佛手瓜下胚轴离体培养及再生植株

对佛手瓜下胚轴再生植株、试管苗移栽及大田定植进行了试验，结果表明：在ＭＳ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ培养基上容易形成下胚轴愈伤组织；愈伤组织分化芽的培养基为ＭＳ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，诱导分化率可达５７５％；顶芽和带腋芽茎段生根的培养基分别为ＭＳ＋ＩＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ和１／２ＭＳ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ，生根率分别为８１．８％和８３．３％；移栽培     

当归愈伤组织的再分化及植株再生

ＭＳ＋ＩＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．５ｍｇ／Ｌ有利于诱导愈伤组织的再分化，１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ和ＭＳ＋ＩＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ２ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ２ｍｇ／Ｌ有利于诱导生根；愈伤组织的再分化能力与其形态有关；诱导形成的完整植株基部可以再次形成次生愈伤组织。     

澳洲坚果的组织培养研究

将澳洲坚果的优良品种ＨＡＥＳ８００的茎段于培养基（ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＣＤ１００ｍＬ／Ｌ）中培养,产生了白色愈伤组织和畸胚,将这些愈伤组织和畸胚接种到培养基（ＭＳ＋ＢＳ１～７ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１～０．５ｍｇ／ＬＡＣ０．２％）上,愈伤组织分化出畸胚,畸胚也以出芽方式增殖,并分化出丛芽。将切下,于培养基（１／２ＭＳ＋ＩＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ０．２％＋Ｓｕｃｒｏｓｅ２％）中诱根６     

澳洲坚果组织培养研究

澳洲坚果优良品种ＨＡＥＳ８００的茎顶,于培养基ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＣＭ１００ｍｌ／Ｌ＋Ｓｕｃｒｏｓｅ３％＋ａｇａｒ０．５％中培养至２５天时,于第二轮叶的叶尖产生白色愈伤组织和畸胚。将它们接种到培养基ＭＳ＋ＢＡ１－７ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１－７ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１－０．５ｍｇ／Ｌ＋Ａ．Ｃ．０．２％＋Ｓｕｃｒｏｓｅ３％＋ａｇａｒ０．５％上,愈伤组织能不断增殖并分化出畸胚;畸胚自身也以出芽方式增殖,且由白逐渐转绿,并分化出丛芽。将单芽切下,于培养基１／２ＭＳ＋ＩＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋Ａ．Ｃ．０．２％＋Ｓｕｃｒｏｓｅ２％＋ａｇａｒ０．５％中诱根６０天后,将无根苗放在沙床上炼苗６０天,可以获得生根良好的种苗。     

合欢组织培养和快速繁殖研究

将合欢成熟胚的胚芽接种于含２，４—Ｄ２ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，再转入合ＢＡ３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ分化培养基上，２周后分化出芽，利用这些芽进行切段扩繁。将苗转入含ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ生根培养基上生根，移栽成活率达９０％以上。所诱导的愈伤组织经过一年的继代培养，其分化能力仍很强。培养中发现高温能增加玻璃苗的发生频率。     

黄瓜子叶组织培养再生植株

将６个黄瓜品种的子叶和下胚轴培养于添加ＢＡ１．０～２．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ（或ＮＡＡ）０．０１～０．０２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中，子叶能够直接分化出芽，出芽率随品种的不同而有差异，下胚轴只长愈伤组织，没有见到芽的分化。将子叶分化的芽切割下来，转入含ＩＢＡ０．１或０．２ｍｇ／Ｌ的１／２ＭＳ培养基中，可长出良好的根系，经移栽，即可成活。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的研究

以小麦成熟胚为外植体，在ＭＳ＋２．４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ培养基上，愈伤组织诱导率为８３．１％；不同品种间诱导率有较大的差异，但愈伤组织的质量与诱导率的高低无关，在ＭＳ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ培养基上，分化率可达４４．４％。     

TDZ对枣子离体培养繁殖的影响

厍有ＴＤＺ０．０１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ＋６ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基中，对离体芽的繁殖系数、高于对照高于ＭＳ＋６ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ）．２ｍｇ／Ｌ的培养基２倍和３倍，枯梢率下降至零，在生根培养基１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ上，生根可达８０％以上。     

