苦丁茶不同提取物的体外抑菌作用研究（摘要）

[目的]研究苦丁茶不同粗提物的抑菌效果。[方法]制备了3种苦丁苯粗提物。粗提物1：称取苦丁茶50 g,加500 ml去离子水浸泡10 h,加热至沸腾,文火2h,过滤。药渣再加3～5倍去离子水煎煮,方法同上,重复3次。合并3次提取液,用旋转蒸发仪浓缩成50 ml,即每1 ml相当于含生药1.0 g,粗提物2：称取50 g干粉（用中药粉碎机粉碎后过80目）,加500 ml去离子水,水浴80℃恒温振荡3 h,离心,取上清液,浓缩,加3倍体积无水乙醇,离心取沉淀,用去离子水配成50 ml溶液。粗提物3：称取50 g干粉,加500 ml 90%乙醇,采用回流提取法,同流时间3 h,回流次数3次,合并3次提取液,过滤,用旋转蒸发仪浓缩成50 ml。粗提物1、粗提物2、粗提物3分装于棕色试剂瓶,封口,于-20℃冰箱中保存,使用前121℃高压灭菌20 min采用试管二倍稀释法和纸片扩散法,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌进行体外抑菌试验,并测定其最小抑菌浓度（MIC）,最小杀菌浓度（MBC）和抑菌环直径。[结果]粗提物1抑菌效果较强,高于粗提物2和粗提物3,对金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌的MIC分别为3.91 mg/ml和31.25 mg/ml。粗提物1对金黄色葡萄球菌的抑菌作用效果最好,抑菌能力最强,抑菌作用为高敏,抑菌环直径达（17.46±0.40）mm,对大肠埃希菌的抑菌作用为中敏,但比粗提物2、粗提物3好;粗提物2对这2种菌的抑菌能力都较差,均为低敏,特别是对大肠埃希菌,抑菌环直径只有（6.30±0.16）mm。粗提物3对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌作用相差不大,都为中敏。粗提物1不但抑菌效果好,且其提取方法、步骤简单,仪器设备价格低,同时不产生废气,可为临床应用上提供支持并带来方便。粗提物3需使用有机溶剂,大量使用容易产生三废,给环境带来一定的危害。考虑到抑菌能力及成本、环保和简便等因素,采用提取粗提物1的方法在生产上比较实用。[结论]苦丁茶的不同粗提物均有不同程度的抑菌作用,为苦丁茶开发成新型、安全的抑菌剂提供了参考。     

天门冬的体外抑菌作用

利用水煎法、醇提取法和超声波提取法制备天门冬(Asparagus cochinchinensis(Lour)Merr.)提取液,并通过正交试验对超声波提取工艺进行优化;采用杯碟法测定天门冬提取液的抑菌圈直径;采用液体稀释法测定最低抑菌浓度。结果表明,超声波提取所用条件为70%的乙醇、浸泡时间6 h、提取时间20min和提取温度35℃时,所得天门冬提取液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)和黑曲霉(Aspergillus niger)抑制作用最强,对这3种菌的最低抑菌浓度分别为3.13、6.25和12.50 mg/mL。说明天门冬提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黑曲霉有较强的抑制作用,是一种天然抑菌剂。     

