PCR及核酸探针检测耐甲氧西林葡萄球菌mecA基因的研究

为了解耐甲氧西林葡萄球菌在畜禽间的存在情况.试验建立针对mecA基因的PCR方法及地高辛标记核酸探针技术,分别用两种方法对75株葡萄球菌分离株进行检测.结果显示,经PCR方法检出42株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的56.0%;经核酸探针方法检出47株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的62.7%,两种方法的总符合率为93.3%.通过研究证实,在畜禽的体表及体内能够分离到耐甲氧西林葡萄球菌,且有较高的分离率,应该引起兽医工作者的足够重视.     

动物源耐甲氧西林葡萄球菌的研究进展

动物源耐甲氧西林葡萄球菌感染可引起多种动物发病,这些菌株不仅对β-内酰胺类抗生素耐药,而且也对其它药物耐药,引起临床治疗的难度增加。概述了动物源耐甲氧西林葡萄球菌的发现过程、耐药机制、兽医临床分布以及传播与扩散,以引起有关学者的关注。     

葡萄球菌属158株耐药性分析

目的:探讨基层医院葡萄球菌的耐药现状及其对9种抗菌药物的耐药性,指导临床合理选用抗菌药物。方法:2005年1月至2008年12月监利县人民医院分离葡萄球菌属158株,采用Kirty-Bauer纸片扩散法选用9种抗菌药物进行药敏试验,耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)检测,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1999年标准判断结果。结果:近4年分离的葡萄球菌158株,主要来源于血液和脓性标本,分别占34.2%、32.3%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为24.1%;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为58.0%;其在临床病区分布中居前3位科室是新生儿病房、神经外科、门诊外科;MRSA和MRCNS对9种抗菌药物的耐药率除万古霉素耐药率为0%外,其它抗菌药物均明显高于甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)。结论:MRSA和MRCNS检出率不断升高,对抗菌药物呈多重耐药,治疗此类细菌感染宜参考细菌药敏结果,合理选用抗菌药物。     

我院儿科近10年葡萄球菌的变迁及耐药性分析

目的了解本院近10年葡萄球菌在小儿败血症中的分类及耐药变迁。方法对2000年1月至2005年1月及2005年2月至2010年1月收治患儿感染葡萄球菌的分类、药敏试验进行回顾性调查与比较。结果 （1）10a共分离葡萄球菌177株,其中凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）占64.4%,金黄色葡萄球菌（SA）占35.6%。近5年CNS的感染率明显增加（77.3%vs51.7%,P〈0.01）,SA的感染率显著下降（22.7%vs48.3%,P〈0.01）。（2）10a分离耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）共99株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占32.3%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）占67.6%。近5年MRSA及MRCNS的感染率明显增加（70.0%vs41.9%和69.1%vs43.5%,P〈0.05或0.01）。（3）MRSA的耐药性明显高于MSSA（P〈0.01）,没有发现对万古霉素耐药株。结论 CNS是本院患儿败血症最主要的病原菌,MRS对多种抗生素耐药率高。实验室加强葡萄球菌耐药性监测对指导儿童患者临床抗感染用药有重要意义。     

鸡源金黄色葡萄球菌耐药性分析

采用药敏纸片扩散法,测定48株鸡源金黄色葡萄球菌对常用的19种抗菌药物的耐药性,检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA).结果表明:所有菌株除对万古霉素、头孢西丁和头孢唑啉100%敏感以外,对其他16种药物均产生不同程度的耐药性,其中耐药率较高的有四环素、强力霉素、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星及克林霉素,耐药率最低的为头孢噻肟、阿米卡星、复方新诺明及利福平.100%的菌株呈多重耐药,分离菌株最少耐受4种药物,最多耐受12种药物,未检测出耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌.     

