镉胁迫对油菜根系生理特性的影响

采用水培体系,对幼苗期油菜根系进行不同浓度(1,5,10,25,50 mg/L)的Cd2+胁迫,胁迫1,3,6,9 d后测定其若干相关生理特性指标,研究镉对油菜根系生理特性的影响。研究结果表明:Cd2+胁迫下油菜根系的电解质相对外渗率、MDA和游离脯氨酸的含量都随着Cd2+处理浓度的增加而增大,并且各处理浓度与对照差异性显著(P<0.05);可溶性蛋白、可溶性糖含量随着Cd2+处理浓度的增加先升高后降低,低浓度(小于5 mg/L)有明显的促进作用;且各指标随着处理时间的延长逐渐上升。SOD酶活性在胁迫3 d后,随处浓度和处理时间的延长先升高后降低,APX、CAT和POD酶活性随着Cd2+胁迫浓度的升高,先升高后降低,但各种抗氧化酶对浓度的敏感性不同,SOD>APX>CAT>POD。综上述,镉胁迫对油菜根系生长有一定的伤害,使得根系细胞膜透性增加,膜脂过氧化加重,根系利用自身渗透调节物质和抗氧化酶活性升高来调节并适应环境,但是高浓度的镉环境使得根系细胞中积累较多的活性氧等自由基而严重伤害细胞,可溶性蛋白含量以及抗氧化酶活性下降,影响根系生长。     

多粘类芽孢杆菌S960抑制尖孢镰刀菌的活性物质分离纯化

对多粘类芽孢杆菌S960胞外粗提液采用硫酸铵沉淀法和Sephadex G-75凝胶层析法分离纯化多粘类芽孢杆菌S960释放的活性物质，用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测该活性蛋白质的相对分子量、薄层层析法初步鉴定该活性物质。结果表明，40%的硫酸铵沉淀提取效果最佳，Sephadex G-75凝胶层析在控制0.5 mL·min^-1的流速下，洗脱时间为50～70 min的收集液中具有有效活性物质，聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该活性物质相对分子量约为66.2 kDa，纯度为91.87%。薄层层析展开结果显示该活性物质可能含有α-氨基酸、苯丙氨酸、羟脯氨酸或脯氨酸。这说明多粘类芽孢杆菌S960可以通过释放具有抑菌活性的蛋白而抑制尖孢镰刀菌的生长。     

繁茂膜海绵的实验室养殖

为了实现可控条件下海绵(marine sponge)的快速生长，获得海绵生物量，解决海绵药物开发的“药源供给不足”的瓶颈问题，本研究以大连周边黄渤海潮间带的繁茂膜海绵(Hymeniacidon perleve)为研究对象，进行室内养殖实验，在自行设计的水体循环和不循环养殖体系水族槽内观察繁茂膜海绵的原代和继代生长过程。海绵经历贴壁、旺盛生长、出芽、静止生长和枯萎5个生长阶段。“窝”型巢穴有利于海绵生长和繁殖。实验过程中观察到繁茂膜海绵以一种拖丝迁移的方式分散新的个体以实现繁殖。扁藻和硅藻可以作为海绵的饵料。平缓的水流有利于海绵的生长。温度是影响海绵生长的关键因素，在一定温度刺激下，海绵会从过冬状态下苏醒，开始生长。     

镉胁迫对油菜种子萌发和根系生长的影响

采用水培的方法,研究了0、1、5、10、25、50 mg/L Cd2+浓度胁迫对油菜种子萌发的影响,以及镉胁迫对油菜幼苗期根系生物量和根系活力的影响.结果表明:(1)当Cd2+浓度＜5mg/L时,对油菜种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数没有显著影响;当Cd2+浓度≥5 mg/L时,对种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数以及幼根根长、根鲜重、芽长、芽鲜重都有显著的抑制.(2)当Cd2浓度≤5 mg/L时,幼苗期根系的根长以及根鲜、干重都随着Cd2浓度的升高和处理时间的延长而升高;当Cd2+浓度＞5 mg/L时,幼苗期根系的根长以及根鲜、干重都随着Cd2+浓度的升高和处理时间的延长而降低.(3)当Cd2+浓度≤1 mg/L时,根系活力明显高于对照,当Cd2+浓度≥5 mg/L时,根系活力开始降低,且随着Cd2浓度升高和处理时间的延长而降低.说明当Cd2浓度积累到一定程度后才对油菜种子萌发和根系生长有抑制作用,Cd2浓度＜5 mg/L的环境有利于油菜种子萌发和根系生长,但Cd“浓度＞5 mg/L的环境不利于油菜的种植.     