鱼腥草叶乙醇提取液的抑菌作用研究

[目的]研究鱼腥草叶中黄酮类物质的最佳提取工艺和鱼腥草叶乙醇提取液的抑菌作用。[方法]以鱼腥草为材料,浓度70%的乙醇为溶剂,设计L9(34)正交试验提取方法,优选出鱼腥草叶中黄酮类物质的最佳提取工艺条件;以多粘芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、裂殖酵母和酿酒酵母、黑曲霉为供试菌种,进行抑菌试验,研究鱼腥草叶乙醇提取液的抑菌作用。[结果]优选出的提取方法为乙醇提取法,其较佳的提取条件为温度80℃,料液比1∶20(g/ml),提取2次,每次提取2 h;在此条件下,鱼腥草黄酮类物质的提取率达4.363%。鱼腥草叶乙醇提取液具有广谱抑菌特性,且对细菌的抑菌效果优于对真菌的抑菌效果;鱼腥草叶提取液对多粘芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、裂殖酵母、酿酒酵母和黑曲霉的最小抑制浓度分别为0.06、0.06、0.08、0.08、0.1、0.1和0.1 g/ml。[结论]研究出了鱼腥草叶中黄酮类物质的最佳提取工艺,并确定了其乙醇提取液的抑菌作用,为鱼腥草叶的进一步开发和利用提供了理论依据。     

金樱子黄酮类化合物提取工艺研究

用水和不同浓度的乙醇、丙酮作溶剂提取金樱子黄酮.通过正交实验得出乙醇法提取金樱子黄酮类化合物最佳条件为:乙醇浓度60%、水浴温度70℃:、固液比1:150,此时提取液中黄酮含量为0.451 2 mg/ml.丙酮法最佳提取条件:丙酮浓度60%,水浴温度500℃,固液比为1:50时.提取液中黄酮含量为0.524 1 mg/ml.     

苦楝果实提取物对几种芽孢杆菌的抑菌活性

将采摘的苦楝果实烘干、粉碎后,以甲醇为溶剂,用超声波法提取后,配成不同浓度的苦楝果实提取液,测定其对巨大芽孢杆菌、短芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌4种芽孢杆菌的抑菌圈直径和抑菌百分率。结果表明:苦楝果实提取液浓度越高,其抑菌作用越强。苦楝果实提取液对枯草芽孢杆菌的抑菌活性最大,对短芽孢杆菌的次之,对巨大芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的抑菌活性最小。     

水葫芦提取物抑菌作用的初步研究

以石油醚、丙酮、四氯化碳对水葫芦全草有效成分进行提取,采用抑菌圈法测定了水葫芦提取物对5种常见微生物的抑菌作用,并用稀释法测定了最低抑菌浓度(MIC)。结果表明:水葫芦提取物有较强的抑菌活性,石油醚提取液抑菌活性强于丙酮、四氯化碳提取液;提取液浓度越高,抑菌效果越好;3种提取液对黑曲霉抑菌作用都表现较强烈,对葡萄球菌抑制作用都表现较差;石油醚提取液最低抑菌浓度分别为黑曲霉0.25%、大肠杆菌0.5%、酵母0.5%。     

柚皮中抑菌物提取工艺优化研究

[目的]优化柚皮提取类黄酮、类柠檬苦素的工艺条件.[方法]以柚皮为原料,采用“乙醇水浴法”提取类黄酮,采用“二氯甲烷回流法”提取类柠檬苦素.[结果]提取类黄酮的最佳工艺为乙醇体积分数60％、料液比1∶25 g/ml、提取温度70℃、提取时间1.5h,提取次数2次,类黄酮3次平均提取率为1.211％;提取类柠檬苦素的最佳工艺为料液比1∶15 g/ml,温度55℃,提取2.5h,提取次数2次,类柠檬苦素3次平均提取率为0.561％.[结论]所得的多元二次回归方程预测模型与实际情况拟合较好,可用于指导柚皮抑菌物的提取分离.     

柑橘粗提液对亚硝酸盐的清除作用

采用对氨基苯磺酸-盐酸萘乙二胺的分光光度法测定了陈皮提取液以及橘子汁对亚硝酸盐的清除率,研究不同条件下提取的陈皮提取液、橘子汁在不同反应条件下对亚硝酸盐的清除率。结果表明,提取陈皮的最优化条件是用65%的乙醇在60℃水浴下提取1 h;获得的陈皮提取液在反应温度60℃、pH值为2时,反应时间20 min对亚硝酸盐的清除率最大;而橘子汁在反应温度20℃、pH值为1.9时反应时间10 min对亚硝酸盐的清除率最大。     

