染色体研究的新方法与新进展

从染色体显微分离与显微克隆、染色体连锁图谱、染色体原位杂交、染色体涂染、染色体的基因定位以及染色体的片段转移等几个方面,分别综述了染色体研究的新方法和新进展,并展示了分子细胞遗传学的发展前景。     

染色体涂染技术与动物分子细胞遗传学的建立和发展

染色体涂染 （ Ｃｈｒｏｍ ｓｏｍ ｅ ｐａｉｎｔｉｎｇ） 是一项在分子细胞遗传学水平上检测染色体重组和畸变的新技术, 包括染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针制备和荧光标记原位杂交两部分。制备染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针可通过流式细胞分类法, 克隆基因库或体细胞杂交株, 以及染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增等途径, 现侧重综述近几年国际上用染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增的方法制备探针进行家畜染色体涂染的实验技术和主要成果。研究结果表明,用该技术进行家畜染色体涂染具有很高的特异性和分辨力, 可用来检测家畜染色体畸变、性别鉴定、显微克隆等, 提高了对家畜染色体 Ｄ Ｎ Ａ 研究和分析的能力, 从而促进了动物分子细胞遗传学这一新的边缘学科的建立和发展。     

黄花梨1号染色体的显微分离

用果胶酶和纤维素酶酶解黄花梨花药制备染色体标本,从大量减数分裂中期1分裂相中选择分散良好的染色体进行拍照和组型分析,建立核型图。根据核型识别目标1号染色体,应用显微操作系统成功进行单染色体分离。     

山羊单条染色体激光显微切割的研究

激光显微切割技术已经成为一种能够快速稳定地从复杂组织获取均一样本的工具,该技术已经有了较为广泛的应用,并随着研究的不段深入,成为单细胞的分离和表达研究必不可少的应用工具。目前,使用激光显微切割分离细胞等研究已非常广泛,但在单条染色体分离的研究上,报道甚少,尤其在山羊上还没有激光显微切割的相关报道。因此,针对山羊单条染色体的分离进行细胞培养、膜玻片核型制备和激光显微切割等条件摸索,确定在ConA刺激剂作用下,培养48h后加入秋水仙素作用淋巴细胞5h,细胞生长良好,可以分离和获得较为理想的单条染色体。为大型哺乳动物的单条染色体分离研究提供借鉴。     

黄花梨1号染色体的显微分离

用果胶酶和纤维素酶酶解黄花梨花药制备染色体标本,从大量减数分裂中期Ⅰ分裂相中选择分散良好的染色体进行拍照和组型分析,建立核型图.根据核型识别目标1号染色体,应用显微操作系统成功进行单染色体分离.     

数码显微互动系统在遗传学实验教学中的应用——以人工诱发染色体畸变的观察为例

传统的教学方法和教学手段已不能满足遗传学实验课程,教师要利用数码显微互动系统,改变传统教学模式。本文以人工诱发染色体畸变为例,介绍了数码显微互动系统在遗传学实验中的应用。结果表明,数码显微互动系统在遗传学实验课程中应用后能提高师生互动,激发学生的学习兴趣,提高课堂效率。     

染色体显微切割和微克隆技术研究进展

本文对染色体显微切割和微克隆技术的初创、应用和发展前景作文献回顾。     

染色体微切割、微克隆技术及其在植物上的应用

染色体显微切割、微克隆技术是由细胞遗传学通往分子遗传学研究的直接桥梁。本文就其概念、发展现状、应用前景以及在植物染色体研究中存在的困难等进行了综述。     

尼罗罗非鱼X和Y染色体原位杂交探针的制备

通过染色体显微切割的方法，分别从尼罗罗非鱼XX和YY个体有丝分裂中期相染色体滴片上，割取第1对染色体，随后经简并PCR扩增，分别用生物素和地高辛标记，得到X和Y染色体探针。将探针与尼罗罗非鱼XY个体的染色体进行荧光原位杂交，在第1对染色体上得到很强的杂交信号。结果表明，染色体显微切割和简并PCR技术相结合，可以有效地制备鱼类DNA探针。     

高等植物显微分离技术应用进展

本文从植物染色体、有性生殖细胞、体细胞和合子的显微分离及相关研究等方面综述了植物显微分离技术的研究进展,并对其应用前景作了展望。     

离子注入引起银杏种子M1代染色体畸变的研究

本文报道了离子注入引起银杏Ｍ１代染色体畸变的结果。研究表明,Ｎ＋离子辐照银杏种子后,胚根细胞中出现了核异常和染色体畸变,显微观察发现有多核、染色体桥、游离染色体和落后染色体,畸变频率在０．８～ｌｌ．２％。随着辐照剂量的提高,畸变频率增大,畸变类型增多。发芽试验结果与染色体损伤结果相符。     

