加拿大披碱草×肥披碱草杂种F1幼穗组培再生体系的研究

[目的]筛选适宜加拿大披碱草×肥披碱草种间杂种F1愈伤组织诱导、幼苗分化和生根的最适培养基。[方法]以加拿大披碱草×肥披碱草种间杂种F1幼穗为外植体,以MS为基本培养基,添加不同的激素和营养物,探讨了2,4-D、6-BA、NAA与IBA4种激素不同浓度对杂种F1愈伤组织的诱导、分化及生根的影响,建立了组培再生体系。[结果]激素2,4-D对杂种F1愈伤组织诱导起决定性作用。适宜杂种F1愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L,诱导率达100%;适宜幼苗分化的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+6-BA2.0 mg/L+NAA0.4 mg/L,分化率达73.3%;适宜生根的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+IBA0.5 mg/L,生根率达86.7%;组培苗经过炼苗移栽得到了完整植株。[结论]杂种F1组培再生体系的建立为新种质的保存奠定了基础。2,4-D适宜浓度为2.0 mg/L。     

红掌离体叶片再生途径的研究

本文是以红掌的叶片做为外植体,探讨植株再生途径,以期为红掌组培苗工厂化提供一定的技术储备。通过培养基对比试验研究表明：诱导红掌叶片愈伤组织的理想配方是：1/2 MS＋6-BA2.0 mg/L＋2,4-D 0.5 mg/L,诱导出愈率为64.3%;诱导愈伤组织分化及不定芽增殖的培养基是MS＋6-BA2.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L,分化率达63.3%,增殖系数为4.1,芽苗健壮;最佳的生根培养基为1/2MS＋NAA 0.1 mg/L,生根率达92.2%。     

五节芒离体再生与多倍体诱导技术体系的建立

以五节芒(Miscanthus floridulus)幼穗为外植体,建立了五节芒的离体再生体系:幼穗的最佳愈伤诱导培养基为MS+4.0 mg/L 2,4–D+0.1 mg/L 6–BA,最佳分化培养基为MS+2.0 mg/L 6–BA,最佳生根培养基为MS+1.0mg/L IAA+0.1 mg/L IBA+1.0 mg/L CCC。比较不同浓度秋水仙碱溶液对五节芒愈伤组织诱变的效果,结果显示,以1 000 mg/L秋水仙碱处理愈伤组织72 h,诱导率可达12.48%,形态特征、DNA含量和染色体核型分析表明,诱导获得的再生植株为五节芒四倍体。     

柳枝稷的组织培养技术研究

[目的]探索柳枝稷的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。[方法]以柳枝稷幼穗为外植体进行组织培养获得组培苗,建立相应的植株再生系统。[结果]愈伤组织诱导培养基为MS＋5．00mg／L2,4-D＋0．15mg／L6．BA＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;继代与增殖培养基为MS＋4．00mg／L2,4-D＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;分化培养基为MS＋0．2mg／L KT＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;生根培养基为1／2MS＋0．80％蔗糖＋0．70％琼脂。愈伤组织诱导和继代培养阶段培养温度为24℃,在分化和生根培养阶段培养温度为28℃。幼穗外植体的出愈率达95％,愈伤组织增殖率在800％-1000％以上,分化率达80％以上,生根率在98％以上。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达95％以上。[结论]采用优化激素搭配的培养基可得到高效的诱导率、分化率和生根率。     

兰州百合花丝组培诱导完整植株的研究

采用组织培养技术对兰州百合花丝愈伤组织的诱导、分化、继代和增殖培养及再生苗的生根进行的研究结果表明，在不同激素组合的培养基上兰州百合花合丝均能诱导出愈伤组织，但一次性成苗能力不同。在诱导愈伤组织的形成及分化中以MS＋BA1．0mg/L NAA0.5mg/L培养基的效果最佳，其发化率达41．67％，分化苗色绿、生长健壮；继代和增殖培养基以MS＋BA1．5mg/L＋NAA0．3－0．5mg/L为好，试管苗月增殖率5倍左右，再生植株生根的理想培养基为B5＋IAA0．2mg/L，生根率达90．5％。     

大葱组织培养及其再生体系的建立与优化

分别以大葱种子、幼叶、根为外植体,进行了愈伤组织的诱导和植株再生试验.结果表明:切口处理的种子为最佳外植体,愈伤诱导率最高为90.28%;以MS 1.0 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L BA为继代培养基、琼脂浓度为9 g/L、继代培养的间隔时间15 d时,都可以有效地减少愈伤玻璃化;MS 2.0 mg/L BA为最佳分化培养基,不添加任何激素的MS培养基为最佳生根培养基.     

