菜籽多糖的抗氧化作用与机理研究

 研究菜籽多糖粗品的抗氧化作用与机理。用K3[Fe(CN)6]与TCA体系、脂肪氧合酶评价菜籽多糖的还原能力及抑制脂肪氧合酶的能力，用丙二醛(MDA)及活性氧(ROS)试剂盒测定MDA及ROS含量，用分光光度法测定小鼠肝线粒体肿胀度。结果显示，在化学模拟体系中，菜籽多糖具有还原能力，2.00 mg·ml-1菜籽多糖的抗活性氧单位为94.03，对脂肪氧合酶的抑制率达22.8%。在体外，2.00 mg·ml-1菜籽多糖使自由基诱导的小鼠肝线粒体肿胀度低于非诱导组，对自由基诱导的小鼠肝线粒体MDA生成抑制率达30.3%，对肝组织匀浆MDA生成抑制率分别为54.7%（非诱导组）、32.0%（Fe2+诱导组）及84.5%（H2O2诱导组）。10.00 mg·ml-1菜籽多糖使小鼠血清抗活性氧单位达1 340.13。在体内，腹膜注射菜籽多糖组小鼠（400 mg·kg-1bw·d-1, 12 d）与对照组相比，肝匀浆MDA的降低达到极显著水平(P＜0.01)。以上结果表明，菜籽多糖在体内外均具有明显的抗氧化作用，菜籽多糖具有还原能力及抑制与氧化有关的酶的活性可能是其抗氧化的机理。     

水溶性灵芝肽在动物体外的抗氧化活性

【目的】研究水溶性灵芝肽在动物体外的抗氧化活性。【方法】用丙二醛(MDA)试剂盒测定MDA含量，用分光光度法测定大鼠血清自氧化溶血及小鼠肝线粒体肿胀度。【结果】当水溶性灵芝肽的剂量为0.25 mg•ml-1时，对大鼠红细胞自氧化溶血的抑制率达62.33%，对溶血过程中MDA生成的抑制率达91.24%；在有或无自由基诱导剂（Fe2+或H2O2）时，0.35 mg•ml-1的水溶性灵芝肽均能极显著抑制小鼠肝匀浆中MDA的生成（P＜0.01），且抑制率大致相当，为60%左右；当水溶性灵芝肽剂量为1.00 mg•ml-1时，对线粒体肿胀度的抑制率为90.52%，对线粒体中MDA生成的抑制率达65.42%，且呈明显剂量-效应关系。【结论】水溶性灵芝肽在体外具有明显的抗氧化作用。     

1株野生蝉虫草的鉴定及其胞内和胞外多糖抗肝癌活性比较

【目的】对1株野外采集的蝉虫草进行分离和鉴定，分析比较其发酵菌丝体胞内和胞外多糖的抗肝癌细胞HepG-2活性及多糖的组成。【方法】通过形态学特征和ITS序列分析，对供试菌株进行鉴定；采用MTT法、细胞划痕试验，比较供试菌株菌丝体胞内和胞外多糖对人肝癌细胞HepG-2的抑制活性以及对人正常肝细胞LO2的毒性，并通过高效液相色谱法和凝胶渗透色谱法，比较分析2种多糖的成分及分子质量分布。【结果】根据菌株形态学特征和ITS序列分析，供试菌株为蝉虫草Cordyceps cicadae；其胞内和胞外多糖均可极显著抑制HepG-2细胞活性（P<0.01），半数抑制浓度（IC₅₀）值分别为3.23和0.45 mg/mL，细胞迁移率分别为38.72%和24.79%，提示胞外多糖比胞内多糖具有更强的抗肝癌细胞HepG-2活性；且2种多糖对人LO2细胞均无明显毒性；进一步分析发现，胞外多糖中半乳糖醛酸的含量是胞内多糖的23.53倍，其分子质量的94.1%集中在19.1～85.0 ku，胞内多糖中核糖是其特征性单糖，高分子质量多糖（>250.0 ku）分布占比明显高于胞外多糖。【结论】野生蝉虫草菌株发酵所产胞外多糖的抗肝癌细胞HepG-2活性较胞内多糖强，二者在单糖组成和分子质量分布上存在明显差异。     

