莲藕组织培养及快速繁殖试验研究

莲藕顶芽或叶芽在１／２ＭＳ＋６－ＢＡ２．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋活性炭０．２％培养基上培养３５ｄ,诱导产生丛生芽３—６个,芽长２—４ｃｍ。此时,将它们分切成单芽转到同一培养基,继代培养２５ｄ,繁殖系数４—６。芽长２—３ｃｍ时再分切成单芽于１／２ＭＳ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋活性炭０．３％培养基上进行生根培养,培养２５ｄ,生根率８２．５％,移载成活率８６％。     

慈姑蛋白酶抑制剂基因转化小白菜获抗虫转基因植株

通过根癌农杆菌的介导将慈姑蛋白酶抑制剂基因导入小白菜。Ｋａｎａｍｙｃｉｎ筛选浓度为１０－１５ｍｇ．Ｌ＾－１,抑制农杆菌生长的抗生素选用Ｃ浓度为３００－５００ｍｇ．Ｌ＾－１。小白菜带柄子叶被农杆菌感染后,抗性芽的诱导频率为０．２％－２．０％。加入适量的ＡｇＮＯ３不仅可以抑制过度生长的农杆菌,还可以使抗性芽的诱导频率约提高到５％。试验获得转基因植株９７株。     

香料烟叶组织培养再生系统建立

将５ｍｍ＊５ｍｍ的香料烟叶块接种到２／３ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养其中,４周后分化出大量丛生芽。继续培养２周后,芽长成苗高１．０－１．５ｃｍ,形成５片小真叶时,转移到２／３ＭＳ＋ＢＡ０．１ｍｇＬ＋ＩＡＡ１的培养其中分化出根,形成完整的再生植株,当植株高２．５－３．５ｃｍ,具有６－７片小真叶时,移栽到经过灭菌的营养土盆中,开始时先用１／３ＭＳ培养液浇苗１ｄ,以后正常管理,定     

河套蜜瓜再生芽高效诱导和再生植株的研究

取河套蜜瓜（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏＬ．ｃｖ Ｈｅｔａｏ）在ＭＳ增减基上生长至５ｄ的幼嫩子叶,在ＭＳ＋６－ＢＡ０．９）,ＩＡＡ１．０的增减基中直接诱导生芽,待再生芽长至０．４ｃｍ～０．６ｃｍ时,切下转入芽伸长拳头基中（ＭＳ＋６－ＢＡ０．９）,待芽伸长至０．８ｃｍ～１．２ｃｍ时,再转入生根诱导（ＭＳ＋ＩＡＡ２）中,待植株长至８ｃｍ～９ｃｍ时,转入沙质土壤中炼苗。整个过程约需６５ｄ～７５ｄ,单个外值体     

番茄子叶离体培养与再生成株

取番茄不同苗龄的无菌苗子叶进行培养，发现以１４天苗龄的子叶培养不定芽再生频率最高。在ＭＳ培养基上添加不同浓度的吲哚乙酸（ＩＡＡ）和玉米麦（Ｚｔ），对子叶愈伤组织的形成影响不大，但对不定芽的分化有较大影响，其中以ＭＳ＋Ｚｔ１ｍｇ．Ｌ＾－＾１ＩＡＡ１ｍｇ．Ｌ＾－＾１效果最好。在同样的培养基上继代培养，待芽长至１－２ｃｍ长时转到生根培养基上即可在短期内长出根系，成为再生植株。     

番木瓜的离体培养快速繁殖

在１／２ＭＴ（无机盐减半）附加０．５ｍｇＬ－１ＢＡ和０．２ｍｇＬ－１ＮＡＡ的ＢＭ１培养基上建立试管株系．在ＭＴ附加０．５ｍｇＬ－１ＢＡ和０．１ｍｇＬ－１ＮＡＡ的ＢＭ２快繁培养基上，每４５ｄ继代一次可获得平均达６．３倍的增殖率．继代芽苗接种在含０．２－１．０ｍｇＬ－１ＩＢＡ培养基中培养可获得较高的长根率     

曼海母宫殿组织培养

曼海母宫殿以当年生枝条上饱满未萌发的侧芽为外植体．进行组织培养、在附加６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上．芽诱导效果最好，在附加６－ＢＡ１．５＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ或ＫＴ１．０＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上．芽的分化效果最好。在附加ＫＴ０．３＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ或６－ＢＡ０．３＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上，壮苗效果最好。在附加ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ或ＩＢＡ０．１＋ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的１／２ＭＳ培养基上生根效果最好。试管苗高２．５～４．０ｃｍ，且具有３～５条短根时，开瓶锻炼３～５ｄ。移栽入土效果好、种植在保温保湿环境中．试管苗成活率高。     

