白桦组培再生系统的研究（II）——影响因素及培养程序

在“白桦（Ｂｅｔｕｌａｐｌａｔｙｐｈｙｌｌａｓｕｋｓ）组培再生系统的研究（Ｉ）”的基础上，以展叶顶芽，休眠腋芽和处子为最初外植株，通过初始培养获得无菌苗后，选取无菌苗的不同部位作外植株，如：茎节，嫩枝，愈伤组织等，经过诱导培养，分化培养及生根培养，形成再生植株，研究了培养基，激素种类及浓度，无性系，外植体类型，蔗糖浓度对诱导及生根的影响，提出白桦组培的最佳条件及程序，最佳无性系的一个外植体，经三次     

激素对绞股蓝愈伤组织过氧化物酶及皂甙含量的影响

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）和分光光度法,对添加不同激素进行组织培养的绞股蓝愈伤组织的过氧化物酶（ＰＯＤ０同工酶及总皂甙含量进行了测定。结果表明,添加ＮＡＡ培养的绞股蓝愈伤组织的ＰＯＤ同工酶在阴极区酶带活性强,添加ＢＡ培养的绞股蓝愈伤组织的ＰＯＤ同工酶在阳极区产生了新的酶带;同时添加ＮＡＡ,２,４－Ｄ,ＢＡ三种激素培养的绞股蓝愈伤组织的总皂甙含量最高。     

盾叶薯蓣愈伤组织培养及其高产系的筛选

以盾叶薯蓣的块茎、茎、叶和茎尖为材料,对其进行了愈伤组织培养,并根据愈伤组织个体间生长速度和皂甙含量差异,进行了高产系的筛选。结果表明：盾叶薯蓣不同外植体（块茎、茎、叶、茎尖）均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖形成愈伤组织最快,皂甙元含量最高;不同培养基、ｐＨ值、接种量、温度、激素等因子对愈伤组织的形成、生长及皂甙元含量有很大的影响;改良ＭＳ培养基、２,４－Ｄ浓度为２．０～４．０ｍｇ／Ｌ、ＢＡ为０．５     

北海道黄杨叶片离体培养及其细胞耐盐性

以北海道黄杨叶片为材料进行愈伤组织诱导及细胞增殖培养试验,同时开展不同浓度NaCl胁迫下愈伤组织培养,探讨外源激素对叶片离体培养的影响及其愈伤组织的耐盐性。结果表明,北海道黄杨叶片诱导愈伤组织最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.3 g/L,有利于愈伤组织增殖的激素为2,4-D0.5 mg/L;0.2%NaCl胁迫对愈伤组织生长影响较小,NaCl浓度高于0.4%时,随盐浓度升高愈伤组织脯氨酸含量增加,生长量急剧降低。     

激素对组织培养绞股蓝生长及酶活性的影响

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和分光光度法,对添加不同激素组织培养的绞股蓝愈伤组织的过氧化物酶同工酶及总皂甙含量进行了测定。结果表明：添加ＮＡＡ培养的愈伤组织的ＰＯＤ同工酶在阴极区酶带活性强,添加ＢＡ培养的合成伤组织的ＰＯＤ同共酶在阳极区产生了新的酶带,同时添加ＮＡＡ,ＢＡ,２,４－Ｄ三种激素培养的愈伤组织的绞股蓝总皂甙含量最高。     

