食蟹猴精液低温保存研究

[目的]探讨食蟹猴精液低温保存液的最佳配方,为食蟹猴精液冷冻保存和品质鉴定奠定基础.[方法]测定生理温度(37℃)、常温( 15~25℃)和低温(0~5℃)3种状态下,食蟹猴精子在不同保存液中的存活时间及存活指数.[结果]生理温度(37℃)和常温( 15~25℃)下,食蟹猴精子在TALP液中的存活时间分别为12.94±5.57和58.59±40.91 h,存活指数分别为4.88±1.97和24.48±17.94;而低温(0~5℃)下,食蟹猴精子在TRIS液添加20%蛋黄的保存液中存活时间及存活指数分别为596.00±83.35 h和283.05±49.42,显著高于其他处理(P<0.01).[结论]TRIS液添加20%蛋黄是食蟹猴精液低温(0~5℃)保存液的最优配方.     

低温定向冷冻法冻存食蟹猴精液的研究

[目的]使用低温定向冷冻方法建立有效的精子冻存条件。[方法]采用低温定向冷冻方法冻存食蟹猴精液,并与常规方法进行对比,探讨冷冻方法和甘油浓度对精子冷冻存活率的影响。[结果]在相同甘油浓度下,低温定向冷冻的食蟹猴精子的活力与顶体完整性显著高于常规冷冻法(P0.05),定向冷冻方法在保存食蟹猴精液效果明显优于常规冷冻方法,且甘油浓度5%时能够达到更好的冷冻效果。[结论]与常规冷冻相比,低温定向冷冻能显著提高精子存活率。在食蟹猴的精液冻存中,采用定向冷冻仪冻存精液能达到较好的冻存效果。     

鸡精液稀释液筛选试验

本试验观察了13种稀释液在低温(3～5℃)和室温(15～25℃)下保存鸡精液的效果。根据预定标准,结果以谷氨酸钠的普通制剂——食用味精为主要成分的6号液、9—B液和9—C液被选为优等液。6号液在低温下精子生存指数为15.02±2.44(x±s),显著高于对照液的11.09±3.92(P<0.05)。9—B液和9—C液在低温下精子存活时间分别为35.5±6.38小时,34.4 3±7.78小时,显著高于对照液的27.07±7.89小时(P<0.05)。另外,4、5和7号液被选为良等液,其保存效果达到了对照液的水平(P>0.05)。     

计算机辅助精液分析系统对食蟹猴精液的分析

[目的]用计算机辅助精液分析系统（CASA）对食蟹猴精液进行分析,以揭示食蟹猴的精液生物学特性。[方法]采用CASA系统对29例雄性食蟹猴精液样本进行分析。[结果]静态特性：食蟹猴的精子密度为（2 134.53±2 052.87）M/ml;活动精子密度为（1 955.36±1 939.59）M/ml,活动精子百分率为（88.79±9.09）%;前向运动精子密度为（1 263.98±1 271.13）M/ml,前向运动精子百分率为（59.58±16.43）%;快速相细胞百分率为（82.76±13.10）%。食蟹猴精子的平均路径速度为（133.78±58.22）μm/s,直线速度为（121.43±56.64）μm/s,曲线速度为（169.78±52.39）μm/s,精子头侧摆幅度为（4.19±0.72）μm,平均摆跨频率（鞭打次数）为（29.79±4.30）Hz,前向性为（84.62±5.46）%,直线性为（63.62±13.07）%。②食蟹猴精子的快速相浓度为（1 844.97±1 875.96）M/ml,百分率为（82.76±13.10）%;中等相浓度为（110.18±139.33）M/ml,百分率为（5.93±5.26）%;慢速相浓度为（85.74±144.32）M/ml,百分率为（3.62±2.90）%;静止相浓度为（93.99±72.85）M/ml,百分率为（7.69±8.20）%。食蟹猴精子的头长比为（61.93±4.4.14）%;头部面积为（7.33±1.22）μmsq。[结论]该研究为在人工饲养食蟹猴的繁殖实践中进行精液品质鉴定提供依据。     

不同稀释液对猪精子活力与保存时间的影响

通过研究不同配方的稀释液在相同的稀释倍数及同一保存条件下,对猪精子活力的影响来选择合适的猪精稀释液。试验选用灌南县家畜改良站内的4头成年公猪的精液作为材料,采用4种稀释液配方,分别进行稀释,观察精子活力和保存时间。结果表明,用葡—柠—乙液稀释的精液,在32h内精子活力平均数显著高于葡萄糖液和葡—柠液,精子存活时间也长于其它稀释液。     

