荆半夏胚性愈伤组织的诱导

以竹叶型荆半夏叶柄为外植体,研究不同培养基、激素配比、不同叶柄处理方式对愈伤组织诱导的影响。结果表明,单独添加2,4-D或6-BA均能诱导半夏叶柄愈伤组织,但诱导率较低,愈伤组织质量相对较差。叶柄不同部位对愈伤组织诱导有显著影响,叶柄下段适合愈伤组织诱导,黄化处理能提高叶柄愈伤组织诱导的效果。正交试验结果表明,4因素对半夏愈伤组织诱导影响从大到小为2,4-D浓度叶柄位置6-BA浓度蔗糖浓度。从诱导率和愈伤组织质量考虑,取半夏叶柄下段接种于培养基MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+60 g/L蔗糖上进行培养,效果较好。     

不同外植体和植物激素对大蒜愈伤组织诱导的影响

以大蒜鳞芽基部、茎尖、根尖和试管苗叶片为外植体,研究不同激素配比对大蒜愈伤组织诱导的影响。结果表明:大蒜根尖和鳞芽基部比茎尖和试管苗叶片易于诱导愈伤组织,根尖愈伤组织诱导率最高。不同激素配比对4种外植体愈伤组织诱导的影响不同,根尖在6-BA和2,4-D不同激素配比下全部诱导出愈伤组织;鳞芽基部愈伤组织诱导的最适激素组合为0.3 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D或0.5 mg/L6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,诱导率为100%;茎尖愈伤组织诱导的最适激素配比为0.7 mg/L 6-BA+1.5mg/L 2,4-D,诱导率为85.83%;试管苗叶片愈伤组织诱导的最适激素配比为0.3 mg/L 6-BA+2.0 mg/L2,4-D,诱导率为71.67%。     

半夏叶柄愈伤组织诱导与分化最适培养基筛选

以半夏(Pinellia ternata(Thunb.)Breit)叶柄为外植体,研究不同培养基配方对诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化的影响。结果表明,适合半夏叶柄诱导脱分化的最佳培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适愈伤组织增殖培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。     

杜鹃红山茶愈伤组织诱导的初步研究

以杜鹃红山茶嫩茎、叶柄以及叶片为外植体,研究不同激素组合及不同外植体对愈伤组织诱导效应的影响,研究结果表明:MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA是杜鹃红山茶愈伤诱导的最佳培养基,MS+1.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L6-BA+1.5 mg/L IAA是最佳的继代培养基。叶柄在愈伤诱导率及生长状况上优于其他外植体。     

商洛五味子不同外植体的愈伤组织诱导

为获得商洛五味子组培快繁的中间材料,选用幼嫩的商洛五味子茎尖、叶片、叶柄为外植体,探讨不同激素(2,4-D,NAA,6-BA)对3种外植体愈伤组织诱导的影响。结果表明:3种外植体愈伤组织诱导的最佳激素配比均为2,4-D 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+6-BA 1.0mg/L。该配方处理下,茎尖诱导率达73.3%,愈伤组织呈绿色,质地致密,生长旺盛;叶柄诱导率达60.0%,愈伤组织呈淡绿色,质地较紧密,生长旺盛;叶愈伤组织诱导率相对较低(53.3%),诱导时间较长,3周后出现愈伤组织,呈绿色。商洛五味子茎尖为愈伤组织诱导的最佳外植体。     

人参茎愈伤组织的诱导和分化研究

以4年生人参茎为外植体,探讨了最适的消毒方法;以MS培养基为基本培养基,用均匀设计的方法探讨了2,4-D和6-BA不同浓度组合对人参愈伤组织诱导率的影响;用2,4-D和6-BA不同浓度组合探讨了对人参茎愈伤组织分化成再生苗的影响。结果表明:人参茎部最好的消毒方法为自来水冲洗2h,无菌操作台内70%酒精溶液浸泡30s,再用0.1%升汞溶液浸泡4min;最适合人参茎外植体诱导愈伤组织的培养基为MS+2.57mg/L 2,4-D+0mg/L 6-BA,诱导率可达64.75%;人参茎愈伤组织分化成试管苗的最好培养基为MS+2.00mg/L 2,4-D+0.05mg/L 6-BA,分化率达22.22%。     

轮钟花组织培养的最佳外植体及培养基筛选

建立轮钟花的组织培养方法,为轮钟花进一步开发利用提供依据,以轮钟花茎段、叶及种子为外植体,通过添加不同浓度的6-BA、NAA和2,4-D于MS或1/2MS培养基中,筛选轮钟花组织培养繁殖的最适培养基及最佳外植体。结果表明:诱导茎段、叶形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L6-BA+1.0mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导种子形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导茎段愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D;种子愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L2,4-D;诱导种子不定芽的最适培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA,分化率为80.0%;种子是诱导轮钟花不定芽的最佳外植体。     

