细胞因子Daintain/AIF-1的纯化及其单克隆抗体的制备与鉴定

由猪小肠中纯化鉴定Daintain/AIF-1,并以其为免疫原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术制备得到4株稳定分泌抗体的单克隆细胞株。对单抗效价、亚类、亲和常数进行分析,4株单抗都属于IgG1(κ)。又经West-ern blot证实,所制备的抗体能特异性与Daintain/AIF-1结合。     

植物多肽激素PA1b的纯化鉴定及功能研究

通过稀醋酸低温浸提、海藻酸吸附、盐析、SephadexG25凝胶过滤、Sephacel离子交换层析和高效液相色谱等方法,从豌豆种子中分离纯化出PA1b及其多种异构体,并通过质谱和氨基酸测序进行了鉴定,结果表明:PA1b能抗胃蛋白酶(pepsin)水解,其高度的酶稳定性是由于分子内具有胱氨酸结构模体。此外,PA1b能明显延长体外培养的胰岛β细胞的存活时间,并影响胰岛β细胞的功能。     

富甘氨酸果蝇抗菌肽SK66的抗菌机制研究

为了研究SK66的抗菌机制,对K66-his、AMA-SK66、Trx-SK66进行序列比对和分析,结果发现Trx-SK66是SK66的氮端加了1个Trx蛋白,AMA-SK66是SK66的氮端加了2个丙氨酸和1个甲硫氨酸,SK66-his是在SK66的碳端加了6个组氨酸;比较SK66-his、AMA-SK66和Trx-SK66杀灭细菌活性,结果表明Trx-SK66没有杀菌活性,AMA-SK66杀菌活性大大降低.试验结果说明氮端氨基酸对SK66杀菌活性很重要,尤其氮端氨基酸的极性.     

竞争抑制ELISA法检测植物中豌豆胰岛素PA1b

为研究豌豆胰岛素PA1b在植物生长发育中的作用,利用竞争抑制ELISA法,检测PA1b在豌豆、芋头、姜、西红柿、苦瓜、蒜头、洋葱、丝瓜、黄瓜等植物中的分布,以及PA1b在豌豆种子发芽过程中的含量变化。结果显示PA1b在豌豆中含量最高,且随着豌豆种子发芽时间的增加含量逐渐减少,PA1b可能对植物生长发育起调控作用。     

大炎肽在胰腺中相互作用蛋白的纯化鉴定

为研究大炎肽影响胰腺β细胞的机制,将大炎肽偶联到CNBr活化的Sepharose 4B亲和层析介质上,利用亲和纯化的方法垂钓其在胰腺组织中的相互作用蛋白,并对纯化蛋白进行胰蛋白酶水解,测定水解片段的分子质量和其中2个片段的氨基酸序列,在MASCOT数据库中检索,鉴定此蛋白为胱硫醚β-合成酶,结果提示大炎肽可能通过结合胱...     

磺胺二甲嘧啶在银鲫体内的药动学及组织残留研究

本文用比色法测定了磺胺二甲嘧啶 (sulphadimine,SM2 )在银鲫血浆及肌肉、肝脏等组织中浓度并考察了采用尾静脉抽血和断尾取血两种取样方法对测定结果的影响情况。结果表明 :抽血采样组血药浓度明显高出断尾采样组 ;以 2 0 0mg kg鱼体重的剂量口灌给药 ,在水温 2 8 5 ( 0 5℃的条件下 ,给银鲫口灌 2 0 0mg kg的磺胺二甲嘧啶后 ,采用抽血方式采样 ,磺胺二甲嘧啶在银鲫体内的药动学最佳数学模型为一级吸收一室开放模型 ,其T1 2ka为 0 665h ,T1 2k为 12 961h ,Cmax为 79 777μg ml。     

富甘氨酸果蝇抗菌肽SK66对子宫颈癌细胞Hela增殖的研究

SK66是一个编码了N端为丝氨酸、C端为赖氨酸且含有66个氨基酸残基的富甘氨酸果蝇抗菌肽。SK66能杀灭宫颈癌细胞Hela,经SK66处理后子宫颈癌细胞Hela的贴壁性很快被破坏,大量细胞悬浮并死亡。通过MTT试验,发现SK66能够显著抑制子宫颈癌细胞Hela的增殖。采用膜片钳技术,研究表明SK66能在DRG细胞上形成阳离子通道。这说明SK66对癌细胞的杀灭机制可能为细胞膜出现大量穿孔、原生质泄漏,细胞破裂死亡。     

一个家蝇抗菌肽的分离纯化

以野生家蝇干燥幼虫为原料,在常规的生化提取基础上,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)法进一步纯化,并结合电洗脱技术,利用灵敏的杀菌活性检测手段,从家蝇抗菌肽总组分中分离纯化出1个20 ku的抗菌肽,对苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄葡萄球菌均有杀灭作用。