遗传转化过程中水稻愈伤组织的内源植物激素变化动态研究

 【目的】通过对遗传转化过程中水稻愈伤组织本身的3种内源激素含量变化动态研究，探讨水稻愈伤组织生长发育过程中内源激素变化规律和激素间的相互关系，旨在为水稻遗传转化体系中合理使用植物生长物质提供参考依据。【方法】以广粳1号、特青、V20B为遗传转化供试材料，采用高效液相色谱法（HPLC）测定了遗传转化过程中4个主要时期愈伤组织中的内源脱落酸（ABA）、生长素（IAA）和玉米素核苷（Z）的含量。【结果】IAA主要存在于种胚诱导出的愈伤组织上及芽中，且过高的IAA含量不利于愈伤组织的诱导和生长；Z主要存在于种胚中，对愈伤组织诱导的启动有决定性作用，如果外植体中的Z含量太低，即使有较高的IAA含量也不能诱导出愈伤组织；过高的ABA对愈伤组织的诱导不利，但在继代培养时适量升高ABA含量有利于胚性愈伤组织的形成。 【结论】内源激素对愈伤组织的生理状态有着极其重要的影响，其种类、含量及协调平衡是水稻愈伤组织形成和分化的关键。同时，诱导培养基中2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的浓度与水稻愈伤组织培养物中的培养力（愈伤组织质量，芽长和诱导率）有一定的相关性，且在培养基中加入2,4-D等生长调节剂类物质会对愈伤中的内源激素含量有一定的影响。     

白桦组培再生系统的研究(Ⅱ)——影响因素及培养程序

在“白桦（Ｂｅｔｕｌａｐｌａｔｙｐｈｙｌａｓｕｋｓ）组培再生系统的研究（Ⅰ）”的基础上,以展叶顶芽、休眠腋芽和种子为最初外植体,通过初始培养获得无菌苗后,选取无菌苗的不同部位作外植体,如：茎节、嫩枝、愈伤组织等,经过诱导培养、分化培养及生根培养,形成再生植株。研究了培养基、激素种类及浓度、无性系、外植体类型、蔗糖浓度对诱导及生根的影响,提出白桦组培的最佳条件及程序。最佳无性系的一个外植体,经三次继代培养增殖达３０００株,最佳培养基上的生根率达９５％以上,Ⅰ、Ⅱ级苗的移栽成活率达９０％。     

外源激素对丹参愈伤组织诱导和有效成分含量的影响

以丹参(S a lv ia m iltiorrh iza)无菌苗的叶为外植体,接种于附加2,4-D、NAA、6-BA及其组合的M S固体培养基上,研究了外源激素对愈伤组织的诱导及有效成分含量的影响。结果表明:单独使用3种外源激素在一定浓度范围内均能诱导外植体产生愈伤组织;2,4-D对丹参愈伤组织的生长有促进作用,但当2,4-D的浓度在4 m g/L以上时,对愈伤组织的生长有抑制作用;配合使用外源生长素和细胞分裂素,能获得出愈率高、生长快、质量好的愈伤组织;外源激素的适宜组合为2,4-D 2.0 m g/L 6-BA 1.0 m g/L;愈伤组织中丹酚酸B的含量随培养时间的延长呈下降趋势。     

柠条锦鸡儿愈伤组织的培养与分化

取柠条的子叶和胚轴切段作为外植体,接种于含不同激素的７种ＭＳ培养基上诱导愈伤组织发生,确定最佳愈伤组织培养基为ＭＳ＋６－－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ,２,４－－Ｄ２ｍｇ／Ｌ。在ＭＳ＋６－－Ｂ１ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ１０ｍｇ／Ｌ的培养基上生长的愈伤组织中,在距愈伤组织表面一定距离处常形成分生组织带,很像形成层带。分生组织带内部的细胞分化产生排列不规则的长形管状细胞,分生组织带两侧的细胞分裂产生正常的愈伤组织细胞。生长在ＭＳ＋６－－ＢＡ０．５／Ｌ,２,４－－Ｄ２ｍｇ／Ｌ的培养基上的愈伤组织中可分化出胚性细胞（团）,这样的愈伤组织转移至无激素培养基后,胚性细胞（团）可进一步分化出原胚、球形胚、心形胚、子叶胚和试管苗。     

