生长激素与奥曲肽对肥胖小鼠SOCS转录表达的影响

【目的】探讨在肥胖状态下,生长激素和奥曲肽对信号转导抑制因子(SOCS)转录表达的影响,为进一步探索生长激素通路参与肥胖形成的可能机制提供理论和实验依据。【方法】利用高脂日粮诱导小鼠肥胖模型,用外源性生长激素和生长抑素类似物奥曲肽处理肥胖小鼠,记录体质量变化,观察皮下脂肪、附睾脂肪和肾周脂肪的沉积情况,检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)含量,同时利用RT-PCR法分析与生长激素密切相关的信号转导抑制因子1,2,3(SOCS1,SOCS2和SOCS3)mRNA的表达。【结果】外源性生长激素处理并不能减少肥胖小鼠脂肪沉积,反而增加了体脂含量(P<0.01),血清中TG、TC、HDL-C和LDL-C含量无显著变化,而SOCS1、SOCS2和SOCS3 mRNA水平显著增加(P<0.01);奥曲肽处理减少了体脂含量(P<0.01),血清中TG、TC和HDL-C含量显著减少(分别为P<0.05,P<0.05和P<0.01),SOCS1和SOCS3 mR-NA表达水平显著减少(P<0.01),但SOCS2却显著增加(P<0.01)。【结论】在肥胖状态下,生长激素并不能减少体脂沉积,但生长抑素类似物奥曲肽却能够减少体脂含量;SOCS1和SOCS3可能参与此作用机制,而SOCS2对于生长激素信号通路变化更敏感。     

次黄嘌呤对小鼠脂质代谢的影响

采用高脂饮食建立营养性肥胖小鼠模型,连续口服给药4周后收集血液和肝脏。通过荧光定量PCR技术对小鼠肝脏中AP-2、PPAR-γ和LPL基因的mRNA相对表达量进行分析。以小鼠体质量增长率、脂肪质量、总胆固醇、甘油三脂等和小鼠肝脏中AP-2、PPAR-γ和LPL基因的mRNA的相对表达量为指标,观察次黄嘌呤的减肥作用。结果表明:经给药后,给药组对小鼠体内脂肪有不同程度的干扰作用,小鼠脂肪质量显著减少(P0.05),肥胖小鼠血清总胆固醇和甘油三酯水平降低,LDL-C和LPS的水平也得到明显改善(P0.05)。其中次黄嘌呤低剂量给药组和次黄嘌呤中剂量给药组对于降低肥胖小鼠的脂肪质量均有效果。     

保健红薯粉对单纯性肥胖大鼠的减肥效果

为探明添加魔芋粉等功能性物质的红薯粉条对单纯性肥胖大鼠的减肥效果,以混合5克保健红薯粉的高脂饲料喂养肥胖大鼠40天,剖腹取体脂肪并称重,同时测定相关血清指标。结果表明:保健红薯粉能抑制肥胖大鼠的体重增长,减轻肥胖大鼠的体内脂肪堆积,对摄食量无影响;还可显著降低肥胖大鼠血清甘油三酯、血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和提高高密度脂蛋白胆固醇含量。     

长白山果蔬发酵物对肥胖大鼠的减肥功效研究

[目的]探究不同剂量长白山果蔬发酵物对肥胖大鼠的减肥功效。[方法]75只雄性Wistar大鼠于屏障系统下喂饲基础饲料7 d,使大鼠适应环境。适应期结束后按体重随机分成空白组和试验组,空白组给予基础饲料,试验组给予高脂饲料;喂养14 d后,试验组大鼠按体重增量排序,淘汰体重增量后1/3的肥胖抵抗大鼠;将剩余肥胖敏感大鼠按体重随机设置为模型组及低、中、高3个剂量组[5、10、20mL/(kg·d)],持续灌胃42 d。[结果]体重及体重增量:模型对照组比空白对照组显著增加(P<0.05),中剂量组和高剂量组显著低于模型对照组(P<0.05)。体内脂肪重量:模型对照组高于空白对照组,差异显著(P<0.05),各剂量组均低于模型对照组,差异显著(P<0.05)。摄食量:高剂量组分别低于空白及模型对照组,差异显著(P<0.05)。生化指标:中剂量组和高剂量组高密度脂蛋白胆固醇高于模型对照组,差异显著(P<0.05),中剂量与高剂量组甘油三酯和总胆固醇显著低于模型对照组(P<0.05)。[结论]中剂量长白山果蔬发酵物对肥胖大鼠具有减肥功效。     

