侧孢短芽孢杆菌S62-9产抗菌物质的分离纯化及部分特性的研究

为开发新型天然抗菌物质,本研究采用硫酸铵盐析、DEAE-cellulose 52离子交换层析、Sephacryl S-100分子筛层析等步骤对侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)S62-9产的抗菌物质进行分离纯化,并对其部分特性进行研究。结果表明:该抗菌物质对热和pH值稳定性高,且抑菌谱广,可抑制多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌,显示出该抗菌物质具有良好的应用前景。     

棉花黄萎菌拮抗细菌BDT-25抑菌蛋白的分离纯化

拮抗细菌BDT-25是从根际土壤中分离得到的1株芽孢杆菌,其菌株发酵液产生的抑菌物质对棉花黄萎菌具有较强的抑制作用。为了明确其抑菌活性组分,本研究通过硫酸铵沉淀的方法从BDT-25菌株去菌体发酵液中提取得到对棉花黄萎病菌具有抑制作用的抑菌蛋白,分别采用阴离子交换层析和凝胶过滤层析的方法对其进行了纯化,抑菌活性检测结果显示,P1具有抑菌活性,为有效抑菌活性组分。经SDS—PAGE电泳纯化为单一蛋白带,分子量约为30kDa。     

土壤芽孢杆菌的筛选与抑菌能力研究

为筛选具有抑菌能力的益生菌,对河北科技师范学院昌黎校区的10处土壤样本进行分离和筛选,通过热击培养、平板划线分离得到7株细菌,结合革兰氏与芽孢染色,在显微镜下观察初步鉴定为芽孢杆菌.从7株芽孢杆菌中选取4株形态各异的菌株进行抗菌活性试验,通过琼脂扩散法证明它们能够产生抗菌肽物质,从而抑制大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的生长.     

枯草芽孢杆菌DZSY21抗菌肽的提取及其应用

为了提取枯草芽孢杆菌抗菌肽以探索其对食品的防腐效果,选用枯草芽孢杆菌DZSY21、解淀粉芽孢杆菌FZB42和枯草芽孢杆菌OKB105 菌种发酵,然后将这3个菌种的发酵上清液分别与丙酮按1:2的体积比混合,旋转蒸发浓缩得到3种菌的抗菌肽粗提物。对抗菌肽的热稳定性试验可知3种菌的抗菌肽经100 ℃加热30 min后抑菌效果均有小幅度降低,但抑菌活性仍较强。抗菌肽蛋白酶稳定性试验结果显示,3种菌的抗菌肽对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶都很敏感;应用性试验中采用牛奶、苹果、肉等作为食品模型,结果显示经枯草芽孢杆菌DZSY21抗菌肽处理后的试验组品相均明显好于对照组。表明枯草芽孢杆菌DZSY21抗菌肽具有较好的防腐效果。     

侧孢短芽孢杆菌B8抑菌物质的理化性质及其分离纯化

从烟草根际土壤中分离到1株生防细菌侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)B8,为了将B8应用于植物病害生物防治,对菌株B8产生的抑菌物质粗提物理化性质进行研究,并采用薄层层析、Pharmadex LH-20柱层析和高效液相色谱对抑菌物质进行分离纯化。试验结果表明:侧孢短芽孢杆菌B8抑菌物质粗提物具有较好的热稳定性,可耐受100℃的高温;其p H值适应范围较宽,在p H值4~10时都有较好的活性,在中性条件下活性最强;对紫外光和日光灯照射不敏感,可长时间保存;侧孢短芽孢杆菌B8产生的抑菌物质为蛋白类,经SDS-PAGE电泳确定蛋白分子量约为11.2k Da;质谱分析结果表明纯化蛋白在NCBI蛋白数据库中没有明确的匹配结果,推测此抑菌蛋白可能是在NCBI蛋白数据库中没有登录的1种新物质。     

侧孢芽孢杆菌2-Q-9菌株外泌抗菌肽的纯化与鉴定

采用75%乙醇沉淀、阴离子交换色谱层析和阳离子交换色谱层析等方法,分离并纯化侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterospours)2-Q-9菌株外泌抗菌肽BL2Q9.结果表明,BL2Q9的相对分子质量为7 800,等电点为10.2.Edman降解测序发现其N末端封闭,串联质谱测序结果表明其与细菌第Ⅳ类鞭毛合成蛋白p...     

蚯蚓中3～30 kD抗菌肽的分离及抗菌效果研究

从蚯蚓体内分离纯化30 kD以下的抗菌肽,并研究其抑菌效果.通过电击诱导蚯蚓产生抗菌肽、超滤浓缩脱盐以及截取3～30 kD的抗菌肽、用阳离子交换分离除去较多杂蛋白、凝胶过滤层析进一步精确分离提纯得到3~30 kD的蚯蚓抗菌肽,有H1和H2两个蛋白浓度较高的峰值.测得其蛋白质量浓度分别为6.82、7.46 mg/μL,其相对分子质量分别在5 856～7 823 kD和14 40～20 00.抑菌活性测定结果表明,H1和H2都有较好的抑菌效果,其中H1对草枯杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌有明显的抑菌效果,H2对巴氏杆菌、大肠杆菌和草枯杆菌也有明显的抑菌效果,H1的抑菌活性比H2高.     

