百合单萜类物质释放与LhTPS表达关联性研究

为研究百合单萜类物质释放与单萜合酶基因表达的关联性,采用顶空固相微萃取(HSSPME)收集了13种不同香型百合4个发育时期的香气;应用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术测定了单萜类挥发物的成分和含量;通过实时荧光定量PCR研究6个百合品种4个发育时期单萜合酶基因LhTPS的表达规律。结果表明:随着百合花朵的开放,其香气成分中的单萜类物质含量表现出先增加后减少的趋势,有香百合的主要单萜类成分为罗勒烯和芳樟醇,但喇叭百合和东喇百合中的单萜类成分主要是1,8-桉叶素和罗勒烯;整体上喇叭百合、东喇百合和东方百合的LhTPS基因表达水平高于麝香百合和亚洲百合;在盛开期时,LhTPS基因的表达水平与罗勒烯和芳樟醇2种化合物的合成具有显著关联性,说明LhTPS基因对罗勒烯和芳樟醇的合成具有重要的作用,是百合花香合成的关键基因之一。     

两个金鱼草品种香气成分分析

为了比较金鱼草不同品种间香气成分及释放量的差异,采用动态顶空套袋采集法并结合自动热脱附-气质联用技术对‘编钟’和‘马里兰’两个金鱼草品种的花香成分进行了分析,鉴定‘编钟’香气成分27种,‘马里兰’香气成分31种,主要包括醛、酯、苯型烃及其衍生物、萜类、烷烃、醇及其他类(含氮、硫及多环化合物)物质。‘编钟’花香的释放总量是‘马里兰’花香释放量的4倍多。其中,萜类物质释放量最大,在两个品种中的相对含量均超过60%。‘编钟’花香的特征成分是(z)-β-罗勒烯,苯乙酮和β-月桂烯,‘马里兰’花香的特征成分是(z)-β-罗勒烯,β-月桂烯和2-乙基-1-己醇。     

两个金鱼草品种香气成分分析

为了比较金鱼草不同品种间香气成分及释放量的差异,采用动态顶空套袋采集法并结合自动热脱附-气质联用技术对‘编钟’和‘马里兰’两个金鱼草品种的花香成分进行了分析,鉴定‘编钟’香气成分27种,‘马里兰’香气成分31种,主要包括醛、酯、苯型烃及其衍生物、萜类、烷烃、醇及其他类(含氮、硫及多环化合物)物质。‘编钟’花香的释放总量是‘马里兰’花香释放量的4倍多。其中,萜类物质释放量最大,在两个品种中的相对含量均超过60%。‘编钟’花香的特征成分是(z)-β-罗勒烯,苯乙酮和β-月桂烯,‘马里兰’花香的特征成分是(z)-β-罗勒烯,β-月桂烯和2-乙基-1-己醇。     

浓香型和淡香型百合单萜合酶基因差异表达

[目的]东方百合香味浓,亚洲百合香味淡,花香差异明显.选取白色的东方百合‘西伯利亚’(Lilium ‘Siberia’)和亚洲百合‘罗马广场’(Lilium‘ NOVANO’)为材料,拟通过分析单萜合成酶基因差异表达,揭示花香差异原因.[方法]采用RT-PCR方法克隆百合单萜合酶基因,并通过Realtime-PCR分析两种百合不同花期的单萜合酶基因表达.[结果]从Lilium ‘Siberia’和Lilium‘ NOVANO’花瓣中克隆得到芳樟醇合酶基因Li-LiS和月桂烯合酶基因Li-MyS.Li-LiS的核苷酸序列与油棕的序列与油棕、海枣相似度分别达到66％、67％,蛋白的氨基酸序列与油棕、可可相似度分别为48％、44％.Li-MyS的核苷酸序列与六出花、烟草相似度分别达到为69％、42％,蛋白的氨基酸序列与六出花、葡萄同源性分别为51％、49％.在花蕾、半开、盛开、衰败四个花期中,Lilium‘ Siberia’花瓣两个单萜合成酶基因表达水平均高于Lilium‘ NOVANO’,并且除了Li-MyS在盛开期和衰败期外,均表现出显著差异.[结论]单萜合成酶基因的差异表达是导致东方百合和亚洲百合香味差异的一个重要原因.     

