植物流式细胞遗传学及其应用研究进展*

 流式细胞遗传学是利用流式细胞术对植物有丝分裂细胞的染色体进行分离、纯化和分选等操作的细胞遗传学分支学科,已在许多领域广泛的应用,如与DNA 分子标记结合进行物理作图,利用FISH和PRINS进行细胞遗传作图,重组DNA文库的构建,标记片段的定向分离以及蛋白质分析。利用流式细胞技术已对数十种植物物种进行了染色体分析,应用最多的是豆类作物和禾谷类作物。流式细胞术有许多潜在的利用价值,主要包括植物染色体和染色体臂特异BAC文库的构建,低拷贝序列的目标分离,ESTs和杂交DNA 序列的高产量作图以及对染色体蛋白的整体分析等。本文综述了植物流式细胞遗传学的研究方法及其在植物研究中的应用,并对其在植物基因组分析的潜在利用价值作了展望。     

植物染色体微分离微克隆技术研究进展与展望

染色体微分离与微克隆技术是细胞遗传学与分子遗传学相结合的一项桥梁技术 ,近年来在植物中的应用日渐活跃 .本文综述了该技术在植物中的研究进展 ,并对其应用前景作了展望     

植物染色体微分离微克隆技术研究进展与展望

染色体微分离与微克隆技术是细胞遗传学与分子遗传学相结合的一项桥梁技术，近年来在植物中的应用日渐活跃，本文综述了该技术在植物中的研究进展，并对其应用前景作了展望。     

本科细胞遗传学核心实验的模块化教学探索

细胞遗传学实验是本科遗传学教学中的重要内容,但由于课时的限制往往无法全部完成。在对现有遗传学实验教材进行分析的基础上,按照模块化设计将细胞遗传学核心实验分解为染色体诱变技术、染色体标本制备技术、染色体分析技术3个模块,在此基础上开展综合性、设计性实验教学,以期为提高细胞遗传学实验教学质量提供参考。     

染色体涂染技术与动物分子细胞遗传学的建立和发展

染色体涂染 （ Ｃｈｒｏｍ ｓｏｍ ｅ ｐａｉｎｔｉｎｇ） 是一项在分子细胞遗传学水平上检测染色体重组和畸变的新技术, 包括染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针制备和荧光标记原位杂交两部分。制备染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针可通过流式细胞分类法, 克隆基因库或体细胞杂交株, 以及染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增等途径, 现侧重综述近几年国际上用染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增的方法制备探针进行家畜染色体涂染的实验技术和主要成果。研究结果表明,用该技术进行家畜染色体涂染具有很高的特异性和分辨力, 可用来检测家畜染色体畸变、性别鉴定、显微克隆等, 提高了对家畜染色体 Ｄ Ｎ Ａ 研究和分析的能力, 从而促进了动物分子细胞遗传学这一新的边缘学科的建立和发展。     

染色体研究的新方法与新进展

从染色体显微分离与显微克隆、染色体连锁图谱、染色体原位杂交、染色体涂染、染色体的基因定位以及染色体的片段转移等几个方面,分别综述了染色体研究的新方法和新进展,并展示了分子细胞遗传学的发展前景。     

细胞遗传学及其在家畜育种中的应用

本文从家畜育种角度概括介绍了细胞遗传学的重要研究成果。主要内容有:细胞遗传学发展概况;染色体分染技术的作用特点;细胞遗传学在家畜育种中的应用,以及哺乳动物和家畜细胞遗传工程研究动态。     

动物细胞遗传学研究现状及其应用

本文介绍了细胞遗传学在动物方面的研究现状及其在畜牧业上的应用。细胞遗传学的研究主要以染色体为对象。目前世界上现存的哺乳动物约4100多种,其中进行过染色体研究或核型分析的有1468种,我国已研究过的有242种。细胞遗传学在人类医学上的应用是众所周知的,在畜牧业上主要用于对种畜进行细胞学检查,以消除对家畜繁殖性能有影响的畸变染色本,以染色体标记来识别家畜品种,对环境污染的监测及遗传操作中的染色体工程。     

染色体研究的新方法与新进展

从染色体显微分离与显微克隆、染色体连锁图谱、染色体原位杂交、染色体涂染、染色体的基固定位以及染色体的片段转移等几个方面，分别综述了染色体研究的斯方法和新进展，并展示了分子细胞遗传学的发展前景。     

植物三体研究综述——形态特征、细胞学行为、雌雄配子传递率及应用

植物三体是遗传学研究中非常重要的非整倍体材料，对植物三体的表现型效应，导致三体表现型异常的原因，导致减数分裂过程中染色体配对及分离异常，造成额外染色体雌雄配子传递率低的原因及其在鉴别易位染色体和遗传图谱构建中的用途等方面进行了综述。     