不同激素配比对南非叶叶片愈伤组织诱导的影响

南非叶是热带地区一种重要的中草药材,主要以扦插繁殖为主,为拓宽繁殖途径,实验以南非叶外植体叶为材料,以不同激素浓度配比诱导其愈伤组织,筛选最佳诱导浓度组合。结果表明:(1)NAA和6-BA各5个浓度梯度组合中,1.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA+0.5 g/L活性碳愈伤组织诱导率最高,为88.3%。即当6-BA为定量时,随着NAA浓度的增加,诱导率也逐渐提高;当NAA浓度为1.5 mg/L时,诱导率达到最佳效果,如继续增加NAA的浓度反而会下降。如单独使用6-BA时,则外植体不分化。(2)在NAA和2,4-D组合中,1.5 mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 g/L活性碳愈伤组织诱导率最高,达95%。当2,4-D浓度大于0.5 mg/L,单独使用时,外植体也可诱导分化,增殖效果随着2,4-D浓度的增加而增加。     

宽叶独行菜组培体系的建立和初步优化

以宽叶独行菜(Lepidium latifolium L.)的叶片和茎段为外植体,接种于MS培养基上进行愈伤诱导和植株再生培养,研究不同浓度激素对愈伤和再生苗生长状况的影响。结果表明,当激素浓度为1.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L IAA+0.5 mg/L 6-BA时,再生植株长势最好;当激素浓度为0.5 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L IAA+1.5 mg/L 6-BA时愈伤组织长势最好;适当增加6-BA的浓度,可以促进再生植株根系的生长。     

泰半夏小块茎的诱导及工厂化育苗研究

以泰半夏的无菌叶片、叶柄为材料,通过愈伤组织分化不定芽途径,建立泰半夏工厂化育苗植株再生体系。结果表明,以叶片、叶柄为外植体,愈伤组织最适诱导培养基分别为:MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 3.0 mg/L、MS+0.5 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA;愈伤组织在相同培养基中增殖后诱导小块茎分化的最适培养基为:MS+2 mg/L6-BA。1/2MS+0.1%活性炭+0.5 mg/L NAA培养基产生的根较粗壮、浓密。     

魔芋愈伤诱导的多因子正交试验

研究花魔芋(Amorphophallus albus)愈伤组织诱导的最佳激素组合培养条件。以魔芋叶柄为外植体,采用4因素3水平正交试验研究2,4-D、NAA、6-BA与KT 4种激素对魔芋愈伤组织诱导的影响。结果表明,2,4-D、NAA、6-BA与KT对魔芋叶柄外植体膨大与愈伤组织形成具有显著效应。利于外植体膨大的最优激素组合为MS+3.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT;利于愈伤组织积累的最优激素组合为MS+1.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT。试验优化的激素组合条件下魔芋外植体膨大与愈伤诱导有较佳的表现,可用于花魔芋的培养。     

不同外植体与激素对北美海棠松散型愈伤组织诱导的影响

为建立北美海棠松散型愈伤组织诱导体系,以北美海棠组培苗的叶片、茎段和叶柄为外植体,在含有不同浓度2,4-D的培养基上进行愈伤组织的诱导,并在含有不同浓度的2,4-D、BA、GA_3培养基上进行松散型愈伤组织诱导。结果显示,以叶柄为外植体的愈伤组织诱导率最高,为100.0%;在浓度为2.0 mg/L的2,4-D的培养基上愈伤组织生长最快;在MS+30.0 g/L蔗糖+100.0 mg/L Vc+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L BA+1.0 mg/L GA3的培养基上可以诱导出结构松散、生长速度最快的愈伤组织。     

玉米湘农3号幼胚愈伤组织诱导及再生体系建立

以玉米品种湘农3号幼胚为外植体,以MS为基本培养基,研究2,4-D与NAA浓度配比对愈伤组织诱导、KT与IBA浓度配比对愈伤组织分化、NAA与6-BA浓度配比对试管苗生根的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;愈伤组织分化的最适培养基为MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根的最适培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.6 mg/L。     

葡萄松散型愈伤组织的培养及其白藜芦醇含量的测定

【目的】获得葡萄(Vitisvini fera L.)松散型愈伤组织,并了解其白藜芦醇含量的变化。【方法】以葡萄的叶、叶柄和茎分别作为外植体,在不同激素组合(6-卞氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)、吲哚丁酸(IBA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D))的培养基(以B5培养基为基本培养基,含30g/L蔗糖和6g/L琼脂)上,进行愈伤组织的诱导和继代培养,并利用高效液相色谱法(HPLC)对不同来源愈伤组织中的白藜芦醇含量进行测定。【结果】以葡萄叶为外植体时,诱导的愈伤组织出愈率很低;以叶柄和茎为外植体时,愈伤组织的出愈率均较高。利用叶柄和茎获得松散愈伤组织时,其诱导培养基组成分别是:B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L和B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L,其继代培养基均为B5培养基+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.1mg/L。在诱导培养基产生的愈伤组织中,白藜芦醇含量由高到低的顺序为叶柄>叶>茎。以叶、叶柄和茎为外植体诱导愈伤组织时,其白藜芦醇含量最高的培养基分别为B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L、B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L和B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L。【结论】葡萄叶柄和茎易被诱导产生松散的愈伤组织,且经多次继代可以用于建立悬浮培养体系;葡萄愈伤组织中的白藜芦醇含量随外植体及培养基组成的不同而有所差异。     