一个家蝇抗菌肽的分离纯化

以野生家蝇干燥幼虫为原料,在常规的生化提取基础上,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)法进一步纯化,并结合电洗脱技术,利用灵敏的杀菌活性检测手段,从家蝇抗菌肽总组分中分离纯化出1个20 ku的抗菌肽,对苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄葡萄球菌均有杀灭作用。     

多粘类芽孢杆菌S960抑制尖孢镰刀菌的活性物质分离纯化

对多粘类芽孢杆菌S960胞外粗提液采用硫酸铵沉淀法和Sephadex G-75凝胶层析法分离纯化多粘类芽孢杆菌S960释放的活性物质，用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测该活性蛋白质的相对分子量、薄层层析法初步鉴定该活性物质。结果表明，40%的硫酸铵沉淀提取效果最佳，Sephadex G-75凝胶层析在控制0.5 mL·min^-1的流速下，洗脱时间为50～70 min的收集液中具有有效活性物质，聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该活性物质相对分子量约为66.2 kDa，纯度为91.87%。薄层层析展开结果显示该活性物质可能含有α-氨基酸、苯丙氨酸、羟脯氨酸或脯氨酸。这说明多粘类芽孢杆菌S960可以通过释放具有抑菌活性的蛋白而抑制尖孢镰刀菌的生长。     

鲶鱼体表黏液IgM的分离纯化及其抑菌活性研究

依次采用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和凝胶过滤层析法从鲶鱼体表黏液中分离纯化IgM,并对其抑菌活性进行了检测.通过试验可以得出,凝胶层析的最佳分离条件为:0.02 mol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液、洗脱速度为0.3 mL/min.鲶鱼体表黏液中提取的IgM对大肠杆菌抑菌作用最强,其次是枯草芽孢杆菌,对藤黄微球菌抑菌效果最不明显.在低温贮存时温度控制在0～4℃,有助于保持其抑菌活性,但随着时间的延长,抑菌活性也会逐渐减弱.     

中密度纤维板抗菌处理方法及抗菌效果

选取LS-500光触媒基础蜡、硅藻纳米复合光触媒液体活性炭、LS-E100(CAPP)吡喃多胺聚酯,配制成不同稀释倍数的抗菌剂;采用喷涂、刷涂工艺对中密度纤维板进行处理;分析抗菌剂的种类、稀释倍数、施加方式等因素,对纤维板的抗菌性能和物理力学性能的影响规律。结果表明:2种处理,中密度纤维板的力学性能,均随着抗菌剂稀释倍数的增大而降低;涂刷工艺处理后的试件,力学性能优于喷洒处理试件的力学性能。涂刷工艺处理的中密度纤维板抑菌圈直径,大于喷洒工艺处理的抑菌圈直径。3种抗菌剂对阳性金黄色葡萄球菌的抑制作用,好于对阴性大肠杆菌的抑制作用;抗菌剂稀释倍数越小,抗菌效果越好。硅藻纳米复合光触媒对阴性大肠杆菌的抑制效果,比LS-500、LS-E100的抑制效果差;其对阳性金黄色葡萄球菌的抑制效果是3种抗菌剂中最好的。     

水生动物组蛋白衍生抗菌肽的结构特征和抗菌活性研究进展

新型抗菌肽取代传统抗生素是未来水产养殖业的发展趋势,组蛋白衍生抗菌肽是水生动物体内的一类重要抗菌肽,在水生动物机体免疫和抗病过程中扮演重要角色,为当前的研究热点。分别对水生动物4种代表性的组蛋白衍生抗菌肽(OncorhyncinⅡ、Buforins、Abhisin和HLP-1)的结构特征和抗菌效应进行综述,旨在为组蛋白衍生抗菌肽的深入研究和推广应用提供参考。     

抗菌肽NK-lysin生物信息学分析及其抑菌作用研究

为分析猪源抗菌肽NK-lysin的理化性质和蛋白结构,并研究猪源抗菌肽在小鼠体内的抑菌效果,以猪小肠组织cDNA为模板进行PCR扩增和测序,通过生物信息学相关软件和工具对其测序结果进行分析。试验选用60只小鼠,随机分为4组(预防组、细菌模型组、治疗组和对照组),设置不同的大肠杆菌和猪源抗菌肽给药方案。结果表明,猪源抗菌肽NK-lysin为稳定的,半衰期在大肠杆菌中(体内)长,与白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)和颗粒性蛋白B(Granzyme B,GZMB)具有相互作用;预防组和治疗组小鼠存活率分别为80.00%和86.67%。综上所述,猪源抗菌肽在小鼠体内安全且具有一定的抑菌作用。     

