低能离子束介导外源基因进入水稻细胞的研究

用离子束介导法将编码β－葡萄糖苷酸酶的ｇｕｅ基因引入受体植物细胞,并实现瞬间表达。水稻悬浮细胞经离子束辐照后,电镜下能观察到细胞表面留下的溅射和刻蚀痕迹,细胞存活率随辐照剂量的增加而显著降低。将离子束（３０ｋｅＶ,２×ｌ０１５Ｎ＋／ｃｍ２）处理后的水稻悬浮细胞,浸入含有ｇｕｓ基因外源ＤＮＡ的ＳＳＣ温育介质,两天后,观察到受离子束直接作用的细胞团的一面有外源ｇｕｓ基因的导入和表达。ｇｕｓ基因瞬间表达的最佳处理剂量悬浮细胞为２×ｌ０１５Ｎ＋／ｃｍ２,成熟胚为２０×ｌ０１５Ｎ＋／ｃｍ２,而且３０ｋｅＶ能量的离子束处理明显较２０ｋｅＶ优越。ＳＳＣ缓冲导入介质最为理想,而添加ＤＭＳＯ（一种细胞促渗透剂）的ＳＳＣ和富含ｃａ２＋的ｋｒｅｎ’ｓＦ溶液（ｃａ２＋对促进质膜稳定性有好处）对离子束介导外源基因进入水稻细胞均不理想。     

H^＋离子束对大麦M1胚芽细胞的诱变效应

利用３０ｋｅＶＨ＋离子注入束辐照大麦种子,结果初步在明：Ｈ＋离子束辐照大麦显著地提高了Ｍ１胚芽细胞的分裂指数,促进了细胞分裂。Ｈ＋离子注入不仅引起胚芽细胞的明显核畸变（双核、小核、微核等）,还诱发染色体多种类型畸变（桥、落后、游离、断片等）,表现出较高的有丝分裂畸变率与较宽的畸变谱。且在２×１０１６Ｈ＋／ｃｍ２～６×１０１６Ｈ＋／ｃｍ２范围内,注入剂量与畸变率呈正相关,但６×１０１６Ｈ＋／ｃｍ２剂量后又呈下降趋势。为此,提出了Ｈ＋离子注入在大麦诱变育种中可被采用的适宜剂量范围。     

奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼核型及DNA含量的比较研究

采用ＰＨＡ体内培养法，取鱼体肾细胞用空气干燥法制备奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼的染色体，经核型分析，奥利亚罗非鱼为２ｎ＝４４，６ｓｍ＋２４ｓｔ＋１４ｔ；ＮＦ＝５０。尼罗罗非鱼为２ｎ＝４４，６ｓｍ＋２４ｓｔ＋１４ｔ；ＮＦ＝５０。经流式细胞仪测量外周血红血球的ＤＮＡ含量，奥利亚罗非鱼为２Ｃ＝２．２２ｐｇ（２．２２ｐｇ／Ｎｕｃｌ）；尼罗罗非鱼为２Ｃ＝２．２７ｐｇ（２．２７ｐｇ／Ｎｕｃｌ）。经对比分析，两种鱼     

离子注入对小麦远缘杂交结实率的影响

分析了Ｎ＋注入对小麦远缘杂交结实率的影响,结果表明：Ｎ＋注入可以克服远缘杂交不亲和性,提高杂交结实率,并以４×１０１６Ｎ＋／ｃｍ２的剂量和处理母本的效果最好。     

一个素性判别定理

将ＬｕｃａｓＬｅｈｍｅｒ定理进行推广，得到如下定理：Ｎ＝ｍ·２ｋ－１（ｋ＞２，１≤ｍ＜２ｋ），如果存在ａ＞２使（ａ－２Ｎ）＝１，（ａ＋２Ｎ）＝－１，则得到Ｌｕｃａｓ数列：ｖ０＝２，ｖ１＝ａ，ｖｎ＋２＝ａｖｎ＋１－ｖｎ，Ｎ为素数的充要条件是Ｎ｜ｖｎ＋...     

稻粉虱为害损失测定与经济阈值

稻粉虱Ａｌｅｕｒｏｃｙｂｏｔｕｓｉｎｄｉｃｕｓ是福建新发生的一种害虫．根据虫量和产量的关系,结合现行稻谷价格、产量水平、防治费用等因素,进行了稻粉虱为害损失的测定,确定允许为害损失率．同时,建立了经济阈值模型：ＥＴ＝１００×Ｃ×Ｆ／（０．０８５１×Ｐ×Ｎ×ＥＣ）＋１７９．４３（早稻穗期）;ＥＴ＝１００×Ｃ×Ｆ／（０．０７４６×Ｐ×Ｎ×ＥＣ）＋１６０．４７（晚稻孕穗期）．根据经济阈值模型,制定出不同产量水平的经济阈值．     