安祖花愈伤组织诱导和植株再生的研究

为建立适合安祖花遗传转化的受体体系,分别选取安祖花组培苗带叶柄的叶片和带叶柄的茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导和植株再生试验。结果表明:以带叶柄的茎段为外植体对愈伤诱导效果好于带叶柄的叶片。使用带叶柄茎段为外植体,以1/2MS BA 1.0 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L为基本培养基进行愈伤组织诱导和继代培养,愈伤组织诱导率最高为89.65%;使用3%蔗糖作为碳源的1/2MS添加0.1 mg/L KT能显著提高诱导率;添加NAA 0.5 mg/L或2,4-D 0.5 mg/L有助于生根。     

适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织诱导及增殖技术

用半夏叶片或叶柄作外植体,通过调节植物生长调节物质的种类、浓度及培养条件,以获得适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织。结果表明,添加2,4-D较NAA诱导的愈伤组织疏松,将叶片接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L或叶柄接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L上诱导出的愈伤组织长势较好且疏松,诱导率分别达到100%和95.6%,愈伤组织鲜重分别为0.932 g和0.622 g。将上述愈伤组织以MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L培养基连续继代3次,便获得适于建立细胞悬浮培养体系的疏松愈伤组织,从而为半夏人工种子生产必须的同步化高质量人工种胚的培养提供可靠材料。     

刺嫩芽快繁体系的建立

[目的]研究刺嫩芽快速繁殖技术。[方法]以刺嫩芽的叶片、叶柄和幼茎为外植体进行组织培养,建立刺嫩芽快繁体系。[结果]3种刺嫩芽外植体中,叶片的愈伤组织诱导效果最好,在4种不同激素浓度的MS培养基上均能诱导出愈伤组织;MS培养基中适当增加2,4-D和少量的6-BA,可显著提高愈伤组织诱导率;最适诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,叶片诱导率高达36.7%;最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D1.5mg/L;最适分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,平均诱导分化率达85.0%;琼脂加入量控制在7.5～8.0g/L及适当降低6-BA的含量时,可有效防止外殖体玻璃化的产生。[结论]该研究建立的刺嫩芽快繁体系,试管苗驯化率可达85.0%,具有一定的推广与应用价值。     

半夏再生体系的建立

【目的】优化半夏再生条件,以获得优质半夏种苗.【方法】筛选出适宜的外植体后,使用3种激素2,4-D,KT,IAA利用正交设计法设置9个处理组对半夏愈伤组织进行诱导.选取长势良好,大小均一的半夏愈伤组织接于4种培养基中进行愈伤组织增殖.选取半夏叶柄诱导出的愈伤组织将其接于5种培养基中进行愈伤组织分化,观察不同培养基对半夏愈伤组织生根和出芽的影响,最后进行炼苗与移栽.【结果】在叶柄、叶片及块茎3种外植体中,叶柄是半夏愈伤组织诱导的最佳外植体;最有利于半夏愈伤组织诱导的培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT+1.0 mg/L IAA;在暗培养条件下,将半夏愈伤组织继代于MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L IAA中生长最快;MS+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA培养基最有利于半夏愈伤组织的生根和出芽.     

铁炮百合离体再生体系的建立

以铁炮百合无菌苗的叶片、鳞片为外植体,进行铁炮百合再生体系的研究。结果表明:鳞片的诱导分化能力高于叶片,鳞片分化培养基(MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)的分化率高达90.98%。用叶片为外植体,不同部位对不定芽的诱导影响较大,以叶片中部分化能力最强,上部次之,下部最差。叶片分化培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,分化率为85.36%。2,4-D浓度对愈伤组织的诱导影响显著,愈伤诱导培养基以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D为佳,愈伤率达80%以上。     

马铃薯愈伤组织诱导中激素浓度配比优化研究

[目的]对马铃薯愈伤组织诱导中的激素浓度配比进行优化研究。[方法]以鲁引1号马铃薯的幼嫩茎段、叶片和叶柄为外植体,通过在基本培养基中添加不同浓度的6-BA和2,4-D,来筛选出马铃薯愈伤组织诱导的最适的培养基。[结果]叶柄和茎段的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D,叶片的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D,愈伤组织的诱导率均可达95%以上。[结论]为鲁引1号马铃薯脱毒研究提供了技术支持。