根重和根长显著增加.在试管薯诱导条件下,0.1 mg/L多效唑处理促进了‘夏波蒂'提早结薯,使单瓶试管薯鲜重、平均直径和单薯鲜重都显著增加,同时降低了畸形薯率;而单瓶试管薯的结薯数量低于BA+CCC处理,但接近对照.这些结果表明:与广泛应用的矮壮素相比,在马铃薯试管薯生产中使用多效唑能提高试管薯产量和质量,且其使用浓度仅为矮壮素的1/5000,有利于降低残留并节约成本,是矮壮素较好的替代物之一.     

Effect of sugar/osmotica levels on in vitro microtuberization of potato (Solanum tuberosum L.)

In order to evaluate of using microtubers for conservation of potato germplasm, the main effects of sucrose, mannitol and PEG on percentage of microtuber initiation and formation, size and fresh weight of microtuber were studied. PEG decreased production and weight of microtubers, whereas higher concentrations of sucrose promoted microtuber production, microtuber size as well as microtuber fresh weight. Increasing of sucrose concentrations were improved efficiently in vitro microtuber production without negative side effects. Addition of mannitol to all media was increased microtuberization than media containing PEG. So, alcoholic sugars such as mannitol increased microtuberization, but after 5 weeks, microtuberization in media supplied with sucrose was more than the mannitol. Such studies might help to reduce the cost of production of virus free potato seed from different cultivars.     

Preliminary Studies on the Production of Artificial Seeds by Encapsutating Microtubers of Potato

The production of atificial seeds by encapsulating microtubers of potato included a series of proccesses.Initially,the micropropagation of adventitions buds and microtuber-inducing system should be established.Both high quatity microtuber and synchronizing microtuber which have the same size were necessary for producing health potato artificial seeds.In our eperiment,the optimum medium of adventitious shoot-inducing of potato Hutao,Kesi,and Favorita is DCR 1.0mg/kg MA 0.5mg/kg IBA 500mg/kg LH;the optium medium of microtuber-inducing of Hutao and Kesi is DCR 5.0mg/kg MA 200mg/kg Lh _8% sugar.and the optium medium of microtuber-inducing of Favorita is DCR 5.0 mg/kg BA 0.1mg/kg NAA 200 mg/kg LH 8% sugar,Microtubers of the same size were gained by selecting the symchronous microtubers.2.0% sodium alginate was sued to encapsulate the microtubers of potato to form the artificialo seeds.and the concentration of Ca Cl2 is 4% .Phytohormone NAA promoted the germination of potato artificial seeds.these artificial seeds have more than 90% germinating frequency in plant hormone-free DCR medium.     

中黑防杨叶片不定芽再生体系的研究

[目的]研究6-BA与NAA不同质量浓度组合,不同的材料来源及不同的取材方法对中黑防杨叶片不定芽分化的影响。[方法]以中黑防杨试管苗叶片为外植体,以MS为基本培养基。[结果]中黑防杨叶片不定芽诱导的最佳6-BA与NAA质量浓度组合为,0.5mg/L的6-BA与0.05mg/L的NAA,其叶片不定芽诱导率为97.91%;最佳材料来源为生根试管苗,其叶片不定芽诱导率达96.66%;最佳取材方法为选取植株上部0.5cm左右幼嫩叶片,其叶片不定芽诱导率98.33%。[结论]建立了稳定的不定芽再生体系,为农杆菌介导的叶盘转化法奠定了基础。     

激素诱导下不同培养方式对马铃薯微型薯的诱导效应

以两个马铃薯普通栽培种“Atlantic”和“甘农薯2号”的无毒试管苗为材料,研究了离体条件下,GA3和IAA对匍匐茎发生和结薯的影响,及在此条件下固体培养、固液双层培养和液体培养3种不同培养方式对马铃薯微型薯诱导和发育的影响.试验结果表明:GA3和IAA在诱导匍匐茎发生和增加单株结薯数上有重要作用,尤以液体培养条件下的效果最为明显;激素诱导下3种培养方式对微型薯的诱导效率在单瓶薯数、单瓶薯重、薯块平均直径及结薯率等方面差异极显著,在单薯重上差异显著,其诱导效应依次为:液体培养>固液双层培养>固体培养.     

马铃薯脱病毒与快繁技术研究

[目的]获得马铃薯脱毒试管苗及使长期保存导致生长势退化的试管苗复壮。[方法]设置不同的灭菌方法和不同的培养基进行马铃薯茎尖脱病毒及脱毒苗的快繁技术研究。[结果]芽外植体灭菌效果以质量分数5%的NaClO灭菌时间2 min与0.1%的HgCl2灭菌时间3 min组合效果最佳;茎尖诱导的最佳培养基为MS+GA30.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,平均诱导率为58.25%;从MS液体和MS固体2种不同的培养基来看,MS液体培养基可以起到壮苗的作用;从扦插和平铺2种不同接种方式来看,平铺的接种方式可以加快脱毒苗繁殖速度。[结论]为马铃薯的组织培养快繁提供了参考依据。     

影响盾叶薯蓣微块茎形成因素的研究

研究了离体条件下影响盾叶薯蓣微块茎形成的各种因素。结果表明:6.0或8.0 mg/L BA和1.0 mg/L KT组合适宜于微块茎的形成;提高培养基中蔗糖浓度有利于微块茎形成,在蔗糖浓度为80 g/L的培养基上,微块茎发生频率高达77.3%,平均重量达367.6 mg;黑暗处理有利于微块茎发生,20 d黑暗处理使微块茎发生频率达81.2%,平均重量为386.2 mg,且微块茎质量较好。这些微块茎在离体或田间均能较好的萌发、生长。     

甘薯品种南薯88的组织培养及植株再生研究

[目的]为南薯88的离体筛选及遗传转化奠定基础。[方法]以南薯88的叶片和叶柄为外植体,置于不同激素配比的培养基中,进行组织培养及植株再生,研究不同激素及外植体对南薯88植株再生的影响。[结果]单独使用6-BA、NAA诱导愈伤组织的效果不理想。过高浓度的2,4-D不利于外植体根的形成,也不利于芽的诱导。在MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L培养基中,两种外植体的出愈率均达100%,根分化率均达100%,叶片的芽分化率分别为20%、7%,叶柄的芽分化率均为7%,成功获得再生植株。相同的培养基,不同外植体的愈伤组织生长情况差异不大,器官的分化表现出一定的差异。[结论]南薯88组织培养较适宜的培养基为MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L。南薯88叶片的分化能力大于叶柄。