运动对高脂饮食大鼠下丘脑SOCS-3和BDNF以及瘦素抵抗的影响

目的：观察运动对高脂饮食大鼠血清和下丘脑瘦素（Leptin）以及下丘脑 瘦素长型受体（OB-Rb） 、促黑皮素受体4（MC4R）、细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3） mRNA表达和脑源性神经营养因子（ BDNF）的影响,探讨适宜运动对高脂饮食大鼠预防肥胖的部分中枢机制。方法：雄性SD鼠24只,随机分为 正常对照组（C组）,高脂模型组（H组）和高脂 60min 运动组（HE组）,每组8只。高脂模型组和高脂 60min 运动组大鼠喂饲高脂饲料,高脂饮食运动组大鼠进行60min的无负重游泳运动。持续10周。结果： 10周运动后,高脂模型组大鼠较正常对照组大鼠体重、Lee''S指数、体脂、脂体比均显著增高(p<0.05), 血清瘦素水平显著升高(p<0.05),下丘脑内OB-Rb、MC4R mRNA表达量显著降低(p<0.05),SOCS-3 mRNA表 达量显著升高(p<0.05),下丘脑BDNF含量显著降低(p<0.05);高脂60min运动组较高脂模型组大鼠体重显 著降低(p<0.01),Lee''S指数、体脂、脂体比均显著降低(p<0.05),血清瘦素水平显著升高(p<0.05),下 丘脑OB-Rb、MC4R、leptin mRNA表达量显著升高(p<0.05),下丘脑SOCS-3 mRNA表达量显著降低(p<0.05) ,下丘脑BDNF含量显著升高(p<0.05)。结论：长期适宜的运动可通过降低下丘脑SOCS-3的表达,增加下丘 脑Leptin 与受体OB-Rb的结合,降低了瘦素抵抗,激活下丘脑含 MC4R 受体的神经元,从而刺激 BDNF 的 释放,从而起到预防高脂饮食引起肥胖的作用。     

荷叶总生物碱降脂减肥作用的体内外试验

通过体内、体外试验探究荷叶总生物碱的降脂减肥作用.给予高脂血症大鼠模型组不同剂量荷叶总生物碱和降脂药物辛伐他汀(阳性药物对照组),观察荷叶总生物碱对高脂血症大鼠体质量、体脂以及血清脂质相关指标的影响;用对硝基苯酚法检测不同质量浓度荷叶总生物碱处理对大鼠胰脂肪酶活性的影响.结果显示:荷叶总生物碱能显著降低高脂血症大鼠的体质量,显著降低血清总胆固醇、血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量,显著降低谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性以及动脉粥样系数,升高高密度脂蛋白胆固醇/血清总胆固醇比值;荷叶总生物碱能抑制脂肪酶活性,抑制类型为非竞争性抑制;在荷叶总生物碱质量浓度为12.5～600μg/mL范围内,对脂肪酶的抑制效果随其质量浓度的增加而增强,在600μg/mL时达到最大抑制率,为25.6%,当荷叶总生物碱质量浓度继续增加时,抑制率趋于平缓,保持在最大值附近.体内、体外试验结果均表明,荷叶总生物碱类物质具有降脂减肥作用,提示其可能具有预防肥胖、调节脂代谢紊乱的功效.     