风信子与欧洲水仙香气差别的GC-MS初探

采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对风信子和欧洲水仙的两个品种分别进行挥发性气体成分种类和含量的测定。从风信子两个品种中均检测出51种香气成分,同时它们的主要成分按相对含量大小都依次为萜烯类、酯类和醇类,从欧洲水仙两个品种中各检测出40和54种香气成分,它们的主要成分依次是萜烯类和醚类。其中‘粉珍珠’和‘蓝衣’特征香气相同,为:乙酸苄酯、β-罗勒烯、β-月桂烯、β-苯乙醇;‘伊莎’和‘阿克罗波利斯’有相同的特征香气:β-罗勒烯、β-月桂烯,此外‘伊莎’还有特征香气顺式-β-罗勒烯、P-二甲醚,‘阿克罗波利斯’有异松油烯。两个种类间主要特征香气的不同造成了两者香味的不同。     

‘西伯利亚’百合单萜释放与Li-mTPS表达日变化动态分析（英文）

使用动态顶空法采集‘西伯利亚’百合不同时间点(7:30、9:30、11:30、13:30、15:30、17:30、19:30)释放的香气,采用自动热脱附-气相色谱/质谱联用(ATD-GC/MS)技术分析鉴定花香成分及释放量。结果表明:单萜释放量呈现先增后减的规律,11:30、13:30、15:30时的释放量较高。在所有的花香成分中,罗勒烯、芳樟醇和β-月桂烯的释放量最高,它们是‘西伯利亚’百合主要的单萜花香化合物。进一步研究发现,‘西伯利亚’百合花瓣中的Li-mTPS(一种百合单萜合成酶基因)的表达与单萜释放表现相似的规律。可见,Li-mTPS的表达在‘西伯利亚’百合主要的单萜释放中起着关键作用,而调控机制有待于进一步研究。     

不同矮牵牛品种花香成分差异分析研究

[目的]矮牵牛花色丰富、花香芬芳,是重要的园林花卉种类,深入阐明不同品种矮牵牛花香特征的差异可进一步明确矮牵牛花香特征多样性的原因,为矮牵牛香花育种提供明确的思路。[方法]本研究以8个系列12个矮牵牛品种为材料,利用嗅觉对其香味浓淡程度进行分类,同时采用顶空-固相微萃取(HS-SPME)与气相色谱-质谱联用(GCMS)技术,鉴定并定量分析不同品种的挥发成分,并进行主成分分析和聚类分析。[结果]12个品种矮牵牛中共检测出66种挥发物,依据花香浓淡程度分为芳香型、清香型、淡香型3类。‘地毯’系列关键挥发物为酯类(苯甲酸甲酯);‘海市蜃楼’系列关键挥发物为烯类((S)-(-)-柠檬烯);‘轻浪’系列关键挥发物为烯萜类(三环萜、β-蒎烯)和酯类(2-甲基丁酸甲酯、苯甲酸甲酯);其余4个系列关键挥发成分分别为三环萜、β-蒎烯、2-甲基丁酸甲酯、苯甲酸甲酯等,聚类分析表明挥发成分相近的品种其遗传关系较为接近。[结论]不同品种矮牵牛挥发成分间存在显著差异,矮牵牛花挥发物主要种类为酯类、萜烯类,关键挥发物主要有(S)-(-)-柠檬烯、三环萜、β-蒎烯、2-甲基丁酸甲酯、苯甲酸甲酯等。苯甲酸苯甲酯是本研究芳香型矮牵牛品种的特征芳香成分。     

