正交试验法在牛蒡组织培养中的应用

应用正交设计法研究BA,NAA及蔗糖3个因子对牛蒡(Arctium lappa L.)组培苗的增殖率的影响,同时考察了NAA,BA及不同浓度的MS培养基3个因子对牛蒡组培苗生根培养的影响,各试验均按正交表L9(34)形成3因素、3水平的不同配比.试验结果表明:最佳的增殖培养基是MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30g/L,最适于生根的培养基是1/2MS+BA 0.1 mg/L+NAA 0.05mg/L+30g/L蔗糖.     

何首乌生根培养因子的优选研究

以何首乌嫩茎为外植体,采用正交实验设计进行何首乌生根培养的研究。实验结果表明：影响何首乌生根培养因子的作用大小为培养基〉IBA〉蔗糖〉NAA,诱导何首乌组培苗生根的最佳培养基为：1／2MS＋NAA0．2mg／L＋IBA1．0mg／L＋30g／L蔗糖。     

长穗桑组织培养和四倍体新种质诱导

以长穗桑枝条为外植体,建立其无菌离体快繁体系,综合利用组织培养技术和秋水仙素诱变技术,进行四倍体诱变处理,试验结果表明：长穗桑最佳的增殖培养基为MS＋BA 2．0mg／L＋NAA 0．2mg／L＋蔗糖30g／L,最佳的生根培养基为1／2MS＋BA 0．1mg／L＋NAA 0．05mg／L＋30g／L蔗糖,四倍体诱导的最佳处理条件为0．2％浓度的秋水仙素浸泡茎段3d,诱导率最高为16．7％。     

新铁炮百合和金百合的组织培养与快速繁殖技术

以新铁炮百合和金百合的鳞片为外植体成功获得再生植株，并建立快速无性繁殖系．新铁炮百合鳞片的最佳芽诱导培养基是MS BA1．5-2．0mg／L NAA0．05mg／L；芽增殖培养基是MS BA0．5～1．0mg/L NAA0．05～0．1mg/L；最适蔗糖质量分数为5％；结球培养基为MS BA0．2mg／L NAA0．05mg／L．金百合鳞片的最佳芽诱导培养基是MS BA3．0mg／L NAA0．05mg／L；芽增殖培养基足MS BA1．0-2．0mg/L NAA0．05-0．1mg／L，蔗糖质量分数变化对芽的生长没有明显影响；结球培养丛为MS BA0．2-0．5mg／L NAA0．05mg／L．两种百合均较易生根，采用1／2MS NAA0.2-0．5mg/L培养基可长出健壮的根系，移栽成活率达90％以上。     

香花槐的组织培养研究

对香花槐进行组织培养试验,结果显示：外植体诱导培养基采用MS＋BA1．0mg／L＋NAA0．05mg／L,可获得70％的萌发率;继代培养基采用Ms＋BA0．5mg／L＋NAA0．04mg／L,增殖系数和生长系数都较高;生根培养基为大量元素减半的MS＋NAA0．5mg／L,其中蔗糖15g／L,生根率达100％。     

伯乐树组织培养快繁技术研究

[目的]筛选伯乐树的最佳芽诱导、增殖生根培养基及炼苗基质。[方法]以伯乐树种子无菌萌发的胚芽为外植体，以MS为基本培养基，添加不同浓度的BA、IBA和NAA进行胚芽诱导培养；以不同浓度的琼脂、蔗糖、NAA、BA为因子作正交设计试验，进行继代增殖培养，并附加不同浓度的IBA和NAA进行生根培养。[结果]伯乐树芽诱导最佳培养基为MS＋BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L，出芽率最高，达71．34％，芽体高度为5．30cm；最佳增殖培养基为MS＋BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋琼脂1．0％＋蔗糖2．5％．胚芽增殖系数达3．6，芽体高度为3．1cm；最适宜的生根培养基为MS＋IBA3．0mg／L＋琼脂0．8％＋蔗糖3．0％，生根率达到89％；伯乐树试管苗的最适炼苗基质为蛭石25％＋珍珠25％＋河沙50％，移栽成活率可达65％。[结论]建立了伯乐树组织培养快速繁殖技术体系。     

应用多因子正交试验筛选野生七姊妹离体培养条件

应用正交设计法研究了植物生长调节剂、硝酸银和活性炭等对七姊妹愈伤组织的诱导、不定芽诱导 和生根培养的影响。结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS 2．4-D 0．8mg／L 6-BA 0．2 mg／L 蔗糖 30g／L 琼脂7．0 g／L;不定芽诱导最佳培养基为MS NAA 0．1mg／L CPPU0．8 mg／L AgNO34.0mg／L 蔗糖30g／L 琼脂7．0 g／L,分化率为95％,增殖率为5．5;最佳生根培养基为1／4MS NAA 0．3 mg／L IBA 0．3 mg／L 蔗糖20g／L 琼脂4．0 g／L,生根率为90％。     