复合溶葡萄球菌酶溶液对微生物的杀灭效果

研究了浓度、温度、pH值、时间和牛血清白蛋白(BSA)对复合溶葡萄球菌酶溶液杀菌效果的影响以评价其在兽用领域使用的有效性。结果表明,在0～40℃、pH值4～8下用复合溶葡萄球菌酶溶液处理1 min以上对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、链球菌、宠物源耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的杀菌率均在99.99%以上,当BSA浓度小于20%时对杀菌效果无明显干扰;现场消毒3～5喷(0.6～1.0 mL)使用10 min后对比格犬毛发表面自然菌及MRSP的杀菌率在99.9%以上。     

我院儿科264例葡萄球菌感染的细菌学分类及耐药分析

目的了解葡萄球菌在小儿败血症中的细菌分类及其耐药状况。方法对我院264例败血症患儿的静脉血标本进行试验,血培养标本用Bact／Alert-120自动血培养分析系统和鉴定菌种和药敏试验用VitekAMS-32微生物自动鉴定仪。结果264株菌株分离到12种葡萄球菌,居前4位分别为表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、金黄色葡萄菌、模仿葡萄球菌;耐甲氧西林金黄色葡萄菌（MRSA）占75．0％,耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）占73．2％,葡萄球菌对青霉素的耐药率达80．0％～100．0％,MRCNS、MRSA对红霉素、复方新诺明耐药率达70％左右,未发现耐万古霉素的葡萄球菌。结论小儿葡萄球菌败血症以凝固酶阴性葡萄菌为首位致病菌,MRCNS、MRSA耐药严重,提示应合理使用抗生素,减少细菌耐药性产生。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌院内感染预防与控制

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是引起医院感染的重要病原菌之一，在医院和社区的感染人数快速增加。MRSA除对甲氧西林耐药以外，还对临床上普遍使用的多种抗菌药物耐药，所致感染呈散发或暴发流行，治疗困难，病死率较高。MRSA医院内感染的预防和控制迫在眉睫。因此，笔者就其感染临床预防与控制进行综述。     

1株抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌放线菌的鉴定及其代谢产物活性分析

【目的】对从原始森林土壤中分离得到的1株抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的放线菌AF1进行分类鉴定,并对其代谢产物活性进行分析。【方法】通过菌株形态学特征、生理生化特征观察和16SrDNA序列分析,对AF1菌株进行分类鉴定;采用琼脂平板打孔法,测定AF1菌株发酵产物的稳定性及AF1菌株发酵产物乙酸乙酯粗提物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌活性。【结果】电子显微镜观察显示,AF1菌株分生孢子直或呈波浪弯曲状,孢子链呈松散螺旋状,AF1菌株能利用葡萄糖、D-半乳糖、麦芽糖、鼠李糖和蔗糖,不能利用D-果糖、D-甘露醇和肌醇,可以水解淀粉但不能水解纤维素。AF1菌株16SrDNA序列全长1 242bp(GenBank ID:KF059834.1),与加利利链霉菌XSD-102(Streptomyces galilee XSD-102)的相似度为100%,初步确定菌株AF1为加利利链霉菌(S.galilee);AF1发酵产物对外界环境不敏感,在30~80℃下活性稳定,90℃处理60min时活性丧失,在pH 2~10下活性稳定,耐受紫外线照射;其乙酸乙酯提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最低抑菌质量浓度(MIC)为68μg/mL。【结论】AF1菌株为加利利链霉菌(S.galilee),其代谢产物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌具有抗菌活性。     

深圳地区金黄色葡萄球菌的耐药性监测与分析

目的:了解本地区金黄色葡萄球菌的耐药变迁及其在不同感染部位的耐药性差异。方法:用Kirby-Bauer法对180株临床分离的金黄色葡萄球菌进行药敏试验。结果:(1)未发现耐万古霉素和替考拉宁的金黄色葡萄球菌,甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对8种所测药物的耐药性差异显著(P<0.05)。(2)不同标本来源的菌株对药物的耐药性存在差异。(3)MRSA的检出率由2001年的35.0％,上升到2003年的53.6％,而金黄色葡萄球菌对氯霉素和复方磺胺甲(?)唑的耐药率则有下降趋势。结论:本地区未发现耐万古霉素和替考拉宁的金黄色葡萄球菌;不同标本来源的菌株对药物的耐药性存在差异,临床医生治疗时应注意区别;MRSA的检出率有上升趋势,需引起医疗工作者的高度重视;金黄色葡萄球菌对氯霉素和复方磺胺甲(?)唑的耐药率保持在较低水平。     