外源激素对鸢尾组织培养的影响

鸢尾为早春花卉，繁殖率较低。应用ＭＳ＋６－ＢＡ１～２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．５～１ｍｇ／Ｌ＋３％蔗糖适于茑尾花茎进行组织培养快速繁殖。但鸢尾品种间内源激素水平不一致，而影响分化的时间，德国茑尾从接种—分化需２０天，法国鸢尾需２５天，意大利茑尾和燕子花则需３０天以上。应用１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５～１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５～１ｍｇ／Ｌ＋１．５％蔗糖＋０．３％活性炭适于诱导生根，每株可诱导生根５～６根。采用蛭石后转入腐叶土：砂质土１∶１混合土移栽７５％～１００％成活。     

甜叶菊“中山一号”快速繁殖的研究

用甜叶菊“中山一号”嫩茎叶叶柄为外植体,ＭＳ为基本培养基,在附加ＢＡ（０．５ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（０．２ｍｇ／Ｌ）的分化培养基上,分化率为８５％;继代增殖在附加ＺＴ（１．５ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（０．１ｍｇ／Ｌ）的培养基上,每３～４周可增殖５～６倍;在附加ＢＡ（０．１ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（０．５ｍｇ／Ｌ）＋ＩＢＡ（０．５ｍｇ／Ｌ）的生根培养基上,生根效果最好,出瓶前须炼苗２～３ｄ,生根苗移栽成活率在９０％     

瓜实蝇生物学特性研究

通过对瓜实蝇B actrocera(Z eug od acus)cucurbitae在10、14、18、22、26、30、34和38℃下卵、幼虫和蛹的发育历期及成虫羽化、取食、交尾和产卵等生物学特性的研究表明,瓜实蝇的卵、幼虫和蛹的发育历期随温度的升高而缩短,其最适发育温度在26~30℃范围内。14℃下卵期3.5~4.0 d,平均(3.68±0.14)d,30℃下仅需1 d;幼虫于14℃下历期最长为(9.0~16.0)d,平均(11.73±1.21)d,30℃下最短为4.0~6.0 d,平均(4.83±0.24)d;蛹14℃下最长为24.0~33.0 d,平均(26.95±0.41)d,最短30℃下为6.0~7.0 d,平均(6.39±0.02)d。成虫白天活动,黄昏时交尾,羽化多集中于凌晨。卵产于瓜皮内,以幼虫蛀食瓜肉为害,老熟幼虫脱离瓜果进入土中化蛹。     

二色胡枝子黄酮体外抗氧化活性

通过二色胡枝子黄酮(Lespedeza bicolor flavonoids ,LBF)清除羟自由基、超氧阴离子的效果及抑制猪油、菜油和亚油酸的自氧化来研究其体外抗氧化作用.结果表明:二色胡枝子黄酮对清除自由基有显著作用,且清除率随黄酮浓度的增加而增大;能够明显地抑制猪油、菜油、亚油酸的自氧化,抑制作用随浓度的增大而增强.作为天然的抗氧化剂,二色胡枝子黄酮具有一定开发利用价值.     

锈色粒肩天牛幼虫的COⅠ、COⅡ、Cytb和28S基因片段序列分析

  目的  基于分子生物学手段，探讨可快速准确鉴别锈色粒肩天牛Apriona swainsoni幼虫与其他天牛幼虫的目标基因，为该保健昆虫的食药用安全提供保障。  方法  利用线粒体COⅠ、COⅡ、Cytb基因和28S细胞核基因的通用引物分别克隆获得4种基因片段，并进行同源序列检索、多重比对、序列信息分析及进化树构建。  结果  基因克隆最终获得锈色粒肩天牛4种基因序列的片段大小分别为817、545、434和1 088 bp。特殊位点分布结果显示:28S的保守位点占比最高，其后依次为Cytb、COⅠ和COⅡ，变异率则正好相反。COⅠ、COⅡ和Cytb基因片段的碱基组成和替换信息特点均表现为A+T含量>G+C含量，颠换高于转换，28S基因片段则表现为A+T含量  结论  COⅠ、COⅡ、Cytb和28S基因均可作为鉴定该虫的分子生物学参考依据。     

