盾叶薯蓣愈伤组织培养及其高产系的筛选

以盾叶薯蓣的块茎、茎、叶和茎尖为材料,对其进行了愈伤组织培养,并根据愈伤组织个体间生长速度和皂甙含量差异,进行了高产系的筛选。结果表明：盾叶薯蓣不同外植体（块茎、茎、叶、茎尖）均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖形成愈伤组织最快,皂甙元含量最高;不同培养基、ｐＨ值、接种量、温度、激素等因子对愈伤组织的形成、生长及皂甙元含量有很大的影响;改良ＭＳ培养基、２,４－Ｄ浓度为２．０～４．０ｍｇ／Ｌ、ＢＡ为０．５     

雪菊的组织培养研究

以雪菊带芽茎段、茎尖、叶片为外植体以MS为培养基添加不同浓度6BA和NAA进行组织培养实验,结果表明适合带芽茎段愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.3mg/L;适合茎尖愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.1mg/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA3.0mg/L＋NAA0.3mg/L,适合雪菊愈伤组织增殖和不定芽诱导的培养基为MS＋6BA2.0mg/L＋NAA0.3mg/L;适合雪菊试管苗生根的培养基为1/2MS＋6BA0.3mg/L＋XAA0.03mg/L,蔗糖减半,以雪菊无菌苗的带芽茎段、茎尖和叶片为外植体成功地诱导出了愈伤组织,其中带芽茎段愈伤组织诱导率最高时间最短效果最好茎尖次之叶片最差.     

葡萄松散型愈伤组织的培养及其白藜芦醇含量的测定

【目的】获得葡萄(Vitisvini fera L.)松散型愈伤组织,并了解其白藜芦醇含量的变化。【方法】以葡萄的叶、叶柄和茎分别作为外植体,在不同激素组合(6-卞氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)、吲哚丁酸(IBA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D))的培养基(以B5培养基为基本培养基,含30g/L蔗糖和6g/L琼脂)上,进行愈伤组织的诱导和继代培养,并利用高效液相色谱法(HPLC)对不同来源愈伤组织中的白藜芦醇含量进行测定。【结果】以葡萄叶为外植体时,诱导的愈伤组织出愈率很低;以叶柄和茎为外植体时,愈伤组织的出愈率均较高。利用叶柄和茎获得松散愈伤组织时,其诱导培养基组成分别是:B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L和B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L,其继代培养基均为B5培养基+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.1mg/L。在诱导培养基产生的愈伤组织中,白藜芦醇含量由高到低的顺序为叶柄>叶>茎。以叶、叶柄和茎为外植体诱导愈伤组织时,其白藜芦醇含量最高的培养基分别为B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L、B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L和B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L。【结论】葡萄叶柄和茎易被诱导产生松散的愈伤组织,且经多次继代可以用于建立悬浮培养体系;葡萄愈伤组织中的白藜芦醇含量随外植体及培养基组成的不同而有所差异。     

转CHS基因非洲菊的组培快繁

以转CHS基因非洲菊株系的茎尖、茎段和叶柄为外植体,分别比较了3种外植体形成愈伤组织的能力,并对茎尖诱导培养基、增殖培养基、生根培养基以及无土基质进行初步筛选,结果表明:形成愈伤组织能力以茎尖最好,茎段次之,叶柄最差;茎尖最佳诱导培养基为MS BA1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L,增殖培养基为MS BA 2.0 mg/L IAA 1.0 mg/L或MS Kt 3.0mg/L IAA 0.05mg/L,生根培养基为MS NAA 0.3 mg/L IBA 0.3 mg/L,无土基质及配比为珍珠岩∶腐熟谷壳=1∶2。     

盾叶薯蓣愈伤组织的诱导及芽分化与增殖

为培育盾叶薯蓣优良品种,培养盾叶薯蓣优质种苗,促进盾叶薯蓣的规模化生产。对高皂素含量的盾叶薯蓣株系进行了组织培养与快繁研究。结果表明,茎尖外植体产生愈伤组织的时间短、出愈率高。在添加0.5 mg/L BA和0.5 mg/L NAA的培养基上,出愈率接近70%,愈伤组织状态良好;1.0 mg/LKT和0.2 mg/L NAA组合可使愈伤组织的芽分化率达90.9%;在添加0.5 mg/L NAA和1.0~2.0 mg/LBA的培养基上,腋芽增殖率最高,且生长健壮。已伸长的腋芽转移至不加任何激素的MS培养基上即可生根,形成完整植株。     