农杆菌介导的莴笋遗传转化体系初步研究

为了研究农杆菌介导的莴笋遗传转化的影响因素,建立莴笋高效遗传转化体系,通过设置不同预培养、共培养时间,探讨其对外植体芽分化率的影响;设置不同农杆菌菌液浸染浓度及浸染时间,探讨其对外植体致死率的影响。试验结果表明,对莴笋外植体预培养2d,外植体芽分化率最高;共培养0、1、2d,外植体芽分化率差别不大;当农杆菌菌液OD600值为0.3、0.5,分别侵染1、3、5min,外植体致死率相差不大。因此,在莴笋遗传转化中,采用外植体预培养2d、共培养2d,农杆菌菌液OD600值为0.5、侵染时间5min的遗传转化体系能提高莴笋的遗传转化率。     

蓬莱松组织培养研究（简报）

以蓬莱松的嫩枝为外植体,在ＭＳ基本培养基附加不同浓度的植物生长调节物质的培养基上于室温２５±２℃,光照１４ｈ／ｄ,光强１５００Ｘ条件下进行组织培养,结果表明,ＭＳ附加６－ＢＡ０．２－０．５ｍｇ／Ｌ可促进转接的愈伤组织分化芽,附加６－ＢＡ０．２－０．５ｍｇ／Ｌ或结合ＮＡＡ０．１－０．２ｍｇ／Ｌ,以蓬莱松嫩芽增殖,生长亦具有良好的促进作用,每芽可增殖４－９倍。     

甘蓝下胚轴的高效再生和农杆菌介导B.t.基因转化甘蓝

分别对取材时间和培养基组成进行研究,建立了甘蓝下胚轴外植体的高效再生系统,当选取６－７ｄ苗龄的下胚轴,将其置于ＭＳＢ＋ＢＡ２．５ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ的芽分化培养其中,并于培养基中附加ＡｇＮＯ３７．５ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ１ｍｇ／Ｌ＋     

单双低油菜原生质体培养高效成株体系的研究

以甘蓝型单低和双低油菜为材料，对原生质体培养及植株再生进行了研究。结果表明：低温预处理无菌苗可提高原生质体活力。不同下胚轴部部位对原生质体的得率及分裂频率均有影响。用琼脂糖包理法，在不含ＮＨ４ＮＯ３及ＫＮＯ３，而加有丝氨酸和谷氨酰胺的Ｋｍ８ｐ培养基上培养原生质体获得了高频率再生愈组织。在Ｍ＋ＢＡ１ｍｇ／Ｌ分化培养基上两周后得到芽的分化，转至ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋生根粉０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上     

不结球白菜子叶离培养再生植株

用矮脚黄的子叶建立了不结球白菜高频率再生体系。在ＭＳ＋６－ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上，外植体分化率达７０％，每一外植体可产生９．６个不定芽，研究了各种因素对子叶离体再生植株的影响，发现１１－１５ｄ苗龄的子叶分化效果最佳。ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ对根的诱导最好。     

西瓜组织培养的研究

为建立西瓜顶芽培养与子叶培养的实验流程,以西瓜子叶、顶芽为外植体,进行了不定芽的诱导、芽的伸长,生根以及再生植株的移栽与嫁接试验,结果表明,顶芽诱志不定芽的诱导率高于子叶,苗龄４－５ｄ,刚刚由黄色较浅绿色的子叶诱导不定芽的诱导率最高,苗龄８￣９ｄ的顶芽诱导产生的不定芽最多;用子叶诱慰定芽的适宜培养基为ＭＳ＝１．０ｍｇ／ＬＢＡ,用顶芽诱导不定芽的适宜培养基为ＭＳ＋３．０ｍｇ／ＬＢＡ＋０．２ｍｇ／ＬＩ     

甘蓝子叶作为外植体转Hyg~r－Km~r基因的技术研究

本文报告了以甘蓝（ｂｒｅｓｓｉｃａｏｌｅｒａｃｅａ）子叶为外植体，成功地将抗潮霉素（Ｈｙｇ~ｒ）基因和抗卡那霉素（Ｋｍ~ｒ）基因导入甘蓝品种，培育出转基因植物的技术研究成果．以ＭＳ为基本培养基，添加ＩＡＡ２ｍｇ／１，ＢＡ４ｍｇ／１，蔗糖２０ｍｇ／１和琼脂８．０ｍｇ／１，进行高再生率基因型选择，结果１９个品种的再生芽发生率在０％～９０％之间。对高再生率的品种进一步试验，进行不同激素浓度的适宜培养基的选择。结果表明：以ＩＡＡ３ｍｇ／１和ＢＡ４ｍｇ／１的ＭＳ固体培养基诱导甘蓝子叶，其再生芽发生率高达９５％～１００％；每个外植体平均可诱导出２．４～３．９个再生芽。抗生素耐性试验结果指出，培养基中含有５００ｍｇ／１羧苄青霉素几乎时再生芽的发生率和再生芽个数无影响，只是诱导的再生芽相对发育缓慢，体态弱小。用卡那霉素和潮霉素所进行的致死试验结果是：虽然致死率因基因型不同而有所不同，但培养基中含有Ｋｍ２０ｍｇ／１和Ｈｙｇ２０ｍｇ／１以上基本可以使所有的外植体死亡而无幼芽的再生。选择时期的试验结果显示，在外植体与ＥＨＡ１０１农杆菌共培养３～ｌ０ｄ范围内，共培养６ｄ和７ｄ进行选择分别获得３％～５％的转化率。     