关于不定方程5x(x+1)(x+2)(x+3)=18y(y+1)(y+2)(y+3)

运用Pell方程、递推序列、同余式及平方剩余等初等数论知识,证明了不定方程5x(x+1)(x+2)(x+3)=18y(y+1)(y+2)(y+3)仅有4组非平凡整数解(x,y)=(6, 4),(-9, 4),(6,-7),(-9,-7),同时给出该不定方程的全部整数解,分别为(x,y)=(0, 0),(0,-1),(0,-2),(0,-3),(-1, 0),(-1,-1),(-1,-2),(-1,-3),(-2, 0),(-2,-1),(-2,-2),(-2,-3),(-3, 0),(-3,-1),(-3,-2),(-3,-3),(6, 4),(-9, 4),(6,-7),(-9,-7).     

桂花OfPSY、OfPDS和OfHYB基因启动子克隆及表达特性分析

  目的  探究高温和外源脱落酸对桂花Osmanthus fragrans类胡萝卜素生物合成的3个相关基因,包括八氢番茄红素合成酶基因(PSY)、八氢番茄红素脱氢酶基因(PDS)、β-胡萝卜素羟化酶基因(HYB)的调控作用,为阐释桂花类胡萝卜素代谢调控的机制提供研究基础。  方法  根据桂花基因组数据库的序列,从桂花品种‘堰虹桂’‘Yanhong Gui’中克隆OfPSY、OfPDS、OfHYB基因的启动子序列,并进行生物信息学分析,再构建PCAMBIA3301-LUC载体在烟草Nicotiana benthamiana中瞬时表达,结合高温(37 ℃)和200 mg·L?1脱落酸处理,分析启动子活性。  结果  获得OfPSY、OfPDS、OfHYB基因的部分启动子,其长度分别为1 908、1 521及1 830 bp。作用元件分析表明:3个启动子中均存在TATA-box和CAAT-box等启动子基本元件、光响应元件、脱落酸响应元件以及MYB和MYC结合位点。此外,在OfPSY启动子中,存在赤霉素响应元件;在OfPDS启动子中,存在茉莉酸甲酯响应元件、赤霉素响应元件、厌氧诱导型元件参与防御和胁迫的元件;在OfHYB启动子中,存在生长素、乙烯、茉莉酸甲酯等激素响应元件、低温响应元件和厌氧诱导型元件。烟草瞬时转化试验表明:相对高温能激活OfPSY、OfPDS和OfHYB的启动子活性,脱落酸能激活OfPDS和OfHYB的启动子活性。  结论  高温和脱落酸可能通过调控桂花类胡萝卜素合成基因启动子活性,影响桂花类胡萝卜素的积累。图4表5参28     

欧洲千里光CYCLOIDEA(CYC)类SvRAY1基因的克隆及功能分析

  目的  揭示菊科Asteraceae欧洲千里光Senecio vulgaris CYC2类RAY1基因过表达使舌状花发生不同程度变宽现象的机制,进一步探究其产生原因。  方法  克隆欧洲千里光SvRAY1基因,利用生物信息学、实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)、超表达载体构建、扫描电镜观察、转基因植株形态学观察与统计等方法与技术,进一步进行SvRAY1基因功能分析。  结果  qRT-PCR反应显示:SvRAY1基因主要在欧洲千里光舌状花及筒状花中表达,且生殖发育第S3和S4阶段舌状花中表达量最高;形态学观察表明转基因欧洲千里光SvRAY1超表达植株的舌状花比野生型长度较短、显著变宽。扫描电镜观察舌状花腹侧表皮细胞大小与形状,宽度显著变宽的株系中显示远轴端细胞排列紧密且细胞分裂旺盛,中轴端细胞形状由边缘弯曲变为平滑,细胞长度变短且分裂旺盛。  结论  欧洲千里光舌状花发育过程中,SvRAY1基因可能促进细胞横向分裂,进而舌状花细胞形态和排列发生不同程度的变化引起舌状花变宽。图6表2参28     

