转基因马铃薯内源农杆菌脱除

[目的]解决采用抗生素抑菌导致转基因马铃薯植株生长与分化受到抑制的问题。[方法]利用转基因植株诱导试管微型薯,由试管微型薯抽枝获得转基因脱菌植株。[结果]参试3个马铃薯品种中,SⅠ、SⅡ最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋6-BA0.5mg/L＋GA30.1mg/L＋cef150mg/L,NT最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋ZT0.5mg/L＋GA30.1mg/L＋cef150mg/L;薯块抽枝最佳培养基为MS＋ZT0.5mg/L＋NAA0.1mg/L;薯块直径0.5-0.7cm抽枝数最高;转基因脱菌植株在无抗生素快繁培养基中经30d培养污染率为0,脱菌植株茎段粗壮,无分枝现象。[结论]建立的方法脱菌简单易行,为转基因个体的筛选和生长排除了障碍。     

马铃薯脱毒试管苗快繁培养研究初报

选用四个马铃薯脱毒良种，分别在四种附加不同激素浓度的MS培养基上进行脱毒试管苗快繁培养研究。结果表明不同马铃薯品种需要不同的培养基，9号配方MS 6-BA 2．5mg／L NAA0．1mg／L GA0．1mg／L可作为中薯3号、郑薯5号的诱导培养基，①号配方MS 6-BA0．8mg／L NAA0．1mg／L GA0．1mg／L作扩繁培养基。中薯4号的诱导与扩繁适合用①号培养基。     

马铃薯茎尖组织培养技术研究

[目的]提高离体马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。[方法]从马铃薯上取生长健壮的芽,经消毒后在显微镜下切取1．0到1．5min长度的茎尖,接种于诱导分化培养基上,研究了不同浓度的GA3、KT与6-BA和不同激素配比以及不同浓度的基础培养基的诱导效果,探讨了茎尖组织诱导分化的最适培养条件。[结果]低浓度的GA3可促进愈伤组织的形成,过高的GA3浓度会抑制愈伤组织的形成;KT比6BA具有更好的诱导效果;在MS＋GA30．1mg/L＋NAA0．1mg／L＋BBA0．5mg／L培养基中激素配比的诱导效果较好。[结论]MS＋0．5mg／LKT＋0．2mg／LGA3＋0．1mg／LNAA是最为适宜的茎尖组织培养基。在28℃、每天光照16h、光照强度〉2000lx的培养条件下,经7d左右即可得到形态良好愈伤组织,经15d左右即可得到分化良好的试管植株。     

马铃薯叶片植株再生系统的建立

以马铃薯栽培品种春薯4号试管苗叶片为材料进行植株再生诱导试验。结果表明，诱导叶片愈伤组织成苗的较佳培养基为MS NAA0．1mg／L BA2．0mg／L GA310mg／L LH500mg／L。强光、低温有利于提高芽诱导率。     

枇杷不同外植体组织培养比较

[目的]为缩短枇杷繁育周期及利用转基因技术培育枇杷新品种奠定基础。[方法]以“冠玉”枇杷的种子、茎尖、幼嫩茎段为外植体进行无菌苗研究。[结果]种子萌发率高,可达100％。茎尖在培养基MS＋6-BA1．2mg／L＋NAA0．6mg／L＋GA30．5mg／L上展叶最好。茎段在培养基MS＋6．BA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋GA30．5mg／L上萌芽最好,萌芽率达68．9％,其次为MS＋6-BA1．2mg/L＋NAA0．4mg／L＋GA、0．5mg／L。茎段在培养基MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋GA30．5mg／L上诱导不定芽最好,其次为MS＋6．BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L＋GA30．2mg／L。初代无菌苗在培养基MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L上增殖最好。[结论]培养基成分的调配对外植体的萌发、增殖有很大影响,尤其是激素浓度。     