茶多酚对猪精液常温保存效果的影响

【目的】研究茶多酚(TPP)对猪精液常温保存效果的影响。【方法】手握法采集20月龄健康杜洛克种公猪精液,在基础稀释液中添加不同质量浓度的TPP(0(CK),0.01,0.02,0.04,0.08,0.16g/L)作为稀释液进行常温(17℃)保存,每隔24h检查精子活率、质膜完整率和顶体完整率,分别在精液保存0,2,4,6d时检测精液中的细菌含量,并在3d和6d时检测精液中的丙二醛含量(MDA)和总抗氧化(T-AOC)活性。【结果】添加0.02,0.04,0.08g/L TPP可明显提高猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和T-AOC活性,降低精液的MDA含量和细菌含量。且以0.04g/L TPP效果最佳,精液有效保存时间为6d。6d时0.04g/L TPP组猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化(T-AOC)活性和细菌含量分别为60.02%,46.40%,75.25%,2.39nmol/L,2.31U/mL和2.19×106 CFU/mL。【结论】茶多酚能有效提高猪精液常温保存效果,最适添加量为0.04g/L。     

夏季山羊精液不同保存方法研究

假阴道法采集重庆市大足黑山羊精液,分析鲜精精液品质,采取随机单位组两因素三水平无重复观察值方差分析试验设计,应用常温保存(20℃)、低温冷藏(4℃)和精液冷冻3种方式进行精液保存效果及对精液品质影响的研究.两因素分别为稀释液和精子密度,每个因素选择3个水平,以生存指数作为评价精液保存效果的指标.新鲜精液采集后检测发现品质良好,活力均值为0.87,畸形率为9.45%,符合GB20557-2006做山羊冻精标准.与去年同期比较,发现高温可造成精液品质下降.稀释液对3种保存效果影响差异均不显著(p0.05),精子密度对常温保存和低温冷藏影响差异极显著(p0.01),对冷冻影响差异不显著(p0.05).不同处理均造成精液品质下降,其中冷冻造成影响极显著.常温和冷藏下以稀释液A1、精子密度1×109个/mL保存较好,冷冻保存以稀释液A2、精子密度2×108个/mL较好.     

夏季山羊精液不同保存方法研究

假阴道法采集重庆市大足黑山羊精液,分析鲜精精液品质,采取随机单位组两因素三水平无重复观察值方差分析试验设计,应用常温保存(20℃)、低温冷藏(4℃)和精波冷冻3种方式进行精液保存效果及对精液品质影响的研究.两因素分别为稀释液和精子密度,每个因素选择3个水平,以生存指数作为评价精液保存效果的指标.新鲜精液采集后检测发现品质良好,活力均值为0.87,畸形率为9.45%,符合GB20557-2006做山羊冻精标准.与去年同期比较,发现高温可造成精液品质下降.稀释液对3种保存效果影响差异均不显著(p>0.05),精子密度对常温保存和低温冷藏影响差异极显著(p<0.01),对冷冻影响差异不显著(p>0.05).不同处理均造成精液品质下降,其中冷冻造成影响极显著.常温和冷藏下以稀释液At、精子密度1×109个/mL保存较好,冷冻保存以稀释液A2、精子密度2×108个/mL较好.     

不同抗冻剂及初冻和解冻温度对鸡精液冷冻保存的影响

【目的】研究对不同抗冻剂及初冻和解冻温度在鸡精液冷冻保存中的效果.【方法】以‘海兰褐’种公鸡为试验材料,利用液氮制作颗粒冷冻精液,研究不同抗冻剂及初冻和解冻温度对鸡精液冻后活率、复苏率及存活时间的影响,并筛选出最佳的抗冻剂种类、浓度和初冻、解冻温度组合.【结果】3种抗冻剂组合的冷冻效果优于单一及两种抗冻剂组合,且GL 8%+DMA 6%+EG 6%组合的冻后活率、精子复苏率最高,分别为0.46和57.50%,为最佳抗冻剂组合;在此基础上,筛选出最佳初冻和解冻温度组合为-140℃和50℃,其冻后活率和复苏率最高,分别达到0.57和71.40%,并在15～25℃条件下精子存活时间为160min;在鸡精液冷冻保存中快速冷冻要对应快速解冻,慢速冷冻要对应慢速解冻,且前者精液冷冻保存效果较好.【结论】筛选出了最佳的抗冻剂组合及初冻和解冻温度,发现快速冷冻和解冻的鸡精液保存效果较好.     

