百合杂种胚的离体培养

以剥除胚乳的两个百合杂交组合的杂种胚，进行离体培养，５ｄ后即开始萌发，１５ｄ后，萌发率达８８％。在不同激素含量的培养基比较试验中，发现以ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ激素浓度培养基培养效果最好，其中，７５％的种胚长成完整植株，１２．５％的种胚长出幼芽，培养过程中，无根的幼苗生长至３ｃｍ左右，约５张叶片时，转移至ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上，２￣３周后，有８０％的幼苗长出根。     

百合幼胚的离体培养和植株再生

为了探索百合幼胚离体培养的最佳胚性生长条件及植株再生途径,以授粉后３５ｄ的百合幼胚为外植体,进行了幼胚胚性生长,愈伤组织的诱导,愈伤组织不定芽、不定根的分化和再生植的移栽试验,结果表明;在含有１ｍｇ／ＬＩＡＡ〈１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ培养基上培养,蔗糖含量为６－８％时,百合幼胚胚性生长最好,１ｍｇ／ＬＩＡＡ,１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ２基上培养,蔗糖含量为６－８％     

兰州百合和大花卷丹远缘杂交胚挽救技术研究

利用兰州百合与大花卷丹进行正反交,研究了花期调控、不同授粉方式、蒴果采收时间及胚挽救培养基配方对杂种胚萌发率及成苗率的影响。结果表明,兰州百合延后种植及大花卷丹提前种植,可有效地解决花期不遇的问题;兰州百合与大花卷丹杂交授粉时,花期授粉的蒴果膨大率可达93.3%,种子有胚率为2.00%;大花卷丹与兰州百合杂交授粉时,切割柱头的授粉膨大率最高,仅为7.6%,但种子有胚率为0%。兰州百合与大花卷丹杂交授粉后60～70 d的蒴果进行胚培养较为适宜。兰州百合与大花卷丹的杂交胚适宜培养基为MS+0.3 mg/LNAA+0.2 mg/L6-BA。     

新铁炮百合品种沈香一号的幼胚培养研究

以新铁炮百合沈香一号(Lilium formolongi cv.Shenxiang No.1)的幼胚为试材,筛选适宜百合幼胚萌发的诱导培养基,结果表明,适宜的诱导培养基为1/2MS,萌发时间在接种后的22～43d之间。6-BA和NAA的浓度比与新铁炮百合幼胚的发芽率之间呈现出显著的相关性,在一定范围内,6-BA和NAA的浓度比越大,胚的萌发率越低。试验筛选出适宜新铁炮百合胚分化不定芽的诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,继代增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L及MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L。新铁炮百合试管苗易出现玻璃化现象,玻璃化程度与培养基的水势、环境湿度和外源激素的浓度有关。     

切花百合杂种胚抢救方法

以东方百合杂种系(O)、亚洲百合杂种系(A)、麝香百合杂种系(L)部分品种为试材,采用子房切片培养、带胎座胚珠培养、胚培养3种方法对系间杂种幼胚进行抢救,并对系内杂种胚离体培养的影响因素进行研究。结果表明,采用子房切片培养和带胎座胚珠培养可使OA,LA型部分杂种胚萌发,且带胎座胚珠培养优于子房切片培养,采用胚培养可使OA,LA,LO型部分杂种胚萌发,最终仅1株LO型杂种苗继续生长,其余杂种苗褐化死亡;OO型杂种胚适宜在胚龄50 d培养,AA,LL型杂种胚适宜在胚龄40 d培养,且0.01～0.1 mg/L NAA的添加对胚萌发是必要的,6-BA是否添加在不同杂交组合中存在差异。     

百合花卉种间杂交种的培育

百合是著名的花卉，在国际切花生产中占有重要地位。切花百合又以花朵向上开放的钟形花为佳。文章利用东北产钟花组的毛百合（Ｌｉｌｉｕｍｄａｕｒｉｃｕｍ）和花色鲜红的细叶百合（Ｌ．ｐｕｍｉｌｕｍ）为亲本，进行百合种间杂交，试图培育出适合东北室外栽培的，且花形、花色优良的百合新品种。试验所得杂种种子在２０℃恒温箱内的培养皿中发芽率为５４％，成苗率为发芽种子的２７％。胚培养的杂种种子发芽率为７３．２％，明显高于培养皿条件下的发芽率。通过种子形态、幼苗分化及子叶、真叶特征比较，发现杂种的特征基本介于亲本之间。染色体观察亦显示出杂种染色体中具有双亲染色体的一些特有形态     