蔬菜内生菌的分离及其生防功能初探

采用5种分离培养基从油菜和芹菜的茎和叶中分离得到215株内生菌，通过菌块对峙法对其拮抗植物病原真菌的性能进行初步的测定，并对发酵液的拮抗活性进行了进一步的筛选。结果表明，对蔬菜立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、直喙镰孢菌(Fusaritum orthoceras)、苹果黑腐皮壳(Valsa mali)有拮抗作用的菌株有18株，包括10株细菌和8株放线菌。分离自油菜茎的放线菌CHSHl9A有极强的抗立枯丝核菌活性，通过显微镜和电镜下的观察，初步判断为链霉菌；进而对其进行DNA提取，16SrDNA全长扩增和长度为l382bp的序列测定及序列分析证明，CHSHl9A为一株链霉菌Streptomyces sp。     

拟南芥at3g57680基因编码的CtpA蛋白对光系统Ⅱ功能的影响

采用电镜技术、Northern印迹技术、蓝绿温和胶电泳、SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹等方法对拟南芥at3g57680基因缺失的突变体植株研究。结果表明:(1)突变体植株和野生型植株的叶绿体都呈扁球状,叶绿体的大小基本一样,叶绿体内部基质,基粒均匀分布,基粒类囊体垛叠层数相近;(2)psbA、psbB、psbC和psbO基因mRNA水平没有变化;(3)类囊体膜蛋白复合物的组成、表达量以及蛋白复合物各亚单位的组成和含量也是基本一致,且突变体与野生型植株中D1蛋白的表达量也保持一致。说明在正常生长环境中,拟南芥at3g57680基因的缺失对叶绿体显微结构、D1蛋白的成熟加工以及PSⅡ蛋白组成等没有影响,即at3g57680基因编码的类CtpA蛋白对PSⅡ功能没有影响。     

蟛蜞菊耐受土壤Cu污染胁迫的光合特性与机理

为揭示蟛蜞菊(Wedeliatrilobata)耐受土壤Cu污染胁迫的机制,设计盆栽试验模拟土壤Cu污染胁迫处理蟛蜞菊。处理3个月后,测定其地上生物量,叶片叶绿素含量,用Ciras-2测定其叶片气体交换常数、Pn-CO_2响应曲线及根呼吸强度,用Handy-PEA测定其叶片荧光参数。结果显示,不同程度的Cu污染胁迫显著(P0.05)影响蟛蜞菊叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(E)、气孔导度(Gs)、细胞间CO_2浓度(Ci);Cu污染也影响蟛蜞菊叶片Pn-CO_2响应曲线;Cu污染胁迫使蟛蜞菊叶片光合性能指数(PIabs)明显下降,单位反应中心吸收的光能(ABS/RC)、单位反应中心捕获的用于还原QA的能量(TR0/RC)、以吸收光能为基础的驱动力(DFabs)、反应中心捕获的激子中用来驱动电子传递到电子传递链中超过QA的其他电子受体的激子占用来驱动QA还原激子的比率(ψE0)、用于电子传递的量子产额(φE 0)等指标均有所下降,快速叶绿素荧光诱导动力学曲线(OJIP)出现K点。但是,不同程度的Cu污染胁迫对蟛蜞菊的地上生物量、根呼吸强度均无显著(P0.05)影响,非高浓度Cu污染胁迫(≤373.27 mg·kg~(-1))对蟛蜞菊叶片Chla、Chlb也无显著(P0.05)影响。研究结果说明蟛蜞菊能耐受Cu污染胁迫以叶绿素不受破坏和根系活力不受影响为基础。     

NaCl胁迫对油菜种子萌发和幼苗生长的影响

用纸床培养,通过测定发芽势、发芽率、及各项生理指标的方法研究了不同浓度的NaCl胁迫对油菜种子萌发及幼苗生长的影响.结果表明:盐浓度<150 mmol/L时,油菜种子萌发与幼苗生长良好,在150～300 mmol/L范围内,油菜种子的发芽势、发芽率、芽长、根长,鲜重和干重等生理指标均随着盐浓度的升高而下降,盐害率不断上升.当NaCl浓度≥300 mmol/L时,种子完全不萌发.随着NaCl溶液浓度的升高,对油菜幼苗的相对电导率和伤害率不断升高,而叶绿素a、b的含量则呈不断下降的趋势.说明NaCl浓度积累到一定程度后才对由此种子萌发和幼苗产生盐害,油菜受NaCl盐害在一定的浓度范围内随浓度增大而增大,NaCl浓度积累达到一定程度后,油菜不能萌发.     

拟南芥at3g57680基因编码的CtpA蛋白对光系统Ⅱ功能的影响

采用电镜技术、Northern印迹技术、蓝绿温和胶电泳、SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹等方法对拟南芥at3g57680基因缺失的突变体植株研究。结果表明:(1)突变体植株和野生型植株的叶绿体都呈扁球状,叶绿体的大小基本一样,叶绿体内部基质,基粒均匀分布,基粒类囊体垛叠层数相近;(2)psbA、psbB、psbC和psbO基因mRNA水平没有变化;(3)类囊体膜蛋白复合物的组成、表达量以及蛋白复合物各亚单位的组成和含量也是基本一致,且突变体与野生型植株中D1蛋白的表达量也保持一致。说明在正常生长环境中,拟南芥at3g57680基因的缺失对叶绿体显微结构、D1蛋白的成熟加工以及PSⅡ蛋白组成等没有影响,即at3g57680基因编码的类CtpA蛋白对PSⅡ功能没有影响。