南美白对虾精子超低温冷冻保存技术研究

【目的】建立一种南美白对虾精子超低温冷冻保存方法,为南美白对虾优良种质的长期保存奠定基础。【方法】利用胰蛋白酶消化法获得游离的南美白对虾精子,分别使用灭菌天然海水、无钙人工海水、3％等渗NaCl溶液和0．9％生理盐水作为基础液,并以不同浓度的二甲基亚砜（DMSO）、甘油、甲醇及其与海藻糖的混合溶液作为抗冻剂,在4种不同降温程序下超低温冷冻保存南美白对虾精子,然后在不同的温度下复苏冷冻精子,以伊红-苯胺黑染色法检测精子存活率。【结果】使用1．00g／L胰蛋白酶消化精荚5min能获得大量游离的南美白对虾精子,以灭菌天然海水为基础液,以10％DMSO和0．25mol／L海藻糖为抗冻剂,在P．1降温程序（4℃平衡30min,以．5℃／min的速率降至-20℃;-20℃平衡5min,以-10℃／min的速率降至-80℃;-80℃平衡5min,然后置于液氮中保存）下超低温冷冻保存南美白对虾精子,经37℃水浴复苏后精子存活率最高。【结论】建立的南美白对虾精子超低温冷冻保存方法具有可行性,为南美白对虾精子冷冻保存库的建立提供了技术支撑。     

鸡精液稀释保存技术的研究

 本文在研究鸡精液基本生理生化特性的基础上，明确了鸡精子体外存活的适宜渗透压和酸碱度。用国产常用试剂，研制出BJJX稀释液，其渗透压为367毫克分子/公斤，pH7.2。用BJJX稀释液与鸡精液作1∶2稀释，0-5℃保存9或24小时后给母鸡输精，蛋受精率分别为90．0%（233/259）及79.0%（184/233），用BPSE液作为对照，蛋受精率为92.4%（218/236）及78.5%（197/251）。以1∶1稀释，在0-5℃保存24小时后输精，BJJX液和BPSE液的蛋受精率分别为92.2%（249/270）及94.8%（220/232）。BJJX稀释精液目前已在京郊作生产性推广应用67000余枚种蛋，蛋的受精率为74.6-91.1%，获得肯定效果。     

猪鲜精17℃保存剂效果对比试验

选择2种著名品牌猪精液常温保存稀释剂为对照组(对照一、对照二),试验组为本课题组经大量试验开发的猪精液常温保存稀释剂,旨在探讨研发的稀释剂对猪鲜精保存效果。试验结果表明,课题组研发的猪精液17℃常温保存稀释剂在有效保存时间和精子总存活时间方面均显著高于对照一组,而相对于对照二组,显著提高了大白种猪精液有效保存时间和精子总存活时间(P<0.05),其余各组差异均不显著(P>0.05)。试验中的3种不同稀释剂在前3d对精子质膜完整性均有较好保护作用, 3组间差异不显著(P>0.05);保存到第5天,试验组和对照二组中精子质膜完整性显著高于对照一组(P<0.05),但前2组之间质膜完整性无显著性差异(P>0.05);保存至第7天,对照一组、对照二组和试验组中精子质膜完整性分别为49.94±3.08, 58.83±2.22, 72.86±2.62,精子质膜完整性在该3组之间均存在差异显著性(P<0.05)。结果显示,在相同储存条件下,本课题组研制的精液常温保存剂对精液保存时间,质膜完整率等指标优于国内市场上著名品牌,且保存效果稳定。     

油菜素内酯对苦瓜幼苗抗冷性的影响

【目的】筛选出油菜素内酯（BR）提高苦瓜抗冷性的最佳浓度, 为解决苦瓜低温胁迫问题提供理论依据。【方法】设CK1和CK2为清水对照（CK1为常温处理,CK2为低温胁迫处理）,通过对不同浓度（10-4、10-3、10-2、10-1、10 mg/L）BR处理后的苦瓜幼苗进行（8.0±0.5）℃ 72 h低温胁迫,并测定植株生长指标及功能叶片中的丙二醛（MDA）含量、可溶性蛋白含量、细胞质相对电导率及超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）活性等。【结果】与CK2相比,不同浓度BR处理可以促进苦瓜幼苗在低温下生长,其鲜物重和叶片叶绿素含量增加,冷害指数降低,POD、SOD活性增加,可溶性蛋白和Pro含量升高,并在一定程度上减缓叶片中MDA的积累,同时可以明显降低细胞质相对电导率。【结论】喷施不同浓度BR可有效提高苦瓜幼苗的抗冷性,其中以10-2 mg/L浓度处理最佳。     

牛血清白蛋白对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释液是提高精子活率的关键因素之一。为了研究牛血清白蛋白（BSA）对猪精液常温保存的影响,在基础液Modena中分别添加1、2、3、4、5和6 g/L 的BSA,检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率以及总抗氧化能力（T AOC）和丙二醛（MDA）浓度,分析BSA对猪精液常温保存效果的影响。结果表明,Modena中添加3～5 g/L的BSA能显著延长猪精子有效保存时间、提高精子活率和质膜完整率、降低MDA的浓度（P<0.05）,但对顶体完整率和T AOC影响不大（P>0.05）,其中添加4 g/L的BSA效果最好,有效保存时间为7.5 d,经过7 d保存后精子活率、质膜完整率、顶体完整率分别为54%、49%和78%,T AOC和MDA的浓度分别为1.03 U/mL和17.51 μmol/L。研究结果说明,Modena中添加BSA能够提高常温保存精子的品质,其适宜添加量为4 g/L。     