百合花卉种间杂交种的培养

百合是著名的花卉，在国际切花生产中占有重要地位。切花百合又以花朵向上开放的钟形花为佳。文章利用东北产种花组的毛百合和花色鲜红的细叶百合为亲本。进行百合种间杂交。试图培育出适合东北室外栽培的。且花形、花色优良的百合新品种。试验所得杂种种子在２０℃恒温箱内的培养皿中发芽率为５４％，成苗率为发芽种子的２７％。胚培养的杂种种子发芽率为７３．２％，明显高于培养皿条件下的发芽率。通过种子形态、幼苗分化及子叶、     

石刁柏胚状体诱导与影响因素的研究

本试验对石刁柏体细胞胚及花粉胚状体诱导进行了研究。试验表明，不同基因型对胚状体发生频率影响很大，接种材料不同会导致胚性愈伤组织形成上的差异，外源物质及植物激素种类、配比对胚状体诱导、分化起着重要作用。ＭＳ培养基附加６％蔗糖，水解酪蛋白６００ｍｇ／Ｌ，谷氨酰胺７００ｍｇ／Ｌ，ＩＢＡ２．５ｍｇ／Ｌ，ＢＡ０．８ｍｇ／Ｌ，胚性愈伤组织诱导率最高；而ＭＳ＋ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ＋嘧啶醇０．８ｍｇ／Ｌ培养基，胚状体诱导效果最佳，平均每块愈伤组织形成体细胞胚１．７２个，花粉胚状体１．４６个。     

宜昌百合体细胞胚诱导及植株再生

为了对秦岭野生宜昌百合资源进行保存,并有效地解决其扩繁和再生问题,以秦岭野生宜昌百合为材料,研究不同质量浓度的激素组合、鳞片的不同部位及光暗培养对秦岭野生宜昌百合的体细胞胚诱导的影响。结果表明,鳞片诱导体细胞胚的适宜培养基为MS+0.5 mg/L TDZ(N-苯基-N-′1,2,3-噻二唑-5-脲)+1.0 mg/L NAA(a-萘乙酸)。鳞片基部诱导体胚率最高,为90.00%,鳞片分化体细胞胚的能力为基部>中部>上部。暗培养下诱导率为90.00%,高于光培养条件。     

龙眼胚性细胞系的建立与保持

本研究比较了生长调节剂、ＡｇＮＯ３、活性炭、碳源、基本培养基、光照度、胚发育时期以及基因型等对龙眼幼胚培养诱导愈伤组织的影响．从幼胚培养中，诱导出多种类型的愈伤组织，经继代培养并筛选，获得松散、生长旺盛、胚胎发生能力极强的松散型胚性愈伤组织．该类型胚性愈伤组织适宜建立悬浮细胞系和分离原生质体，并且转移至含体积分数为０．０５椰子汁的ＭＳ固体培养基上，形成大量的胚状体．采用在附加１ｍｇＬ－１２，４－Ｄ的ＭＳ培养基与附加１ｍｇＬ－１２，４－Ｄ、０．５ｍｇＬ－１ＫＴ和５ｍｇＬ－１ＡｇＮＯ３的ＭＳ培养基交替继代培养，该类型胚性愈伤组织可长期保持     

加拿大披碱草×肥披碱草杂种F1幼穗组培再生体系的研究

[目的]筛选适宜加拿大披碱草×肥披碱草种间杂种F1愈伤组织诱导、幼苗分化和生根的最适培养基。[方法]以加拿大披碱草×肥披碱草种间杂种F1幼穗为外植体,以MS为基本培养基,添加不同的激素和营养物,探讨了2,4-D、6-BA、NAA与IBA4种激素不同浓度对杂种F1愈伤组织的诱导、分化及生根的影响,建立了组培再生体系。[结果]激素2,4-D对杂种F1愈伤组织诱导起决定性作用。适宜杂种F1愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L,诱导率达100%;适宜幼苗分化的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+6-BA2.0 mg/L+NAA0.4 mg/L,分化率达73.3%;适宜生根的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+IBA0.5 mg/L,生根率达86.7%;组培苗经过炼苗移栽得到了完整植株。[结论]杂种F1组培再生体系的建立为新种质的保存奠定了基础。2,4-D适宜浓度为2.0 mg/L。     