12种百合杂交类型香气成分比较

为研究不同杂交类型百合香气成分的特征,采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,对12个杂交类型41个品种百合花被片的挥发性成分进行定性与定量分析。结果表明:百合的主要挥发性成分为桉树脑、(E)-β-罗勒烯、芳樟醇和苯甲酸甲酯,无香的亚洲百合和亚喇百合挥发性成分的数量和含量显著低于其他类型百合。同种杂交类型下的百合在非度量多维尺度图中往往距离较近,由杂交种再次相互杂交得到的混杂交类型结合了亲本的香气性状。     

‘西伯利亚’百合单萜释放与Li-mTPS表达日变化动态分析

使用动态顶空法采集‘西伯利亚’百合不同时间点（7:30、9:30、11:30、13:30、15:30、17:30、 19:30 ）释放的香气，采用自动热脱附-气相色谱/质谱联用（ATD-GC/MS）技术分析鉴定花香成分及释放量。结果表明:单萜释放量呈现先增后减的规律，11:30、13:30、15:30时的释放量较高。在所有的花香成分中，罗勒烯、芳樟醇和β-月桂烯的释放量最高，它们是‘西伯利亚’百合主要的单萜花香化合物。进一步研究发现，‘西伯利亚’百合花瓣中的Li-mTPS（一种百合单萜合成酶基因）的表达与单萜释放表现相似的规律。可见，Li-mTPS的表达在‘西伯利亚’百合主要的单萜释放中起着关键作用，而调控机制有待于进一步研究。     

欧洲水仙4个花期香气成分的GC-MS分析

为了研究欧洲水仙花发育过程中香气成分的动态变化,以欧洲水仙‘荷兰船长’为材料,采用顶空—固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱—质谱(GC-MS)联用技术分析其4个花期的香气成分及其含量的变化。结果表明:欧洲水仙花发育的不同时期,香气成分及含量差异明显。4个花期共鉴定出26种香气化合物,萜烯类化合物是其主要香气成分,其次是醇类化合物,主要的香气成分有(Z)-β-罗勒烯、别罗勒烯、β-月桂烯、对苯二甲醚、(E)-β-罗勒烯、桉叶油醇、萜品油烯、3-蒈烯、芳樟醇。欧洲水仙‘荷兰船长’主要的特征香气成分是(Z)-β-罗勒烯、β-月桂烯和别罗勒烯。主要香气成分的释放在整个开花期间呈现先升后降的趋势,种类数量和含量均在盛花期达到最高。     

不同品种百合花挥发性成分定性与定量分析

【目的】研究不同品种百合（Lilium spp.）花挥发物的组成成分与释放量,寻找百合关键致香成分。【方法】采用活体植株动态顶空套袋-吸附采集法与ATD-GC/MS（自动热脱附-气质联用）分析技术,对4个杂种系7个品种百合花的挥发性成分进行定性与定量分析。【结果】试验共检测出64种化合物,属淡香型的亚洲百合和LA百合杂种系的3个品种含有39种,属浓香型的东方百合和麝香百合杂种系的4个品种含有54种。不同香型百合花的挥发性成分存在显著差异,亚洲百合和LA百合杂种系烷烃类化合物释放量较高,主要成分为2-乙基-1-己醇、乙苯、邻二甲苯、2,2,4,6,6-五甲基庚烷、5-乙基-2,2,3-三甲基庚烷、3-甲基十一烷和2,2,6-三甲基癸烷。东方百合和麝香百合杂种系萜烯类释放量最高,β-月桂烯、罗勒烯、芳樟醇、2-乙基-1-己醇为其主要成分。【结论】3个淡香型百合品种中没有检测到萜烯类化合物和苯甲酸甲酯,而4个浓香型百合品种中萜烯类释放量最高,主要为β-罗勒烯和芳樟醇,可初步确定这两种化合物为百合花致香的关键成分。     