屎肠球菌胞外多糖对镉胁迫下水稻种子萌发及幼苗生长的影响

为研究屎肠球菌胞外多糖对Cd胁迫条件下水稻种子萌发及幼苗生长的影响,采用水培试验法,在含有Cd(20、40 mg·L~(-1))的培养液中添加不同浓度胞外多糖(500、1 000 mg·L~(-1)),考察水稻种子萌发及幼苗生长相关代谢指标的变化。试验结果表明,Cd胁迫明显抑制了水稻种子的萌发效率与幼苗各器官的发育情况,而添加不同浓度的屎肠球菌胞外多糖可以显著促进Cd胁迫下水稻种子的发芽势、发芽率和根部发育,但水稻萌发后的芽长受到显著抑制,而这种抑制作用在水稻幼苗生长阶段并未观察到。在Cd胁迫条件下,胞外多糖处理后的水稻幼苗内类黄酮与花色素苷的含量提高了18.6%～208.7%,超氧化物歧化酶、过氧化物酶的活力显著上升,丙二醛含量显著下降。傅里叶变换红外光谱显示胞外多糖提高了Cd胁迫下水稻叶片中碳水化合物、蛋白质、脂类和羧酸盐的含量,并可能通过加强渗透作用来降低Cd对水稻的毒害作用。研究结果表明,屎肠球菌胞外多糖可以显著缓解Cd胁迫对水稻种子萌发与幼苗生长的毒害作用。     

几种食用菌多糖抗氧化活性比较

以热水浸提、乙醇沉淀的方法,分别从金钱菇、花菇、冬菇子实体中提取多糖,通过对还原力的测定、用硫代巴比妥酸法测小鼠肝组织丙二醛、用分光光度法测小鼠肝线粒体肿胀实验及测金钱菇、花菇、冬菇多糖提取物对邻苯三酚自养化体系的抑制作用,对3种不同来源的多糖进行了抗氧化活性研究,结果表明：金钱菇、花菇、冬菇多糖提取物均具有较强的抗氧化性能,且在还原力方面,随着多糖浓度的增大,其抗氧化活性逐渐增强,金钱菇表现为最强、花菇次之、冬菇则表现得最差;都能明显地抑制.OH所致的丙二醛增长;减少.OH所致的线粒体肿胀,抑制邻苯三酚自氧化,所以金钱菇、花菇、冬菇均具有抗氧化活性。     

南瓜水溶性多糖的体外抗氧化作用

研究了南瓜多糖体外清除自由基以及抗氧化的作用.采用水杨酸法和AP-TEMED法分别检测羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-),研究南瓜多糖清除·OH和O2-的效果.用硫代巴比妥酸法测定小鼠肝丙二醛含量,用分光光度法测定小鼠红细胞溶血和肝线粒体肿胀程度,研究南瓜多糖的抗氧化效果.结果表明:南瓜多糖可以清除·OH、O2-,抑制·OH所致丙二醛的产生,减少·OH所致红细胞溶血,减轻·OH所致肝线粒体肿胀程度.试验证明南瓜多糖具有明显的抗氧化作用.     

亚香棒虫草多糖C-10体外抗肿瘤活性研究

[目的]研究亚香棒虫草多糖C-10体外抗肿瘤活性。[方法]以亚香棒虫草分离筛选的内生真菌为菌种,液体转化发酵产虫草多糖,经过分离提取得胞内和胞外多糖,并探讨其对3株癌细胞(肺腺癌A549细胞、乳腺癌MCF-7细胞、神经母癌SH-SY5Y细胞)的生长抑制效果。[结果]随着时间和浓度的增大,胞内多糖对癌细胞的抑制率逐渐增大,且差异较为明显,在培养72 h的条件下,BN-H多糖(0.096 6 mg/mL)对肺腺癌A549细胞、乳腺癌MCF-7细胞、神经母癌SH-SY5Y细胞的抑制率分别为97%、71%、97%,比其他浓度的胞内外多糖抑制效果更好。[结论]BN-H(0.096 6mg/mL)的亚香棒虫草多糖对肺腺癌、乳腺癌和神经母癌细胞具有极显著抑制作用(P<0.01),具有较强的时间和浓度依赖性,且胞内多糖对癌细胞的抑制效果好于胞外多糖。     

碱提油菜子多糖的体外抗氧化活性研究

对碱提菜子多糖及其级分多糖进行了体外抗氧化活性研究.结果表明,碱提菜子粗多糖和级分多糖都能够减少小鼠肝匀浆丙二醛(MDA)的生成,抑制肝线粒体肿胀和红细胞氧化溶血.     