凤尾兰的组织培养

以凤尾兰(YuccagloriosaLinnaeus)的茎尖、幼嫩茎段及嫩叶为外植体进行组织培养。结果表明以嫩叶为外植体的愈伤组织诱导率最高,由茎段诱导的愈伤组织继代增殖最好,由茎尖诱导的愈伤组织诱导不定芽表现最佳。筛选出最佳初代培养基MS 6-BA3.0mg/L NAA0.2mg/L;愈伤组织增殖培养基MS 6-BA8.0mg/L NAA0.1mg/L;不定芽诱导培养基为MS 6-BA5.0mg/L KT1.0mg/L;不定芽增殖培养基为MS 6-BA4.0mg/L NAA0.05mg/L 椰子水100mL/L;生根培养基为1/2MS NAA0.2mg/L。     

桂花愈伤组织的诱导与增殖

[目的]探索影响桂花愈伤组织诱导及增殖的激素组合。[方法]以紫银桂的幼叶、茎尖和幼胚为材料,对影响桂花愈伤组织形成和继代培养的激素组合进行研究。[结果]叶片、茎尖和幼胚在不同培养基中均能产生愈伤组织。在诱导培养基中NAA浓度为0.3 mg/L的条件下,当幼胚、幼叶和茎尖培养基中6-BA浓度分别为3.0、5.0和5.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。在诱导培养基中NAA浓度为0.5 mg/L的条件下,当幼胚、茎尖和幼叶培养基中6-BA浓度为3.0、3.05、.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。从节省成本的因素考虑,最适合愈伤组织增殖的激素组合应为6-BA 2.0+NAA 0.5 mg/L。[结论]该研究为桂花愈伤组织的诱导和增殖的进一步研究奠定了基础。     

革叶蕨的离体培养研究

以革叶蕨的幼嫩根茎(母株新发生的匍匐茎)、幼嫩叶柄、幼叶作为外植体,诱导产生愈伤组织。研究表明,茎段用HgC l2溶液浸泡10 m in、叶片和叶柄用HgC l2溶液浸泡3 m in灭菌效果较好;MS 0.5 mg/L IAA 0.1 mg/L NAA最适合诱导形成愈伤组织和幼芽分化;茎段尤其是走茎茎尖是诱导愈伤组织分化为幼苗的最适外植体材料;最佳生根培养基为1/2MS 0.1 mg/L NAA。     

墨西哥薯蓣组培快繁研究

薯蓣是重要的经济植物,所含薯蓣皂甙元具有较高的开发利用价值,被广泛用于医药、食品和卫生保健等方面。作者以目前人工栽培中种苗需求量较大且人工繁殖较困难的墨西哥薯蓣为材料,对其茎秆、茎尖和叶片的愈伤组织和丛芽的诱导、生根培养等关键环节进行了试验研究。结果表明,以茎尖、茎秆作为外植体,在MS培养基和附加6-BA1mg/L、2,4-D0.8mg/L条件下,产生愈伤组织的速度快、丛芽诱导的效果最好;在1/2MS附加NAA1.5mg/L和活性炭0.2mg/L培养基条件下生根效果较好。用该方法,本实验室在使用少量外植体材料和在较短时间内获得了大量可用于生产的生根试管种苗。     

安祖花愈伤组织诱导和植株再生的研究

为建立适合安祖花遗传转化的受体体系,分别选取安祖花组培苗带叶柄的叶片和带叶柄的茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导和植株再生试验。结果表明:以带叶柄的茎段为外植体对愈伤诱导效果好于带叶柄的叶片。使用带叶柄茎段为外植体,以1/2MS BA 1.0 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L为基本培养基进行愈伤组织诱导和继代培养,愈伤组织诱导率最高为89.65%;使用3%蔗糖作为碳源的1/2MS添加0.1 mg/L KT能显著提高诱导率;添加NAA 0.5 mg/L或2,4-D 0.5 mg/L有助于生根。     

绿玉菊离体培养与快速繁殖

用绿玉菊叶片、不带腋芽茎段、带腋芽茎段和茎尖为外植体进行离体培养研究,分析了影响愈伤组织形成的因素及分化困难的原因.研究结果表明:在愈伤组织诱导时,不带腋芽茎段较嫩叶易产生愈伤组织,是首选外植体;6-BA1. 0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1的激素配比对茎段愈伤组织诱导有利,诱导率高达100%;在MS基本培养基中,pH值为5.4较适宜愈伤组织的分化,且6-BA3.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1对愈伤组织分化不定芽的效果较好,分化不定芽均数达11.10个.茎尖及带腋芽茎段在MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1的培养基上,能直接诱导出大量生长健壮的丛生芽,生根在MS+NAA0.05mg·L-1的培养基上进行,生根率高达100%,根多而壮,植株长势好.     