组织培养生产高山红景天有效成分的研究 Ⅰ．高山红景天愈伤组织的诱导与培养

以高山红景天的叶片、子叶、茎和根为外植体。诱导产生了大量的愈伤组织．筛选出适于愈伤组织大量培养的固体培养基．以６ＢＡ４～８ｍｇ／ｌ，ＮＡＡ２～２．５ｍｇ／ｌ为最佳激素种类和浓度．研究了固体培养条件下愈伤组织生长规律，绘制了生长曲线，并筛选出优良的细胞无性系．     

不同培养基对鸡骨草愈伤组织的诱导

[目的]研究影响鸡骨草愈伤组织形成的条件,为鸡骨草的组织培养及悬浮培养提供参考。[方法]从鸡骨草的大田植株和种子发芽后的幼芽中合适部位选取外植体,在附加不同浓度、不同组合的外源激素2,4-D和6-BA的MS培养基上,对鸡骨草愈伤组织进行诱导,计算诱导率,观察愈伤组织生长情况。[结果]单独使用一种激素时对愈伤组织的诱导能力大致相同,2,4-D比6-BA对鸡骨草茎段愈伤组织的诱导能力稍强一些。培养基中添加2种激素时愈伤组织褐变程度稍轻,最适合的培养基为MS附加2,4-D2．0mg／L＋6-BA1．5mg／L。[结论]多种激素组合比单种激素有利于愈伤组织的形成,培养基中适宜的激素组合可降低愈伤组织褐变率。     

不同外植体对甘草愈伤组织诱导的影响

在相同激素配比条件下,采用组织培养法研究不同外植体(根、茎、子叶、下胚轴)对愈伤组织诱导和生长的影响。结果表明,在不同外植体中,下胚轴对愈伤组织的平均诱导率最高(93.9%),且出愈时间最早,褐化率最低(10.6%),是诱导愈伤组织的最佳材料。在特定激素浓度条件下,下胚轴诱导出的愈伤组织中甘草总黄酮的含量相对其他外植体较高;而子叶诱导出的愈伤组织中甘草酸的含量相对其他外植体较高。     

细叶远志愈伤组织的诱导

[目的]探讨影响细叶远志（Polygala tenuifolia Willd.）愈伤组织诱导的因素,建立细叶远志愈伤组织培养方法。[方法]采用组织培养方法,比较不同外植体、pH、温度、光照、激素种类及配比对细叶远志愈伤组织诱导的影响。[结果]在培养基MS上,子叶的诱导率最高,为88%;叶片和茎诱导生成的愈伤组织较少;不同pH对愈伤组织生长质量的影响差异不明显;愈伤组织诱导最适温度为28℃;66%的光照培养诱导率高于33%的光照培养;1.0 mg/L6-BA＋0.1 mg/L NAA的激素配比的诱导率最高。[结论]细叶远志愈伤组织的适宜培养基为MS＋1.0 mg/L6-BA＋0.1 mg/LNAA＋30 g/L蔗糖＋5 g/L琼脂（pH6.8）,培养温度为28℃,66%的光照培养18 h和黑暗培养6 h交替进行。     

崇左金花茶的组培诱导愈伤研究

[目的]探索崇左金花茶组织培养中诱导愈伤组织的途径和方法。[方法]用崇左金花茶的幼嫩叶片、幼嫩茎段和种子作为外植体,在不同激素组合培养基上进行愈伤组织诱导试验。[结果]幼嫩叶片愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D;幼嫩茎段愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D;种子愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+4mg/L 6-BA+0.6 mg/L 2,4-D。[结论]该研究获得了崇左金花茶的最佳愈伤组织诱导培养基,为崇左金花茶组织培养体系的建立提供了技术支持。     