湖羊精液稀释液及冷冻保护剂的筛选

试验旨在研究不同稀释液对湖羊精液的4℃保存效果,同时探讨不同种类及浓度的冷冻保护剂对湖羊精液冷冻保存效果的影响。选择6种常见的绵羊精液稀释液配方,检测湖羊精液稀释后精子活力变化,分析精子存活时间及生存指数;另选取6种常见的精子冷冻保护剂,分3组浓度(5%、10%、15%)添加,检测细管冻精解冻后的精子活率。结果表明,6种稀释液对湖羊精液的4℃保存效果存在显著差异,其中F稀释液保存效果最佳。冷冻保护剂的种类和添加比例对湖羊精液的冷冻保存效果都存在影响,稀释液中添加5%的丙三醇对湖羊精液的冷冻保存效果最佳。     

BTS精液稀释液及保存时间对猪人工授精效果的影响

研究了BTS(Beltsville thawingsolution)精液稀释液及保存时间对猪人工授精效果的影响,结果表明:用BTS稀释液常温保存猪精子,精子生存指数明显高于葡-柠液组(P<0.05),精子有效保存时间可延长60h;以纯精液输精,随着保存时间延长,母猪产仔数下降(P<0.05),而以混合精液输精时,各试验组母猪产仔数并无明显差异(P>0.05);BTS液不同保存时间对人工授精效果影响程度与配种公母猪的品种差异有关。     

庆阳驴细管精液低温保存研究

为了获得研究驴的精液不同常温保存效果,本研究比较几种不同配方和两种制作方法对精液保存效果的影响。结果显示：通过对精液的低温度的控制来寻找适合本地生产条件的稀释液配方。本试验中含有6.5%果糖的2号保存液和含有6.0%葡萄糖的3号保存液低温保存时效果优于含有7.5%蔗糖的保存液。研究表明,在低温保存稀释液中的糖类很好的解决了渗透压问题,同时还能为精子的活动提供能量;加入的卵黄使精液在一定程度上提高了对温度巨变的缓冲能力;稀释液中青霉素和链霉素添加的量更有效的抑制了细菌的生长与繁殖,为进一步研究驴的超低温保存提供一定的技术基础。     

胭脂鱼精子低温保存及其在人工授精中的应用

[目的]研究胭脂鱼精子的低温保存方法,为胭脂鱼的人工繁殖和人工授精提供基础依据。[方法]试验配制了A、B、C、D4种精子保存液,以0．7％的NaCl溶液作为对照,以精子被激活后的活率为指标,对4种精子保存液保存成熟的胭脂鱼精子的效果进行评价。[结果]在低温（0～4℃）条件下,4种精子保存液之间及其与对照溶液之间的差异比较明显。其中保存效果最好的是B液,能在120h内使精子的活率保持为80％;D液次之,能在84h内使精子的活率保持为80％。胭脂鱼在淡水中快速运动时间为（24．0±3．5）s,寿命为（128．0±9．5）s。2007～2008年精子保存B液在胭脂鱼的人工授精中进行应用,受精率为53％～85％。[结论]用精子保存液低温保存胭脂鱼精子的方法是切实可行的。     

肉用种绵羊精液低温保存试验

将精液品质优良的肉用种公羊精液采用两种低温保存稀释液进行稀释保存,观察保存效果。结果表明, 两种配方种公羊精液低温保存的总存活时间和存活指数之间无显著性差异(P>0．05),两种配方都是比较理想的精液低温保存稀释液;不同配方保存精液的pH值随保存天数的延长而随之下降;现用现配的稀释液对精液保存的效果明显好于贮存4 d的稀释液。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的影响

为研究适宜于大白猪精液常温保存的稀释液配方,以精子活率、质膜完整率、顶体完整率和呼吸强度为测定指标,分析4种不同配方的稀释液常温下保存大白猪精液的效果。结果表明,经48h保存后,稀释液Ⅰ和Ⅱ保存的精子活率、质膜完整性和顶体完整率分别达到54%、58%和88%,显著优于其他组(P<0.05)。经稀释液Ⅰ和Ⅱ保存的精子的呼吸强度分别为7.25min和8.25min,显著优于稀释液Ⅲ、Ⅳ和对照组(P<0.05),但稀释液Ⅰ和Ⅱ差异不显著(P>0.05)。因此,稀释液Ⅰ和Ⅱ是大白猪精液常温保存的适宜稀释液。