基于16S rDNA序列和RFLP分析的病鳗分离菌株鉴定

结合16S rDNA基因序列和限制性片段长度多态性（RFLP）的分析方法,通过与GenBank库中已递交的细菌16S rDNA基因序列进行同源性比较,对分离自发病鳗鲡（欧洲鳗鲡,日本鳗鲡和美洲鳗鲡）的30株细菌进行初步鉴定和分类.结果表明,这些细菌可大致分为气单胞菌属（Aeromonas sp.）、假单胞菌属（Pseudomonas sp.）、邻单胞菌属（Plesiomonas sp.）、克雷伯氏菌属（Klebsiella sp.）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter sp.）、不动杆菌属（Acinetobacter sp.）和肠杆菌属（Enterobacter sp.）等7个菌属.分析认为,部分分离菌株可能是引起鳗鲡病害的疑似致病性菌株.     

烟草黑胫病拮抗细菌菌群的筛选

从湖南烟区烟草黑胫病重发田块采集根际土壤样品共900份,经富集培养后筛选出195个对烟草黑胫病菌有拮抗效果的细菌菌群。菌群Miseq高通量测序结果表明:不动杆菌属(Acinetobacter)和寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)为拮抗细菌菌群共有的优势属。挑选5个抑菌效果较好菌群施入烟田土壤,B44R菌群对烟草黑胫病防效达51.56%。将这5个细菌菌群进行拮抗菌株分离筛选,获得的拮抗菌株分别属于芽孢杆菌属、不动杆菌属、寡养单胞菌属和克雷伯氏菌属。施入菌群后的土壤高通量测序结果显示这些拮抗细菌菌群可在土壤中定殖,其中不动杆菌属和芽孢杆菌属的种群数量显著增加。     

烟草连作病害土壤与连作非病害土壤的细菌群落差异性比较

通过对烟草连作病害土壤、连作非病害土壤及新垦植烟土壤细菌群落结构间的差异性比较，为以微生物手段减少烟草连作病害提供一定的理论依据。采用宏基因组高通量测序技术，测定分析三类土壤的细菌群落结构。结果表明，连作病害土壤细菌总OTUs与独有OTUs最多，群落结构相似，同源性高；连作病害土壤中的蓝细菌门（Cyanobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、假单胞菌属（Pseudomonas）、铁矿沙单孢菌属（Arenimonas）、厌氧绳菌属（Bellilinea）、节杆菌属（Arthrobacter）、黄杆菌属（Flavobacterium）、类诺卡氏菌属（Nocardioides）占比显著高于连作非病害土壤和新垦土壤。连作非病害土壤样本间细菌群落结构差异较大，同源性较低。新垦土壤细菌慢生根瘤菌属（Bradyrhizobium）、酸土单胞菌属（Aciditerrimonas）、分枝杆菌属（Mycobacterium）、鞘氨醇单胞菌属（Sphingomonas）、红游动菌属（Rhodoplanes）5个属所占比例较高，但硝化螺旋菌属（Nitrospira）占比较低，细菌群落结构...     

苹果煤污病菌分离中污染细菌的鉴定及抑菌抗生素的筛选

为明确煤污菌分离中污染细菌的组成,筛选可抑制污染菌的抗生素,对煤污病菌分离中伴随的污染细菌进行纯化,通过16S rDNA序列分析对代表性纯菌株进行鉴定,并采用滤纸片法测定9种抗生素对供试细菌菌株的抑菌效果。结果表明,煤污病菌分离中污染细菌的组成复杂多样,至少包括9个属,分别是微杆菌属Microbacterium、短小杆菌属Curtobacterium、考克氏菌属Kocuria、葡萄球菌属Staphylococcus、芽孢杆菌属Bacillus、鞘氨醇单胞菌属Sphingomonas、Aureimonasi及2个未确定属,这2个属分别与草药菌属Herbiconiux和甲基杆菌属Methylobacterium相近。不同抗生素对供试细菌菌株的抑菌效果差异很大,庆大霉素和卡那霉素对所有供试细菌菌株都有抑制作用,链霉素、新霉素和金霉素分别能够抑制98.08%、96.15%和90.38%的细菌菌株;四环素、萘啶酮酸和青霉素分别只能抑制42.31%、9.62%和9.62%的细菌菌株,氯霉素对所有的细菌菌株都无抑制作用。因此,在煤污病菌的分离培养中可使用庆大霉素、卡那霉素、链霉素、新霉素和金霉素抑制细菌污染。     

