梅花鹿IFN-α基因的克隆与原核表达研究

为研究梅花鹿IFN-α的抗病毒功能和分子机制,根据GenBank中牛IFN-α基因序列(A00145),设计并合成1对引物,以梅花鹿肝脏组织DNA为模板,采用PCR技术扩增梅花鹿IFN-α全基因核苷酸序列。序列分析表明梅花鹿IFN-α基因全长570 bp,编码189个氨基酸,其中含18个氨基酸的信号肽和169个氨基酸的成熟多肽,存在1个潜在跨膜区,基因随不同物种发育进化地位表现出种属间的差异性。在此基础上,合成1对引物,扩增梅花鹿IFN-α成熟肽核苷酸序列,构建pET28a-IFNα原核重组表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中。SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,在24 kd左右出现特异性蛋白带,表达产物主要为不溶性的包涵体,表达量占菌体总蛋白的34.04%,且表达产物与抗His标签抗体可发生特异性反应。将Ni柱纯化的pET28a-IFNα诱导表达产物复性后,细胞病变抑制法检测表明表达产物具抗病毒活性。研究结果为梅花鹿IFN-α蛋白抗病毒分子机制的研究及抗病毒药物的开发奠定了基础。     

长春地区鹿源性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

调查吉林省长春市周边地区（榆树、农安、九台、双阳和德惠）腹泻梅花鹿源大肠杆菌的血清型分布和耐药性。对梅花鹿源大肠杆菌进行分离、培养和生化反应鉴定；并对所得菌株进行玻片凝集法确定血清型；用平板扩散法或肉汤微量稀释法测定其对15种抗菌药物的敏感性；利用PCR方法检测9种耐药基因。共得到127株大肠杆菌，84株大肠杆菌属于36种不同的血清型，其中47株属于11种血清型，即O2，O7，O9，O21，O26，O87，O126，O128，O138，O142和O154；所得菌株对15种抗菌药物呈现不同程度的耐药性；耐药基因strB、strA、aadA、tetA和sul2在被检菌株中最为流行。菌株对磺胺类和四环素耐药性最严重, 而且大多数菌株呈多重耐药性；对阿莫西林、卡那霉素较为敏感。对临床用药有指导意义。     

母鹿饲喂益生素效果初报

选取产仔前母鹿 30头在试验组饲料中添加益生素每次 2g/头。结果表明 ,加喂益生素后 ,不仅改善了母鹿胃肠内的菌群 ,增加有益菌的数目 ,增强了母鹿体质 ,而且提高了断乳仔鹿生长的各项指标     

水貂株犬瘟热病毒融合蛋白基因的克隆与序列分析

以犬瘟热病毒水貂分离株RNA为模板,经RT-PCR反应,扩增出融合蛋白基因的1053bp DNA片段,通过T-A克隆技术,成功构建克隆载体PMD-18T/F。序列分析表明:分离株与01-2689株、2544-Han95株、A75-17株、DOGDK91C株、00-2601株、ONP株、PDV-2株核苷酸序列同源性分别为94.3%、93.5%、94.4%、93.6%9、5.3%、97.3%和94.5%;氨基酸序列同源性分别为97.2%、96.6%、97.4%、97.4%、97.4%、97.2%和98.0%。抗原指数分析表明分离株与疫苗ONP株、强毒A75-17株在40-50位氨基酸间存在明显差异。     

EGF基因在动物方面的研究进展

EGF(Epidermal growth factor)是一组具有和表皮生长因子较高同源结构的糖蛋白,与其相似的生物学功能糖蛋白也属于EGF受体的配体。近年来。许多学者对EGF基因的研究发现,它们都具有胚胎细胞生长功能的调节作用。本文总结了EGF家族的生物学特性,EGF的结构和生物学作用以及其他EGF家族成员的研究概况,以期为日后对EGF基因的研究提供参考。     

与养貂户谈谈水貂妊娠和产仔哺乳期的饲养管理

<正> 当您饲养的种貂顺利结束配种以后,可千万不要松气。因为这只是给水貂生产打下了一个初步基础,如果在妊娠期和产仔哺乳期里饲养管理不善,将会发生胚胎吸收、流产、产死胎或弱仔,以及仔貂大批死亡,致使前功尽弃,造成不可挽回的损失。这里,与养貂户(特别是新养貂户)简单地谈谈水貂妊娠期和产仔哺乳期的饲养特点和管理要点。     

水貂准备配种期的饲养管理

<正>12月至翌年2月是水貂的准备配种期.冬至以后,日照时间逐渐延长,水貂的内分泌活动进一步增强,生殖器官迅速发育.在正常条件下,到2月下旬,母貂的卵巢已有成熟的卵泡产生,公貂睾丸发育成熟并产生成熟的精子.如果此期生殖器官发育受阻,将影响下一个时期的发情、交配和受孕。入冬以前,水貂体内积蓄了大量营养物质,为越冬创造了条件.冬季又由于气温降低,机体对热能的需要量增高,故水貂表现食欲强、采食多,体况逐渐肥胖.生产实践证明,体况过肥或过瘦,对繁殖都有较大的影响.体况肥胖的母貂,卵巢周围脂肪很多,阻碍卵泡发育同时月脂肪压迫输卵管,会妨碍精     

梅花鹿天然Toll样受体9基因克隆与序列分析

Trizol法提取梅花鹿肝脏总RNA,采用ORF两端兼并引物,RT-PCR方法克隆梅花鹿天然Toll样受体9基因（TLR9）并进行系统的生物信息学分析。RT-PCR结果显示,梅花鹿TLR9基因的mRNA长4 043bp,含有800bp左右的5’UTR,完整ORF编码1 081个氨基酸（GenBank序列号为：HQ260632）。同源性分析显示梅花鹿TLR9基因编码区与其他物种高度同源,但5’UTR区存在基因结构的变异。功能结构域分析显示不同物种间TLR9结构域相对保守但也存在细微差别,结构域的差别导致梅花鹿TLR9蛋白胞外区马蹄形弧顶内侧空间结构由人类TLR9蛋白的弧形改变为梅花鹿TLR9蛋白的三角形。进化分析显示TLR9基因分子进化关系与物种间真实进化相一致。