染色体微切割、微克隆技术及其应用

介绍了染色体微切割、微克隆技术的原理及主要方法，并讨论了该技术在植物中的应用。     

大麻染色体制片技术

[目的]探究大麻染色体的制片技术。[方法]对大麻染色体制片技术的预处理液、解离时间、染色时间等进行试验研究,并对其进行染色体数目观察。[结果]研究表明:用大麻根尖在常温下用0.003%的8-羟基喹啉溶液预处理2 h或用饱和对二氯苯处理1.5 h,经卡诺固定液固定30 min后,在1∶1的1 mol/L HCl和45%醋酸60℃下恒温水浴中解离30 s,地衣红染液染色8 h压片镜检,能取得良好的制片效果。大麻染色体数目观察表明,大麻染色体数目2n=2x=20。[结论]该研究为大麻细胞学方面的深入研究提供了资料。     

花鱼骨染色体核型的研究

[目的]为了解和确定韶关地区花鱼骨的分类地位及演化关系。[方法]采用PHA和秋水仙素活体注射、肾细胞培养和空气干燥制片技术,制备花鱼骨的染色体。[结果]花鱼骨体细胞的染色体数目2n=50,核型公式为16 m+14 sm+16 st+4 t,NF=80。[结论]韶关花鱼骨在染色体系统演化上没有明显的数目和形态变化。     

植物染色体微分离、微切割与微克隆技术的研究进展

介绍了染色体微分离、微切割与微克隆技术的发展历史;综述了植物染色体微分离、微切割和微克隆技术的研究进展及其应用与展望。     

雌雄异株植物性染色体演化研究进展

植物的性别分化是植物发育生物学的热点问题,而植物性染色体的研究有助于阐明性染色体起源和演化的机制,因此成为研究植物性别分化的重点领域。对模式种雌雄异株植物番木瓜、白麦瓶草和酸模性染色体研究进展以及性染色体演化进行了概述,以期为后续的研究奠定基础。     

果蝇唾腺染色体的制作技术研究

[目的]为果蝇唾腺染色体试验教学及相关研究提供成熟的制作技术。[方法]以野生型果蝇三龄幼虫为试验材料,通过三龄幼虫培养、唾腺剥离、压片、解离、染色等完整的制片过程探索染色体制片规律。[结果]利用镊子柄部进行压片效果很好,染色体伸展充分。通过比较4种染色试剂（苏木精、醋酸洋红、卡宝品红和改良苯酚品红）的染色效果选出的最佳试剂为改良苯酚品红。[结论]该研究为果蝇唾腺染色体的制作提供了成熟的技术参考。     

去壁低渗法制备长寿沙田柚染色体标本的研究

为了给长寿沙田柚的染色体核型分析、细胞遗传学研究和良种培育提供参考依据,以其幼叶为研究材料,设计4种前低渗时间和12种酶解方式处理,对制片效果的影响进行了研究。结果表明:预处理后的材料经前低渗60min后,用0.2%纤维素酶∶0.2%果胶酶(3∶1,v/v)混合酶液37℃酶解80min,可得到理想的制片效果,背景干净,染色体分散、清晰。     

多倍体西瓜染色体制片技术改良及其核型分析

[目的]改良多倍体西瓜染色体标本制片技术,比较多倍体西瓜常规核型分析与荧光核型分析结果,为西瓜细胞遗传学研究及辅助构建西瓜物理遗传图谱提供参考依据.[方法]以多倍体西瓜为材料,以传统染色体制片方法去壁—低渗火焰干燥法为基础,去掉其前低渗和后低渗两个步骤,合并其再固定与火焰涂片两个步骤,用吉姆萨染色剂和荧光染料DAPI分别对多倍体西瓜染色体进行常规染色和荧光染色,并进行核型分析.[结果]使用改良型酶解去壁火焰干燥法进行多倍体西瓜染色体制片,比传统去壁—低渗火焰干燥法简化了用KCl溶液前低渗、后低渗及用卡诺固定液再固定3个步骤,可缩短制片时间1.0~2.0 h,提高制片效率,获得的染色体样本数目齐全、分散良好、形态清晰.用DAPI染色比用吉姆萨染色更容易检测到细胞中期分裂相,每张玻片可缩短检测时间0.5~1.5 h;染色体的着丝点、长臂及短臂形态更清晰.[结论]采用改良染色体制片方法可提高多倍体西瓜染色体的制片效率,对该制片进行荧光核型分析比常规核型分析更准确,效率更高.     

果蝇(Drosophila melanogaster)唾腺染色体的制备及染色体识别

果蝇(Drosophila melanogaster)唾腺染色体的制备与分析是果蝇细胞遗传研究的基本实验技术,也是非常流行的遗传学教学实验。国内绝大多数的实验教材介绍了这个实验的操作方法,但对于如何辨别染色体各条臂,并进而识别具体的带纹均未予以介绍。笔者详细介绍唾腺染色体的制备及拍摄、数码照片拼接方法;并着重介绍如何根据各条臂端粒端的形态特征,以及利用Lefevre的唾腺染色体照片图谱中指示的蓬突(puff)、缢缩及带纹组合特征识别染色体臂的方法,供研究和实验教学参考。