‘云香’水仙花香成分分析

‘云香’水仙是福建农林大学园艺遗传育种研究所选育的多花水仙新品种,2012年4月1日通过福建省农作物品种审定委员会认定。‘云香’水仙花朵大、花朵数量多、花期长、香气浓,不仅具有优良的观赏性状,而且可作为提取香料的原料。本试验利用气相色谱质谱联用仪(GC-MS)分别对‘云香’水仙花蕾期、初花期、盛花期、衰败期的花朵样品进行了花香成分分析。以期为进一步研究花香成分的生物合成途径,指导花香育种奠定基础。试验采用Tenax管吸附剂吸附法采集‘云香’水仙花香成分。将采样瓶、活化后的Tenax吸附管、大气采样仪,相互之间用硅胶管连接。然后在采样瓶中装入水仙花样品用橡胶塞密封好,打开大气采样仪进行采样。采样完成后取下Tenax管,用1m L的色谱纯正己烷洗脱。取1μL洗脱的样品,用美国Varian Saturn3900/2100T气相色谱质谱联用仪进行分析。色谱条件:色谱柱为DB-5MS(内径0.25mm,柱长30m,液膜0.25μm);载气为氦气(纯度99.999%);流速1m L·min-1;进样口温度250℃;分流比1/2;起始70℃,保留3min;以10℃/min升到90℃保留2min;以5℃/min升到180℃保留1min;以8℃/min升到190℃保留2min。质谱条件:电离方式EI;电子能量70Ev;阱温220℃;传输线温度280℃;采集方式为全扫描;质量扫描范围为40~650amu。通过自带的软件Saturn GC/MS Workstation Version 5.52和谱库wiley7、nist98m、nist05m数据库进行图谱分析,得出可能的成分鉴定结果。以面积归一化法根据各组分的峰面积值换算样品中不同物质的相对含量。分析结果表明:‘云香’水仙花蕾期和初花期分别检测出25种成分,其中含量最高的5种是反式罗勒烯、乙酸苄酯、苯甲酸、3,4-二羟基苯乙二醇和茴香醚。盛花期检测出的成分上升至29种,其中含量最高的5种成分略有差别,分别是反式罗勒烯,其次是乙酸苄酯、茴香醚、顺式罗勒烯、苯甲酸等。衰败期共检测出28种成分,其中含量最高的5种成分与花蕾期和初花期相同。顺式罗勒烯、α-萜品烯、樟脑、癸醛等具有香味的赋香成分都只在盛花期检测到,枯烯、辛醛、右旋柠檬烯、芳樟醇、壬醛等具有香味的赋香成分都只有在衰败期检测到。说明随着花的开放花香成分的种类增加,具有香气的赋香成分也在增加,这与人们的嗅觉感官结果一致。‘云香’水仙的香气成分主要为萜烯类化合物和苯丙酸类化合物,它们的合成取决于异戊二烯和苯丙氨酸代谢途径,因此探索其代谢途径的关键酶基因的作用与调控机理对指导花香育种具有重要意义。     

SPME/GC-MS法分析不同龙眼品种果实中的香气成分

采用SPME/GC-MS法对4个龙眼品种果实香气成分进行了分析鉴定。结果表明,4个龙眼品种共检测出44种芳香物质,其中烷类11种,烯类18种,酯类10种,醇类3种,酮类1种,炔类1种,它们构成4种龙眼主要的香气成分。4个龙眼品种在香气组成和含量上有所差异,储良、东良、东丰、石硖中分别含有25种、24种、26种、21种香气成分。其中,4种龙眼共有的香气成分有7种:分别是十七烷、罗勒烯(顺式)、罗勒烯(反式)、别罗勒烯、1,3,8-对-薄荷三烯、α-石竹烯、(E)-β-金合欢烯,但其相对含量都有所差异;此外,各品种也具有自己独特的香气成分,如储良特有的香气成分有9种:包括十六烷、2-甲基-4-亚甲基-5-(2,2-二甲基环丙基)-1-戊烯、5-环丙基戊酸乙酯、二十酸乙酯、棕榈酸乙酯、9-十六碳烯酸乙酯、香叶基芳樟醇、芳樟醇、2,7-二甲基-3-辛烯-5-炔;东丰特有的3种:包括1-碘十一烷、反式,反式-法尼基酸甲酯、2-羟基十二烷酸甲酯;石硖特有的4种:包括十一烷、(-)-异丁香烯、1,3,3-三甲基-2-乙基环己烯、喇叭茶醇;东良没有特有的香气成分。     