蛇床子提取物对番茄灰霉病菌的抑制效果

为研究蛇床子提取物对番茄灰霉病的抑菌效果及抑菌活性的稳定性,以番茄灰霉病菌作为供试菌种,用蛇床子提取物作为抑菌剂,采用生长速率法测定其抑菌效果。结果表明,蛇床子不同溶剂提取物对供试菌种均表现出抗菌效果,并筛选出最佳提取溶剂为乙醇(φ=95%),其抑菌率达到76.92%;提取时间和方式是超声提取30min,抑菌率达到78.87%,超声波提取10、60min与震荡1、2、3d变化不大;在不同质量浓度下测定蛇床子抑菌效果,当提取物质量浓度为20g.L-1时,接菌后3.5d菌丝生长抑制率可达到最大值,为77.35%;蛇床子提取物抑菌活性的试验中,蛇床子在-20℃和100℃时抑菌活性低于0～80℃处理;蛇床子的光稳定性在光照超过48h之后抑菌活性有所下降;蛇床子的有效保存时间在0d最大,以后逐渐降低,超过25d抑菌率明显下降。因此,蛇床子提取物对番茄灰霉菌的最佳抑菌条件是用乙醇(φ=95%)提取,超声波提取30min,质量浓度为20g.L-1,避光保存于4℃的冰箱中,保存时间不超过25d。     

南天竹抑菌活性的初步研究

采用生长速率法,测定了南天竹不同器官的提取液对小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)、番茄褐斑病菌(Helminthosporiurn carposaprum)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicolai)的抑菌作用,结果表明,当质量浓度为0.1g/mL时,南天竹不同器官的提取液对4种病原菌菌丝生长都有一定的抑制作用,但不同器官的抑菌活性不同,其中南天竹叶提取液的抑菌活性较强,抑制率均高于50％;根提取液的抑菌活性次之;茎和果实提取液的抑菌活性较弱,抑制率均低于50％.     

青刺果种粕粉提取物体外抑菌作用的研究

[目的]探讨青刺果种粕粉提取物对常见致病细菌的抑制作用以及温度、pH值、紫外光等因素对其抑菌活性的影响。[方法]采用滤纸片扩散法研究青刺果种粕粉提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌的抑制作用。[结果]青刺果种粕粉提取物对常见致病细菌均有一定的抑菌作用,抑菌浓度低,热稳定性和紫外光稳定性较好,但其抑菌pH值范围不够广,在pH值为4—6的条件下抑菌效果最佳。[结论]青刺臬种粕粉提取物具有较好的抑菌作用,可望将其开发成抗菌药物。     

Antibacterial Activity of Crude Extracts of Prinsepia utilis Royle in vitro

The purpose of this study is to isolate the active fraction from the crude extract of Prinsepia utilis Royle and to determine its antibacterial activity against the standard and drug-resistant bacteria strains in vitro. The Prinsepia utilis Royle was extracted in three portions by using petroleum ether, ethanol and water by the continuation recirculate extraction. The antibacterial activity of the extracts were evaluated by the determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) values. The results showed that the ethanol extract and aqueous extract of petroleum ether showed the weakest inhibition. MIC values of the aqueous Prinsepia utilis Royle were found that they had significant effects against bacteria, while ethanol extracts against three standard bacteria (S. aureus ATCC25923, E. coli 44102, Salmonella 50041) were 25, 25, 50 mg · mL-1 and 50, 100, 100 mg · mL-1 , MIC values of three drug-resistant bacteria (S. aureus GL17, E. coli EYAC08-56, Salmonella STQD2G.) were 50, 50, 50 mg · mL-1 and 100, 100, 200 mg·mL-1 , respectively. MBC values of two extracts against three standard strains were 25, 50, 100 mg·mL-1 and 50, 100, 200 mg·mL-1 , MBC values of three drug-resistant bacteria were 100, 100, 100 mg·mL-1 and 200, 200, 200 mg·mL-1 , respectively.     