Nesfatin-1在雌性大鼠生殖轴上的表达及对其初情期的影响

[目的]本研究旨在探究Nesfatin-1在雌性大鼠生殖轴上的表达及其对初情期启动的影响。[方法]以雌性SD大鼠为研究对象,采用免疫组化技术对成年雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴(HPOA)上的Nesfatin-1/Nucb2蛋白进行定位;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法分析Nesfatin-1/Nucb2、Tac2、Gnrh mRNA在雌性大鼠的不同发育阶段(幼年期、初情期前、初情期和成年期)下丘脑转录水平的变化;对初情期前(25日龄)的雌性大鼠进行侧脑室注射Nesfatin-1,在阴门开启时取下丘脑、垂体、卵巢和血清,用RT-qPCR分析下丘脑中Gnrh、ERα,垂体中GnrhR、FSHβ、LHβ及卵巢中FSHR、LHR mRNA的转录水平变化,用ELISA检测血清E_2的水平。[结果]Nesfatin-1主要分布于弓状核(ARC)、室旁核(PVN)、下丘脑外侧区(LHA)、视上核(SON)、腺垂体、卵母细胞、黄体细胞、间质细胞、颗粒细胞。Nesfatin-1/Nucb2、Tac2、Gnrh mRNA在不同发育阶段大鼠下丘脑中表达水平均呈先上升后下降的趋势,且Nesfatin-1/Nucb2与Tac2 mRNA表达变化的趋势大体一致,呈正相关(r=0.940,P0.001),在初情期前表达水平最高(P0.01)。对25日龄雌性大鼠侧脑室注射Nesfatin-1可使初情期启动提前10 d左右,并显著增加卵巢重(P0.05)和血清中E_2浓度及生殖轴Gnrh、GnrhR、LHβ、LHR、FSHβ、ERα mRNA表达水平(P0.05),但不影响FSHR mRNA的表达。[结论]Nesfatin-1在HPOA轴均有表达,Nesfatin-1通过上调Gnrh及其受体等生殖相关基因的表达而促进大鼠初情期的启动。     

大豆异黄酮干预肥胖大鼠肝氧化应激及炎症反应

本研究旨在探究不同剂量大豆异黄酮(soy isoflavones,SIF)干预肥胖大鼠后肝的氧化应激及炎症反应情况。准备80只SD大鼠,普通饲料喂养16只SD大鼠做空白对照;高脂饲料喂养64只SD大鼠9周建立肥胖大鼠模型,将64只模型大鼠随机分成4组,每组16只,大豆异黄酮(0、150、300、450 mg·kg^-1)灌喂,每周定期测量体重,连续干预4周。取肝脏组织,苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色观察肝脏组织形态学结构;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;荧光定量PCR方法检测肝脏组织中促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。组织病理学发现,肥胖大鼠出现典型的肝细胞脂肪变性伴肝组织炎性损伤,肝SOD、CAT和GSH-Px水平降低,IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA表达水平升高。大豆异黄酮干预后,各剂量组肝组织病理损伤得到改善,抗氧化因子活性显著提高并呈剂量效应,促炎因子表达水平显著下调。大豆异黄酮可逆转肥胖致肝组织病理损伤和提高肝脏抗氧化活性,下调肥胖相关促炎因子基因的表达,上述结果可为大豆异黄酮的应用开发提供参考。     