发菜多糖清除自由基活性的研究

[目的]为发菜多糖的药物和食品开发提供科学依据。[方法]采用分光光度法研究发菜多糖对自由基的清除作用。[结果]发菜胞外多糖和荚膜多糖对DPPH自由基均具有一定的清除能力,当多糖加入量为312μg时,胞外多糖对DPPH自由基的清除率(12.8%)高于荚膜多糖(11.2%)。发菜胞外多糖对羟自由基的清除效果较明显,在试验浓度范围内荚膜多糖对羟自由基的最大清除率为37.7%。发菜胞外多糖和荚膜多糖对超氧自由基的清除效果均较明显,当多糖浓度为125μg/ml时,胞外多糖对超氧自由基的清除率(42.6%)略高于荚膜多糖(41.5%)。[结论]发菜胞外多糖与荚膜多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基都有清除能力,且在一定浓度范围内,其清除效果与多糖浓度呈正相关。胞外多糖的作用效果强于荚膜多糖。     

桑菊饮的抗氧化及保护线粒体作用

[目的]确定桑菊饮清除超氧阴离子(O2-)、抗氧化、保护线粒体的作用,为进一步扩大桑菊饮在抗衰老方面的应用提供参考依据.[方法]以L-Cys体系体外诱导昆明小鼠脑匀浆脂质过氧化及肝、脑线粒体肿胀,以NADH-PMS-NBT系统产生O2-,然后探讨桑菊饮对脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、线粒体肿胀度及O2-清除效果的影响.[结果]桑菊饮能明显抑制肝线粒体肿胀、MDA生成及清除O2-,且均呈剂量—效应关系.其中,当桑菊饮添加剂量为5.36 mg/mL时,对肝线粒体、肝匀浆、脑匀浆MDA生成的抑制率分别为50.45%、65.71%和42.3%,对NADH-PMS-NBT系统O2-的清除率为65.93%.[结论]桑菊饮具有清除O2-抗氧化及保护线粒体的功能,在抗衰老方面具有广阔的应用价值.     

羧甲基纤维素复合涂膜对油豆角保鲜效果的影响

研究利用羧甲基纤维素(CMC)、薇菜多糖和茶多酚复合涂膜保鲜油豆角,(10±1)℃条件下贮藏,每隔4 d取样测定失重率、VC、叶绿素、粗纤维、细胞膜通透性和丙二醛等指标。结果表明,羧甲基纤维素、薇菜多糖和茶多酚复合涂膜保鲜剂可明显降低油豆角贮藏期间失重率,减少VC和叶绿素损失,控制油豆角纤维化、电导率和丙二醛增加,同时抑制腐烂发生。油豆角最佳复合涂膜剂组合为0.6%CMC+0.8 g·L~(-1)薇菜多糖+200 mg·kg~(-1)茶多酚。最佳涂膜组合处理油豆角贮藏20 d后,MDA、VC含量和叶绿素含量分别为2.08μmol·g~(-1)、17.2 mg·100 g~(-1)和0.12 mg·g~(-1),保鲜效果明显优于对照。     

库页红景天多糖的抗氧化作用评价

【目的】探讨库页红景天多糖的体外抗氧化作用,为红景天多糖的合理开发利用提供科学依据。【方法】采用黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶—鲁米诺发光体系、抗坏血酸-CuSO4-酵母-H2O2系统及荧光法分别测定库页红景天多糖对超氧阴离子（O2）、羟自由基（·OH）、NO的清除作用,同时采用Fe2＋诱发脂蛋白过不饱和脂肪酸（PUFA）过氧化体系评价库页红景天多糖的抗脂质过氧化作用。【结果】库页红景天多糖的总糖含量为42.49%,糖醛酸含量为38.28%。库页红景天多糖能有效清除O2、·OH、NO及抑制脂质过氧化,抑制率分别达到90.50%、87.72%、70.25%和85.05%,其对应的IC50分别为3.30 μg/mL、0.90 mg/mL、20.00 μg/mL和0.90 mg/mL。【结论】库页红景天多糖是一种良好的天然抗氧化剂,可应用于食品、医疗和保健等方面。     