新疆牛羊产业链中金黄色葡萄球菌的污染调查与毒力基因检测

【目的】 分析乌鲁木齐及周边地区牛羊源金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的污染状况及常见毒力基因检测。【方法】 采集乌鲁木齐及周边地区牛养殖场和牛羊屠宰场752份样品(粪样、挤奶厅工具拭子、胴体拭子、屠宰工具拭子等),采用国家标准方法进行金黄色葡萄球菌分离和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的鉴定,检测10种常见毒力基因(sea、seb、sec、fnbA、fnbB、hla、hlb、clfa、pvl、tst)的编码情况。【结果】 共分离出26株金黄色葡萄球菌,分离率为3.46%,其中奶牛养殖场、牛屠宰场和羊屠宰场的分离率分别是4.39%、1.13%、3.72%、。其中有8株是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,占检出率的30.77%。毒力基因sea、seb、sec、fnbA、fnbB、hla、hlb、clfa、pvl、tst的检测率分别是11.54%、19.23%、3.85%、3.85%、23.08%、100%、53.85%、100%、0、15.38%,其中clfa和hla的检出率最高。 【结论】 新疆奶牛养殖场和牛羊屠宰场中均存在金黄色葡萄球菌,其中奶牛养殖场中MRSA的污染较严重,金黄色葡萄球菌主要编码hla和clfa 2种毒力基因。     

抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌鼠源化噬菌体抗体库的构建及筛选

用灭活的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌免疫小鼠后,取出小鼠脾脏提取总RNA,以RT-PCR扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,以重叠延伸PCR(SOE-PCR)法将VH和VL拼接成ScFv基因,克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中,转化大肠杆菌E.coli TG1,构建鼠源抗金黄色葡萄天然噬菌体抗体库。研究结果表明,构建的鼠源性抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌抗体库库容为3.2×106,多样性良好,共筛选出8个阳性克隆。说明已成功构建抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌抗体库,为筛选有效治疗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌奠定了基础。     

我院近5年表皮葡萄球菌医院感染的调查及菌株耐药性分析

目的了解我院表皮葡萄球菌致医院感染状况及耐药性,以便采取更有效的控制措施。方法对2003年1月至2008年1月间我院365例医院感染患者的各个感染部位进行表皮葡萄球菌的分离和耐药性检测。结果表皮葡萄球菌检出率逐年增加,菌株分布以呼吸道最多见,其次为伤口和血液;321株分离的表皮葡萄球菌中,耐甲氧西林菌株(MRSE)逐年递增;MRSE对头孢霉素类、红霉素、庆大霉素及环丙沙星等常用抗生素的耐药率呈逐年上升趋势,但对阿米卡星耐药率仍<20%,对利福平和左氧氟沙星耐药率<50%;甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)对大多数药物依然保持较低的耐药率;未发现对万古霉素的耐药株。结论表皮葡萄球菌的分布广泛,耐药情况严重,MRSE菌株逐年增多,应引起临床高度重视,抗生素的使用应根据药敏试验结果,参考本地区耐药趋势作出合理选择。     