番茄遗传转化体系的建立

研究以番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）栽培品种“中杂9号”、“毛粉802”和“合作908”为试材,通过对番茄茎段的离体培养,研究不同基因型以及不同激素组合对植株再生的影响。结果表明：以茎段为外植体时中杂9号和毛粉802更适合诱导再生植株形成;IAA与IBA比较,IAA利于芽的形成及正常芽的发育。其中中杂9号最适宜诱导愈伤组织和芽分化培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋IAA0.1mg/L、MS＋6-BA2.0mg/L＋IAA0.4-0.5mg/L,分化率均高达100%,毛粉802最适宜诱导愈伤组织和芽分化培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋IAA0.4-0.5mg/L,分化率高达100%。茎段外植体适宜的生根培养基为MS＋IAA0.5mg/L＋6-BA0.6mg/L,生根率高达80.8%。     

桂平魔芋组织培养研究

以桂平魔芋球茎、鳞片、顶芽等切块为外植体,愈伤组织诱导的适宜培养基为MS＋6－BA0.5-1.0mg/L NAA0.5-1.0mg/L、球茎、鳞片诱导率达100％,而顶芽切块诱导无效。愈伤组织芽分化最适培养基是MS＋BA1．5＋NAA0．01mg/L,分化率达90％以上,顶芽切块在分化培养基上能长出丛生芽,频率达72％。芽在MS＋NAA0．3－0．5mg/L培养基上都能100％生根形成完整植株。     

花榈木胚轴愈伤组织的诱导及植株再生

［目的］通过愈伤组织诱导途径,建立快速高效的花榈木再生体系。［方法］花榈木成熟种子在MS培养基中萌发获得无菌苗,以幼苗的胚轴为外植体诱导愈伤组织,经继代后进一步诱导不定芽和生根。［结果］诱导花榈木愈伤组织的最适培养基为MS＋ 1.0 mg/L 2,4 D＋0.5 mg/L KT,诱导率达96.7％;诱导愈伤组织分化不定芽的培养基为MS＋0.5 mg/L NAA＋0.1 mg/L TDZ,其不定芽诱导率为85.0％;平均每块愈伤产生不定芽6.2个;生根的最适培养基为1/2WPM＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA,生根率为88.9％。炼苗移栽后,成活率可达85.0％。［结论］花榈木胚轴愈伤组织诱导途径的植株再生是一套快速高效的离体再生体系,可为花榈木种质资源保存、转基因、遗传育种等研究提供重要参考。     

马铃薯品种"大西洋"高效再生体系的建立

以马铃薯品种“大西洋”为试材,进行了叶片和茎段的离体再生研究。结果表明,叶片与茎段愈伤组织最佳诱导培养基分别为MS＋6BA2.5 mg/L＋NAA0.3 mg/L和MS＋6BA2.5 mg/L＋NAA0.2 mg/L,诱导率均达100%。叶片与茎段愈伤诱导不定芽分化的最佳培养基分别MS＋6 BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋GA35.0 mg/L和MS＋6 BA2.0 mg/L＋NAA0.05 mg/L＋GA35.0 mg/L,不定芽分化率分别达100%和80%。诱导试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS＋0.2 mg/LNAA,生根率为100%,试管苗移栽成活率为91%。     

2,4-D对扁穗牛鞭草幼穗离体培养的影响

以雅安扁穗牛鞭草的幼穗为外植体,研究了2,4-D浓度和不同取材部位对愈伤组织诱导的影响以及继代培养时不同浓度的2,4-D对愈伤组织增殖、分化、生根的影响.结果表明:以幼穗下部为外植体接种在MS+2,4-D 7.0 mg/L培养基中,颗粒状愈伤组织的诱导率高达100.00％;MS+2,4-D 1.0 mg/L是幼穗愈伤组织较为适宜的继代增殖培养基,在该培养基上颗粒状胚性愈伤组织的出愈率为89.44％,愈伤组织的绿苗分化率和生根率都可达100％,平均绿芽点数和生根数等均极显著高于其他处理.     

秘鲁番茄高效再生体系的研究

以秘鲁番茄的叶片和茎段为外植体,研究不同外植体种类、激素配比对秘鲁番茄愈伤组织诱导、分化和不定芽生根的影响,以期建立秘鲁番茄组织培养高效再生体系。结果表明:秘鲁番茄的叶片较茎段更适宜愈伤组织诱导与分化,以叶片为外植体时,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达100.0%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达92.4%。以茎段为外植体时,最佳诱导愈伤培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达95.8%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达86.5%。不定芽最适宜的生根培养基为MS+1.0 mg/L NAA,生根率达100.0%。采用草炭土+珍珠岩(体积比1∶1)的混合基质作为移栽基质,移栽成活率可达90%以上。     

柱花草下胚轴愈伤诱导和植株再生

以柱花草品种“热研2号”下胚轴为外植体,建立了高效的再生体系.下胚轴愈伤诱导最佳培养基为:MS +2,-D 2.0 mg/L,其愈伤诱导率为96％;最佳芽分化培养基为:MS+6 -BA 3.0 mg/L,其分化率为88％,最佳壮苗培养基为:MS+6-BA1.0mg/L+ NAA 0.7 mg/L +GA 0.2 mg/L;在最佳生根培养基MS+ NAA 0.2 mg/L上,生根率达到72％,移栽成活率为74％.     