低能重离子对T1噬菌体和T1 dsDNA的影响及与紫外线效应的比较

以大肠杆菌噬菌体Ｔ１为材料,探讨了４０ｋｅＶＰ＋和Ｎ＋离子注入及３０ｋｅＶＮ＋离子脉冲式注入后,噬菌体的失活（以空斑形成能力即ＰＦＡ丧失为指标）及Ｔ１ＤＮＡ的琼脂糖凝胶电泳图谱的变化,并同紫外线（２５３．７ｎｍ）引起的相应效应进行了比较。结果表明：（１）离子注入组噬菌体的存活率低于对照组,其失活效应随剂量升高而提高;高剂量组的ＤＮＡ电泳图谱比对照组多一条分子量略小的弱带,且主带有明显拖尾现象,提示Ｔ１ＤＮＡ分子经离子注入后发生了部分主链的断裂;（２）紫外线照射对噬菌体的失活效应比离子注入组强烈得多,但其ＤＮＡ电泳图谱与对照组相比未见任何差异;（３）离子束的束流密度对噬菌体的失活效应也有一定影响。     

根癌农杆菌介导的mMT-IcDNA转化枸杞及其表达的研究

报道了小鼠金属硫蛋白－ＩｃＤＮＡ通过根癌农杆菌介导转入枸杞,并在枸杞体内表达产生富集锌的转基因枸杞。用带有嵌合ｍＭＴ－ＩｃＤＮＡ及ｃａＭＶ３５ｓ启动子的含非致癌性Ｔｉ质粒载体的概癌农杆菌ＬＢＡ４４０４（ｃａＭＶ３５ｓ：ｍＭＴ－ＩｃＤＮＡ：ｎｏｓ）感染枸杞幼茎外植体,在含有Ｋｍ１００μｇ／ｍｌ和Ｚｎ＾２＋５０μｍｏｌ／Ｌ的选择培养基上筛选转化的愈伤组织,并在含Ｋｍ５０μｇ／ｍｌ,Ｚｎ＾２＋１００μｍ     

贝母属4种核型的报道

对四川产的４种贝母进行了核型研究，米贝母ＦｒｉｔｉｌｌａｒｉａｄａｖｉｄｉｉＦｒａｎｃｈ，核型公式为２ｎ＝２ｘ＝２４＝２ｍ＋２ｓｍ＋１０ｓｔ＋１０ｔ，染色体相对长度系数Ｉ．Ｒ．Ｌ＝２Ｌ十２Ｍ２十７Ｍ１＋２ｓ核型为２Ｂ型，瓦布贝母ＦｒｉｔｉｌｌａｒｉａｗａｂｕｅｎｓｉｓＳ．Ｙ．ＴａｎｇｅｔＳ．Ｃ．Ｙｕｅｈ，核型公式为２ｎ＝２ｘ＝２４＝２ｍ＋２ｓｍ（ＳＡＴ）＋２０ｔ，染色体相对长度系数Ｉ．Ｒ．Ｌ＝４Ｌ＋６Ｍ２＋１２Ｍ１＋２Ｓ，核型为２Ｂ型；浓度贝母ＦｒｉｔｉｌｌａｒｉａｍｅｌｌｅａＳ．Ｙ．ＴａｎｇｅｔＳ．Ｃ．Ｙｕｅｈ，核型公式为２ｎ＝２ｘ＝２４＝２ｍ＋２ｓｍ＋２０ｔ，染色体相对长度系数Ｉ·Ｒ·Ｌ＝４Ｌ＋８Ｍ２＋１０Ｍ１＋２Ｓ，核型为３Ａ型；槽鳞贝母ＦｒｉｔｉｌｌａｒｉａｕｎｉｂｒａｃｔｅａｔａＨｓｉａｏｅｔＫ．Ｃｓｉａｖａｒ．ｓｕｌｃｉｓｑｕａｍｏｓａ（Ｓ．Ｙ．ＴａｎｇｅｔＳ．Ｃ．Ｙｕｅｈ）ＨｓｉａｏｅｔＳ．Ｃ．Ｙｕ，核型公式为２ｎ＝２Ｘ＝２４＝２Ｘ（ＳＡＴ）＋２ｓｍ＋１０ｔ，染色体相对长度系数Ｉ．Ｒ．Ｌ＝４Ｌ＋４Ｍ２＋１４Ｍ１＋２Ｓ，核型为３Ｂ型。该４种贝母核型较一致，但各种之间在次缢痕、随体、Ｂ染色体的数目?     