枣树组织培养养愈伤组织诱导的研究

将枣树不同品种的不同器官及其部位的外植体接种含有不同激素的培养基中培养，对其愈伤组织诱导条件进行了条件，结果表明，灌阳长枣（中国）和普通枣（日本）为较适宜组培的品种，胚，嫩枝顶部，芽为适宜组培的器官；以ＭＳ（１／２ＮＯ＾－３）的作基本培养基，并添加３μｍｏｌ左右Ｚｅａｔｉｎ和约３０μｍｏｌＮＡＡ或ＩＡＡ可以获得数量较多，质量较好的愈伤组织，叶所产生的愈伤组织颜色较深，数量也较少，并在初代培养时易产     

植物组培材料酚类物质HPLC特性及其与褐变的关系

该文研究了阿月浑子、枣树和红地球葡萄2年生叶片与组织培养苗叶片、愈伤组织酚类物质含量的变化并对其进行了HPLC分离特性的研究。结果表明:酚类物质的含量与组织培养过程中外植体的褐变有一定的正相关性,愈伤组织酚类物质含量普遍高于相应的组培苗叶片,酚类物质是促使愈伤组织易于褐变的主要原因之一。邻苯二酚类的酚类化合物是植物材料发生褐变的主要底物。     

西洋参愈伤组织培养及皂甙含量分析

以西洋参芽孢为外植体,接种于ＭＳ加不同激素组合的培养基中,诱导形成愈伤组织,并测其生长量,结果表明;愈伤组织生长以植物激素２,４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ１．５ｍｇ／Ｌ为最好,而西洋参总皂甙含量以２,４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ为最高。     

穿山龙愈伤组织培养研究

以穿龙薯蓣的叶柄、茎段、叶和茎尖为材料,对其进行了愈伤组织培养。结果表明:穿龙薯蓣不同外植体(叶柄、茎段、叶、茎尖)均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖形成愈伤组织最快,皂甙元含量最高;不同培养基、pH值、接种量、温度、激素等因子对愈伤组织的形成、生长及皂甙元含量有很大的影响;改良MS培养基、2,4-D浓度为3.0￣5.0mg/L、BA为1.0mg/L的激素配比使愈伤组织的生长量、产物含量最高。     

手参组培技术与愈伤组织药用成分研究

本研究以甘孜州野生手参为对象,以手参的茎尖、根尖、侧芽三种外植体类型,结合2,4-D、6-BA、NAA三种植物生长调节剂的浓度与组合,研究不同外植体类型及植物生长调节剂对手参愈伤组织诱导的影响,探索建立手参组织培养技术体系,同时,检测愈伤组织中药用化学成分,阐明药用成分差异,对再生植株进行综合评价。结果显示茎尖的愈伤组织诱导率最高（59.5%）,在0.5mg/L NAA的条件下愈伤组织诱导率最高（59.8%）,同一浓度下,单独添加生长素的愈伤组织诱导率高于生长素和细胞分类素的组合;根尖的褐变率最高（100%）,茎尖的褐变率最低（38.5%）;经检测发现,在NAA愈伤组织中的天麻素和dactylorhin A的含量都要高于2,4-D愈伤组织中的含量。本研究结果为进一步提高手参的品质,增强我国药用植物产业的竞争力,为后续商业化的应用打下坚实的基础。     

影响羊草愈伤组织分化因素的研究

[目的]探索影响羊草愈伤组织分化及再生的因素,为羊草组织培养及转基因受体系统建立提供理论依据。[方法]选取5种类型羊草种子进行组织培养,研究在愈伤组织继代、分化培养过程中培养基类型、激素种类和浓度、低温处理等因素对分化率的影响。[结果]不同种群的羊草愈伤组织分化率差异极大;在愈伤组织诱导和继代过程中添加2.0mg/L2,4-D有利于羊草胚性愈伤组织再生能力的保持;继代培养时,不同种类培养基对分化率影响不大,低温处理不能提高长时间继代培养愈伤组织的分化率;分化培养时,外源激素对提高羊草分化率作用不大。[结论]影响羊草愈伤组织分化率的因素主要包括种质资源以及诱导和继代过程中的激素浓度。