速生优良杉木组培继代及生根培养研究

[目的]研究培养基、6-BA、IBA、NAA等4个因子对杉木（Cunninghamia lanceolata）组培苗芽增殖的影响和蔗糖、IBA、NAA、ABT6#等4个因子对组培苗生根培养的影响,寻求最适杉木组培苗芽增殖和生根的培养基配方,为杉木组培快繁提供一些有益的参考。[方法]应用正交设计法研究培养基、6-BA、IBA、NAA等4个因子对杉木组培苗芽增殖的影响和蔗糖、IBA、NAA、ABT6#等4个因子对组培苗生根培养的影响。[结果]最佳的继代增殖培养基是1/3MS＋蔗糖30 g/L＋6-BA 0.7 mg/L＋IBA 0.5 mg/L,最适于生根的培养基是1/2MS＋蔗糖30 g/L＋IBA 1.2 mg/L＋NAA 0.4 mg/L。[结论]该研究为杉木组织培养中选择合适的培养基提供了科学依据。     

优良八仙花品种(Hydrangea serrata‘Preziosa’)的离体培养与快速繁殖

以八仙花当年生茎段为外植体,进行离体快速繁殖技术研究。结果表明：无菌芽诱导的适宜培养基为改良MS＋BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋CH0．5g／L十蔗糖30g／L＋琼脂粉6．0g／L,诱导率为97．2％;芽增殖的适宜培养基为改良MS＋BA1．0mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂粉6．0g/L,增殖系数达6．1;生根的适宜培养基为1／2MS＋IBA0．3mg／L＋蔗糖20g/L＋琼脂粉6．0g／L,试管苗在该培养基上根系生长良好,生根率达100％。     

印楝的组织培养和快速繁殖

以印楝带芽茎段为外植体,进行快速繁殖技术研究,愈伤组织诱导率为100％,其繁殖系数30d可达5～7倍,生根率30d可达100％。诱导培养基以MS BA1．0mg／L NAA0．01mg／L 3％蔗糖最佳,继代增殖以MS BA0.5mg／L NAA0．1mg／L 3％蔗糖为宜。生根培养以1／2MS NAA0．1mg／L 1．5％蔗糖效果最好。     

黑皮果蔗花叶病茎尖脱毒技术研究

[目的]利用果蔗热带种（Badila）茎尖培养进行甘蔗花叶病的脱毒研究。[方法]采用黑皮果蔗茎尖作为外植体进行了组织培养,并在生根阶段和假植阶段进行了甘蔗花叶病毒的分子检测。[结果]初代培养基为MS＋0.50 mg/L6-BA＋0.01 mg/LNAA＋30 g/L蔗糖,继代培养基为MS＋0.20 mg/L6-BA＋0.01 mg/LNAA＋30 g/L蔗糖。甘蔗花叶病毒检测结果为阴性。[结论]利用热处理结合茎尖培养能够有效脱除花叶病毒。     

国兰“绿蕙红舌”的组织培养技术

采用不同培养基对国兰"绿蕙红舌"的种子进行组织培养试验研究,综合分析不同培养基配方在国兰"绿蕙红舌"组织培养过程中对种子萌发与原球茎诱导、原球茎继代增值、原球茎分化及生根壮苗的影响。结果表明,种子萌发与原球茎诱导最适宜培养基为MS+BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+水解酪蛋白100 mg·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;原球茎继代增值最适培养基为KC+BA0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+活性碳2g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;原球茎分化最适培养基为KC+BA1.0 mg·L-1L+NAA 0.2mg·L-1+活性碳2 g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;生根壮苗最适培养基为1/2 MS+NAA 0.5mg·L-1+活性碳2 g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1。以上培养基pH均为5.1～5.4。     

茅膏菜组织培养研究初报

[目的]探讨培养基组合对茅膏菜愈伤组织形成、分化和生长的影响。[方法]以好望角茅膏菜为试验材料,在10种培养基上进行繁殖,研究不同的培养基组合对茅膏菜愈伤组织形成、分化和生长的影响。[结果]茅膏菜幼叶在MS培养基上能形成愈伤组织,但在花宝一号＋BA 0.1~1.0 mg/L＋NAA 0.1~0.5 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖10~30 g/L培养基上有利于愈伤组织形成,特别是花宝一号＋BA 1.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖20 g/L时更有利于愈伤组织形成 在MS＋活性炭＋BA 0.1~1.0 mg/L＋NAA0.1~0.5 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖10~30 g/L培养基有利于茅膏菜愈伤组织的分化,特别是MS＋活性炭＋BA 1.0 mg/L＋NAA 0.2mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖30 g/L培养基既有利于愈伤组织分化出芽,又有利于幼苗分化出根。[结论]该研究为茅膏菜的快速繁殖奠定了基础。     