沙棘品种深秋红茎尖组织培养

[目的]筛选沙棘品种深秋红茎尖组织培养基配方。[方法]选用不同培养基,以7月中旬至8月下旬采集的大田茎尖为外植体,对沙棘品种深秋红的组织培养技术进行研究。[结果]最适初代培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L,最适愈伤组织诱导培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L,最适继代培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,最适腋芽诱导培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L。[结论]该研究建立了沙棘品种深秋红茎尖组织培养技术,为其产业化生产奠定基础。     

西双版纳甜糯山药茎尖组培技术优化研究

甜糯山药是西双版纳的特有品种，传统的繁殖方式效率不高。为推广、扩繁该品种，本研究以西双版纳甜糯山药的茎尖和茎段为材料，对各阶段的培养基、培养条件进行筛选优化，获得了一套适合西双版纳甜糯山药茎尖、茎段组培的快繁体系。其中：最适诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+PVP 150 mg/L+VC600 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.8 g/L；最适分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+PVP 150 mg/L+VC600 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.8 g/L，培养30 d分化率可达到73.33%；最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂7.8 g/L，培养30 d后生根率达到80.00%；最后组培苗通过炼苗移栽至装有育苗土（沙∶土∶基质=1∶1∶1）的穴盘中，10～15 d后成活率可达65%以上。     

碧玉兰的组培快繁技术研究

以碧玉兰的茎尖、茎段作为外植体进行组织培养,结果表明:适宜的起始培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L;生根培养基是1/2MS+NAA 1.0 mg/L。     

不同激素配比对茶树苗组织培养的影响

利用茶树苗的叶片、茎段、茎尖等外植体为材料,探讨不同激素配比对叶片、茎段产生愈伤组织,以及对茎尖产生丛生芽的影响。结果表明:叶片、茎段都能产生愈伤组织,但茎段的愈伤组织诱导率较高,叶片的愈伤组织诱导率较低。叶片、茎段愈伤组织培养的最适培养基是MS+2,4-D(2mg/L)+6-BA(0.4mg/L)。     

红栀子愈伤组织诱导研究

[目的]为了研究红栀子组织培养的最佳条件,为栀子黄色素的工业化生产提供理论依据。[方法]以红栀子茎尖、茎段和幼嫩叶片为外植体,在MS、1/2MS和1/4MS3种培养基上进行培养试验,研究不同外植体、培养基、激素浓度和消毒时间对诱导愈伤组织的影响。[结果]红栀子茎尖和幼嫩叶片的诱导效果明显优于茎段。在3种培养基中,MS培养基更有利于愈伤组织的产生和生长。在MS培养基中添加2,4-D时,2.0mg/L为诱导红栀子茎尖愈伤组织的最适浓度。用升汞消毒,茎尖、茎段和幼嫩叶片的最佳消毒时间分别为9、12和7min。[结论]MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L为红栀子幼嫩叶片愈伤组织的最佳培养基,且10d后形成愈伤组织。     

中药白芍愈伤组织的培养及其中芍药苷的测定

[目的]建立中药白芍愈伤组织培养的方法,并测定其中芍药苷的含量。[方法]以白芍叶、茎为外植体,接种于不同的愈伤诱导培养基和继代培养基上培养愈伤组织,并提取愈伤组织中的芍药苷,用TLC和HPLC法测定愈伤组织中芍药苷的含量。[结果]适合白芍茎的诱导愈伤培养基是1/2MS+0.2 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,叶的最适诱导培养基是1/2MS+1.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA,白芍愈伤继代培养适合培养基为1/2MS+0.1 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L ZT+0.5 mg/L NAA。经HPLC测定每克干白芍愈伤组织中的芍药苷含量为0.068 9 mg。[结论]中药白芍的叶和茎可诱导形成愈伤组织,且形成的愈伤组织中含有芍药苷。     

生姜芽的组培快繁

[目的]寻找生姜芽组培快繁的最佳方案。[方法]以MS为基础培养基,设计生姜芽组培快繁的两条途径,选择生姜芽组培快繁的最佳培养基配方。[结果]结果表明,茎尖→芽最适培养基为:改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎尖→愈伤组织→芽,茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,愈伤组织诱导芽分化的最适培养基为:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。采用超净工作台上用75.0%酒精30 s+10.0%NaClO 15 min+0.1%HgCl210 min+50 ug/L青霉素与台外消毒相结合对外植体进行表面消毒,去污效果最佳。[结论]对愈伤组织进行切割并继代培养后再诱导芽分化,可获得较大的增殖倍数。     

野葛愈伤组织诱导及分化的研究

对野葛叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究,结果表明:6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为芽,6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.