马铃薯脱毒苗植株不同部位外植体对试管薯形成的影响

以马铃薯晚熟品种青薯6号和青薯2号脱毒试管苗为材料,在MS＋BAP5．0mg／L＋白糖80．0mg／L诱导液体培养基和冬季散光、黑暗两种培养条件下,研究了植株不同部位对试管薯形成的影响。结果表明,植株中部外植体形成试管薯的效果最佳,试管薯形成最早,诱导30d结薯率达60％,比植株基部和顶部外植体分别高18．0％和33．0％,植株基部外植体比顶部外植体高15．0％．90d结薯率达97％,分别比植株顶部和基部外植体高19％和3．0％,植株基部外植体比顶部外植体高16％,单薯鲜重最高,为60．4mg,比植株基部和项部外植体分别高6．8mg和28．8mg,植株基部外植体比顶部外植体高22．0mg,因此,以脱毒苗植株中部外植体诱导试管薯效果最好,其次为植株基部外植体。     

马铃薯不同基因型幼芽茎外植体的组织培养

利用青薯168、青薯5号和青薯8号三个品种幼芽带节茎段和节间组织为材料,研究了马铃薯的再生体系,结果表明,愈伤组织诱导率为72．92％～92．59％,愈伤组织分化率为30．68％～51．13％,每个外植体形成的小枝梢数为2．3～9．1个,绿色小植梢生根长成健壮的小植株,故认为MS＋NAA0．25mg／L＋BAP1．5mg／L＋GA37mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂7g／L为愈伤组织诱导培养基．MS＋BAP2．25mg／L＋GA37mg／L＋KT2．0mg／L＋NAA2．25mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂7g／L为分化培养基组成的再生体系是有效的,特别对青薯8号更为明显。     

基于均匀设计优化牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗及植株再生体系

[目的]筛选最适合的牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗诱导培养基和生根培养基。[方法]以牛皮杜鹃嫩叶为外植体,应用均匀设计对牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苟诱导培养基和生根培养基进行筛选,并对筛选结果进行了验证。[结果]最适合牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗的诱导培养基为：1／4MS＋3．70mg／L ZT＋0．02mg／LIAA＋1．00mg／L KT,诱导率达95．5％;最适生根培养基为：MS（改良）＋0．10mg／L IAA＋0．07mg/L NAA,生根率达98％。[结论]通过验证试验证明,成功建立了牛皮杜鹃嫩叶直接再生芽苗及植株再生体系。     

大麻的离体培养与快速繁殖

以工业大麻品种云麻1号的带节茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究。结果表明，在培养基MS＋6BA1．5～2．0mg／L＋NAA0．4mg／L＋GA30．1mg／L中具有较好的萌芽效果，在MS＋ZT1mg／L＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5～1．0mg／L＋GA30．1mg／L中继代培养，转入1／2MS＋MS全量铁盐＋IBA2．5～3．0mg／L诱导生根，即可获得完整植株。     

白术茎尖的离体快繁研究

[目的]建立白术茎尖的离体快繁体系,筛选最佳培养基。[方法]以白术的茎尖为外植体,设置7种附加NAA、IBA、6-BA不同浓度配比的MS培养基进行茎尖诱导分化与增殖培养,设置5种附加不同浓度NAA的1／2MS培养基进行生根培养,将驯化后的试管苗置于草木灰与草炭土（1：2）的混合基质进行移栽试验。[结果]7种诱导分化与增殖培养基中,MS＋6-BA0．4mg／L＋NAA0．1mg／L的培养基有利于白术芽的萌发,芽成活率达100％;MS＋6．BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L的培养基有利于诱导丛生芽增殖。5种生根培养基中,以1／2MS＋NAA0．1mg／L＋活性炭0．5g／L诱导白术生根的效果最佳,生根率达66．7％。驯化后的试管苗在草木灰和草炭土的混合基质中培养,试管苗成活率高。[结论]该研究为白术实现工厂化育苗及药用次生代谢产物研究提供了试验依据。     

马铃薯品种茎段愈伤组织诱导和植株再生的研究

以2个马铃薯品种夏坡蒂和费乌瑞它茎段为外植体,研究了不同植物激素对马铃薯愈伤组织诱导及其不定芽分化的影响.结果表明,夏坡蒂和费乌瑞它的茎段最佳愈伤诱导组织培养基分别为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+GA30.5mg/L和MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA30.5mg/L,愈伤率均可达到100%;夏坡蒂和费乌瑞它的不定芽最佳诱导培养基分别为MS+ZT 2.0 mg/L+NAA0.1mg/L+GA3 5mg/L和MS+6-BA 2.0mg/L+ZT 2.0mg/L+GA3 5mg/L,诱导率分别为52.38%和53.6%.结果为进一步转基因工作中高效植株的再生奠定了一定的基础.     