豆天蛾幼虫肠道细菌分离及初步鉴定研究

豆天蛾是豆类作物生产过程中的一种重要害虫,也是一种重要的食用昆虫资源,在山东省、江苏省的部分地区已形成特色菜肴。本文从人工饲养种群的老熟幼虫肠道环境中分离、纯化、培养,获得细菌8个菌株,对其菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应进行厂系统研究。鉴定结果表明：1号细菌菌株属于纤维单胞菌属(Cellulomonas)；2、3号菌株暂小能确定所属地位,分别记为Clanis bilntata(L_2)、Clanis bilineata(L_3)；4～7号细菌菌株分别属于地杆菌属(Terrabactcr)、短状杆菌属(Brachybactefium)、李斯特氏菌属(Listefia)、丙酸杆菌属(Propi- onibactefium)；8号菌株为枯草芽孢杆菌(Baciplus subtilis)。不同细菌属之间在豆天蛾幼虫肠道环境中存在数量方面的明显差异。     

螃蟹脚可培养内生细菌多样性及其促生活性研究

【目的】揭示螃蟹脚可培养内生细菌的多样性及其产IAA、铁载体及解磷、解钾能力,筛选具促生活性菌株,为后续植物内生细菌资源的开发与利用提供一定的基础数据和理论依据。【方法】以寄生植物螃蟹脚为研究材料,采用4种分离方法和5种不同培养基分离其内生细菌,通过16S rRNA基因序列对内生细菌进行鉴定,并构建系统发育进化树确定内生细菌的分类地位;从分离获得的螃蟹脚内生细菌中筛选具有ACC脱氨酶活性菌株,并对含ACC脱氨酶内生菌株的产IAA、铁载体及解磷、解钾能力进行测定。【结果】从螃蟹脚中共分离纯化获得60株内生细菌,通过16SrRNA测序及比对分析,去重复后共获得52株螃蟹脚内生细菌,分属于15科22属,其中以悬浮法（Z法）和纤维素—脯氨酸培养基（4号）的分离效果最佳,分别获得16和17个菌属,且以短小杆菌属（Curtobacterium）为优势菌属,占23.08%。促生能力测定结果表明,12株具ACC脱氨酶活性的内生细菌中7株菌（占58.33%）具有产IAA能力,其中菌株SWFU34产IAA能力最强,为4.95mg/mL;10株菌（占83.33%）具有产铁载体能力;8株菌（占66.67%）具解磷和解钾能力,其中有4株菌株（占33.33%）同时具有产IAA、铁载体及解磷、解钾能力。【结论】螃蟹脚蕴藏着丰富的微生物资源及具促生活性的菌株,其中短小杆菌属为优势菌属,假单胞菌属菌株SWFU34的促生活性最突出,具有农业应用的潜力。     

杜仲内生细菌对植物病原菌的拮抗作用

为进一步丰富玉米病害的生防资源,通过平板稀释法,对健康杜仲组织进行内生细菌的分离纯化,共得到内生细菌55株, 55株内生细菌分别属于芽孢杆菌属（Bacillus）、类芽孢杆菌属（Paenibacillus）、伯克霍尔德菌（Burkholderia）、贪铜菌属(Cupriavidus)和赖氨酸芽孢杆菌属（Lysinibacillus）等5个属。利用平板对峙方法,筛选出对玉米小斑病和玉米茎基腐均有较好的抑制作用的内生细菌DZSY21,其抑菌率分别达到61.30%和79.10%,显微观察显示,拮抗菌株 DZSY21可引起病原菌菌丝断裂、畸形等现象。随后,对内生细菌DZSY21开展了gyrB及趋化性研究,结果表明,DZSY21为枯草芽孢杆菌,且对玉米根系分泌物具有较好的趋化性。     