茂名地区常见病原菌的分布及其耐药性检测

目的：了解茂名地区常见致病菌的分布及其耐药性,指导本地区临床用药。方法：收集茂名市辖区内7间医院2002年1月～2003年12月收治的感染性疾病患者标本,经培养、分离,共得病原茵3370株。采用美国Microscan autoscaix4细菌分析仪进行鉴定和药敏分析。结果：G^-杆菌1129株,占33．5％,以大肠埃希氏菌为主;G^-球菌121株,占3．6％,以淋球菌为主;G^-球菌1704株,占50．6％,以葡萄球菌为主;G^-杆菌206株,占6．1％,以类白喉棒状杆菌为主;真菌210株,占6．2％,以白色念珠菌为主。最常见的病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌,共1149株．占34．1％。其次为大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌等。G^-杆菌大部分病原菌对氨苄青霉素和头孢噻吩耐药。G^-球菌大部分对青霉素、氨苄青霉素、红霉素和四环素耐药,耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCN)的检出率分别为13．1％和61．9％。未检出耐万古霉素的葡萄球菌。结论：本地区的耐药情况较重,应加强病原菌的监测,做到合理用药。     

抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌内生细菌KLXD06粗蛋白的提取

雪胆具有多种药用价值,菌株KLXD06是从雪胆中分离筛选的1株对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)具有抗菌活性的内生细菌。采用硫酸铵盐沉淀法提取KLXD06产生的抑菌粗蛋白,结果表明,用硫酸铵盐沉淀法能提取KLXD06发酵液的抑菌粗蛋白,抑菌粗蛋白对MRSA的抗性较强,并具有一定的热稳定性。     

131株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 了解我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染状况及其对临床常用抗生素的耐药特点.方法 按常规方法分离金黄色葡萄球菌种,用VIEK32全自动微生物分析系统进行鉴定和药敏试验.结果 分离出MRSA 131株,占金黄色葡萄球菌(SA)感染总数的52.2%,全部对万古霉素敏感,对利福平、复方新诺明耐药率较低,但对其它抗菌药物的耐药率较高.结论 MRSA分离率及耐药率相当高,应注意合理地选用抗生素治疗及控制好院内感染.     

高良姜花和果实的挥发油化学成分

采用水蒸气蒸馏法提取高良姜花和果实的挥发油,采用GC-MS法测定其化学成分,并采用琼脂滤纸片法测定其抗菌活性.结果表明,高良姜新鲜的花和果实中的挥发油含量分别为0.003％和0.209％;花挥发油中的主要成分为Caryophyllene oxide (40.63％)和β-caryophyllene(11.14％),果实挥发油中的主要成分为α-cadinol(41.20％)和τ-cadinol(22.88％);花和果实的挥发油对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的生长均有一定的抑制活性.     

金钮扣提取物体外抑菌活性的初步研究

[目的]研究金钮扣提取物的体外抑菌活性。[方法]采用药敏纸片扩散法及2倍稀释法测定金钮扣提取物对金黄色葡萄球菌等10种细菌的抑菌效果。[结果]①对金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、微球菌、枯草芽孢杆菌、痢疾杆菌、白色葡萄球菌6种供试菌有抑制作用。②及③对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、微球菌、枯草芽孢杆菌、痢疾杆菌6种供试菌有较强的抑制作用。②及④对白色葡萄球菌有较弱的抑菌作用。[结论]金钮扣不同提取物对供试菌抑菌效果不同;②的抑菌效果优于①;而③及④是主要活性成分,具有抑菌作用。     

超级细菌MRSA“克星”出现

正最近,美国科学家发现一类新型抗生素,可以在小鼠模型中杀死耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌——MRSA。美国布朗大学科学家埃莱夫塞里奥斯·麦隆纳基斯及其同事鉴定出两种合成类维甲酸化合物,可以杀死实验中正在生长的MRSA细胞和MRSA持留菌,其中一种可以有效治疗慢性MRSA感染小鼠模型。目前还需对这两种化合物实施进一步开发,以提高它们的安全性,使其走近临床     

利奈唑胺治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎的疗效及影响因素分析

目的 分析利奈唑胺治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)肺炎的疗效、影响因素及安全性.方法 回顾性分析41例利奈唑胺治疗MRSA肺炎的临床资料.结果 利奈唑胺治疗MRSA肺炎的有效率为78.0%,细菌清除率为73.2%,不良反应率为2.4%.血培养阳性、合并感染性心内膜炎者的临床疗效及细菌清除率明显降低(P＜0.05...