番木瓜实生苗茎段组培快繁条件的优化

【目的】探讨不同激素对番木瓜实生苗茎段分化的影响,为提高番木瓜繁育效率提供参考依据。【方法】番木瓜种子采用直接接种、无菌水处理18 h后接种等4种方式预处理获得最佳种子处理方式;再以获得的实生苗茎段为外植体进行芽诱导培养基、增殖壮苗培养基、生根培养基的优化筛选。【结果】经6-BA 1.0 mg/L与GA31.0 g/L等体积混合液浸泡18 h后接种的番木瓜种子发芽率高达93.3%,接种培养后污染率低至3.3%;适合番木瓜茎段芽诱导培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖壮苗培养基为MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L,增殖系数最高达4.3,生根诱导培养基为MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L。【结论】MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L、MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L和MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L分别作为番木瓜实生苗茎段芽诱导、增殖壮苗和生根诱导培养基,可提高番木瓜实生苗茎段组培育苗效率。     

不同激素对补血草器官分化的影响

以补血草的带节花梗为材料,在离体条件下研究不同激素对花梗愈伤组织的诱导、不定芽分化、继代培养以及生根的影响,建立和优化离体再生体系,为补血草快速繁殖、种质资源保存以及遗传转化提供有效的途径和技术。结果表明,MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L为补血草花梗愈伤组织诱导的最佳培养基,愈伤组织诱导率最高(89.2%),出愈速度最快(12 d),产生的愈伤组织颜色翠绿,质地紧密;不定芽诱导以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的效果最佳,诱导率为74.3%,平均每块愈伤组织诱导的不定芽数为3.6个;在NAA 0.1～0.2 mg/L+6-BA 1.5～2.0 mg/L时的继代增殖效果最好,分化率大于85%,使幼苗数增加3倍以上;生根培养以1/2 MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L时的生根率最大,为100%。     

凤尾兰的组织培养

以凤尾兰(YuccagloriosaLinnaeus)的茎尖、幼嫩茎段及嫩叶为外植体进行组织培养。结果表明以嫩叶为外植体的愈伤组织诱导率最高,由茎段诱导的愈伤组织继代增殖最好,由茎尖诱导的愈伤组织诱导不定芽表现最佳。筛选出最佳初代培养基MS 6-BA3.0mg/L NAA0.2mg/L;愈伤组织增殖培养基MS 6-BA8.0mg/L NAA0.1mg/L;不定芽诱导培养基为MS 6-BA5.0mg/L KT1.0mg/L;不定芽增殖培养基为MS 6-BA4.0mg/L NAA0.05mg/L 椰子水100mL/L;生根培养基为1/2MS NAA0.2mg/L。     

大花蕙兰高频再生体系的建立

以大花蕙兰的不同部位作外植体,对其启动诱导;采用正交试验设计等方法筛选大花蕙兰类原球茎诱导、增殖与生根壮苗的最佳培养基。结果表明:在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,在1/2MS NAA 1.0 mg/L GA31.0 mg/L 香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。     

白桃成熟胚试管苗培养研究

以白桃成熟胚为试验材料,无菌萌发获取试管苗,并筛选出试管苗培养最合适的增殖及生根培养基。研究结果表明,白桃试管苗培养最适合的增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,增殖系数为3.45。生根率最佳诱导培养基为1/4 MS+IBA 0.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根率为82.22%。生根数最佳诱导培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根数为5.96。     

金钱树的组织培养

以金钱树[Zamioculcaszamiifolia(Loddiges)Engler]的幼嫩小叶为外植体,采用幼叶→愈伤组织→丛生芽→完整植株的途径进行繁殖。结果表明:叶片在MS BA2mg/L 2,4-D1.0mg/L PVP0.5mg/L 活性炭0.5mg/L 蔗糖30g/L培养基上暗培养30d,可诱导形成愈伤组织;愈伤组织在MS BA4mg/L KT0.5mg/L 蔗糖30g/L培养基上光照培养25d,可诱导形成丛生芽(丛生芽在继代培养过程中每20～25d可增殖3～5倍);丛生芽接种于MS BA3mg/L NAA0.2mg/L 蔗糖30g/L培养基上壮苗培养4周后,再转入1/2MS BA2mg/L NAA0.5mg/L 蔗糖30g/L培养基上培养30d,可诱导形成完整的根系。