川芎的组织培养技术研究

探索川芎的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。以川芎根、茎段和叶片作外植体进行组织培养,获得了大量的组培苗,建立了相应的植株再生系统。川芎根诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.2 mg/L;茎段及叶片诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L;根愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.2 mg/L+IAA 0.3 mg/L;茎段及叶片愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L。根外植体在愈伤组织、分化不定芽和生根方面的诱导率分别为84%、86%和87%;茎段和叶片愈伤组织的诱导率达到92%和96%,其不定芽分化率为98%,生根率为93%。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达98%。提出了优化激素搭配的培养基,得到了高效的诱导率、分化率和生根率。     

虎尾兰组培快繁技术研究

[目的]寻求虎尾兰组培快繁的最佳培养基。[方法]以虎尾兰幼叶为外植体,采用2种不同浓度的消毒剂进行处理,探讨外植体最佳消毒方法。以MS为基本培养基,研究添加不同浓度的2,4-D、6-BA和NAA对虎尾兰幼叶愈伤组织诱导、芽分化诱导及生根的影响,确定虎尾兰组培快繁的最佳培养基。[结果]虎尾兰外植体最佳消毒方式为70%酒精10 s＋0.1%升汞5 min,外植体污染率为7.7%;虎尾兰愈伤组织诱导最适宜培养基为MS＋0.25 mg/L 2,4-D,出愈率为100%;诱导芽分化的最适宜培养基为MS＋0.5 mg/L 2,4-D＋2.0 mg/L 6-BA,分化率为76%;根培养的最适宜培养基为MS＋4.0 mg/L NAA,生根率达到100%,试管苗成活率达95%。[结论]该研究为虎尾兰组培快繁的大规模工厂化生产提供了科学依据。     

西番莲胚乳愈伤组织诱导和三倍体植株再生

用紫果西番莲种子的胚乳作外植体离体培养,在MS＋BA0．2mg/L NAA2.0mg/L培养基上诱导获得乳白色或淡黄色结构致密的愈伤组织,诱导频率达到84．7％。愈伤组织在MS＋BA2mg/L NAA0．2mg/L上分化不定芽的频率最高,达65％,增殖系数达到5．2。再生的不定芽在1／2MS＋IBA1mg/L上诱导生根的效果好,生根率达63％。再生植株经根尖染色体计数有95．3％的细胞染色体数目为2n=3x=27,证明再生植株为三倍体。说明胚乳培养是获得三倍体的高效途径。     

番茄子叶、下胚轴植株再生体系的建立

本研究以番茄(Lycopersicon esculentumM ill.)栽培品种“中杂9号”、“毛粉802”和“合作908”为试材,通过对番茄子叶、下胚轴的离体培养,研究不同基因型以及不同激素配比对植株再生的影响。结果表明:以下胚轴为外植体时3种材料均可诱导再生植株,其中中杂9号和毛粉802最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.4 mg/L。以子叶为外植体时毛粉802和合作908均可诱导出再生植株,其中毛粉802诱导愈伤组织及芽分化的最适宜培养基为MS 6-BA1.0mg/L IAA0.2mg/L和MS 6-BA1.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908诱导愈伤组织及芽分化的培养基为MS 6-BA0.5mg/L IBA0.5mg/L。两种外植体适宜的生根培养基均为MS IAA0.5 mg/L。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

不同浓度激素配比对防风愈伤组织诱导及再分化的影响

以防风的有活力的种子为材料，通过栽种土培苗，比较不同来源外植体愈伤组织的形成能力，并通过不同激素配比调整，研究愈伤组织分化生根、生芽的适宜条件，进而建立防风组培苗再生体系。结果表明，以幼叶为外植体所诱导出的愈伤组织分化情况最佳，最佳诱导培养基为MS+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA,诱导率达86.6%;最佳继代培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.6 mg/L NAA,增殖倍数为3.2;最佳诱导丛生芽培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA,生芽率为100%;最佳诱导不定根最佳培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L IAA,生根率为46.8%。     

香根草外植体的选择及植株再生试验

为建立香根草组织培养及植株再生体系,分别选取生长健壮无病虫害的植株茎杆、根、叶和幼嫩芽不同部位进行外植体选择及愈伤组织诱导,以及香根草外植体消毒方法和激素处理及培养基对丛生芽诱导的影响试验.结果表明,茎杆、根、叶作为外植体,诱导不出愈伤组织.幼嫩芽是最佳香根草外植体的选择.0.1％升汞对各部位处理效果成功率在65％以上,幼嫩芽消毒浸泡8 min成功率达88％.在MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L的培养基上培养25 d幼芽愈伤组织诱导率为100％.在MS＋6-BA 0.8 mg/L＋NAA 0.2 mg/L培养基上培养20 d诱导丛生芽效果最好,增殖系数为6.4.生根培养基选用1/2 MS＋NAA 0.3 mg/L＋IAA 0.1 mg/L为最佳,生根率达90％以上.