抗阻、耐力运动对肥胖小鼠肝脏自噬相关蛋白表达的影响

为探讨抗阻、耐力运动对肥胖小鼠肝脏自噬相关蛋白活性的影响,将100只4周龄C57BL/6雄性小鼠进行8周高脂饲料喂养,得到32只肥胖小鼠。将肥胖小鼠随机分为4组,分别为高脂喂养对照组(HHC组)、普通饲料对照组(HNC组)、普通饲料+有氧运动组(HNE组)、普通饲料+抗阻运动组(HNR组),每组8只,HNE和HNR组分别进行8周跑台和爬梯训练。ELISA法检测血糖及肝脏中总胆固醇(TC)和总三酰甘油(TG)含量,Western blot法检测小鼠肝脏自噬相关蛋白表达量。结果表明：8周高脂膳食干预后,小鼠肝脏自噬相关蛋白Beclin-1表达量显著降低,p62蛋白表达量显著升高;8周抗阻和耐力运动可显著降低肥胖小鼠血清和肝脏TG和TC含量,小鼠肝脏自噬相关蛋白Beclin-1表达量、LC3Ⅱ/Ⅰ比值均显著升高,p62蛋白表达量显著降低,不同运动形式间3种自噬相关蛋白均未发现显著差异。综上,高脂膳食可使肝脏自噬水平降低,体内脂质积累增加,而抗阻和耐力运动均可促进肥胖小鼠肝脏自噬水平提高,促进肝脏脂质代谢,且2种运动形式间无显著差异,抗阻和耐力运动均可作为预防和治疗肥胖及其相关肝脏疾病的辅助手...     

原花青素对肥胖小鼠脂肪沉积的抑制

探讨葡萄籽提取物原花青素对肥胖小鼠脂肪沉积的影响.用高脂日粮饲喂小鼠建立肥胖模型,然后分别用低剂量[50 mg/(kg·d)]、中剂量[100 mg/(kg·d)]和高剂量[200mg/(kg·d)]的葡萄籽提取物原花青素灌胃处理15 d,记录体质量变化,检测血清中TG、T-CHO、LDL-C和HDL-C浓度,检测葡萄糖耐受性和胰岛素耐受性,同时利用Real-ime PCR分析PPARy、C/EBPα、HSL和FAS mRNA的表达水平.结果表明,葡萄籽提取物原花青素可降低肥胖小鼠体质量,并呈现一定的剂量依赖性.各处理组血清中总T-CHO、TG和LDL-C浓度均显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)降低,而HDL-C浓度显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)升高.同时,各处理组注射葡萄糖有改善肥胖小鼠高血糖的趋势.注射胰岛素后,原花青素可改善肥胖小鼠对胰岛素的抵抗状况.各处理组附睾脂肪组织中C/EBPa、FAS和PPARyγ基因mRNA的表达水平均显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)低于对照组,而HSL mRNA表达水平则呈现显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)升高.由此可知,葡萄籽提取物原花青素可抑制肥胖小鼠脂肪沉积,降低血脂,同时通过影响脂代谢相关基因的表达和葡萄糖、胰岛素耐受性共同调节小鼠脂肪代谢.     

品牌符号对农产品消费的预期理论研究

农业是产品同质化程度最深的产业,所以农产品比一般的产品更需要品牌来形成差异,而品牌区分同质化产品主要依赖的就是品牌符号。笔者基于行为经济学里的预期理论对品牌符号如何影响消费者购买农产品展开了研究,并从理论上提出了利用预期理论使品牌符号对消费者购买农产品施加积极影响的3点策略,以期能够丰富国内关于建立农业品牌的理论。     