阿鲁科尔沁牧区牛乳中乳酸菌生物学特性的研究—第一报：乳杆菌属的鉴定

本项研究从科尔沁草原的阿鲁科尔沁牧区南北4个苏木6个牧户中采集43个乳样。从43个乳样品分离到64株乳酸菌，对其中的47株进行了鉴定，结果分离到29株乳杆菌属的细菌。对其中10株进行了种的鉴定，结果4株为犊牛乳杆菌（Lactobacillus vitulinus)、2株德氏乳杆菌（L.delbrueckii)、2株植物乳杆菌（L.plantarum)、1株瘤胃乳杆菌（L.ruminis)、1株清酒乳杆菌（L.sake）共为5个种。本项研究发现，该牧区自然发酵酸乳中主要菌株是乳杆菌属细菌和肠球菌细胞的乳酸菌菌株，这些菌均属于中温发酵性菌株，经对其生物学特性的鉴定基本符合乳杆菌属、种的鉴定标准。     

草地贪夜蛾肠道细菌分离鉴定与功能初探

【目的】明确草地贪夜蛾幼虫肠道细菌的种类和功能,以诠释肠道细菌对草地贪夜蛾寄主植物适应性的影响,为揭示草地贪夜蛾的寄主适应机制及进一步预测其寄主谱扩张趋势提供依据。【方法】采用传统的微生物分离纯化方法对草地贪夜蛾肠道细菌进行分离纯化,对分离获得的细菌菌株进行16S rRNA序列同源性分析鉴定;利用筛选培养基对产生纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶及对苯酚有代谢能力的菌株进行初筛,并进一步用DNS法测定相关菌株产纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶的酶活性,用含苯酚的无机盐培养基培养菌株,检测菌株的苯酚降解效率。【结果】共分离获得45株细菌菌株,经同源序列比对分析,45株细菌菌株分属于3门5属8种,分别是厚壁菌门（Firmicutes）的葡萄球菌属（Staphylococcus）和芽孢杆菌属（Bacillus）,变形菌门（Proteobacteria）的克雷伯氏菌属（Klebsiella）和不动杆菌属（Acinetobacter）,放线菌门（Acinobacteria）的短杆菌属（Curtobacterium）,其中克雷伯氏菌属的丰度最高。45株菌株中有产纤维素酶菌株11株,酶活力最高的是变栖克雷伯氏菌菌株K3,为0.105±0.007 U/mL;产木聚糖酶菌株10株,酶活力最高的是枯草芽孢杆菌菌株B9,为1.090±0.468 U/mL;产果胶酶菌株5株,酶活力最高的是变栖克雷伯氏菌菌株K27,为0.193±0.047 U/mL;降解苯酚的菌株9株,降解速率最高的是沙福芽孢杆菌菌株B8,为（0.347±0.042）%。【结论】草地贪夜蛾幼虫肠道细菌的产酶菌株多样性较高,推测这是导致草地贪夜蛾寄主谱广,对寄主为害严重的原因之一。     