丽江木本油料青刺果资源调查

为探讨青刺果资源的分布现状和多样性,笔者收集丽江市境内12个乡镇及玉龙雪山风景区内121份青刺果资源,并对此进行调查和评价。结果表明：丽江青刺果集中分布在2000~3200 m海拔区域,在海拔1800 m以上的区域都有分布。青刺果花期在11月—次年3月,果期在4—7月;青刺果有耐寒、耐旱、耐贫瘠的特点。丽江目前野生青刺果面积为3400 hm ²,人工栽培面积为6800 hm ²。不同海拔、地域的青刺果在物候期、种子大小、百粒重等方面有明显的差异。种子性状分析表明,丽江青刺果有着丰富的表型性状多样性;最大和最小的种子,在纵、横、侧三径上长度相差都在2倍左右;种子最重单粒重为0.408 g,最轻的为0.056 g,相差7.3倍;103份资源的百粒重在10~20 g之间;种子的饱满度在30%~100%之间,有5份资源饱满度为100%。本调查结果将为青刺果遗传多样性研究和育种利用提供参考。     

青刺果酵母发酵液活性成分分析及其抗氧化活性研究

采用水提取和微生物提取的方式对青刺果(Prinsepia utilis Royle)黄酮、总糖进行提取,并测定粗提液对DPPH自由基的清除作用。结果表明,水提取与微生物提取青刺果黄酮的提取率分别为0.37%和0.88%,水提取与微生物提取青刺果总糖提取率分别是7.65%和3.38%。青刺果微生物提取液对DPPH自由基的清除作用在相同的稀释倍数下高于水提取液,表明微生物提取植物中活性物质具有一定可行性和优越性。     

青刺果黄酮对鸡血清抗体和血液生化指标的影响

探讨了青刺果黄酮对鸡血清抗体和血液生化指标的影响.试验结果表明,青刺果黄酮组与对照组相比,21日龄时,IgM表现为极显著增加(p＜0.01);28日龄时,IgG和IgM表现为显著增加(p＜0.05);其他指标均有所提高,但差异不显著(p＞0.05).各项血液生化指标与对照组相比差异不显著.青刺果黄酮可通过提高血清抗体水平来提高动物机体的免疫机能,且对机体各项血液生化指标无不良影响,有望作为天然免疫剂应用.     

青刺果总黄酮定性分析及含量测定

[目的]建立青刺果（Prinsepia utilis Royle）黄酮鉴别与含量测定的方法。[方法]采用乙醇回流法从青刺果油粕中提取总黄酮,通过颜色反应和薄层层析对青刺果黄酮进行理化鉴别,并用Al（NO3）3-NaCO2络合比色法测定其含量。[结果]供试品溶液的最大吸收波长为510nm,在15min内稳定。芦丁对照品溶液浓度（x）与吸光度值（y）的线性回归方程式：y=-2.571×10-3＋13.163x,r=0.9998,线性关系良好;加样回收率在98.00%～104.00%,平均为101.16%,RSD=2.15。测得青刺果粗品中总黄酮含量为7.20%～7.30%,平均为7.25%±0.05%,RSD=0.69%;青刺果油粕中总黄酮含量为0.37%～0.38%,平均为0.38%±0.01%,RSD=1.54%;总黄酮得率为5.17%～5.25%,平均为5.20%±0.04%,RSD=0.80%。[结论]该研究建立的紫外分光光度法简便、快速、准确、可靠,可用于青刺果总黄酮含量的测定。     

青刺尖种籽油抗缺氧生理活性的研究

青刺尖（Prinsepia utilis Royle)为蔷薇科植物,主要分布在西南地区海拔2300m至3200m山区,其种籽可榨取食用油,味香,口感好,当地人自古有采种,榨油,食用和护发等的传统,研究表明,青刺尖种籽油灌胃小鼠30d,对实验小鼠的体重无显著影响。处理组与对照组比较,在常压抗氧试验,NaNO2中毒存活试验和急性脑缺血性氧试验中,其抗缺氧时间,存活时间有显著的差异,此表明青刺尖油具有提高小鼠缺氧耐力的作用。     