超声波对大白鼠离体血液流变性质的影响

目的：观察超声剂量对血液流变性质的影响。方法：对１０只大鼠心脏穿刺取血；以０Ｗ·ｃｍ＾－２（作为对照组）、０．５Ｗ·ｃｍ＾－２、１．０Ｗ·ｃｍ·＾－２和１．５Ｗ·ｃｍ＾－２超声剂量在２５．０±０．５℃下固定式辐照５ｍｉｎ；在２５．０±０．１℃下用锥板式粘度计等测量全血高切变率表观粘度等９项指标。结果：超声剂量组与对照组比较，全血高切率（２２５ｓ＾－１）表观粘度（Ｐ〈０．０１）、全血低功率（１１．２     

质粒拯救型T-DNA标签质粒的构建

[目的]为了高效率地获得转基因植物的旁邻序列。[方法]以pUC18及pWM101为出发质粒,通过用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切质粒pUC18,得到含大肠杆菌复制起点及氨苄青霉素抗性基因的pUC18大片断,并将这段DNA整合到pWM101的T-DNA之中构建重组质粒。[结果]该质粒利用根癌农杆菌转化植物后,可利用潮霉素筛选转化细胞,拯救质粒则可转化大肠杆菌后,以氨苄青霉素进行筛选。[结论]该研究为以后的用T-DNA标签研究植物功能奠定了基础。     

重离子束辐照对甜高粱幼苗存活率及抗氧化酶活性的影响

[目的]研究重离子束辐照甜高粱种子后对其发芽势、存活率和抗氧化酶活性、脂质过氧化作用等的影响,探讨重离子束辐照甜高粱的生物学效应。[方法]利用兰州重离子加速器产生的能量为100 MeV/u的12C6+离子束对2个甜高粱品系干种子进行剂量为0、40、80、120、160和200 Gy辐照,研究种子发芽势、存活率和抗氧化酶活性。[结果]重离子束辐照处理对甜高粱发芽势和存活率的影响变化不一致,发芽率呈现肩型下降趋势,但其对应的幼苗存活曲线总体上呈"类马鞍型"。SOD、POD、CAT及ASA-POD等的酶活性变化趋势也不相同,MDA含量随辐照剂量增加呈上升趋势,说明高剂量的重离子束辐照对甜高粱幼苗的膜损伤加重。[结论]重离子束辐照处理降低了甜高粱的发芽势和存活率,对甜高粱幼苗抗氧化酶活性有不同程度的影响,该研究结果为下一步进行重离子束辐照选育和改良甜高粱品种奠定了基础。     

简易快速高效制备T载体

[目的]制备成本廉价、使用方便、效率高的T载体。[方法]用PstI充分酶切纯化的质粒pUC19,再用T4DNA聚合酶消化15min,电泳得到T载体,进行质量检测,并与商品化的T载体pMD18-T进行对比。[结果]自制的T载体自连检测只发现2个菌落与PCR扩增片段连接。经转化大肠杆菌JM109,pMD18-T的平均白斑率为99.4%,转化菌落为3.55万个/μg,自制T载体的平均白斑率为99.7%,转化菌落为3.38万个/μg,完全可以与商品出售的T载体媲美。[结论]该研究自制的T载体自连率低,假阳性率低,克隆效率高,可替代商品化的T载体用于TA连接,而且制备时间短,成本低廉,技术简单,值得推广。     

Analysis of heavy-ion-induced DNA strand breaks in plasmid pUC18

Plasmid DNA was irradiated or implanted by mixed particle field(CR) or lithium-ion-beam to detect strand breaks.The primary results showed that mixed particle field could induce single and double strand breaks with positive linear-dose-effects;most of sequence changes induced by CR were point mutant.Lithium-ion-beam could induce strand breaks also,but it was only at dose of 20Gy.     

N~+离子束注入诱变选育生防菌枯草芽孢杆菌的研究(英文)

[目的]研究N+离子束注入对生防菌枯草芽孢杆菌存活率和突变率的影响。[方法]对离子束注入前样品处理方法进行优化,包括枯草芽孢杆菌液体培养时间、稀释浓度、稀释溶剂和菌膜干燥时间;采用N+离子束注入进行诱变处理,并通过平板对峙法和牛津杯法筛选菌株。[结果]N+离子束注入样品前处理最佳条件为:枯草芽孢杆菌液体培养20~24h,利用无菌水将菌液稀释到106个/ml,菌膜干燥时间为0~60min;离子束注入诱变的最佳条件为:注入能量30kev,剂量为2.0×1014~4.0×1014ions/cm2,枯草芽孢杆菌存活率为8.43%~26.71%,突变率为3.50%~5.43%。[结论]该研究结果为枯草芽孢杆菌离子束注入诱变育种方法的研究提供了参考依据,同时也为其他生防菌的辐射诱变育种奠定了基础。     