高通量技术分析‘砂蜜豆’甜樱桃不同组织内生细菌多样性

为探明甜樱桃内生细菌种群结构及多样性，以‘砂蜜豆’甜樱桃根、主干树皮和枝条3个组织的内生细菌为研究对象，对其16S rRNA V3～V4区进行高通量测序。结果表明，‘砂蜜豆’甜樱桃不同组织内生细菌群落多样性及功能存在较大差异。不同组织中共获得有效序列9 665 813条，聚类为1 386个OTU(operational taxonomic units)，隶属于20个门、43个纲、79个目、162个科和346个属。在门水平，变形菌门（Proteobacteria）在各组织中的丰度均最高，是最优势菌门。在属水平，根部内生细菌的优势菌属为链霉菌属（Streptomyces）、类固醇杆菌属（Steroidobacter）和乳酸杆菌属（Lactobacillus）；枝条内生细菌中鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas）的相对丰度较高；主干树皮内生细菌的优势菌属为拟杆菌属（Bacteroides）。PICRUSt (phylogenetic investigation of communities by reconstruction of unobserved states)基因预测表明，内生细菌...     

成都市郊区土壤芽孢杆菌的初步研究

利用格网抽样与重点抽样相结合的混合随机抽样技术以及全球卫星定位系统(GPS),在成都市郊区采集耕作层土样20个,采用稀释平板计数法对其芽孢杆菌和总细菌进行了分离。结果表明,芽孢杆菌是成都市郊区土壤细菌中的主要类群,约占细菌总量的25、3％;鉴定出13种芽孢杆菌中,广泛分布的种有巨大芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和环状芽孢杆菌。根据物种多样性分析的结果,成都市郊区芽孢杆菌物种较丰富,绝大多数样点能分离到2个种以上,少数采样点可达4个种以上。单个样点均匀度指数较低,生态优势度较高,存在明显的优势种。     

纤维分解酶对青贮饲料发酵特性的影响

作者选用来源于Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ　属的新规纤维分解酶（ＡＣＥ）,以苜蓿（Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｓａｔｉｖａ）和意大利黑麦（Ｌｏｌｉｕｍ　ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ）为材料草,用小规模发酵试验法调制于贮饲料,并添加乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃａｃｅｉ）作以对比,分析了青贮饲料发酵过程中的微生物动态及发酵特性。结果表明,添加ＡＣＥ,促进了青贮饲料的乳酸发酵,但同时也助长了好气性细菌和酪酸菌的增殖。与无添加区相比,乳酸菌区及混合添加区的ＣＯ２生成量及于物质损失率显著（Ｐ＜０．０５）减少,但纤维分解酶区则明显增加（Ｐ＜０．０５）。混合添加纤维分解酶和乳酸菌,使青贮饲料的ｐＨ,酪酸含量及挥发性氮成分降低,乳酸含量提高,明显改善了青贮饲料的发酵品质。     

内蒙古河套地区酸粥中乳酸菌的分离及其生物学特性的研究

本实验从内蒙古河套地区家庭中采集12个酸粥的酸浆样品，进行乳酸菌的分离及生物学特性的研究。从样品中分离到10株乳酸菌，8株属于乳杆菌属，2株属于肠球菌属，其中以乳杆菌的细菌分布最广。本项实验分离到的乳酸菌属中温菌，且产酸、产香效果良好。     

半连续补料沼气发酵过程中主要微生物生理群的消长及其对产甲烷效率的影响

每隔11天以青草和猪粪(9:1)连续补料四次,每次补料后主要微生物生理群的消长趋势基本一致。随着补料次数的增加,纤维分解细菌、产酸细菌、氨化细菌的最高菌数略有下降趋势,其菌数对数由第一次补料后的5.3、8.6、7.7到第四次补料后则为4.6、6.28、6.28。而产甲烷细菌则比较稳定,甚菌数对数均为6.0。半连续补料能维持较长时间的较高日产气效率。日产气效率和纤维素、半纤维素降解率呈正相关,而纤维素、半纤维素的降解率又直接受纤维分解细菌的影响。每次补料后,纤维素降解率分别为38.51％、38.80％36.71％和31.96％,平均日产气效率分别为17.90、19.90、18.50和17.80m1/g·d。沼气中甲烷百分含量和日产甲炕效率的高低与产甲炕细菌菌数有关。每次补料后的平均甲烷百分含量为58.00％、52.30％、55.80％、60.00％,平均日产甲烷效率分别为10.97、10.54、10.88、10.68ml/g·d,比较稳定。     