Loxp序列位置对基因表达的影响

【目的】先选用绿色荧光蛋白基因（egfp）作为试验基因构建loxp位点位于egfp基因上游或下游不同位置的表达结构,对loxp位点的位置对基因表达的影响进行初步分析。然后以植酸酶（phytase）基因为另一个试验基因对通过egfp基因得出的结果进行进一步验证。研究结果为开展通过基因打靶技术将外源基因与内源基因通过2A序列连接共表达的转基因动物制作中,打靶位点的选择提供可靠依据。【方法】先选择增强绿色荧光蛋白基因（egfp）为试验基因,红色荧光蛋白基因（dsred2）为内参基因。以pEGFP-N2、pGEM-5zf-loxp质粒为基础,构建了ploxp-EGFP（loxp序列位于egfp基因开放阅读框的Kozak序列上游的5′非翻译区）、pEGFP-loxp（loxp序列位于egfp基因开放阅读框的终止密码子下游的3′非翻译区）、ploxp-EGFP-loxp（egfp基因开放阅读框的Kozak序列上游5′非翻译区和终止密码子下游3′非翻译区各有一个loxp序列）。以pEGFP-N2质粒为对照质粒,以pDsRed2-N1为内参质粒,与所构建的egfp基因各表达质粒共转染PK15细胞,转染24h后在荧光显微镜下观察荧光表达情况,用荧光分析软件Image J进行荧光强度分析并记录荧光强度,进而应用SPSS19.0软件对各转染荧光表达情况进行分析,确定loxp序列的位置对基因表达的影响。为了对以egfp基因为试验基因所得到的结果进行进一步验证,本试验选择植酸酶（phytase基因）基因为试验基因,egfp基因为转染内参基因萤火虫荧光素酶基因（luciferase基因）为表达内参基因。以pIREsNEo、pGEM-5zf-loxp和pT-phytase、pGL4.13[luc2/SV40]质粒为基础。构建了p-SV40-luciferase-CMV-loxp-phytase（loxp序列位于phytase基因开放阅读框的Kozak序列上游的5′非翻译区）、p-SV40-luciferase-CMV-loxp-phytase-loxp（phytase基因开放阅读框的Kozak序列上游5′非翻译区和终止密码子下游3′非翻译区各有一个loxp序列）、p-SV40-luciferase-CMV-phytase-loxp（loxp序列位于phytase基因开放阅读框的终止密码子下游的3′非翻译区）和p-SV40-luciferase-CMV-phytase（phytase基因开放阅读框的上下游均无loxp序列）等试验质粒,以egfp基因(pEGFP-N2)为转染内参基因与所构建的各种phytase基因表达结构共转染PK15细胞,同时设置一个转pEGFP-N2+ pDsRed2-N1的空白对照。转染48h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白基因表达情况,用荧光分析软件Image J进行荧光强度分析并记录荧光强度,应用SPSS19.0软件对各转染绿色荧光表达情况进行分析。同时应用钼蓝法测定各转染的植酸酶活性。应用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒检测各转染萤火虫荧光素酶活性。用SPSS19.0软件对各转染的植酸酶和萤火虫荧光素酶表达水平（活性）进行统计分析。【结果】试验中以dsred2为内参基因,对转染后每个转染的不同区域红色荧光强度平均值(代表各转染红色荧光蛋白的表达水平)进行统计分析表明egfp基因各结构每个转染的间红色荧光蛋白表达水平差异不显著,表明不同转染间排除了转染操作、质粒纯度、细胞活性等的差异对分析结果的影响,转染前质粒的电泳结果表明,各质粒间不同构象的质粒比例基本一致,这也基本排除了转染用质粒质量的差异对转染效果的影响,对各转染不同区域绿色荧光强度的平均值（代表各转染的egfp基因表达水平）进行的统计分析表明,同一结构不同转染间egfp基因表达水平差异不显著,不同结构的转染间存在差异,其中ploxp-EGFP和ploxp-EGFP-loxp结构转染中绿色荧光蛋白的表达水平显著低于pEGFP-loxp和pEGFP-N2,而pEGFP-loxp和pEGFP-N2转染间egfp基因间的表达差异不显著。这一结果初步说明loxp序列在外源基因开放阅读框下游时对基因表达水平没有影响,在外源基因开放阅读框上游时对基因表达呈负影响,为了进一步验证上述结果的可靠性,本研究以植酸酶基因作为另一试验基因,以萤火虫荧光素酶基因为表达内参基因,以egfp基因为转染内参基因再次进行了验证,验证试验得到了相似的结果。【结论】开展通过基因打靶技术将外源基因与内源基因通过2A序列连接,实现外源基因和内源基因共表达的转基因动物制作研究中,以Cre/loxp系统作为报告基因删除工具时,则内源基因的下游为最佳的打靶位点。     

施肥对玉米品质的影响研究

以高淀粉玉米品种华单208和普通玉米品种农大364为供试材料,采用正交试验设计,分析氮、磷、钾对2种不同类型玉米的产量性状及品质性状的影响。试验结果表明:磷、钾对玉米品种营养品质的影响大于氮。施磷后,高淀粉玉米华单208的脂肪含量增加了7.14%;施钾后高淀粉玉米华单208的蛋白质含量增加了4.82%,农大364品种的蛋白质则增加了3.72%。     