N+ 离子束注入诱变选育生防菌枯草芽孢杆菌的研究

[目的]研究N+离子束注入对生防菌枯草芽孢杆菌存活率和突变率的影响。[方法]对离子束注入前样品处理方法进行优化,包括枯草芽孢杆菌液体培养时间、稀释浓度、稀释溶剂和菌膜干燥时间;采用N+离子束注入进行诱变处理,并通过平板对峙法和牛津杯法筛选菌株。[结果]N+离子束注入样品前处理最佳条件为:枯草芽孢杆菌液体培养20～24 h,利用无菌水将菌液稀释到106个/ml,菌膜干燥时间为0～60 min;离子束注入诱变的最佳条件为:注入能量30 kev,剂量为2×1014～4×1014ions/cm2,枯草芽孢杆菌存活率为8.43%～26.71%,突变率为3.50%～5.43%。[结论]该研究结果为枯草芽孢杆菌离子束注入诱变育种方法的研究提供了参考依据,同时也为其他生防菌的辐射诱变育种奠定了基础。     

分式析因设计法对低能离子束介导参数的初步研究(英文)

[目的]利用分式析因法探索低能离子束介导各参数的生物学效应。[方法]以同源四倍体双胚苗水稻DER10-04-01为受体材料,以披碱草为DNA供体材料完成离子束介导试验,利用分式析因设计法对低能N+离子束介导外源基因转化水稻的参数进行初步研究。[结果]低能N+离子注入时所采用的能量、剂量、DNA浓渡和DNA浸泡时间等4个因素对DER10-04-01的正常生长发育产生明显的生物学效应,其中注入剂量与DNA浓度对其产生的生物学效应更明显。[结论]能量、剂量、DNA浓渡和DNA浸泡时间是离子束介导转化外源遗传物质中对试验效果具有重要影响的主要因素。     

Biological damage from intranuclear tritium: DNA strand breaks and their repair

Isotopic decay in tritiated thymidine in the DNA of frozen (-196 degrees C) Chinese hamster cells causes breaks in DNA strands to accumulate at a rate of 2.1 breaks per decay. After DNA is thawed the tritium-induced breaks repair rapidly with a half-time of 15 minutes at 37 degrees C. In comparison to breakage by x-rays, the efficiency of DNA strand breakage by tritium is equivalent to 0.48 rad per decay. This dose per decay is close to that predicted by simple dosimetric considerations (0.38 rad per decay) for irradiation by the beta particles from tritium.     

纳米碳粉和碳管对大肠杆菌抗紫外伤害的研究

[目的]研究碳纳米材料在紫外条件下对微生物细胞的生物学效应。[方法]以pUC19质粒的大肠杆菌（E.coli）为材料,研究多壁纳米碳管、纳米碳粉在不同紫外强度下对微生物存活率的影响。[结果]通过不同时间的紫外照射试验表明,加入纳米碳管可以有效增加存活菌落数目,而加入纳米碳粉也能提高微生物的存活率。[结论]碳纳米材料能够提高微生物在紫外条件下的生存率。     

猪C3d分子佐剂PRRSV GP5基因核酸疫苗的构建及免疫效果的研究

 【目的】构建猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5基因C3d-P28分子佐剂重组质粒,探明C3d-P28分子佐剂的免疫增强效果。【方法】用大肠杆菌疫苗对健康猪进行免疫激活,提取猪肝脏总RNA,RT-PCR克隆C3d-P28并连接至pUC19载体,构建pUC19-P28.n（2、4、6）串联体,然后分别将P28.n（2、4、6）连接至真核表达载体pcDNA3.1构建成 pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）。RT-PCR扩增PRRSV GP5基因,分别定向克隆至pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）中,构建pcDNA3.1-GP5-P28.n（2、4、6）重组质粒;提取重组质粒进行双酶切、电泳,同时用重组质粒转染Marc 145细胞,经间接免疫荧光进行蛋白表达检测,并用重组质粒免疫小鼠,通过ELISA试剂盒检测小鼠体内抗体、IL-4和IFN-γ的水平,检验重组质粒的免疫效果。【结果】从猪肝脏中克隆了C3d cDNA,构建了pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）串联体,并将PRRSV GP5基因定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1-P28.n（2、4、6）中,构建了PRRSV GP5重组质粒（pcDNA3.1-GP5-P28.2、pcDNA3.1-GP5-P28.4、pcDNA3.1-GP5-P28.6）;通过检测小鼠血清中抗体、IL-4和IFN-γ的结果显示,抗体效价、IL-4和IFN-γ含量均比对照组高,且以pcDNA3.1-GP5-P28.6组的效果最好,与空白对照及PCDNA3.1-GP5组比较差异均显著（P<0.05）。【结论】构建了猪补体C3d-P28分子佐剂PRRSV GP5重组质粒,该质粒可刺激机体产生较高的体液免疫和细胞免疫水平,补体 C3d-P28分子佐剂能显著增强PRRSV GP5基因的免疫效果。