重离子对四种作物的生物学效应——Ⅱ 重离子对作物胚根细胞中染色体畸变频率的影响

本文给出了46.6MeV/amuC~(6+)离子对四种不同作物胚根细胞中染色体畸变的实验结果。由显微观察发现了微核、小核、桥、断片、游离染色体和环状染色体等多种畸变类型;畸变频率在0.9—179.8‰之间。辐照剂量与畸变频率之间呈显著的正相关性。文中对四种作物之间染色体畸变频率的差异以及畸变频率与种子萌发能力之间的关系进行了讨论,提出了重离子束可以成为作物辐射育种的一种有效的诱变源。     

染色体分离技术及其在植物中应用研究进展

染色体分离技术是分子遗传学和细胞遗传学的桥梁技术,得以在诸多领域广泛应用。就染色体分离技术的原理、主要流程及存在的主要问题进行了总结,同时对该技术在植物中应用研究进展进行了阐述。     

松栎柱锈菌对兴凯湖松细胞染色体的影响

对兴凯湖松健株和被松栎柱锈菌侵染的病株种根尖细胞，做显微观察及核型分析，结果表明：兴凯湖松被侵染后，其细胞分裂相减少，分裂相细胞粘滞性增强。细胞核型由对照的４Ａ变成４Ｂ，但细胞染色体数目和核型构成没有发生变化。     

新疆额尔齐斯河流域白斑狗鱼的染色体核型分析

采用PHA和秋水仙素胸腔体内注射法,以头肾组织为材料,低渗-空气干燥法制片,对取自新疆额尔齐斯河流域白斑狗鱼的染色体核型进行了分析。经对5尾白斑狗鱼的45个中期分裂相进行显微分析和测量,结果显示:白斑狗鱼的25对染色体均为端部着丝粒染色体,其核型公式为2n=50 t,NF=50。白斑狗鱼染色体大小的绝对值为0.96~1.36μm,平均长度为1.20μm。25对染色体相对长度大小依次递减,大小差异较显著,平均值为5.68。目前,对新疆额尔齐斯白斑狗鱼的染色体组型研究尚未见报道。     

新疆额尔齐斯河流域白斑狗鱼的染色体核型分析

采用PHA和秋水仙素胸腔体内注射法,以头肾组织为材料,低渗-空气干燥法制片,对取自新疆额尔齐斯河流域白斑狗鱼的染色体核型进行了分析。经对5尾白斑狗鱼的45个中期分裂相进行显微分析和测量,结果显示:白斑狗鱼的25对染色体均为端部着丝粒染色体,其核型公式为2n=50 t,NF=50。白斑狗鱼染色体大小的绝对值为0.96~1.36μm,平均长度为1.20μm。25对染色体相对长度大小依次递减,大小差异较显著,平均值为5.68。目前,对新疆额尔齐斯白斑狗鱼的染色体组型研究尚未见报道。     

银黑狐的核型分析

采用外周血液淋巴细胞培养的方法，对银黑狐的染色体进行了分析，结果表明，银黑狐二倍体细胞的染色体数目为２ｎ＝３６，分狐核型为３６，ｘｙ，母狐为３６，ｘｘ。在常染色体中还存在０－４条Ｂ染色体。     

银杏第1染色体DNA文库的构建

观察了50个银杏根尖的染色体,发现在约半数根尖中,最大的1对染色体(第1染色体)随体有差异,其中1条随体较大而明显,另1条则很小.采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离了随体较为明显的那条第1染色体.将分离到的单条染色体去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头,进行2轮PCR扩增,得到了大小为300-3000bp的扩增片段.用第2轮PCR产物构建质粒文库,得到了约含有75000个重组子的该染色体DNA文库.随机挑取66个重组子进行分析,发现插入片段大小主要分布在500-2000bp,平均为800bp.该文库为银杏第1染色体特异探针的筛选、遗传图谱的构建、重要基因的克隆以及性染色体的鉴别等研究提供了基础.     

简易压片法观察水稻有丝分裂和减数分裂行为

[目的]建立一套简单易行的染色体压片技术,获得水稻染色体资料。[方法]以水稻根尖和花药为材料,采用改进后的压片法进行制片,对水稻有丝分裂和减数分裂过程进行显微观察取像。[结果]水稻有丝分裂包括间期、前期、中期、后期、末期5个时期,中期的染色体缩至最短,是观察与研究染色体的好时期。水稻减数分裂包括减数分裂Ⅰ、减数分裂Ⅱ 2个过程,其中在减数分裂I 过程中发生了染色体复制,减数分裂Ⅱ过程中仅发生了细胞分裂。[结论]改进后的水稻染色体压片技术能够获得准确的染色体资料,可为育种和遗传操作提供依据。     

京枣试管苗染色体稳定性观察

以继代培养20代后经生根培养基生根的京枣试管苗为试验材料,用常规染色体压片和显微观察相结合的方法对根尖进行染色体数目观察,结果显示,京枣试管苗的染色体数目2n=24条的占85%,说明经继代培养的京枣试管苗仍保持遗传稳定性。