春油菜菌核病田间发生规律研究

研究结果表明:黑龙江省北安农场管理局菌核病病菌子囊盘于6月中旬始见,子囊盘数量与3日内大气平均相对湿度呈正相关(R=0.657),与3日内平均气温呈负相关(R=-0.604)。大气中病菌孢子于6月中旬始见,7月中下旬出现高峰期。花朵于6月下旬开始发病,7月上旬出现发病高峰期。花朵带病率与3日内的相对湿度和日照时数显著相关(R1=0.95;R2=-0.857)。叶片于7月初开始发病,7月中旬达到高峰期,以后逐渐下降。茎秆于7月上旬开始发病,为土表菌核直接侵染造成,发病率低,增长慢,7月下旬快速增长(为病叶再侵染造成)直至收获。     

浅谈无线网络在农业上的应用

本文从无线网络的概述出发，阐述了无线网络的优势、传输方式、组成、拓朴结构、标准、应用前景及存在的问题，提出了无线网络将是今后农业信息化发展的趋势。     

GA对彩色马蹄莲生长影响研究

采用GA溶液浸泡彩色马蹄莲种球,催芽播种,研究GA对彩色马蹄莲的生长影响,结果表明:GA低浓度处理种球可以促进种球萌发,并对彩色马蹄莲的开花有一促进作用,GA浓度在50~80μL/L左右效果较好,促进开花而没有畸形花出现。高于80μL/L浓度抑制植株的生长,并对生根有一定抑制作用。     

普洱茶多糖抗疲劳作用研究

[目的]研究普洱茶多糖的抗疲劳作用。[方法]健康昆明种小鼠30只,随机分成3组(10只/组,雌雄各半):对照组(Ⅰ组)、普洱茶多糖水溶液处理组(Ⅱ组)、普洱茶水浸液处理组(Ⅲ组),连续饲喂14 d,检测其运动耐力和血清尿素氮含量。[结果]Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠运动耐力分别为(187.2±4.7)、(438.5±20.3)、(270.3±7.8)min,血清尿素氮值分别为(8.168 7±0.194 4)、(1.680 6±0.156 8)、(4.231 0±0.349 2)mmol/L。可见给小鼠饲喂普洱茶多糖和普洱茶水浸液都能显著降低其血清尿素氮形成,同时也能显著提高小鼠的运动耐力,延长其游泳时间,且茶多糖效果比茶水浸液效果好。[结论]茶叶多糖具有一定的抗疲劳作用。     

教育网站动态新闻发布系统的设计与实现

目前教育网站多数采用动态网站形武。一般具有动态新闻发布系统。本文从实际应用出发。研究了动态新闻发布系统研制开发的一般方法，进行了教育网站新闻发布系统设计与实现的实践。     

杨树伐根嫁接试验

用中林46号杨树枝条做接穗嫁接在北京杨品种上进行生长及投资试验，试验结果表明：杨树伐根嫁接苗比苗圃育苗和苗圃平茬苗的高生长及粗生长均高，而且比更新植苗造林节省投资。     

略论道路交通事故认定的可诉性

采用实证分析法、比较分析法、逻辑分析法和语义分析法,在总结相关规范性法律文件的规定及其变化、司法审判实践情况以及理论界有关该问题的争议的基础上,分析了交通事故责任认定的特征及其与鉴定行为的区别,得出交通事故责任认定应是公安机关行使行政管理职权的具体行政行为,应该纳入行政诉讼范围的结论。从立法、司法、理论方面全面研究该问题,意在充实相关问题的理论研究,并希望通过本文论述推动有关立法,实现行政实务和法律规定的衔接,制约公安交警部门的行政权力,促使交通事故当事人权益得到充分维护,实现真正的依法行政。