福州茉莉红茶特征香气成分分析

检测福州茉莉红茶香气成分,研究香气成分与茉莉红茶品质的相关性。以福州市茶王赛茉莉红茶样本为研究对象,采用固相微萃取富集茉莉红茶香气组分,通过气质联用技术测定香气成分组成,利用MPP和SPSS软件分析茉莉红茶的特征香气成分。结果表明:福州茉莉红茶中共鉴定出36种香气物质,包括6种醇类、7种酯类、3种含N化合物、15种萜烯类化合物和5种其他类化合物,其中含量较高的香气成分为芳樟醇(13.51%～22.94%)、苯甲醇(7.25%～19.22%)、顺式-3-己烯醇苯甲酸酯(12.34%～22.49%)、乙酸卞酯(12.54%～19.64%)、α-法呢烯(8.66%～15.61%)和氨茴酸甲酯(7.21%～9.89%)等。主成分分析结果显示,与前3个主成分呈较大相关(载荷量0.6或-0.6)的香气成分分别有27、7和3种,筛选出茉莉红茶特征香气成分主要为苯甲醇、芳樟醇、乙酸苄酯、水杨酸甲酯、δ-杜松烯、α-法呢烯、顺式-3-己烯醇苯甲酸酯、吲哚和氨茴酸甲酯,其中前5种香气成分与茉莉红茶的品质成正相关,后4种香气与茉莉红茶的品质呈负相关。     

2个芍药品种不同花器官香气成分分析

‘巧玲’和‘杨妃出浴’是杂交选育芳香型芍药新品种的重要亲本材料。为了弄清其不同花器官香气成分、含量及其分布规律，进而为芍药花香相关功能基因的分离、鉴定、克隆、时空表达及芳香型芍药分子育种等后续研究提供一定的理论依据。本文以典型芳香型芍药品种‘巧玲’与‘杨妃出浴’为试材，以淡香型芍药品种‘粉玉奴’为对照，采用顶空固相微萃取和气相-质谱联用技术，检测分析其花瓣、瓣化雄蕊、雌蕊、萼片4个不同花器官的香气成分。结果表明:‘杨妃出浴’含有29种香气成分，主要为香叶醇(27.62%)、苯乙醇(18.00%)、3, 7-二甲基-2-辛烯醇(14.56%)、α-蒎烯(9.79%)，鉴于‘粉玉奴’花瓣样品中未能检测到以上香气成分，因此可初步确定香叶醇、苯乙醇、3, 7-二甲基-2-辛烯醇、α-蒎烯等为‘杨妃出浴’花冠释放香气的关键成分。‘巧玲’含有41种香气成分，主要为芳樟醇(30.06%)、桉油精(23.28%)、苯乙醇(22.09%)、乙酸叶醇酯(11.86%)、石竹烯(5.24%)，其中芳樟醇与桉油精含量特别高，对照分析可初步确定‘巧玲’花香主要来源于芳樟醇、苯乙醇、桉油精与石竹烯的贡献。同时，2个品种不同花器官之间香气物质的释放量均表现出明显差异，其中瓣化雄蕊中均为最高，外层花瓣次之，而雌蕊与萼片中较少，与感官上香气的初步判断相吻合。因此，‘巧玲’和‘杨妃出浴’花香成分在不同花器官部位的空间表达上具有明显差异性。      

白玉兰与望春玉兰花香成分和含量的比较研究

采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析了白玉兰和望春玉兰鲜花的芳香成分及相对含量,并对其进行了比较.结果表明,白玉兰和望春玉兰花香成分的种类及含量存在较大差异.白玉兰共检测出25种芳香成分,萜烯类化合物含量最高,达到了70.29%,是主要香气成分.含量较多的芳香成分有β-水芹烯、α-金合欢烯、桉叶油素、β-蒎烯、氧化芳樟醇和α-蒎烯;望春玉兰共检测出32种芳香成分,萜烯类化合物是主要香气成分,其相对含量为71.34%,含量较多的芳香成分有β-水芹烯、顺式-β-罗勒烯、桉叶油素、β-蒎烯、β-月桂烯和紫丁香醇D.不同的芳香物质及含量组成,使白玉兰和望春玉兰形成各自独特的香气类型.     