喜树愈伤组织诱导与抑制褐化的研究

[目的]筛选喜树外植体的最佳诱导培养基,研究抑制外植体及继代愈伤组织褐化的方法。[方法]以喜树的幼叶和种胚作为外植体,通过测定过氧化物酶和多酚氧化酶的活性,从外植体选择、培养基种类、激素配比、添加物的处理等方面进行愈伤组织的诱导和抑制外植体及继代愈伤组织褐化的研究。[结果]幼叶外植体的最佳诱导培养基为:SH+NAA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L;种胚外植体的最佳诱导培养基为:MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L。抑制幼叶外植体褐化的方法为:增加外植体大小,吹干培养基表面水分。抑制愈伤组织继代培养褐化的方法为:最佳诱导培养基附加30mg/L抗坏血酸和5g/L活性碳;1次继代后,将质地致密的愈伤组织转移到MS培养基上培养。[结论]该研究为喜树的遗传转化和植株再生提供理论基础。     

老芒麦×紫芒披碱草杂种F1幼穗再生体系的建立

以老芒麦×紫芒披碱草种间杂种F1代的幼穗（2～4cm）为外植体材料,以MS为基本培养基,研究了4种不同外源激素组合对幼穗愈伤组织诱导和植株再生能力的影响,筛选出最适杂种F1愈伤组织诱导的培养基为：MS＋2,4-D2.0mg/L,诱导率达63.3％;适宜幼苗分化的最佳培养基为：MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.4mg/L,分化率为75％;适宜生根的最佳培养基为MS＋IBA0.5mg/L,生根率达90％;组培苗经过炼苗移栽得到了完整植株.该再生体系的建立为下一步进行秋水仙碱诱导染色体加倍提供基础,最终克服其不育性,创造饲草新种质.     

北美蓝云杉体细胞胚发生技术研究

研究北美蓝云杉体细胞胚发生技术,对该树种的胚胎发生机理和建立相关的快繁技术体系等具有一定的理论意义。以成熟胚为外植体,分别对基本培养基、生长调节剂种类和浓度对其体细胞胚发生各阶段的影响进行了研究,同时观察体细胞胚发生过程的形态特征。结果表明:1)胚性愈伤组织诱导培养基,首先在DCR培养基+2,4-D5.0mg/L+6-BA4.0mg/L+KT2.0mg/L诱导15d后,之后转入DCR培养基+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L,胚性愈伤诱导率最高为45.3%;2)胚性愈伤组织保持与增殖培养基为1/2LM培养基+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+PEG40001.0g/L,胚性愈伤组织增殖率最高为102.27%;3)IBA可促进成熟体细胞胚的诱导,以1/2LM+IBA0.5mg/L+ABA2.0mg/L(以上4种培养基均附加蔗糖30g/L,谷氨酰胺450mg/L,水解酪蛋白500mg/L,琼脂5.0g/L,pH=5.8)的体细胞胚诱导率最高,为38.10%;4)在1/2MS+1.0g/L活性炭的培养基上,体细胞胚萌发,子叶生长但胚根发生较少。北美蓝云杉体细胞胚诱导过程中出现严重的畸形胚现象及生根难的问题,今后有待进一步研究。     

离体条件下油松成熟合子胚不定芽的形成

为确定油松成熟胚离体培养诱导不定芽的最适条件,以油松成熟胚为外植体材料,分别接种在TE、DCR和MS3种基本培养基上以确定最适培养基;随后按照U6*(64)均匀设计表,在TE培养基中添加不同浓度梯度的植物生长激素6-BA、NAA、KT,建立试验组合以确定最佳激素配比;基于上述实验,进一步探讨了蔗糖浓度对不定芽诱导的影响及6-BA对不定芽生长的影响。结果表明:基本培养基对于不定芽的诱导起重要作用,在TE培养基上不定芽诱导率最高,DCR次之,MS最差;运用Uniform Design Version3.00均匀设计软件,通过数据处理、回归分析及试验优化,得到激素最佳组合为:6-BA6mg/L+NAA0.1mg/L,KT对试验没有显著影响;蔗糖浓度为4.0%时不定芽诱导率最高;培养基中降低6-BA的浓度有利于不定芽的生长,在TE+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的培养基中,丛生芽平均长度最长。     