彩色海芋组织培养过程中内生菌的抑制

以4个进口彩色涨芋为材料，比较了不同种类抗生素、适宜抗生素的浓度对组织培养过程中内生菌抑制的影响。结果表明，200mg/L的青霉素GK对内生菌抑制的效果最为明显，且不影响组培苗的正常生长。     

乳酸菌剂对青贮饲料发酵品质的改善效果

 为探讨添加乳酸菌对青贮饲料发酵过程中微生物的动态变化、发酵品质及乳酸异性体生成比率的影响，以意大利黑麦草（Lolium multiflorum）为材料草，选用2种乳酸球菌及1种乳酸杆菌进行青贮饲料的添加调制。其结果如下：⑴乳酸球菌添加区，于贮藏初期，乳酸球菌旺盛繁殖；乳酸杆菌添加区，在发酵全过程保持了高水准的乳酸杆菌数，促进了乳酸发酵。⑵添加乳酸菌有效地抑制了与青贮饲料共存的丝状菌（霉菌）、酵母菌及一般细菌的繁殖，其制菌效果，乳酸杆菌大于乳酸球菌。⑶添加乳酸菌使pH值及挥发性氮与全氮（VBN/T-N）比值降低，乳酸含量提高，改善了青贮饲料发酵品质。⑷乳酸菌添加改善了L（+）乳酸的生成比率，与无添加区相比，乳酸球菌添加区和乳酸杆菌添加区分别提高了7%-8%和12%-14%。     

用微量量热法测定保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌的热量变化及世代时间

通过测定细菌生长过程的热量变化，得到相应的热谱图，由热谱图得到了不同温度下菌种在乳中的生长代时，并与传统测代时的结果进行了比较。     

地膜覆盖栽培玉米土壤中微生物变化规律的研究

本试验结果表明:在地膜覆盖条件下细菌、放线菌、真菌等数量增加。其中细菌、放线菌的数量随玉米生育期的发育逐渐增多,而真菌的数量则逐渐减少。硝化细菌、好气性纤维素分解菌、好气性自生固氮菌等的数量,覆膜者也高于不覆膜的。由于地膜覆盖为土壤微生物提供了有利条件,使其数量增加、活性增强、加速土壤养分转化,提高土壤有效养分含量,使玉米获得增产效果。     

乳酸菌发酵剂冻干保护剂筛选及应用的研究

用蔗糖、乳糖,海藻糖、麦芽糊精、山梨醇、甘油、侧金盏花醇等１３种材料对乳酸菌的冻干保护效果进行的比较研究表明,海藻糖,侧金盏花醇为最佳保护剂,其次为蔗糖、麦芽糊精、山梨醇、谷氨酸钠、脱脂奶粉,在以水和增菌液为基质中冻干保护效果显著,对乳球菌的保护效果优于乳杆菌。冻干菌物菌落总数与菌体产酸力有一定关系,但与乳糖酶关系不明确,冻干后的菌体表面呈脑回样皱褶,但形态变化不大。并设计了最佳冻干保护剂配方     

反复通过寄主对水稻白叶枯病菌致病力和生化性状的影响

把致病力强弱不同的四株水稻白叶枯病菌反复接种在两个抗性不同的水稻品种上,测定比较了反复接种12代后的菌种和原始冻干菌株的致病力与若干生化性状。致病力弱的菌株经反复接种后致病能力增强,致病力强的菌株经反复接种后,致病力逐渐减弱;病菌的胞外粘多糖量和蛋白酶活性的变化趋势与致病力的变异相一致,但菌的生长速度和胞外纤维素酶活性的变异无明显规律。本文还讨论了寄主抗性的遗传背景对病菌变异的影响。