不同光照强度对‘金盏银台’水仙花香释放的影响

以漳州水仙‘金盏银台’(Narcissus tazetta L.var.chinensis Roem)为试材,经5个不同光强(0、100、300、600、1 000μmol/(m2·s)处理后,采用活体动态顶空法收集花香,然后利用热脱附-气相色谱/质谱联用技术,对水仙花香成分以及相对含量进行测定。结果表明,漳州‘金盏银台’水仙释放出8大类共58种化合物,在所测的58种挥发化合物中(Z)-3,7-二甲基-1,3,6-辛三烯(罗勒烯)含量最多,其次是乙酸乙酯,3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇(芳樟醇),3-甲基-2-丁烯-1-醇乙酸酯,这些是‘金盏银台’水仙花香的主要成分,并且化合物种类数随着光强的增强呈现出先增多后减少的变化规律。花香成分的相对含量随光强的增加也表现明显的变化,且多数化合物的相对含量在光强为300μmol/(m2·s)时最高。     

红刺玫挥发物成分及抑菌作用

利用固相微萃取与GC-MS系统,分析了红刺玫花、叶的自然挥发性物质组成。鉴定出叶片挥发物成分10种,主要成分乙酸顺式-3-己烯酯(41.84%)、1R-α-蒎烯(27.11%)、罗勒烯(6.21%),占挥发物总质量分数的75.16%;花瓣挥发物成分25种,主要成分D-香茅醇(41.9%)、苯乙醇(15.62%)、1R-α-蒎烯(13.4%),占挥发物总质量分数的70.92%。利用β-蒎烯、罗勒烯、D-香茅醇、3-蒈烯4种挥发性物质进行了抑菌活性试验,发现4种挥发物质对供试菌均表现出一定的抑制作用,其中罗勒烯与D-香茅醇对金黄色葡萄球菌抑制作用较强,最低抑菌质量浓度(MIC)均为12.5 mg·L~(-1);β-蒎烯与D-香茅醇对枯草芽孢杆菌、D-香茅醇对大肠杆菌抑制作用次之,MIC均为50 mg·L~(-1)。β-蒎烯对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑制作用较弱,MIC为800 mg·L~(-1)。     

广东陈香茶特征香气物质研究

为研究广东陈香茶特征香气物质,采用顶空固相微萃取方法(HS-SPME)结合气质联用技术(GC-MS)鉴定了9个广东陈香茶样品中的香气物质种类及其含量。结果表明:共鉴定出醇类、酮类、杂氧化合物、醛类和烯类等50多种香气化合物;具有木香、药香和"陈香"特征的呈香物质比对照显著增加,主要包括雪松醇、雪松烯、β-愈创烯、α-紫罗酮、β-紫罗酮、二氢猕猴桃内酯、乙酸苯甲酯、苯甲酸苯甲酯等;而具有花香的物质如芳樟醇、水杨酸甲酯、壬醛等明显减少。推测广东陈香茶的特征香气物质主要为上述具有愉快木香、药香气味的芳香物质。     

百合品种‘Siberia’ rDNA ITS序列的克隆及序列比对

本文对东方百合品种‘Siberia’样品进行ITS的序列测定,将得到的序列与GenBank上百合属42个种的rDNA ITS进行比对,并在此基础上构建了系统发育树。序列比对结果表明东方百合品种‘Siberia’的rDNA ITS与其它种的同源性不高,序列的相似性为70%左右。系统发育树也表明东方百合品种‘Siberia’与同比42个种的同源率较低,证明百合属各种间、种内高度进化,东方百合品种‘Siberia’的形成是经过多世代多次进化而完成。