真菌菌丝黑色素提取条件的研究

[目的]为了更好地提取真菌黑色素。[方法]比较了菌丝粒径(30、60、100和140目)和3种高温提取条件(高压灭菌锅内121℃20 min、沸水浴2 h和沸水浴5 h)提取真菌黑色素的效果。[结果]菌丝粒径对黑色素提取效果影响不显著。沸水浴5 h提取不同粒径菌丝黑色素的含量在0.01水平显著高于其余2个高温提取条件。沸水浴5 h提取30目菌丝黑色素含量的RSD为0.5%～3.0%,黑色素加标回收率为86.0%～123.0%。[结论]1 mol/L NaOH沸水浴5 h提取30目菌丝中的黑色素是较好的提取方法。     

臭牡丹根提取物的抑菌效果

[目的]研究臭牡丹根不同极性溶剂提取物对常见植物病原微生物的抑菌效果。[方法]制备了乙醇、乙醚、乙酸乙酯和蒸馏水4种臭牡丹提取物,采用菌饼法研究臭牡丹根的抑菌能力,包括抑菌圈直径（十字交叉法）、最小抑菌浓度（MIC）的测定。并以小麦赤霉为指示菌,观察了pH值为5～8范围内臭牡丹根提取物的抑菌活性。[结果]臭牡丹根的4种提取物对小麦纹枯病菌、小麦赤霉病菌、水稻纹枯病菌、玉米大斑病菌均具有不同程度的抑菌作用,其中,蒸馏水提取物的抑菌效果最好,其次为乙酸乙酯、乙醚,80％乙醇提取物的抑菌效果最差。4种溶剂提取物对小麦赤霉的抑制效果几乎都优于其他的菌种,而对玉米大斑的抑制效果最差,可能是其抑菌机理不同,导致对不同菌的抑菌能力产生差异。乙酸乙酯提取液对小麦赤霉、小麦纹枯、水稻纹枯和玉米大斑最小抑菌浓度分别为16、20、20、25mg／ml;80％乙醇提取液对水稻纹枯和小麦赤霉的最小抑菌浓度为30mg／ml,而对小麦纹枯和玉米大斑的最小抑菌浓度为35mg／ml;蒸馏水提取液对小麦纹枯和小麦赤霉的最小抑菌浓度为10mg／ml,水稻纹枯和玉米大斑的最小抑菌浓度分别为16、20mg／ml;乙醚提取液对小麦赤霉、小麦纹枯、水稻纹枯和玉米大斑最小抑制浓度分别为10、20、20、30mg／ml。总的看来,臭牡丹根提取物对这几种常见植物致病菌的MIC均在35mg／ml以下。臭牡丹根提取物在pH值5～8的范围内具有不同程度的抑菌作用。80％乙醇提取物和乙酸乙酯提取物在中性条件下,抑菌效果较好,然后,随着pH值增加或减小而变差;乙醚提取物在酸性条件下,对小麦赤霉的抑制作用大于在中性和碱性条件下;而蒸馏水的则与乙醚相反,表明其抑菌活性受pH值的影响较大。[结论]臭牡丹根对4种病原微生物具有较好的抑制效果,其抑菌活性受pH值影响较大。     

木本油料植物青刺果花药快繁技术初步研究

[目的]找出诱导野生青刺果花药萌发的基本培养基和培养条件。[方法]以野生青刺果花药为外植体,采用MS、N6为基本培养基,添加香蕉汁液为附加物,探讨不同培养基及培养条件对青刺果花药诱导的影响。[结果]在MS+香蕉汁+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂,光照8 h、温度13℃为培养条件下培养,愈伤组织诱导较好。[结论]该研究为青刺果花药培养奠定基础。