刺树愈伤组织培养时不定芽的分化

以枣树色白,结构紧密的愈伤组织为材料,对其不定芽的分化情况进行了研究。结果表明,用ＭＳ（ＮＯ＾－３／２）作基本培养基,并附加ＫＴ４．０００ｍｇ／Ｌ．ＺＴ１．７５０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．０１５ｍｇ／Ｌ可以获得比较好的不定芽分化效果,鸡收枣和无核小枣不定芽再生频率分别达到３０％,２２％,其它品种再生频率低于１５％,不定芽在ＭＳ（ＮＯ＾－３／２）＋ＮＡＡ０．０１５ｍｇ／Ｌ＋ＺＴＴ１．７５０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ４     

甘蓝型油菜子叶原生质体培养再生植株

从早熟甘蓝型油菜品种６０１的子叶中游离出原生质体，采用液体浅层培养，获得持续分裂的细胞。培养基中的２，４－Ｄ浓度对刺激细胞分裂至关重要。形成的小愈伤组织必须继代培养（ＭＳ培养基补加２，４－Ｄ０．２ｍｇ／Ｌ，ｋｔ２ＭＧ／Ｌ）后，再转至ＭＳ分化培养基（补加ＮＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ，ＫＴ３ｍｇ／Ｌ）上，才能分化出芽。分化的芽在ＭＳ生根培养基（补加ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ）上，可以形成完整植株。     

曼海母宫殿组织培养

曼海母宫殿以当年生枝条上饱满未萌发的侧芽为外植体．进行组织培养、在附加６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上．芽诱导效果最好，在附加６－ＢＡ１．５＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ或ＫＴ１．０＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上．芽的分化效果最好。在附加ＫＴ０．３＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ或６－ＢＡ０．３＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上，壮苗效果最好。在附加ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ或ＩＢＡ０．１＋ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的１／２ＭＳ培养基上生根效果最好。试管苗高２．５～４．０ｃｍ，且具有３～５条短根时，开瓶锻炼３～５ｄ。移栽入土效果好、种植在保温保湿环境中．试管苗成活率高。     

花椰菜高频再生系统的研究

本文研究了ＢＡ、ＮＡＡ、ＡｇＮＯ３、子叶龄、培养密度以及Ｋｍ对花椰菜子叶再生和影响，建立了一个高频再生系统，使再生频率达１００％，其最佳各成分的配比是：ＭＳ＋ＢＡ４．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡｇＮＯ３５．０￣１０．０ｍｇ／Ｌ。     

荔浦芋的离2体培养和快繁技术

选用优良荔浦芋的母芽和子芽的顶芽为外植体。在ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的培养基上可诱导出再生植株,瑞生植株在ＭＳ＋６－ＢＡ２．０～４．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ或ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上继代培养３０－４０天可获得２－３倍丛生芽,以６－ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基对丛生芽的诱导效果较好,把丛生芽切割在ＭＳ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ或ＭＳ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的培养基上培     

佛手瓜下胚轴离体培养及再生植株

对佛手瓜下胚轴再生植株、试管苗移栽及大田定植进行了试验，结果表明：在ＭＳ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ培养基上容易形成下胚轴愈伤组织；愈伤组织分化芽的培养基为ＭＳ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，诱导分化率可达５７５％；顶芽和带腋芽茎段生根的培养基分别为ＭＳ＋ＩＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ和１／２ＭＳ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ，生根率分别为８１．８％和８３．３％；移栽培     

合欢组织培养和快速繁殖研究

将合欢成熟胚的胚芽接种于含２，４—Ｄ２ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，再转入合ＢＡ３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ分化培养基上，２周后分化出芽，利用这些芽进行切段扩繁。将苗转入含ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ生根培养基上生根，移栽成活率达９０％以上。所诱导的愈伤组织经过一年的继代培养，其分化能力仍很强。培养中发现高温能增加玻璃苗的发生频率。     

佛手瓜下胚轴离体培养及再生植株

对佛手瓜下胚轴再生植株、试管苗移栽及大田定植进行了试验，结果表明：在ＭＳ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ培养基上容易形成下胚轴愈伤组织；愈伤组织分化芽的培养基为ＭＳ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，诱导分化率可达５７５％；顶芽和带腋芽茎段生根的培养基分别为ＭＳ＋ＩＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ和１２ＭＳ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ，生根率分别为８１．８％和８３．３％；移栽培养土用土砂粪＝３２１的灭菌土，幼苗成活率达７５％；大田定值，平均单株结果８８．４３个，平均单果重２４０．２３ｇ．     

芦荟茎段的组织培养

采用芦荟茎段培养,经实验得出最佳培养基配方。诱导分化培养基：Ｍｓ＋６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ;增殖培养基：Ｍｓ＋６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ;生根培养基：Ｍｓ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ。     

大白菜外植体分化诱导及村植株再生的研究

利用大白菜的下胚轴、子叶切块和带柄子叶等外植体诱导分化和植株再生。结果表明：在ＭＳ＋１￣２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基上获得的无菌苗质量最好，分化能力最强；在ＭＳ＋５．０／ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ分化培养基上，直插的带柄子叶分化频率最高，接种后４０天达４１．２％，并能形成大量不定芽（多者一个外植体可达２０多外不定芽）；幼苗在ＭＳ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基上能正     