抗菌肽NK-lysin生物信息学分析及其抑菌作用研究

为分析猪源抗菌肽NK-lysin的理化性质和蛋白结构,并研究猪源抗菌肽在小鼠体内的抑菌效果,以猪小肠组织cDNA为模板进行PCR扩增和测序,通过生物信息学相关软件和工具对其测序结果进行分析。试验选用60只小鼠,随机分为4组(预防组、细菌模型组、治疗组和对照组),设置不同的大肠杆菌和猪源抗菌肽给药方案。结果表明,猪源抗菌肽NK-lysin为稳定的,半衰期在大肠杆菌中(体内)长,与白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)和颗粒性蛋白B(Granzyme B,GZMB)具有相互作用;预防组和治疗组小鼠存活率分别为80.00%和86.67%。综上所述,猪源抗菌肽在小鼠体内安全且具有一定的抑菌作用。     

扁柏醇与托酚酮抑菌活性的初步研究

采用滤纸片扩散法测定了扁柏醇和托酚酮对大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果表明,扁柏醇和托酚酮均对供试菌种有抑制作用,扁柏醇对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的MIC分别为300和100 μg/mL,MBC均为300μg/mL;托酚酮对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的MIC分别为100和50 μg/mL,MBC分别为300和100μg/mL.通过不同浓度的扁柏醇和托酚酮对供试菌的抑制作用比较,推测其活性基团为羟基和酮基.     

抗菌肽的应用及展望

抗菌肽（Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｐｅｐｔｉｄｅ）是昆虫体内经诱导而产生的一类具有抗菌活性的碱性多肽物质，它有Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ等多种结构。抗菌肽具有广谱的杀菌活性，它具有分子量小、热稳定、水溶性好，以及材料来源丰富等优点。更为重要的是抗菌肽对正常的真核细胞几乎没有作用，仅仅作用于原核细胞和发生病变的真核细胞，抗菌肽具有广谱的杀菌活性，不仅作用于革兰氏阳性细菌，而且也作用于真菌、昆虫、某些病毒和肿瘤细胞，同时还能加速免疫和伤口的愈合过程。１抗菌肽在基因工程上的应用抗菌肽基因的化学合成方面在国内…     

稻蝗抗菌肽的诱导和粗提物活性研究

近年来,昆虫抗菌肽的研究逐渐成为昆虫免疫学及分子生物学研究的热点之一,它可为抗菌和抗肿瘤新药的开发提供新的来源。本文对稻蝗(Oxyachinensis)幼虫进行了紫外照射、超声波、针刺、菌液注射的处理,发现E.coli注射诱导产生的抗菌物质活性明显;通过对不同指示菌做抑菌测定,结果显示稻蝗抗菌肽仅抗革兰氏阳性菌;经高温处理、酸性处理,表明此抗菌物质为一种热稳定的碱性抗菌多肽。     

柞蚕抗菌肽Moricin的抑菌活性研究

本研究在对柞蚕抗菌肽Moricin基因成功进行克隆及毕赤酵母表达的基础上,对其生物活性进行了研究。结果表明,抗菌肽Moricin对大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌和金黄色葡萄球菌临床分离菌株的抑菌圈直径为12~21 mm,表明Moricin对这些菌株均具有较强的抑菌活性,对临床耐药菌株的抑菌作用尤其明显。Moricin对上述菌株的最低抑菌浓度为3.9~15.6μg/m L。Moricin对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的广谱抑菌活性使其在畜禽疫病防治和生产中具有潜在的重要价值。     

中药抗菌喷雾的体外抗菌性能检测

[目的]研究含多种中药成分的抗菌喷雾的体外抗菌效果并对其抗菌机理进行分析.[方法]选用大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)2种菌,用肉汤稀释法和荧光染色法测定抗菌喷雾对其抑菌活性、抑菌率、最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),用滤纸片法测定其抑菌环,用扫描电子显微镜(SEM)和透射电子显微镜(TEM)观察抗菌喷雾对细菌表面结构和超微结构的影响.[结果]中药抗菌喷雾在极短的时间内对E.coli和S.aureus的抑菌率就能达到100％,滤纸法显示抑菌环明显;MIC和MBC结果说明了中药抗菌喷雾在稀释5倍之后仍对2种细菌具有抑制作用;喷雾作用后的细菌大量死亡,表面及内部结构均发生明显变化.[结论]多种中药成分的抗菌喷雾对E.coli和S.aureus具有显著的联合抑菌效果.     

树莓乙醇提取物抑菌活性研究

研究以大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aurous)、酵母(Yeast)、匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)、黑曲霉(Aspergillums niger)、灰绿青霉(Penicillium glaucum)为供试菌,测定树莓(Rubus chingii Hu)乙醇提取物的抑菌活性。结果表明,树莓乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌具有比较显著的抑菌效果;在一定温度及pH范围内,其抑菌率与时间呈正相关;而在时间相同的情况下,其抑菌率与乙醇提取物浓度呈正相关。