低碳氮比畜禽粪水厌氧消化液短程硝化脱氮试验研究

针对畜禽粪水厌氧消化液存在低C/N、后续可生化性差等问题,提出利用短程硝化反硝化技术处理高氨氮畜禽粪水厌氧消化液。结果表明:在(29±1)℃条件下,通过调节曝气量控制DO在0.6~0.9 mg·L~(-1)之间,接种厌氧氨氧化颗粒污泥可快速实现短程硝化反硝化;之后在恒定曝气量下使反应器内DO为0.1~2.88 mg·L~(-1)时,在处理高氨氮粪水过程中,通过对比四组不同pH和游离氨(FA)发现,当pH=8、FA=18 mg·L~(-1)左右时更利于亚硝化菌的优势竞争并可长期稳定实现短程硝化反硝化;应用MPN法测得氨氧化菌(AOB)和亚硝酸氧化菌(NOB)数量之比为600∶1。SBR反应器稳定运行期间COD负荷和氨氮负荷分别为2.0~3.5 kg·m~(-3)·d~(-1)和0.6~0.8 kg·m~(-3)·d~(-1),COD去除率为63%~71%,NH~+_4-N去除率在94.9%以上,NO-2-N积累率(NAR)达到94.25%以上。     

微量元素对大豆根腐病主要病原菌生长及其产毒作用的研究

研究了不同微量元素(B、Mn、Mo、Cu、Zn)对大豆根腐病主要致病菌茄镰孢菌和立枯丝核菌产孢、菌丝生长、产毒的作用。结果表明:微量元素Mn为60 mg.L-1、Zn为1.8 mg.L-1、B为2 mg.L-1时对茄镰孢菌产孢有显著的抑制作用。Mn、Mo、B在供试的3个浓度下对茄镰孢菌和立枯丝核菌菌丝生长、产毒量均有一定的抑制作用,并随浓度增加抑制作用增强。在供试最低浓度时,Cu为1.8 mg.L-1、Zn为1.2 mg.L-1对病原菌菌丝生长和产毒有促进作用。     

虫酰肼对甜菜夜蛾酚氧化酶的抑制作用

【目的】研究证实虫酰肼是否对甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)酚氧化酶活性具有抑制作用。【方法】采用生物化学方法,分别测定虫酰肼对甜菜夜蛾5龄幼虫离体酚氧化酶的作用特点和用虫酰肼浸泡饲料饲喂5龄幼虫后,虫酰肼对幼虫头部、血淋巴及表皮组织酚氧化酶活性的抑制作用。【结果】随着虫酰肼浓度增大,酚氧化酶活力呈逐渐下降趋势,虫酰肼对酚氧化酶的抑制中浓度(IC50)为5.43μmol·L-1。虫酰肼对酚氧化酶的抑制作用表现为混合型抑制,游离酶抑制常数(K i)和酶-底物络合物抑制常数(K is)分别为11.223μmol·L-1和34.036μmol·L-1。通过研究金属铜离子和酶液对虫酰肼吸收峰的影响,推测虫酰肼对甜菜夜蛾酚氧化酶的抑制作用不是与该酶活性中心的铜离子结合,而可能是与酚氧化酶蛋白结合发生作用有关。用28.41μmol·L-1和85.23μmol·L-1亚致死剂量浓度的虫酰肼分别处理甜菜夜蛾5龄幼虫24、48和72h后,测定其头部、血淋巴和表皮酚氧化酶的活性。结果表明,随着用虫酰肼处理时间延长,两个剂量的虫酰肼对幼虫头部、血淋巴和表皮酚氧化酶的抑制作用基本呈逐渐增大趋势;处理后相同时间,高剂量的虫酰肼对酚氧化酶活性的抑制率基本上高于低剂量的抑制率;虫酰肼对头部酚氧化酶的抑制率最高,血淋巴次之,表皮最低。【结论】虫酰肼对甜菜夜蛾酚氧化酶具有明显的抑制作用,幼虫新表皮形成过程受到阻碍可能与虫酰肼抑制酚氧化酶的活性有关。     

抗菌卷柏多糖的提取与分离

采用4种方法提取卷柏多糖,其中综合法提取率最高,为1.45%。可溶性多糖经DEAE-纤维素52柱层析进一步纯化,得到1种中性糖和1种酸性糖,各占86.5%和13.5%。利用纸片扩散法测定其抗菌活性,结果表明,卷柏多糖具有较强的抗动植物病原菌活性,对肠炎病病原菌、绿木霉与甘薯薯瘟病病原菌的最小抑菌浓度为6.25 mg.mL-1。     