平菇原生质体制备及再生培养研究

平菇菌丝原生质体的释放以菌龄４～６ｄ的幼嫩菌丝,用２％Ｌｙｗａｌｚｙｍｅ采用０．６ＭＫＣｌ为渗稳剂在ｐＨ值为５．５、温度为３５℃、酶解２～２．５ｈ生长较好,可达１０７个／ｍＬ,孢子释放原生质体在１．５％溶壁酶和１．５％纤维素酶混合作用,同样外界条件下原生质体转化率可达１００％。原生质体再生以２号培养基在０．６Ｍ甘露醇的作用下,用载片悬浮滴式再生法,再生率可达１２．３％。     

红酵母原生质体制备和再生条件研究

［目的］初步探讨红酵母原生质体制备和再生的条件。［方法］以红酵母为试材,研究渗透压稳定剂pH值、酶浓度、酶解时间、预处理时间4个因素对红酵母原生质体制备率和再生率的影响。［结果］pH值在6.5～7.0,原生质体的制备率和再生率随着渗透压稳定剂pH值的升高而上升。当酶浓度从0.2%上升到1.0%时,原生质体制备率上升较快,而原生质体再生率下降较慢。随着酶解时间的增加,原生质体的制备率逐渐增加,而原生质体的再生率逐渐下降。在5～15 min,原生质体制备率和再生率均随着预处理的时间的增加而降低。［结论］当渗透压稳定剂pH值为7.0,蜗牛酶酶浓度为1.0%,酶解时间为60 min,预处理时间为5 min时,原生质体的制备率和再生率能分别达到较高的值。     

原生质体技术在园艺植物育种中的应用

原生质体技术包括原生质体植株再生、原生质体融合技术等,在园艺植物育种应用工作中取得了一定的成果,原生质体再生植株的变异为园艺植物育种工作提供了大量材料;原生质体融合技术则是育种工作的新途径。二者都对育种工作的发展起到了非常重要的作用。     

原生质体技术与观赏植物育种

原生质体培养和植株再生技术在观赏植物育种中起重要作用。原生质体的来源、原生质体的分离、培养基的成分、培养方法等,都对原生质体的培养有重要影响。近年来,观赏植物原生质体在细胞融合、遗传转化上有了一定发展,为创造观赏植物新种质提供了新途径和方法。     

原生质体培养及其在蔬菜育种上的应用

综述了近年来原生质体技术的研究进展及其在蔬菜育种上取得的成果,并讨论了原生质体技术存在的不足及应用前景。     

原生质体培养及其在果树育种上的应用

综述了近年来原生质体技术的研究进展及其在果树育种上的应用,并讨论了原生质体技术存在的问题及应用前景。     

层出镰孢菌原生质体制备条件的研究

[目的]研究层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)原生质体的最佳条件,建立高效制备层出镰孢菌原生质体制备的方法.[方法]通过对菌丝体菌龄、酶解液组合、酶解反应温度及酶解时间等影响因素进行优化,对层出镰孢菌原生质体的制备条件进行研究.[结果]菌块在CMC液体培养基中25℃培养分生孢子3 d后,过滤离心后转移至YEPD液体培养基中培养12 h,该菌丝最适于层出镰孢菌原生质体的制备;用1.2 mol/L KCl溶液配制含有5 mg/m L裂解酶、25 mg/m L崩溃酶、0.05 mg/m L溶壁酶的酶解液在30℃下对菌丝酶解1.5 h,此时原生质体的数量最大,为2.47×10~9个/m L.原生质体再生培养时,使用40%PTC溶液恢复细胞壁,在TB3液体培养基中30℃过夜培养,离心后与TB3固体培养基混合后倒入平板培养,原生质体再生率可达39.75%.[结论]通过对菌丝体菌龄、酶解液浓度、温度、酶解时间等条件的优化,可提高层出镰孢菌原生质体的产量及再生率,为进一步研究层出镰孢菌致病分子机制提供理论依据.     

植物原生质体在遗传操作中的应用

本文简述了植物原生质体在遗传转化,体细胞杂交和突变体筛选等方面的研究进展,指出了原生质体用以遗传操作的优点以及在实际应用中存在的一些问题     

烟草普通花叶病毒在烟草胞质体中的增殖

 本试验证明了TMV-RNA在有细胞核的烟草原生质体中能大量增殖,但在无核的胞质体中却难以增殖。     

玉米和拟南芥的原生质体制备及瞬时表达体系的研究

[目的]优化玉米和拟南芥原生质体的制备条件及瞬时表达体系.[方法]以不同时期玉米叶片和拟南芥为材料分离原生质体,通过对不同酶浓度,解离时间和渗透压的研究,优化最佳分离原生质体体系;原生质体再经PEG介导的转化,通过GFP基因表达百分比鉴定原生质体活性和转化效率.[结果]玉米和拟南芥原生质分离的最佳条件为：纤维素酶1.5％,离析酶0.5％;拟南芥酶解4h,甘露醇浓度0.4 mol/L;玉米酶解6h,甘露醇浓度0.45 ～0.50 mol/L.最佳生长时期为：拟南芥6～8片叶;玉米二片叶.用去内毒素质粒经PEG（玉米30％ PEG,拟南芥40％ PEG）诱导转化置于黑暗下培养,原生质体活性和转化效率较高,原生质体中可以观察到明显的GFP荧光.[结论]玉米和拟南芥原生质体的制备受酶浓度,解离时间和渗透压的影响,在原生质体转化过程中,质粒DNA纯度,PEG浓度等是影响转化效率的关键因素,与拟南芥原生质体相比玉米原生质体要稳定性差一些.