黑色马铃薯的组织培养及快繁技术研究

[目的]研究黑色马铃薯的组织培养及快繁技术。[方法]以黑金刚马铃薯的块茎为外植体,于附加不同激素配的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件。[结果]适宜块茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L GA,诱导率可达95%以上;适宜丛生芽诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达92%以上;1/2MS培养基易于诱导生根,部分外植体可产生紫黑色小块茎,生根率达100%。[结论]该研究可为人工规模化生产黑色马铃薯种苗提供技术资料。     

正交试验优化红颜草莓离体再生体系

[目的]优化红颜草莓离体再生体系。[方法]采用正交试验,研究不同培养基、植物生长调节剂的种类及浓度对红颜草莓叶片不定芽再生的影响。[结果]IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,诱导率为90.00%;最佳分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,分化率为8.1%;最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2mg/L,平均每个不定芽的增殖倍数为7.67;最适继代培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均苗高5.98 cm;最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均根数为4.5根。[结论]为进一步研究草莓的遗传转化奠定了基础。     

龟背竹的离体培养和快速繁殖

[目的]寻找龟背竹组织培养的适宜培养基,建立成熟的组培快繁技术。[方法]以龟背竹成年茎段扦插后生成的腋芽作为外植体进行离体培养,寻找合适的诱导培养基和增殖培养基,并进行生根培养。[结果]确定龟背竹不定芽的最佳诱导培养基为MS＋BA5.0mg/L（单位下同）＋ZT0.5＋NAA0.1,增殖的适宜培养基为MS＋BA3.0＋ZT0.3＋NAA0.1,生根培养基为1/2MS＋IBA0.5＋NAA0.2。[结论]为龟背竹工厂化育苗的有效进行提供了技术支持和参考。     

长寿花离体繁殖技术研究

用长寿花的带芽茎段为外植体,进行了外植体的建立、增殖、生根及移栽研究。结果表明:芽启动培养基以MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L为宜,启动率达100.0%。增殖培养中,6-BA与NAA、GA配合使用增殖效果好,外植体培养在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+GA30.1mg/L上可增殖9.3倍。采用MS+6-BA1.0mg/L+GA30.1mg/L+AC2.0g/L的半固体培养基,可使长寿花增殖与生根同步进行,每个外植体平均可产生5.5个芽,生根率达100.0%。试管苗移栽入土成活率达100.0%。     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

费乌瑞它马铃薯脱毒技术研究

[目的]解决费乌瑞它马铃薯种薯退化问题。[方法]利用植物茎尖脱毒培养技术对费乌瑞它马铃薯进行脱毒。[结果]芽外植体灭菌方式以5%NaClO_3 min+0.1%HgCl_2灭菌7 min+70%乙醇0.5 min组合效果最好;芽外植体消毒灭菌后在MS基本培养基中培养效果最好;6-BA、NAA对芽外植体的诱导和分化有促进作用,最佳诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,此时芽分化成苗率最高。[结论]该研究可为费乌瑞它马铃薯种薯生产提供理论依据。     

常绿杂交杜鹃组培快繁技术研究

[目的]研究常绿杂交杜鹃的组培快繁技术.[方法]以常绿杂交杜鹃一年生半木质化茎段为外植体,进行组织培养技术研究.[结果]外植体在1/2MS+ 1.8 mg/L ZT+O.1 mg/L IBA +30 g/L蔗糖+4 g/L琼脂,pH 5.0的培养基上诱导率可达96.67％;最佳继代培养基为1/2MS+ 1.2 mg/L ZT +0.1 mg/L NAA +30 g/L蔗糖+4 g/L琼脂,pH 5.0,此时芽苗生长健壮;最适生根培养基为1/2MS+ 1.0mg/L IBA+ 1.5 mg/L NAA +30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+3 g/L活性炭,pH 5.0,此时生根率可达95％.[结论]为常绿杂交杜鹃的快速繁殖提供技术支持.     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。