甘蓝型油菜原生质体培养和植株再生

从甘蓝型油菜试管苗下胚轴和幼叶分离的原生质体，在含２．４－Ｄ０．８ｍｇ／１，ＮＡＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．５ｍｇ／１的改良ＢＧ培养基中浅层液体和固体平板培养６天，分裂细胞为８％－２０％，至１５天形成３２细胞的细胞团。愈伤组织在含ＮＡＡ０．２ｍｇ／１，ＩＢＡ０．１ｍｇ／１，６－ＢＡ１．０ｍｇ／１的ＭＳ分化培养基上培养基上培养３－４周，产生不定芽，并在附加ＩＢＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．２ｍ...     

不结球白菜子叶离体培养再生植株

用矮脚黄的子叶建立了不结球白菜高频率再生体系。在ＭＳ＋６－ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上，外植体分化率达７０％，每一外植体可产生９．６个不定芽。研究了各种因素对子时离体再生植株的影响，发现１１～１５ｄ苗龄的子叶分化效果最佳。ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ对根的诱导最好。     

洋桔梗Double Mariachi Rink高效遗传转化体系的建立

以洋桔梗品种Double Mariachi Pink为供试材料,探讨影响根癌农杆菌介导法遗传转化的一些因素,包括Cb(羧苄青霉素)脱菌浓度、Km(卡那霉素)筛选浓度、农杆菌的侵染浓度和预培养时间等.研究结果表明:脱菌培养基中Cb的浓度为200mg/L时,抑制农杆菌生长但不显著影响叶片不定芽分化;不定芽分化阶段和生根阶段的适宜Km筛选浓度分别为30mg/L和15mg/L;外植体预培养3d,在D600nm≈0.5的农杆菌菌液中侵染10 min后,Km筛选得到的抗性植株GUS染色蓝斑率最高,达到86.7%.     

油菜农杆菌介导转化体系的优化

以甘蓝型油菜湘油15号为试验材料,对农杆菌转化体系中外植体预培养时间、培养基中AgNO_3浓度、农杆菌侵染时的菌液浓度、共培养基pH值等进行了优化研究,确立了优化的遗传转化条件。结果表明,外植体在农杆菌侵染和共培养前预培养3 d,可明显提高子叶外植体和下胚轴外植体出愈率和抗性芽苗分化率,有利于获得较高的转化效率;在基因转化中,AgNO_3的最佳使用浓度为30μmol/L,最佳的农杆菌侵染菌液OD_(600)为0.4,共培养基pH值5.4是油菜农杆菌介导转化中优化的转化条件。     

月季的离体快速繁殖技术

以月季良种红衣主教带腋芽茎段为外植体进行离体快速繁殖研究,结果表明：在ＭＳ＋２．００－３．００ｍｇ．Ｌ＾－１６－ＢＡ＋０．１０ｍｇ．Ｌ＾－１ＮＡＡ培养基上进行起始培养,其腋芽分化率达６３％以上,在ＭＳ＋２．００－３．００ｍｇ．Ｌ＾－１６－ＢＡ＋０．１０ｍｇ．Ｌ＾－１ＮＡＡ＋１．００ｍｇ．Ｌ＾－１ＧＡ３培养基上进行继代增殖,４５ｄ其增殖倍数达３．４以上,且长成的芽苗比较粗壮;增殖后的芽苗在１／２ＭＳ     

辣椒叶片离体培养与植株再生

以辣椒无菌苗叶片为外植体，就激素对其不定芽分化及植株再生的影响进行了研究。结果表明，ＢＡ对叶片不定芽的诱导效果最好，ＺＴ次之，ＫＴ不能有效地诱导叶片形成不定芽；ＩＡＡ与ＢＡ相配合使叶片不定芽分化频率明显提高；ＩＢＡ或ＮＡＡ与ＢＡ的激素组合使叶片不定芽分化频率有所不降；２，４－Ｄ对叶片不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加１．０ｍｇ／ＬＧＡ３有利于不定芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的ＭＳ或ＭＳ＋ＭＡ培养基上诱导生根，形成完整植株。