小鼠胚胎体外培养的研究——从囊胚期培养发育到体节期

在小鼠胚胎体外培养研究中,为筛选出适合囊胚期胚胎发育的最佳培养液,本研究分三个试验组进行。第一试验组的培养液主要由CMRL-1066和人脐带血清（HCS）组成;第二试验组的培养液是CMRL-1066加上胎牛血清（FCS）;第三试验组用TCM-199添加少量碳酸氢钠做培养液。在适宜的体外培养条件下,不同培养液获得了不同的培养成绩。试验结果表明：具有HCS的CMRL-1066培养液是把小鼠从囊胚期胚胎在体外条件下培养至体节期的最佳培养液;添加FCS的CMRL-1066培养液不够理想;而加进少量碳酸氢钠的TCM-199培养液则完全不适合培养囊胚期小鼠胚胎。     

Effect of Different Hormone Combinations on Somatic Embryogenesis in Cotton Cultivar Xinluzao 33(Gossypium hirsutum L.)

[Objective] This study was conducted to evaluate the efficiency of somatic embryogenesis and plant regeneration for an upland cotton cultivar Xinluzao33 under the induction of different hormone combinations and thus to determine the optimal hormone combination. [Method] Calli of Xinluzao33(Gossypium hirsutum L.) were induced from seedling hypocotyl tissue by a range of DK and BK combinations. Embryogenic calli and embryos were induced on callus-inducing medium(CIM) without any hormones. Callus appearance and quality were compared to determine which medium was the optimal for callus induction. Embryogenesis ratio was calculated to determine which medium was the best for somatic embryogenesis and plant regeneration. [Result] Callus induction rate was 100% in all the 12 hormone combinations.The calli were yellow or kelly, and their texture was loose or soft under low concentrations of DK combinations, green or white, variably compact under high concentrations of DK combinations. The calli induced by BK combinations were kelly or green, covering creamy white substance. The best medium for callus induction was DK6(0.05 mg/L 2, 4-D and 0.10 mg/L KT). Embryogenic calli were successfully induced from all the combinations. The efficiency of embryogenic callus induction,embryogenesis, and plantlet regeneration were significantly different among the 12 combinations. The result showed that the embryogenesis ratio was the highest in BK3 combination(0.50 mg/L IBA and 0.50 mg/L KT), 72.86% of embryogenic calli differentiated into somatic embryos after being cultured on CIM for 80 d, and80.93% of the somatic embryos finally regenerated into plants on SEM(somatic embryo induction medium). [Conclusion] These results indicate that hormone combination BK3(0.50 mg/LIBA and 0.50 mg/L KT) was the best medium for somatic embryogenesis and plant regeneration from Xinluzao33.     

麝香百合'Snow Queen'×毛百合种间杂交种的育成

以麝香百合(Lilumlongiflorm)杂种系品种‘Snow Queen'为母本,野生毛百合(L.dauricum)为父本,采用切割花柱法进行杂交,通过种子培养成功获得了杂交幼苗.采用RAPD分子标记法对获得的由其中一个株系扩繁而来的幼苗进行了鉴定,证实为真杂种:杂种带48.65%来自母本,29.73%来自父本,2...     

攸县油茶胚状体发生及其组织学观察

[目的]研究以攸县油茶(Camellia yuhsienensis Hu)成熟子叶为外植体的胚状体发生情况。[方法]以子叶为外植体,接种于MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT培养基上,诱导胚性愈伤组织。胚性愈伤组织块转接至以MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA和NAA的激素组合的培养基上诱导产生胚状体。取不同发育阶段的组织块制作石蜡切片,进行组织学观察。[结果]成熟子叶块接种于诱导培养基MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,15d左右开始出现胚性愈伤组织。胚性愈伤组织转接至培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA时胚状体诱导率最高,为87.78%;无激素培养基也能诱导胚性愈伤组织产生胚状体,但诱导率极低,仅为6.67%。组织学观察表明,胚性细胞由愈伤组织表面及其内部邻近的若干细胞分化而来,经过球形胚、心形胚、子叶形胚等不同发育阶段直至成熟胚状体。[结论]诱导胚性愈伤组织分化为胚状体的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA。     

睡莲不同杂交组合幼胚愈伤组织诱导研究

以睡莲3个杂交组合的幼胚为外植体,研究了胚龄、基本培养基、植物生长调节剂配比对愈伤组织诱导的影响。结果表明:1/2MS为最适的基本培养基;3个杂交组合在1/2MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L培养基中愈伤组织的平均诱导率均最高,分别为56.4%、21.5%和47.9%;授粉后13~18 d为幼胚培养的最佳时期。