Effect of Hydropqinone on Ruminal Urease in the Sheep and its Inhibition Kinetics in Vitro

Effect of hydropuinone (HQ) on rumen urease acivity was studied. Hydroquinone at concentration of 0. 01 mg· L-1 , 1 mg· L-1and 10 mg · L-1 inhibited urease of intact rumen microbes in vitro by 25%, 34%,55% and 64% respectively. In the present of low concentration of βmercaptoethanol, rumen urease could be solubilized and partially purified. The Km for the enzyme was 2 × 10-3 mol · L-1 with Vmax of 319. 144μmoles/mg/min. The kinetics of inhibition with partially purified rumen urease was investigated. The result showed that the inhibitory effect was not eliminated by increasing urea concentration indicating a noncompetitive in nature with inhibition constant 1.2 × 10-5mol · L-1. Hydropuinone at a concentration that produced 64% urease inhibition did not affect ruminal total dehydrogenase, proteolytic enzyme( P ＞ 0. 05) but increased cellulase activity by 28% ( P ＜ 0. 05 ) in vitro. These results demonstrated that hydropuinone was a specific inhibitor of rumen urease and could delay urea hydrolysis effectively without negative effect. The inhibitor appeared to offer the potential to improve nitrogen utilization by ruminants fed diets containing urea.     

金银花尺蠖蛹粗多糖体外抗氧化活性

为了解金银花尺蠖Heterolocha jinyinhuaphaga蛹粗多糖的抗氧化活性,采用热水浸提法提取了金银花尺蠖蛹粗多糖,并测定其体外抗氧化活性。结果表明:金银花尺蠖蛹粗多糖对二苯代苦味酰自由基（DPPH）,羟基自由基（·OH）以及超氧阴离子自由基（O₂-·）具有一定的清除作用,在其质量浓度为0.2 g·L-1时的清除率分别为39.32%,35.62%和26.75%。随着多糖质量浓度的增大,对自由基的清除率也逐渐增加,当质量浓度上升到1.2 g·L-1时,清除率分别为74.93%,61.59%和47.84%,分别增加了35.61%,25.97%和21.09%,差异达显著水平（P < 0.05）。在0.2~1.2 g·L-1的质量浓度范围内,清除率与粗多糖质量浓度之间呈显著的线性关系。金银花尺蠖蛹粗多糖具有较强的体外抗氧化活性,具有开发为抗氧化剂的潜力。图 4 参20     

茗荷水溶性多糖体外抗氧化性能的研究

[目的]为多糖抗氧化作用的进一步研究和利用提供科学依据。[方法]采用热浸提法从茗荷中提取多糖,通过测定茗荷水溶性多糖对有机自由基DPPH的清除活性和在模拟胃液条件下其对NO2-的清除作用以及分析其抗油脂氧化性能来研究茗荷水溶性多糖的体外抗氧化性能。[结果]茗荷多糖对有机自由基DPPH有较明显的清除作用,其清除率随多糖浓度增加而增大。茗荷多糖提取物可以有效地抑制动植物油脂的氧化作用。在模拟胃液的条件下,茗荷多糖对硝酸盐有较明显的清除作用。茗荷多糖对NO2-的清除率随多糖浓度的增加而增加,当多糖浓度达到5mg/ml时,其对NO2-的清除率达72.6%。[结论]茗荷多糖可通过清除NO2-而抑制强致癌物质亚硝酸胺的形成,从而减小患癌症的几率。     

由养殖废水导致的湛江硇洲岛海域夜光藻赤潮

于2002年2月对湛江硇洲海域发生的夜光藻赤潮进行了调查,结果发现：该赤潮发生的海域水温19℃,盐度27-32,pH值6．87—8．33,溶解氧2．81—8．11mg·L-1,化学需氧量0．97-492．28mg·L-1,氨氮0．002-0．258mg·L-1,硝酸盐0．040—0．262mg·L-1,亚硝酸盐0．005～0．175mg·L-1,无机氮0．047—0．529mg·L-1,活性磷酸盐0．048—1．682mg·L-1。这是由于当地对虾养殖池清塘,将大量富营养化养殖废水直接排入海,从而造成该海域发生长约2km,宽约50m,面积约10hm2的红色夜光藻赤潮的主要原因。