MutL调控水稻黄单胞菌的致病力

为了了解水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)中 的MutL/MutS系统是否参与DNA修复以及是否调控病原菌的致病力,构建了mutL突变体,比较了野生型与mutL突变体的突变率差异,野生型、mutL突变体及其互补菌株侵染水稻的能力。结果显示,mutL突变导致Xoo在H₂O₂胁迫下的突变率显著升高,mutL突变导致Xoo致病力下降,表明DNA错配修复蛋白MutL参与Xoo的DNA修复并正调控Xoo致病力。     

花生油酸脱氢酶基因AhFAD2A和AhFAD2B的时空表达特征

花生Arachis hypogaea油酸脱氢酶AhFAD2是调控花生种子中油酸与亚油酸比值（oleic acid/linoleic acid,O/L）的关键酶,已确定存在2个编码AhFAD2的基因:AhFAD2A和AhFAD2B,但两者在花生中的时空表达特征尚不清楚。选取2个有代表性O/L的花生品种‘山花15’‘Shanhua 15’（O/L为1）和高油酸花生突变体（O/L大于20）为材料,根据AhFAD2A和AhFAD2B基因3'-UTR核苷酸序列的差异,设计了新型、简便的区分两者的特异性引物,并利用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术,对2个花生品种的7个不同组织（根,茎,叶,花,开花后20,40,60 d种子）中AhFAD2A和AhFAD2B的表达特征进行了分析。结果表明:AhFAD2A和AhFAD2B在‘山花15’和高油酸花生突变体7个组织中都有表达;其中,在2个花生品种3个不同发育时期的种子中,AhFAD2A和AhFAD2B在开花后40 d的种子中表达量最高,推测在开花至花后40 d这一阶段种子中FAD2的表达量可能对花生最终O/L起主要的调控作用。另外,‘山花15’种子中AhFAD2B的表达量显著高于AhFAD2A,而在高油酸花生突变体种子中则相反,推测花生中AhFAD2B在催化油酸去饱和生成亚油酸的过程中比AhFAD2A可能起更重要的调控作用。     

草酸青霉和棘孢木霉对青枯劳尔氏菌的生防效果

  目的  探究自主筛选获得的2株生防菌棘孢木霉Trichoderma asperellum QZ2与草酸青霉Penicillium oxalicum QZ8对青枯劳尔氏菌Ralstonia solanacearum(简称青枯菌)的生防效果。  方法  以青枯菌作为靶标菌,通过平板培养法、生长曲线法测定2株生防菌及其发酵液对青枯菌生长的抑制作用;通过土培试验、基于稀释涂布法测定生防菌在土壤中对青枯菌的抑制效果。  结果  平板对峙培养试验发现:棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌有显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达80.9%和45.9%;棘孢木霉QZ2与草酸青霉QZ8生防菌高温灭菌发酵液对平板培养青枯菌,同样呈显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达33.3%和34.8%。无菌滤膜处理的未高温灭菌2株生防菌发酵液的青枯菌液培养结果表明:其D(600)显著小于未添加生防菌发酵液的对照D(600)(P＜0.05),且棘孢青霉QZ8抑制效果好于草酸木霉QZ2。土壤培养结果显示:2株生防菌处理的土壤中青枯菌的活菌数量显著低于未添加生防菌的对照(P＜0.05)。  结论  棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌均有显著的抑制效果,可作为番茄Lycopersicon esculentum青枯病的潜在生防菌。图5表2参32     

转酿酒酵母HOG1基因拟南芥植株的获得与检测

HOG1(high osmolarity glycerol,HOG1)是酵母中参与耐高渗透压调控的重要基因。根据已发表的酿酒酵母序列,设计特异引物,扩增到完整的HOG1基因;构建植物表达载体pBI121-HOG1,通过农杆菌介导转化拟南芥,获得转化植株种子。对收获的T0代种子进行卡那霉素抗性筛选,并通过PCR和RT-PCR对抗性苗进行检测。结果表明,构建的载体成功转化拟南芥,并获得了13份转HOG1基因苗。